循环内皮祖细胞在阿托伐他汀钙干预肾性高血压大鼠体内的变化

背景：循环内皮祖细胞数量和功能降低预示高血压患者血管内皮修复能力降低,但有关他汀对高血压患者循环内皮祖细胞的影响尚不十分清楚。 目的：血管内皮细胞及循环内皮祖细胞在阿托伐他汀钙干预肾性高血压大鼠体内的变化。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,2008-06/2009-02于重庆市神经病学重点实验室完成。 材料： SPF级雄性SD大鼠24只,阿托伐他汀钙为辉瑞公司产品,批号：65837003。 方法：随机抽取16只大鼠,应用经典的两肾一夹方法构建SD大鼠肾性高血压模型,随机分为高血压组、他汀组;剩余8只为对照组,行同样操作,但不套银夹。术后4周他汀组给予阿托伐他汀钙20 mg/(kg•d)灌胃8周,其余两组大鼠给予等量蒸馏水灌胃8周。 主要观察指标：实验第4,12周测各组大鼠血压、血脂,第12周通过苏木精-伊红染色观察胸主动脉内皮细胞层连续性,并测定循环内皮祖细胞数量及增殖、黏附和迁移能力。 结果：他汀组第4,12周收缩压与同期模型组比较差异无显著性意义,但两组均明显高于同期对照组收缩压(P < 0.01);他汀组大鼠血脂无明显变化。模型组大鼠胸主动脉内皮层连续性严重受损;他汀组大鼠血管内皮细胞受损明显减轻。模型组循环内皮祖细胞数量显著低于他汀组与对照组,差异有显著性意义(P < 0.01);模型组循环内皮祖细胞增殖能力、黏附能力和迁移能力显著低于他汀组与对照组,他汀组仍低于对照组,3组之间比较差异有显著性意义(P < 0.01)。 结论：肾性高血压大鼠胸主动脉内皮细胞受损严重,循环内皮祖细胞数量及功能下降;阿托伐他汀钙可提高循环内皮祖细胞数量,改善循环内皮祖细胞功能。     

白藜芦醇对脑动脉瘤大鼠外周血内皮祖细胞及VEGF和TGF-β表达水平的影响

目的 探讨白藜芦醇对脑动脉瘤大鼠外周血内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)及血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子-β(TGF-β)表达水平的影响。方法 按随机数字表法将60只大鼠随机等分为对照组、模型组、白藜芦醇组; 模型组和白藜芦醇组均建立大鼠肾性高血压模型,对照组模拟手术; 白藜芦醇组给予白藜芦醇(50 mg/kg)混入饲料喂养,对照组和模型组普通饲料喂养; 3组于术后1个月末、3个月末分别随机抽取10只大鼠,通过内眦取血法取血,用流式细胞仪测定其EPCs的数量,用ELISA法检测大鼠VEGF和TGF-β表达水平。结果 与对照组比较,模型组术后1、3个月末EPCs水平均明显降低(P<0.05); 与模型组比较,白藜芦醇组术后1、3个月末EPCs、VEGF水平均显著增高(P<0.01),TGF-β水平也明显增高(P<0.05); 与术后1个月末比较,术后3个月末白藜芦醇组EPCs、VEGF、TGF-β水平明显增高(P<0.05)。结论 白藜芦醇可显著动员外周血EPCs及其趋化因子VEGF、TGF-β,可能在预防和延缓脑动脉瘤的发生发展中起到重要作用。     

