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目的探讨不同加样方式对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎(乙肝)病毒核心抗体(抗-HBc)的影响。方法采用4种不同加样方式对92例初检抗-HBc阳性的样本进行复检,观察样本在不同检测组中的光密度(OD值)变化。结果第3种方法由于模拟同时对乙肝5项进行加样,加样时间最长,第1种方法时间次之,第2种和第4种方法耗时相差不大,第4种方法略长。4种不同加样方式对92例样本进行检测的OD值与加样时间成反比,第3种方法OD值最低,即阳性率最高。结论样本加入后立即加入酶标抗体(加样时间短)可减少加样时差对检测结果的影响。 相似文献
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抗-HCV酶联免疫吸附试验试剂的评价 总被引:2,自引:0,他引:2
目的评价国内外11种抗-HCV酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂的质量。方法采用艾滋病参比实验室基础血清盘、BBI阳转血清盘、美国CAP特性血清盘,对国产和进口的试剂进行质量测评。评价指标包括敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值等。结果11种抗-HCV ELISA检测试剂的敏感性均为100%,多数试剂特异性>90%。阳转血清盘评价显示5种试剂平均延长天数<2d,大多数试剂未检出抗-NS3。所有试剂均检测能出抗核心区抗体。美国CAP特性血清盘评价显示所有试剂检测结果与标准结果一致率均为100%。结论11种抗-HCV酶联免疫吸附试验试剂有较高的敏感性,特异性有差异。由于ELISA抗-HCV试剂敏感性高,实用性强,适合于我国一般人群的筛查检测。 相似文献
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冯健亮 《国际检验医学杂志》2012,33(14):1779-1780,1790
目的 评估帝肯Freedom EVO 150全自动加样仪使用1 000与200 μL两种不同容量规格的一次性加样针对抗-HCV酶联免疫吸附实验的影响.方法 选1份抗-HCV弱阳性标本和稀释后血清标准物质作为待检样本,用两种酶免试剂在全自动加样仪上使用不同规格的一次性加样针进行加样检测,并对检测结果进行灵敏度、孔间精密度和符合性对比分析.结果 应用200与1 000 μL两种不同容量规格一次性加样针加样后,在两种抗-HCV酶免试剂检测各孔间S/CO值统计结果CV值差异有统计学意义(P<0.05).结论 应用全自动加样仪进行加样时,应选用满足微量样本移取精度要求的一次性加样针,避免因使用不当容量规格的一次性加样针而导致血液检测质量事故的发生. 相似文献
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刘庆良 《上海医学检验杂志》2002,17(1):60-62
免疫细胞表面表达有多种抗原或受体 ,如各种CD系列分子等 ,有的可作为临床实验室检定T、B细胞和CD细胞等参与免疫应答反应细胞的特异性标志 ,或用以研究细胞分子和粘附分子及其相应受体的变化 ,或用以探讨诸多表面分子参与免疫应答的机制 ,等等。现有一些检测上述分子的方法 ,如免疫细胞化学法 ,荧光免疫染色法等。以流式细胞仪检测法 (FACS)最为简便可靠 ,且能定量 ,缺点是需要贵重的仪器和成套的试剂 ,费用高。从方法学角度分析 ,还有几个问题限制了FACS的广泛应用 ,如受检细胞为粘附性细胞时需要胰酶处理 ,因而可能破坏某… 相似文献
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ELISA操作复杂,许多因素包括所有试剂,抗原抗体反应条件,仪器的稳定性,操作人员的熟练程度以及是否按操作规程进行操作等等都可影响其检测质量,故ELISA室内质控的难度较大,且尚无可以直接借鉴的经验和方法,本文对其主要的影响因素进行了探讨,并作了初步应用。1材料与方法1.1HBsAg试剂盒:上海科华公司。1.2自制正常阴性血清,HBsAg定值血清:购自卫生部临检中心,包括1ng/ml,2ng/ml,5ng/ml,和1万ng/ml.1.3仪器:进口加样器;DIGISCAN酶标仪;FLEXIWASH洗板机等。互.4试剂盒的选择与质量检测:卜,’I试剂… 相似文献
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快速酶联免疫吸附试验检测HBsAg 总被引:1,自引:0,他引:1
