乳腺癌中的HPV16感染对hTERT蛋白表达的影响

目的为了研究乳腺癌中的HPV16感染对hTERT蛋白表达的影响。方法检测了人乳头状瘤病毒HPV16和人端粒酶逆转录酶（hTERT）在乳腺癌中的表达。应用免疫组化SP法共检测了52例乳腺癌和16例乳腺良性瘤HPV16和hTERT蛋白的表达。结果表明HPV16和hTERT蛋白在乳腺癌组的阳性表达率均显著高于乳腺良性瘤组。统计分析表明,hTERT蛋白表达阳性率与HPV感染率密切相关（P〈0.05）。结论HPV16感染参与了乳腺癌的发生,其致癌机制可能是通过某种途径引起hTERT蛋白表达增加而导致乳腺癌的发生。     

喉鳞状细胞癌组织中HPV16/18感染与hTERT、c-myc蛋白表达的关系及意义

目的研究喉鳞状细胞癌组织中人乳头状瘤病毒（HPV）16／18感染与端粒酶催化亚单位（hTERT）和c—myc蛋白表达的关系及意义。方法在39例喉鳞癌组织、10例声带息肉组织中应用原位杂交法检测HPV16／18的感染情况,同时应用免疫组化法检测hTERT和c—myc蛋白的表达情况,并分析喉鳞癌组织中HPV16／18感染、hTERT和c—myc蛋白表达之间的相关性。结果39例喉鳞癌组织中HPV16／18感染阳性表达率48．7％（19／39）,hTERT、c—myc蛋白阳性表达率分别为84．6％（33／39）、82．1％（32／39）。10例声带息肉组织中HPV16／18感染、hTERT蛋白均未见阳性表达,c—myc蛋白阳性表达率为10％（1／10）。经统计学分析HPV16／18感染、hTERT和c—myc蛋白在喉鳞癌组织与声带息肉组织间的表达差异均有统计学意义。喉鳞癌组织中HPV16／18感染与hTERT和c—myc蛋白阳性表达之间均存在显著正相关关系。结论喉鳞癌组织中hTERT和c—myc蛋白表达的改变可能与HPV16／18感染有关,且三者相互作用,共同影响喉鳞癌的发生、发展。这些指标综合分析可能为阐明HPV16／18的恶性转化机制以及为喉鳞癌早期诊断和基因治疗提供参考依据。     

宫颈癌组织中P16和HPV16/18 E7的表达及意义

①目的研究宫颈癌组织中抑癌基因p16 mRNA和蛋白质的表达,以及与HPV16/18 E7表达的关系.②方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测45例宫颈浸润癌组织、12例宫颈原位癌组织和20例正常宫颈组织中HPV16/18的感染情况;采用RT-PCR技术检测上述标本中HPV16/18阳性者E7 mRNA的表达水平及所有标本中p16 mRNA表达水平;采用免疫组化技术进一步检测HPV16/18 E7、P16蛋白的表达情况.③结果宫颈原位癌和浸润癌HPV16/18的感染率、HPV16/18 E7 mRNA和蛋白表达阳性率明显高于正常宫颈组织,差异有显著性(χ2=5.12～15.78,P<0.05、0.01),原位癌和浸润癌组之间比较差异无显著性(χ2=0.119、0.000,P>0.05);原位癌和浸润癌p16 mRNA的相对表达量明显高于正常宫颈,差异有显著性(F=5.412,q=4.125、5.519,P<0.05);HPV16/18 E7阳性组p16 mRNA的表达阳性率明显高于阴性组,差异有显著性(t=4.127,P<0.01);P16蛋白在宫颈原位癌和浸润癌组织中呈现过表达,在正常组织中为阴性表达或弱表达;p16 mRNA的相对表达量与HPV16/18 E7 mRNA的相对表达量呈显著正相关(r=0.813,P<0.05);P16蛋白的过表达与HPV16/18 E7蛋白表达有相关关系(χ2=8.959,P<0.01);HPV16/18 E7 mRNA和蛋白及p16 mRNA和蛋白的表达与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移、肿瘤的大小和病人的年龄无关(P均>0.05).④结论抑癌基因p16的过表达发生在宫颈癌的早期和癌前病变阶段,可用于临床筛查和早期诊断宫颈癌.     