罗格列酮降低氧化应激的作用：促进和动员内皮祖细胞参与了吗？

背景：过氧化物酶增殖物激活受体γ激动剂可动员骨髓内内皮祖细胞至外周血中。然而,其动员内皮祖细胞的确切机制还不是很清楚。有实验证明,过氧化物酶增殖物激活受体γ受体激动剂可降低糖尿病小鼠的氧化应激反应。 目的：明确过氧化物酶增殖物激活受体γ激动剂罗格列酮在体内是否通过降低氧化应激动员内皮祖细胞。 方法：将24只雄性新西兰大白兔以数字表法随机分为3组：正常组、对照组和罗格列酮组,每组8只。对照组和罗格列酮组予高脂饮食2周后行颈动脉球囊损伤术,罗格列酮组术后第1天灌胃给予罗格列酮1 mg/(kg•d),4周;对照组灌胃给予生理盐水。正常组仅切开颈部皮肤,给予正常饲料。术后4周以流式细胞仪测定CD34和KDR双阳性内皮祖细胞数量,Greiss法测定一氧化氮浓度,比色法检测超氧阴离子,RT-PCR 法测量一氧化氮合酶及NADPH p22phox mRNA表达。 结果与结论：24只兔均进入结果分析。与对照组比较,罗格列酮组兔内皮祖细胞数量、血清一氧化氮水平、清除超氧阴离子能力、一氧化氮合酶mRNA表达均明显升高(P < 0.05),但仍低于正常组(P < 0.05)。罗格列酮组兔NADPHp22phox mRNA表达明显低于对照组(P < 0.05),与正常组接近(P > 0.05)。3组血糖及血脂差异无显著性意义。在不依赖于降脂和降糖作用下,罗格列酮可能通过在转录水平降低NADPH氧化酶和增加一氧化氮合酶表达,从而降低氧化应激在体内动员内皮祖细胞。     

体外高浓度葡萄糖培养及黄芪干预人外周血内皮祖细胞的数量和增殖与分化**☆

背景：内皮祖细胞数量及功能受损是糖尿病血管并发症发生发展的重要环节,黄芪对多种原因引起内皮功能障碍具有保护作用,可以有效保护血管内皮功能。 目的：观察高浓度葡萄糖及黄芪干预对人外周血内皮祖细胞数量、增殖及分化影响。 方法：不同浓度葡萄糖孵育内皮祖细胞24 h以及30 mmol/L葡萄糖孵育内皮祖细胞不同时间;内皮祖细胞经20 g/L黄芪预处理24 h后,再加入30 mmol/L葡萄糖培养24 h。 结果与结论：高葡萄糖以浓度及时间依赖方式减少内皮祖细胞的数量,降低内皮祖细胞的增殖及向内皮细胞系分化能力(P < 0.05或0.01),给予黄芪预处理后,内皮祖细胞数量明显增加,增殖及向内皮细胞系分化能力明显增强(P < 0.05或0.01)。提示高葡萄糖以浓度及时间依赖方式减少外周血内皮祖细胞数量,降低内皮祖细胞的增殖及向内皮细胞系分化能力,黄芪可以改善高葡萄糖对内皮祖细胞的损伤作用。     

体外心脏震波冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血循环中内皮祖细胞及血管内皮生长因子的变化***☆

背景：体外心脏震波治疗改善缺血心肌微环境、促进缺血心肌组织内新生血管生成的作用机制目前尚不清楚。 目的：探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者体外心脏震波治疗后血循环中血管内皮生长因子与内皮祖细胞的变化。 方法：行体外心脏震波治疗的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者26例,单支病变7例,双支病变8例,3支病变11例,采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板,用EGM-2-MV培养基培养细胞。7 d后通过倒置相差显微镜计数内皮祖细胞克隆形成单位,ELISA法检测血浆中血管内皮生长因子水平。 结果与结论：与治疗前比较,震波治疗后内皮祖细胞克隆形成单位数量、血管内皮生长因子水平均显著升高(P < 0.001 )。3支病变组内皮祖细胞克隆形成单位数量显著高于单支病变组、双支病变组(P < 0.001 );双支病变组与3支病变组的血管内皮生长因子水平均明显高于单支病变组(P < 0.05)。血管内皮生长因子水平与内皮祖细胞克隆形成单位数量呈正相关(r=0.251,P < 0.01),且随着血管内皮生长因子水平的升高,集落数有增加的趋势。提示体外心脏震波治疗能促进血管内皮生长因子的分泌,可能是导致血循环中内皮祖细胞增多的原因。     

