椎间盘退变的形态学分型中转化生长因子-β1表达的临床意义

目的：观察腰椎间盘退变（IDD）的形态学分型中转化生长因子β1（TGF—β1）表达特点，探讨其在IDD临床诊断与治疗中的临床意义。方法：椎间盘突出患者手术过程中切除的退变组织样本50例列入研究组，严重外伤导致腰椎骨折且行手术治疗患者的椎间盘组织样本50例列入对照组。所有样本均取病变组织制成切片，SP法染色后，在光学显微镜下观察相关标本。结果：研究组病变组织TGF—β1表达为（＋）的比例明显高于对照组，说明研究组患者椎间盘细胞组织中TGF-β1表达较高，数据经统计学比较具有显著差异（P〈0．05）。结论：可以将TGF-13。的表达情况作为一种临床检测与诊断椎间盘退化的生物学指标，并配合MRI的临床诊断，从而提高检出率和诊断准确性。可以将TGF—β1的表达情况作为一种临床检测与诊断椎间盘退化的生物学指标，并配合MRI的临床诊断，从而提高检出率和诊断准确性。     

椎间盘退变的形态学分型中转化生长因子-β1表达的临床意义

目的探讨退变椎间盘分型中转化生长因子(TGF-β1)表达的意义。方法收集正常与退变椎间盘组织,并根据病理改变把退变椎间盘组织分为Ⅳ级,采用HE染色,Western bloting和RT-PCR方法分析TGF-β1的表达情况。结果 HE染色、Westernbloting和RT-PCR均显示:在正常组织中TGF-β1有表达;在病变组织中并随病理分型增加TGF-β1随之增加,退变与正常组比较以及IV型与I型比较具有及显著差异(P<0.01)。结论 TGF-β1是引起椎间盘退变的重要原因,并且与病理的形态学分型密切相关。     

MMP-1及TIMP-1在人退变椎间盘髓核中的表达

目的测定MMP-1及TIMP-1在人退变椎间盘髓核中的表达,探讨其在人椎间盘退变发生、发展中的作用。方法选取2009～2010年青海大学附属医院骨科腰椎间盘突出症手术切除髓核标本25例及外伤致胸腰椎骨折切除髓核15例作为对照组。采用免疫组化法检测退变椎间盘髓核细胞中MMP-1及TIMP-1表达。结果在椎间盘髓核细胞中MMP-1的表达病例组的阳性率高于对照组（P〈0.01）;椎间盘髓核细胞中TIMP-1的表达病例组阳性率高于对照组（P〈0.01）。结论退变椎间盘髓核细胞中MMP-1及TIMP-1表达升高,退变椎间盘髓核细胞中MMP-1/TIMP-1失调,在椎间盘突出的发生、发展中发挥重要作用。     

TGF-β1基因转染修饰人退变腰椎间盘髓核细胞

目的　探讨对人退变腰椎间盘细胞以外源性生长因子TGF-β1进行基因修饰的可能性,同时检测相应编码蛋白的表达情况.方法　髓核细胞取自8例因腰椎间盘退变手术病人,在体外进行原代培养,并分作3组.将构建好的分别携带增荧光绿色蛋白EGFP基因（报告基因）和TGF-β1基因的腺病毒载体Ad/CMV-EGFP、Ad/CMV- TGF-β1直接转染细胞,对转染情况进行观察.结果　第一组（Ad/CMV-EGFP转染组）经荧光显微镜下观察有特异性绿色荧光表达,并持续4周,表示外源基因转入成功；第二组（Ad/CMV-TGF-β1转染组）经组化染色证明产生TGF-β1,转染率约30%,而作为对照的第三组则染色基本阴性.结论　采用腺病毒载体可以将TGF-β1基因转染修饰腰椎退变椎间盘细胞,并能表达相应的生长因子TGF-β1,为今后腰椎间盘退变疾病的基因治疗提供了实验基础.     