喉癌中HPV 16/18 E6蛋白的表达

目的检测HPV16／18E6蛋白在喉癌中的表达水平,研究其表达与临床、病理参数的关系,探讨HPV在喉癌病因学中的作用。方法选取喉癌30例,另选声带息肉30例及正常喉组织6例作为对照,采用免疫组织化学方法(S-P法)检测其HPV16／18E6蛋白的表达。结果喉癌中HPV16／18E6、凹空细胞的阳性率分别为56.7％(17／30)、46．7％(14／30)。声带息肉中凹空细胞的阳性率为40％(12／30),HPV16／18E6为阴性。正常喉组织均为阴性。喉癌中凹空细胞表达与组织分化正相关,分化越高,阳性率越高。喉癌中HPV16／18E6表达与凹空细胞表达呈正相关,与组织分化负相关,分化越低,阳性率越高。结论HPV16、18型与喉癌的发生密切相关。     

南通市如皋县宫颈浸润性鳞癌的地区差异及其与HPV16、HPV18感染的关系

目的　探讨人乳头状瘤病毒 16和 18型 (HPV16、HPV18)感染状况与宫颈癌的地区分布间的相关性。方法　应用免疫组化技术 ,对如皋县东北部 (宫颈癌高发区 )的宫颈浸润性鳞癌 3 9例和西南部 (低发区 )的宫颈浸润性鳞癌 3 8例分别进行HPV16和HPV18检测。结果　HPV16在高发区和低发区的阳性率分别为 64.1%和71.0 5% (P >0 .0 5) ,HPV18在高发区和低发区的阳性率分别为 3 8.46%和 42 .1% (P >0 .0 5)。另外本资料显示高发区患者年龄 (平均 54.2岁 )较低发区 (平均 61岁 )小 (P <0 .0 5)。结论　HPV16和HPV18作为宫颈鳞癌的病原学因子 ,其在不同地区间可能是相似的。本研究中高、低发癌地区间患者年龄差异的原因有待探讨     

宫颈病变中HPV16/18感染与P16^INK4A蛋白表达的关系

目的通过检测宫颈癌及其癌前病变组织中HPVl6／18感染和P16^INK4A蛋白表达的情况，探讨两者之间的关系以及它们在病理诊断中的意义。方法应用荧光定量PCR技术对宫颈组织进行HPV DNA定性检测，采用Envision两步免疫组织化学染色方法检测P16^INK4A蛋白表达。结果268例宫颈组织中HPVl6／18的总检出率为53．73％（144／268），其检出率随CINI级、CINⅡ～Ⅲ级和宫颈鳞癌病变程度的加重而显著增高（P〈0．05）。P16^INK4A“蛋白表达的阳性率在慢性宫颈炎、CINI级、CINⅡ一Ⅲ级和宫颈鳞癌组织中两两比较均有显著性差异（P〈0．05）。HPVl6／18感染与P16^INK4A蛋白的表达呈正相关关系（r8=0．689，P〈0．01）。结论HPV16／18感染可能通过影响P16^INK4A“蛋白的过表达与宫颈癌及其癌前病变的发生发展密切相关，二者联合检测对宫颈癌的筛查和预防具有重要意义。     

免疫印迹法检测宫颈液基细胞中HPV16、18 E6表达

采用免疫印迹方法检测宫颈鳞癌30例、腺癌8例、宫颈上皮内瘤变（CIN）52例和16例正常宫颈液基细胞中HPV16、18 E6表达.结果表明,宫颈液基细胞中HPV16、18 E6癌基因的过度表达与子宫颈癌及CINⅡ～Ⅲ密切相关,为阐明子宫颈癌病因和发病机制以及预测CIN进一步发展的可能性提供了理论依据.     