基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞移植治疗糖尿病下肢缺血☆

背景：基质细胞衍生因子1α被证明可以促进内皮祖细胞归巢。 目的：观察基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞移植治疗糖尿病模型鼠下肢缺血的疗效。 方法：取雄性Wistar鼠30只,25只成功建立糖尿病模型大鼠,随机数字表法分为3组,对照组注入等量生理盐水,共培养组注射与基质细胞衍生因子1α共培养的内皮祖细胞,内皮祖细胞组注入未进行共培养的内皮祖细胞。 结果与结论：MTT检测结果显示,基质细胞衍生因子1α能显著增加内皮祖细胞的增殖能力(P < 0.01)。移植后第28天动脉造影显示共培养组缺血侧下肢动脉显影血管数多于内皮祖细胞组和对照组(P < 0.05)。提示采用基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞,有利于使糖尿病大鼠缺血下肢血供改善,主要来自于新生血管形成和/或原有细小血管的代偿性增粗。     

脑损伤大鼠内皮祖细胞与早期血管新生的关系

目的 探讨创伤性脑损伤大鼠外周血中内皮祖细胞的变化及创伤区早期动态血管新生情况.方法 成年雄性Wistar 大鼠70只随机分为创伤组及假手术组,每组各35只,两组于伤前及伤后3、6、24、48、72、168 h随机取7只大鼠外周血,用流式细胞仪测外周血中内皮祖细胞数量.同时于伤前及伤后1、4、7、14 d各随机取5～7只大鼠取脑, 行血管内皮标志物CD31免疫组化染色观察创伤区血管的新生情况. 结果脑创伤大鼠外周血中的内皮祖细胞表现于3 h先降低(P<0.01),在6 h升高达峰(P<0.05),后逐渐降低达基础水平.创伤区周围CD31~+细胞与对照组相比于1d开始增多(P<0.01),于7 d左右达到平台高峰;外周血中内皮祖细胞的数量变化与创伤区周围血管的数量变化存在明显的相关性.同时微血管呈逐渐增多的趋势.结论 脑创伤后外周血中的内皮祖细胞明显增加,归巢到创伤区,参与了创伤区血管的新生和损伤组织的修复.     

补阳还五汤对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响

背景：现代医学研究表明,内皮祖细胞和补阳还五汤在治疗缺血性疾病上具有相似的功能,两者之间是否存在着一定的联系？ 目的：观察补阳还五汤对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响。 方法：采用密度梯度离心法分离培养兔外周血内皮祖细胞,经Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双染色和表面抗原的免疫组织化学检测鉴定后,将贴壁细胞随机分为4组,分别用基础培养基以及含有20,50,100 g/L补阳还五汤的EBM-2培养基进行细胞培养72 h。检测细胞形态及计数,再采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法、Transwell小室、黏附功能检测、一氧化氮检测及血管内皮生长因子免疫细胞化学分析来评定其增殖、迁移、黏附、分泌一氧化氮和表达血管内皮生长因子的能力。 结果与结论：不同质量浓度补阳还五汤均能增加内皮祖细胞的数量,提高内皮祖细胞增殖、黏附、迁移和分泌一氧化氮的能力(P < 0.05),药物质量浓度在50 g/L时影响最为显著(P < 0.01),而对血管内皮生长因子表达的影响较微弱。提示补阳还五汤能增加内皮祖细胞的数量,提高内皮祖细胞的增殖、迁移和黏附能力,并可能诱导晚期内皮祖细胞的分化。     

脐血内皮祖细胞尾静脉与局部注射治疗糖尿病下肢缺血

背景：内皮祖细胞治疗糖尿病下肢缺血临床及动物实验多采用局部肌肉注射。 目的：比较脐血内皮祖细胞鼠尾静脉与局部注射治疗糖尿病下肢缺血效果的差异。 方法：取Wistar雄性大鼠分成5组：①糖尿病射线照射后结扎双后肢股动脉,尾静脉注射内皮祖细胞(DLV)。②糖尿病结扎双后肢股动脉左后肢局部肌肉注射PBS(DLC),右后肢局部肌肉注射内皮祖细胞(DLM)。③正常大鼠射线照射后结扎双后肢,尾静脉注射内皮祖细胞(NLV)。④糖尿病不结扎不注射内皮祖细胞(DC)。用绿色荧光示踪内皮祖细胞,苏木精-伊红染色检测肌纤维间毛细血管数,RT-PCR检测双后肢肌肉血管内皮生长因子mRNA水平。 结果与结论：DLV组与DLM组比较,右后肢腓肠肌溃疡及缺血好转明显,二者无明显区别;有明显荧光,差别不明显,Ⅷ因子免疫组织化学染色肌纤维间毛细血管数多,相互间无明显差别;腓肠肌血管内皮生长因子表达差异无显著性意义(P > 0.05)。提示脐血内皮祖细胞治疗糖尿病大鼠下肢缺血尾静脉注射与局部肌肉注射效果相当。     