我们对常规检测HBsAg 的ELISA法加以鞣化载体、应用聚乙二醇(PEG)、提高酶浓度等措施,建立了一种快速法,全程仅45分钟,与常观法作多项对比实验效果较好。 相似文献
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张维 《国际检验医学杂志》1981,(2)
从临床标本分离腺病毒,最早用的一种方法是组织培养,虽此法敏感,但从接种标本到出现细胞病变(CPE)的时间较长,而且不恒定。一般认为CPE出现的速度与感染的病毒量或腺病毒的型别有关。标本中病毒量少时,CPE将长达28天才出现,最后还须用补体结合试验或免疫荧光方法鉴定。这两种方法均可检测病毒复制过程中过量合成的六邻体亚单位抗原。如在CPE出现前能检测少量腺病毒抗原,则可加速诊断。本文介绍了用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测感染细胞提取液中的腺病毒抗原。其方法是用纯化腺病毒5型六邻体抗原免疫的豚鼠抗体,提取球蛋白后吸附于聚苯乙烯板,置37℃ 相似文献
10.
陈沣藻 《国际输血及血液学杂志》1983,(3)
本文作者介绍一种简单、灵敏和重复性好的酶联免疫吸附试验(ELISA),测定特发性血小板减少性紫癜(ITP)的血小板抗体。一、材料和方法:取正常人或患者EDTA抗凝血,分离血小板,把它悬浮于EDTA-VBS液中,调整血小板计数至50,000个/mm~3。用碱性磷酸酶标记抗人IgG(Anti-IgG~(AP))。准确取0.1ml血小板悬液,加入0.1ml1/250的Anti—IgG~(AP),37℃30分钟,离心,洗沉淀物3次。加1ml基质(P-硝基苯磷酸二钠),37℃5分钟,加1ml 5N NaOH终止反应,离心,将上清液于410nm测OD。取0.1ml生理盐水作标准与1/2500的Anti-IgG~(AP)保温,以下步骤同上。用Bo- 相似文献
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酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定操作非常简便,一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步骤的不当都会影响测定结果,且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚. 相似文献
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酶联免疫吸附试验(ELISA)因其操作简单,灵敏度高,特异性好,经济安全等特点而在临床上广泛应用,但是由于其操作步骤复杂,一般包括试剂准备,样本收集,加样,温育,洗涤,显色,比色,结果判定等,其中任何一项操作不当都会对检测结果产生很大影响。因此,必须加强ELISA检测的全面质量控制,保证其结果的准确可靠。结合本院临床免疫室工作的实际经验,现总结报道如下。 相似文献
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酶联免疫吸附试验质量控制的探讨 总被引:4,自引:0,他引:4
酶联免疫吸附试验(ELISA)是将抗原、抗体反应的高度特异性与酶对底物催化作用的高效性相结合起来检测液体标本中微量的免疫物质的一种方法。自20世纪70年代问世以来,已成为临床实验室应用最广泛的免疫学技术之一。ELISA法所用的试剂,如抗原、抗体、酶标记物等均为生物制剂,相对来说生物制剂是不稳定的,不同批次的质量可能有差别,同批次不同保存时间、不同条件下质量也各异。 相似文献
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影响酶联免疫吸附试验测定的关键环节 总被引:2,自引:1,他引:2
临床酶联免疫吸附试验(ELISA)测定现通常采用微孔板为固相的测定模式,测定操作非常简单,一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步操作不当都会影响测定结果,现将测定过程中可能发生的主要问题分析如下.…… 相似文献
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酶联免疫吸附试验影响因素的分析 总被引:3,自引:2,他引:3