宫颈癌中端粒酶的表达与HPV E6/E7基因的研究

目的 探讨端粒酶活性表达与HPV E6/E7基因在宫颈癌发生发展中的作用以及两者的关系.方法 查阅近年来国内外相关文献及相关试验、理论研究成果讨论两者在宫颈癌发生发展中的作用以及其相关性做一综述.结果 高危型HPV E6/E7蛋白是病毒致癌蛋白,在宫颈癌的发生起重要的作用,端粒酶活性表达在子宫颈癌的发生发展中同样起重要的作用,其活性表达与HPV感染密切相关.结论 将hTERT与HPV E6/E7基因有关的基因或蛋白结合起来应用可提高对宫颈肿瘤的早期诊断率,并将其作为一种早期的筛查HPV手段,对宫颈癌的预警和筛查有重要作用,在临床上有一定的应用价值.     

HPV1618型E6蛋白和PKRp-PKR在宫颈病变的表达及意义

目的 探究HPV1618型E6蛋白和PKRp-PKR在宫颈病变的表达及意义.方法 选取2018年2月至2019年10月在本院就诊的62例宫颈癌患者(甲组)、105例宫颈上皮内瘤样病变患者(CINⅠ33例、CINⅡ37例、CINⅢ35例,乙组)以及20例宫颈健康者(丙组)作为研究对象,采用免疫组化法检测HPV1618型E6蛋白、蛋白激酶R、磷酸化型蛋白激酶R,比较3组表达情况.结果 3组E6蛋白、蛋白激酶R阳性表达率呈正相关(P<0.05).甲组蛋白激酶R阳性表达率明显高于磷酸化型蛋白激酶R(P<0.05).E6蛋白、蛋白激酶R的阳性表达率与宫颈病变级别呈正相关(P<0.05).宫颈癌病情进展与E6蛋白、磷酸化型蛋白激酶R阳性表达率相关(P<0.05).结论 HPV1618感染可抑制蛋白激酶R激活,突破防御机制,不利于疾病预后,磷酸化型蛋白激酶R可抑制疾病进展,改善预后.     

HPV16 E6,E7基因与宫颈疾病及其癌变的关系

目的　研究人乳头状瘤病毒 1 6型 (HPV1 6 )E6 /E7基因在宫颈疾病及其癌变中的作用。方法　运用PCR的方法扩增HPV1 6E6 /E7基因 ,分子克隆技术进行基因的克隆并进行基因序列的测定 ,病理学的方法确诊宫颈炎、CINⅡ～Ⅲ级和宫颈癌。结果　宫颈癌 ,CINⅡ～Ⅲ级 ,宫颈炎组织中HPV1 6E6 /E7总检出率分别为 70 % ,75 %和 6 5 %。其中HPV1 6E7的检出率在三者之间差异无显著性 ,HPV1 6E6的检出率在宫颈癌与CINⅡ～Ⅲ级之间差异无显著性 ,但两者都高于宫颈炎。结论　HPV1 6E6 /E7基因与宫颈疾病及其癌变的关系密切 ,在宫颈疾病的癌变过程中 ,E6基因可能发挥了重要的作用。     

组织芯片检测MCM2和HPV16在宫颈癌中的表达及意义

目的：探讨MCM2和HPV16在宫颈癌组织中的表达及相关性。方法：采用免疫组化ABC法检测MCM2和HPV16在不同病变宫颈组织芯片中的表达。结果：MCM2在宫颈癌中表达高于正常宫颈,有显著性差异（P〈0.05）,HPV16在宫颈癌和C IN中表达高于正常宫颈（P〈0.05和P〈0.01）。HPV16表达与病理类型有关,宫颈鳞癌中阳性表达显著高于宫颈腺癌,有显著性差异（P〈0.05）。HPV16与MCM2呈明显正相关（r=0.3608,P〈0.01）。结论：MCM2和HPV16在宫颈癌变过程中起协同促进作用。MCM2是一个敏感、可靠地反映宫颈上皮细胞增殖的指标,其结合HPV的检测对判断宫颈病变的性质及程度有参考价值。     