蜂蜜治疗糖尿病创面与内皮祖细胞的动员*

背景：研究表明溃疡愈合的重要过程之一为溃疡的基质中形成新生血管,而骨髓来源的内皮祖细胞在这一过程中起到重要作用。骨髓来源的内皮祖细胞由骨髓向外周血动员以及其向溃疡处移行将有助于在溃疡处形成新生血管从而促进溃疡愈合,基质细胞衍生因子1α正是循环中调节血管生成前体细胞向受损组织移行的关键分子。 目的：观察蜂蜜治疗后内皮祖细胞动员情况以及对基质细胞衍生因子1α表达的影响。 方法：在链脲佐菌素介导的糖尿病大鼠模型的背部制造一个直径1.8 cm的全层皮肤创面,随机分成蜂蜜组和生理盐水组,观察两组的创面变化。流式细胞仪测定大鼠外周血中内皮祖细胞的数量。实时定量PCR测定局部组织中基质细胞衍生因子1α的表达。 结果与结论：在伤后3,7 d 蜂蜜组创面愈合面积比生理盐水组明显增加(P < 0.05);创面模型建立后3 d,外周血内皮祖细胞明显增加(P < 0.05);实时定量PCR检测创面组织中基质细胞衍生因子1α mRNA的表达与生理盐水组相比较明显增强。结果提示蜂蜜可能通过基质细胞衍生因子1α的生成促进内皮祖细胞的动员,进而参与新生血管生成,促进糖尿病大鼠创面愈合。     

Changes and function of circulating endothelial progenitor cells in patients with cerebral aneurysm

Endothelial dysfunction is a trigger for the formation of cerebral aneurysm (CA). The circulating endothelial progenitor cell (EPC) plays an important role in postnatal vasculogenesis and reduction of endothelial injury. In this study, we tested the hypothesis that decreased number and impaired function of circulating EPCs correlate with CA formation in patients. Blood circulating EPCs were identified by flow cytometry. The level of plasma vascular endothelial growth factor (VEGF) was measured by ELISA. Circulating EPCs from patients (n = 27) were cultured in vitro, and the function of EPCs was evaluated by cell migration and senescence-associated β-galactosidase activity. The number of circulating EPCs was significantly decreased in both unruptured and ruptured CA patients compared with healthy control subjects. Impaired migratory capacity and elevated cellular senescence of cultured EPCs were observed in patients with CA (ruptured and unruptured). The percentages of EPC senescence in patients with CAs were significantly and negatively correlated with the number of circulating EPCs. In addition, there were higher levels of plasma VEGF in CA patients compared with healthy control subjects. Our results show that the numbers and functions of circulating EPCs are reduced in patients with CAs. These findings suggest that the decreased number and impaired function of circulating EPCs in CA patients may contribute to the pathophysiological process of aneurysm formation.     