ELISA法以微孔板条为固相的测定模式,操作非常简单,其技术条件要点包括:试剂的制备,反应条件的选择和操作标准化.影响因素一般涉及到样本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步骤的不当都会影响测定结果,现分述如下. 相似文献
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酶联免疫吸附试验终止剂的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
酶联免疫吸附试验终止剂的比较研究梁中琴,穆荣普(苏州医学院生物技术研究所,江苏苏州215007)终止剂作为在ELISA试验中的影响因素之一至今未能引起人们足够的注意。为此我们选择6种常用的终止剂进行较为系统地比较研究。为终止剂的优化提供依据,兹将实验... 相似文献
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目的 比较梅毒酶联免疫吸附实验试剂盒的检测性能,优选适宜于献血者梅毒螺旋体检测的试剂盒.方法 应用中国药品生物制品检定所提供的梅毒螺旋体国家参考品血清盘、卫生部临床检验中心提供的梅毒螺旋体血清盘、相关部门确认的标本,对5种试剂盒进行性能评价.结果 5个厂家生产的试剂特异性均为100.00%,灵敏度93.44%~100.00%,总符合率96.92%~100.00%,精密度5.30%~16.70%,A、B、C 3种试剂最低检出限低于D和E试剂.结论 不同厂家生产的试剂性能存在差异,各采供血机构应选择灵敏度高、特异性强的试剂,以提高献血者梅毒螺旋体抗体的检测质量. 相似文献
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酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)问世数十年来,广泛应用于检测各种体液中的可溶性抗原或抗体.在传统的ELISA中,微孔板上包被的是可溶性的抗体或抗原,然而在免疫学研究和临床检测时,需要了解免疫活性细胞表面表达的特定分子以对细胞特性进行认定和分类,亦需测定抗某种细胞的抗体或评价某种细胞的功能,因而传统的ELISA中的包被物或受检物就要被替代,检测模式有所改变.1971年,Avrameas等[1]首次用酶标记抗体定量测定细胞表面的免疫球蛋白,又经数年的发展,形成了以细胞包被酶标板测定细胞表面特定分子的细胞-ELISA.近年来细胞-ELISA衍生出多种模式(方法),并筛选出适合细胞-ELISA的标记酶.目前已有多种成熟的细胞-ELISA的模式,并在检验医学中得到应用. 相似文献
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酶联免疫吸附试验测定血清内源性哇巴因 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立血清内源性哇巴因(EO)浓度测定的酶联免疫吸附试验,促进对这一新的皮质类固醇激素的研究。方法利用外源性哇巴因免疫家兔制备哇巴因抗血清,用棋盘试验确定抗血清的稀释度及包被抗原的浓度;进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验。结果以抗血清稀释度为1:10000、包被抗原浓度为1μg/ml时标准曲线最理想,灵敏度为0.23μg/L,血清EO高(2.4μg/L)、中(1.2μg/L)、低(0.6μg/L)浓度的平均批内变异系数为4.7%,批间变异系数为12.3%;高、低浓度的回收率分别为96.3%和91.4%;与肾上腺素、去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、氢化可的松及地塞米松无交叉结合反应,与地高辛存在1.8%的交叉反应。用该法测定正常人(10例)、孕妇(23例)及原发性高血压患者(10例)血清EO含量分别为0.51±0.17、0.81±0.26、0.74±0.20μg/L。结论该方法具有方便、快速、准确、特异和成本低的优点,可用于对内源性哇巴因的临床与实验研究。 相似文献
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酶联免疫吸附试验检测影响因素探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
酶联免疫吸附试验(ELISA)是目前临床免疫学检验领域的主流检测技术之一,而且其反应中各组分的成本较为低廉,特别是对肝炎病毒的监测,最基层的医院也在开展。因其操作简单,灵敏度高,特异性好,达ng水平,经济安全,不需要特殊设备等特点而在临床上广泛应用。但是由于其操作步骤复杂, 相似文献