宫颈癌高危人群HPV16及18感染检测方法的建立

①目的　建立宫颈癌高危人群人乳头状瘤病毒 (HPV) 1 6及 1 8感染的检测方法。②方法　对HPV1 6及 1 8E6 /E7基因序列进行序列比较分析 ,根据二者的共享序列设计通用引物 ,进行外侧扩增 ;在通用引物扩增序列之间分别设计HPV1 6和 1 8的特异性引物 ,分别进行半套式PCR扩增 ,以检测并鉴定女性宫颈分泌物中HPV1 6及 1 8的感染。对该方法的敏感度和特异度进行了测定 ,并用该法对 31例宫颈癌病人和 1 1 3例对照组妇女宫颈分泌物进行了检测。③结果　PCR扩增后HPV1 6、HPV1 8分别有 341、4 30bp和 1 0 9、4 73bp的带产生。该反应体系最低可检测浓度为 3μg/L。用该方法对人类基因组DNA、人类巨细胞病毒 (HCMV)和大肠埃希菌DNA以及其他型别的HPV进行检测 ,均未见假阳性结果产生。宫颈癌病人HPV1 6的感染率为 6 7.7% ,HPV1 8的感染率为 1 9.4 % ,明显高于对照组 (χ2 =31 .5 2、6 .2 6 ,P <0 .0 1、0 .0 5 )。④结论　HPV1 6、HPV1 8感染与宫颈癌的发生密切相关。本研究建立的方法具有特异度和敏感度高、简便、快速等特点 ,可推广应用于临床检测。     

稳定表达HPV16 E6 siRNA细胞克隆的建立

目的构建针对HPV16 E6基因的逆转录病毒载体,感染HPV16阳性宫颈癌细胞,筛选稳定表达HPV16 E6 siRNA的细胞克隆。方法采用DNA重组技术构建表达靶向HPV16E6基因的pSUPER．retro RNAi逆转录病毒载体,脂质体法将逆转录病毒载体转染人包装细胞PA317,G418筛选稳定产生逆转录病毒的细胞克隆,收集病毒上清,感染靶细胞SiHa,G418筛选出稳定表达HPV16 E6 siRNA细胞克隆,RTPCR检测细胞中E6 mRNA表达,细胞增殖实验检测细胞增殖力。结果获及稳定产生逆转录病毒的细胞克隆,病毒感染靶细胞SiHa后,筛选出稳定表达HPV16 E6 siRNA的细胞克隆,RTPCR示HPV16 E6 mRNA表达受到抑制。细胞增殖实验示克隆细胞增殖率明显下降。结论成功建立稳定表达HPV16 E6 siRNA细胞克隆,特异性的siRNA能抑制细胞生长、HPV16 E6 mRNA表达,HPV16 E6 siRNA可能成为治疗宫颈癌的一种新方法。     

胃粘膜癌前病变与胃癌p16 p53蛋白表达的比较研究

目的 检测p16、p53突变蛋白在胃癌、异型增生和肠上皮化生病变中的表达，以探讨抑癌基因与胃癌发生的关系和在胃癌早期诊断中的价值。方法 免疫组化(SP)法。结果 p16蛋白在胃癌、异型增生和肠上皮化生的表达呈递增趋势；p53蛋白的表达则呈递减趋势。结论 p16蛋白的缺乏和p53蛋白的突变与细胞异型性和生物学行为改变有密切关系。     

温度对突变型HPV16-L1蛋白表达的影响

目的：探讨温度对突变型HPV16-L1蛋白表达的影响。方法：分别在37℃、25℃诱导表达突变型HPV16-L1蛋白，SDS-PAGE电冰比较表达产量。结果：电泳结果显示，降低诱导温度对总蛋白量没有明显影响，但目的蛋白量高于常规37℃下的产量。结论：诱导表达时适当降低温度可提高目的蛋白表达产量。     