枸杞多糖对颅内动脉瘤大鼠NF-κB信号通路及血管内皮组织炎性损伤的影响

目的 探讨枸杞多糖(LBP)对颅内动脉瘤(IA)大鼠核蛋白因子-κB(NF-κB)蛋白通路及血管内皮组织炎性损伤的影响。方法 取SD雌性大鼠50只,采用切除双侧卵巢并结扎左侧颈总动脉及双侧肾动脉后支以构建IA模型,随机分为IA模型组、LBP低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量组,另取10只大鼠,只暴露卵巢、颈总动脉、双侧肾动脉后支,不进行摘除和结扎,作为对照组(Control组); 各组均于手术1周后,开始给药,Control组、IA模型组经灌胃给予生理盐水,LBP各剂量组灌胃给予相应剂量药物,1次/d,共给药30 d; 末次给药12 h后处死,取大鼠血液用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血管内皮损伤标志物血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮素(ET)水平; 分离取出大鼠脑动脉(Wills)环,在40倍显微镜下检查大脑动脉(Wills)环病理改变,并检测动脉瘤血管壁厚度及动脉瘤体积; 取脑动脉瘤血管组织,用苏木精-伊红染色(HE)检测动脉瘤血管组织病理变化; 蛋白免疫印迹法(Western blot)检测动脉瘤血管组织NF-κB,Toll样受体-4(TLR4)蛋白表达水平。结果 与Control组比较,IA模型组大鼠Willis环上凸起、管壁厚度和肿动脉瘤体积、动脉瘤内皮细胞空泡变性及炎性细胞浸润等病理损伤程度、血清IL-6,TNF-α,VEGF,ET水平、动脉瘤血管组织NF-κB和TLR4蛋白表达水平明显升高(P<0.05); 与IA模型组比较,LBP低、中、高剂量组大鼠Willis环上凸起、管壁厚度和动脉瘤体积、动脉瘤内皮细胞空泡变性及炎性细胞浸润等病理损伤程度、血清IL-6,TNF-α,VEGF,ET水平、动脉瘤血管组织NF-κB和TLR4蛋白表达水平明显降低(P<0.05),且LBP各剂量组上述指标水平呈剂量依赖性降低。结论 LBP可能通过抑制TLR4/NF-κB通路激活、降低炎症反应来减轻IA血管内皮组织损伤。     

骨髓基质细胞及血管内皮祖细胞移植对局灶性脑缺血大鼠神经功能恢复的影响

目的 观察经静脉移植骨髓基质细胞(BMSCs)及血管内皮祖细胞(EPCs)后,缺血性脑损伤大鼠神经系统功能恢复情况.方法 40只健康成年Wistar大鼠按随机数字表法分为模型组、移植BMSCs组、移植EPCS组、移植BMSCs/EPCs组,每组10只.线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.造模后24h取1 mLBMSCs、EPCs、BMSCs/EPCs细胞悬液(3×10~6个/mL)分别经尾静脉注射移植入后3组大鼠.模型组大鼠注射等量生理盐水.移植前、移植后1、7、14、28 d,采用旋转试验、躯体感觉试验、神经系统功能评分(NSS)评估各组大鼠神经功能的恢复情况.移植后28d,免疫荧光染色检测各组大鼠缺血脑组织的微血管密度(MVD).结果 移植后第7天,旋转试验显示移植BMSCs/EPCs组大鼠旋转时间长于其他3组,躯体感觉试验和NSS评分分别显示移植BMSCs/EPCs组大鼠移物时间和NSS评分低于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05);移植后28 d,免疫荧光染色检测结果显示缺血脑组织MVD明显高于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 静脉BMSCs/EPCS联合移植可增强缺血性脑损伤功能的恢复.     

缺血性脑血管病患者颈动脉粥样硬化程度与循环内皮祖细胞的相关性分析

目的探讨缺血性脑血管病患者颈动脉粥样硬化程度与循环内皮祖细胞(EPCs)的相关性。方法根据CD133和KDR标记,采用流式细胞仪检测缺血性脑血管病患者(包括TIA、急性脑梗死、颈动脉粥样硬化)和健康体检者外周血内皮祖细胞(EPCs)数量变化。结果缺血性脑血管病患者EPCs数量较对照组明显减少(P<0.01);随着颈动脉粥样硬化程度加重,EPCs数量呈降低趋势,颈动脉重度狭窄与轻度和中度狭窄相比有差异(P<0.05);急性脑梗死和TIA患者较单纯颈动脉粥样硬化患者EPCs数量明显增加(P<0.01)。结论缺血性脑血管病患者EPCs与颈动脉粥样硬化程度呈负相关,可反映颈动脉粥样硬化的程度;急性缺血可能会增加EPCs的动员。     

Effects of Rubus parvifolius L. on neuronal apoptosis and expression of apoptosis-related proteins in a rat model of focal cerebral ischemic-reperfusion injury*★

BACKGROUND： Studies have shown that the Rubus parvifolius L. （RP） plant extract exhibits protective effects on cerebral ischemia. This effect is reflected in altered ischemic neuronal apoptosis and associated protein expression.
OBJECTIVE： To explore the neuroprotective mechanism of RP after cerebral ischemia injury.
DESIGN, TIME AND SETTING： Randomized control experiment of cellular, molecular, and protein levels. The experiment was completed at Chongqing Medical University at the School of Pharmacy Laboratories and Basic Medical Institute from October 2005 to January 2006.
MATERIALS： Twenty-four adult, male, Wistar rats, weighing （28 ± 20） g. RP extract, which was a product of ethanol extraction, was provided by the Laboratory of Pharmaceutical Analysis, Chongqing Medical University. RP was dissolved in distilled water to a concentration of 10 mg/mL. All rats were randomly assigned into four groups： 5 g/kg RP, 10 g/kg RP, model, and sham-surgery, with 6 rats in each group.
METHODS： In the 5 and 10 g/kg RP groups, as well as the model group, the middle cerebral artery was occluded （MCAO） for 60 minutes, resulting in focal cerebral ischemia, followed by reperfusion for 24 hours. Rats in the 5 and 10 g/kg RP groups received 5 and 10 g/kg RP, respectively. The RP treatment group received RP intragastrically （once a day） for 3 days. One hour after the last dose, rats were subjected to MCAO. The same surgical procedure was performed in the sham-surgery group, except the suture was introduced into the external carotid artery, but not advanced. Rats in the model group were subjected to MCAO. The sham-surgery and model groups received intragastrically administered normal saline once per day for 3 days. One hour after the last dose, the rats were subjected to surgery.
MAIN OUTCOME MEASURES： TUNEL labeling and immunohistochemical methods were used to investigate changes in neuronal apoptosis and expression of the apoptosis-related proteins, Bax and Bcl-2, on the ischemic hemisphere     

大鼠脑缺血再灌注区ICAM—1的表达与粘附性变化的实验研究

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后缺血区ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达及白细胞和血管内皮细胞间粘附性的变化。方法:４０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为正常组、假手术组和缺血２ｈ再灌注２、４、１２、２４、４８、９６ｈ组,原位杂交和兔疫组化法检测ＩＣＡＭ、１ ｍＲＮＡ和蛋白表达,超高速摄录像系统观察缺血区微血管内白细胞与内皮细胞间的粘附性变化。结果:缺血再灌注后局部脑组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达以及微动脉内白细胞与内皮细胞间粘附性均明显增高。结论:脑缺血再灌注后ＩＣＡＭ－１表达增高,介导了白细胞与血管内皮细胞间的粘附增强,参与了缺血再灌注损伤。     

外周血内皮祖细胞数目和阿尔茨海默病关系研究

目的 研究AD患者外周血内皮祖细胞(EPCs)数目及脑血流速度、血小板计数等临床资料与认知功能的关系.方法 选择自2008年至2009年于天津医科大学总医院老年神经科就诊的患者78例,按照疾病种类分成3组:AD组(23例),血管性痴呆(VaD)组(25例),认知功能正常组(30例).采集患者一般临床资料,TCD检查评价大脑中动脉血流速度,颈动脉彩色TCD检查颈动脉内膜中层厚度(IMT),流式细胞仪检测外周血EPCs数目,简易精神状态量表(MMSE)评分测定认知功能.结果 3组患者间性别、年龄、体重指数、血压、血脂、血小板计数、IMT差异均无统计学意义(P＞0.05).AD、VaD组患者外周血中EPCs数目、MMSE评分、脑血流速度均较认知功能正常组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).排除常见危险因素的影响后,外周血EPCs数目与MMSE评分呈正相关(r=0.541,P=0.000).多元线性回归分析提示,AD组患者MMSE评分、体重指数,舒张压、血小板计数与外周血EPCs数目有关(P＜0.05).结论 AD患者外周血EPCs数目明显减少,其导致的脑血管修复能力下降、脑灌注不良可能与AD患者的认知功能障碍有关.