维生素D受体在宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样变（CIN）和宫颈癌组织中维生素D受体（VDR）的表达情况,探讨其在宫颈癌发生发展中的作用。方法应用组织芯片技术和免疫组织化学染色方法检测20例慢性宫颈炎、45例宫颈上皮内瘤变（CIN）和84例宫颈癌组织中VDR的表达。并采用χ^2检验进行统计学分析,比较VDR在这三种不同宫颈病变组织中的表达差异及相关性。结果①VDR表达于细胞核,VDR阳性细胞的细胞核被染成棕黄色。慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（CIN）、宫颈癌组织中VDR的表达率分别为5.0%、46.7%、95.2%,各组间差异有统计学意义,P〈0.01。宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各组中VDR表达率分别为20.0%、26.7%、93.3%,三组间比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,CINⅢ组织中VDR的表达率高于CINⅠ和CINⅡ,差异有统计学意义（P〈0.01）;②VDR的表达与宫颈癌的临床分期、分化程度、淋巴结有无转移密切相关（P〈0.01）,在临床期别越早、分化程度越高、淋巴结未转移者的癌组织中表达较低,而与患者年龄、组织学类型无关（P〉0.05）。结论VDR在宫颈癌发生发展中有重要作用,维生素D类似物可能成为一种新的抗癌药用于宫颈癌的治疗。     

P16、P15在子宫颈癌中的表达及临床病理意义研究

目的 :研究P16、P15在子宫颈癌中的表达特点 ,并探讨其与临床分期、病理分级、淋巴结转移及预后的关系和意义。方法 :应用超敏S -P免疫组化方法检测 4 3例宫颈鳞癌及 10例正常宫颈组织、10例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)中的P16、P15的表达情况 ,并结合临床分期、病理分级、淋巴结转移及预后情况进行分析。结果 :(1)在 4 3例宫颈癌中P16阳性细胞主要为胞浆染成棕黄色 ,少数标本中胞核也染成棕黄色 ;P15阳性细胞胞核、胞浆均为棕黄染色 ,但胞核染色比胞浆深。 (2 )P16和P15蛋白表达结果相比较无统计学意义 ,但二者在宫颈癌组织的表达明显低于在对照组正常宫颈中和CIN中的表达率。统计学分析有系统性线性趋势。 (3)P16和P15蛋白表达在I、II、III级中的差异均无显著性。 (4)P16、P15在宫颈癌I～IV期中的表达虽有下降趋势 ,但差异均无显著性。 (5 )P16 ,P15在淋巴结转移组中的阳性表达率明显低于在无淋巴结转移组的阳性表达率 ,(6 )子宫颈癌患者术后生存期≥ 5年者 ,P16和P15蛋白的表达阳性率显著高于生存期 <5年者。结论 :抑癌基因P16、P15的表达缺失在子宫颈癌中同时存在 ,二者的表达缺失积极参与了宫颈癌的发生、发展和转移 ,二者的联合表达缺失预示患者预后差。P16、P15蛋白的检测对评估子宫颈癌淋巴结转移     

青年女性CIN中Ki67的表达及其与HPV16/18感染的关系

目的：探讨Ki67在青年女性子宫颈上皮内瘤变（Cervieal Intraepithelial Neoplasia,CIN）中的表达及其与HPV16/18感染的关系,进一步研究青年女性CIN发生、发展的机制。方法：分别采用免疫组织化学和原位杂交法检测Ki67及HPV16/18在正常对照组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组的表达。结果：Ki67及HPV16/18在正常对照组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ的表达逐渐升高,阳性率分别为7.69%、42.86%、64.52%、82.50%和15.38%、61.90%、74.19%、100%,各CIN组Ki67和HPV16/18的表达高于正常对照组（P〈0.05）;各CIN组之间Ki67和HPV16/18的差异有统计学意义（P〈0.05）;在正常对照组和各CIN组Ki67与HPV16/18的表达具有相关性（r=0.667,P〈0.05）。结论：Ki67和HPV16/18参与了青年女性子宫颈CIN的发生、发展;联合检测Ki67和HPV16/18的表达,可进一步了解宫颈CIN的进展情况,对及时阻断宫颈癌前病变的发展及治疗具有重要的临床指导意义。     

HPV16E6和E7基因序列多态性与宫颈癌临床病理特征相关性

目的 探讨宫颈癌人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6和E7转化基因序列多态性,及其与宫颈癌临床病理特征的相关性.方法 从77例宫颈癌组织中筛选出51例HPV16阳性标本,扩增E6及E7基因,PCR产物进行序列测定.应用DNAStar生物软件进行核苷酸和氨基酸序列的分析.结果 宫颈癌组织中HPV16 E6共测得6个突变位...