Abstract：

Objective To study such clinical characteristics as number of circulating endothelial progenitor cells (EPCs), cerebral blood flow velocity (CAFV) and platelet count in patients with Alzheimer' s disease (AD). Methods A total of 78 patients were recruited from the outpatient and inpatient departments of our hospital. Patients with AD (n=23), patients with vascular dementia (VaD,n=25) and healthy elderly controls with normal cognition (n=30) were enrolled after matching for clinical data, carotid intima-media thickness (IMT) and Mini Mental State Examination (MMSE). The CAFV was examined with transcranial Doppler (TCD). Peripheral blood EPCs were counted by flow cytometry.Results No statistical significant differences were noted between patients with AD and VaD, and controls on gender, age, body mass index, blood pressure, total cholesterol, triglycerides, platelet and IMT (P＞0.05). Compared with those in control group, the number of circulating EPCs and scores of MMSE and CAFV in patients with AD and VaD were significantly decreased (P＜0.05). After the adjustment of traditional risk factors, thc number of circulating EPCs had a positive correlation with the scores of MMSE (r=0.541, P=0.000). Liner regression analyses showed that body mass index, diastolic pressure,platelet and scores of MMSE were positively correlated to the circulating EPCs number in patients with AD (P＜0.05). Conclusion The reduction of number of circulating EPCs, decreasing the repair capability of cerebrovasculars and inducing poor cerebral perfusion, plays important roles in the cognitive dysfunction of patients with AD.     

循环内皮祖细胞异位表达骨钙素在缺血性脑血管病发病中的作用

目的 检测缺血性脑血管病患者循环内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）表达骨钙素（osteocalcin，OCN）的绝对数量和相对比例，为评价血管病变提供参考指标。方法 采用病例对照研究方法，比较病例组（n=51）和对照组（n=30）缺血性脑血管病传统危险因素的差异；应用流式细胞仪检测外周血EPCs数量及OCN表达水平，建立logistic回归方程。结果 病例组EPCs数目、OCN阳性的EPCs数目以及其百分比均显著高于对照组（均P <0.01）。病例组中，钙化组OCN阳性的EPCs百分比高于非钙化组（P =0.033），而不同程度的脑血管狭窄组之间，OCN阳性的EPCs百分比差异无统计学意义（P =0.672）。OCN阳性的EPCs百分比是缺血性脑血管病发病的独立危险因素（优势比为1.143，95%可信区间为1.060～1.232）。结论 缺血性脑血管病患者循环EPCs表达OCN，对血管损伤具有负性影响，而非单一的修复作用。OCN阳性的EPCs可作为评价缺血性脑血管病变的细胞学指标。     

脂联素转染的内皮祖细胞对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨脂联素(adiponectin, APN)基因转染的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)移植对2型糖尿病大鼠(type 2 diabetes mellitus, T2DM)脑缺血再灌注损伤(ischemic-reperfusion injury,I/R)的保护作用及其可能的作用机制。方法 4周龄SD雄性大鼠骨髓分离培养EPCs,随机分组并干预:未干预组(EPCs组)、转染APN基因的EPCs(LV-APN-EPCs组)和空白病毒EPCs(LV-EPCs组); 5周龄SD雄性大鼠70只,随机分为假手术组(sham组)、对照组(PBS组)、LV-APN-EPCs治疗组、LV-EPCs治疗组和EPCs治疗组,高脂结合链脲佐菌素诱导T2DM模型,线栓法造I/R模型,I/R损伤后1 h分别静脉注射1 mL PBS、PBS、 LV-APN-EPCs、LV-EPCs和EPCs,I/R前和I/R后的第1、7、14 d,各组进行mNss评分; 细胞治疗后第14 d,各组行脑组织HE染色、CD31+免疫荧光染色,ELISA法检测炎症因子IL-β和TNF-α的水平。结果 I/R后第7、14 d LV-APN-EPCs组的mNss评分明显小于LV-EPCs组、EPCs组和PBS组(P<0.05); 细胞治疗后第14 d,LV-APN-EPCs组神经元破坏较LV-EPCs组、EPCs组和PBS组明显减轻; CD31+免疫荧光染色显示LV-APN-EPCs治疗显著增加了I/R损伤区皮质的血管密度(P<0.05); ELISA显示LV-APN-EPCs组脑组织的炎症因子IL-β和TNF-α的水平明显较LV-EPCs组、EPCs组和PBS组低(P<0.05)。结论 LV-APN-EPCs治疗对T2DM大鼠脑I/R损伤发挥保护作用,其可能的作用机制是促进脑I/R损伤区血管再生和抑制炎症因子的表达。