HIF-1α和GLUT-1在人体退变腰椎间盘中的表达及意义

目的：研究低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）和葡萄糖转运蛋白-1（glucosetransporter-1,GLUT-1）在人体退变腰椎间盘髓核中的表达及意义。方法：对照组为取自青壮年腰椎爆裂性骨折患者的正常椎间盘髓核组织;实验组取自临床患者退变椎间盘髓核组织,依据术前MRI影像表现分为2组。术中所取标本分别进行免疫组织化学染色及RT-PCR检测,比较3组椎间盘髓核组织中HIF-1α和GLUT-1的表达,并对检测结果进行统计学分析。结果：免疫组织化学结果显示在正常人类腰椎间盘组织中HIF-1α和GLUT-1的表达呈弱阳性,中度退变组中HIF-1α和GLUT-1的表达为阳性,重度退变组中HIF-1α和GLUT-1的表达为强阳性,且随着腰椎间盘组织退变的程度加重其表达也进行性加强（P〈0.01）。 RT-PCR结果显示,HIF-1α和GLUT-1基因存在于人体椎间盘髓核组织中,3组患者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：HIF-1α和GLUT-1均可能参与了人类腰椎间盘组织的退变过程,二者在人体退变腰椎间盘组织中有相同的增高趋势。可以考虑通过检测HIF-1α和GLUT-1在椎间盘组织中表达来检测腰椎间盘组织退变情况,从而为预防和治疗腰椎间盘退变的提供新思路和切入点。     

TGF-β通路在椎间盘退变分子生物学进程中作用机制的研究进展

椎间盘退变的发生与椎间盘细胞流失、细胞外基质合成与降解失衡和局部炎症反应有密切关联。转化生长因子β（TGF-β）家族在椎间盘退变的分子生物学进程中发挥关键的调控作用,且在椎间盘的形成和发育过程中均发挥重要作用。另外,在退变的椎间盘中,TGF-β呈低水平表达,造成椎间盘组织细胞外基质表达水平降低、椎间盘细胞凋亡加速和椎间盘组织内炎症反应加强等不良反应,进一步加速了椎间盘组织的退变。同时,以TGF-β异常表达为靶点的分子生物治疗策略成为椎间盘退变治疗的新手段。适当激活TGF-β通路可以抑制细胞外基质降解、促进椎间盘细胞增殖并抑制其凋亡,并可以有效抑制椎间盘组织内炎症,起到延缓椎间盘退变发展、恢复椎间盘形态和高度及增加椎间盘组织负重的作用功能。但过度激活TGF-β通路反而会引起髓核细胞老化,加剧椎间盘退变。现回顾TGF-β通路在椎间盘发育和退变过程中的表达情况,并对TGF-β异常表达造成椎间盘退变中的分子生物学机制进行阐述。     

β-catenin、TGF-β_1在腰椎间盘退行性变中的作用及意义

目的分析β-catenin和TGF-β_1在腰椎间盘退行性病变中起的作用及意义。方法收集我院在3年内收治的腰椎间盘退行性病变患者60例,设置为观察组。7例非正常死亡的身体健康且没有椎间盘突出,家族史者(18~25岁)体内获得的7个椎间盘组织设置为对照组。对两组的β-catenin和TGF-β_1进行检测和分析。结果在检测后显示,观察组的β-catenin和TGF-β_1均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论β-catenin和TGF-β_1的表达可以成为对腰椎间盘退行性病变的重要参考指标。通过调节β-catenin、TGF-β_1的表达水平来控制椎间盘基质代谢的平衡,预防或延缓椎间盘退行性变的发生。     

内皮素-1在大鼠退变椎间盘中的表达和意义

目的研究内皮素-1（ET-1）在大鼠试验性退变椎间盘中的表达及其意义。方法建立雄性SD大鼠腰椎间盘退变模型为试验组,正常SD大鼠为对照组,每组各25只,采用免疫组织化学法检测2组椎间盘组织中ET-1的表达。结果试验组和对照组的椎间盘组织均有ET-1表达,试验组的ET-1表达较对照组显著增高（P〈0.05）。结论 ET-1在腰椎间盘退变的发生和发展中起着非常重要的作用。     

转化生长因子-β1在退变黄韧带中过度表达

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β1在黄韧带退变过程中的作用.方法 退变黄韧带标本来自8例退变性腰椎管狭窄症患者.其平均年龄58.6岁.8例青少年型急性腰椎间盘突症患者的黄韧带标本作为正常对照,平均年龄24.2岁.在术前MRI像上测量黄韧带厚度;用逆转录聚合酶链式反应检测黄韧带中Ⅰ型胶原和TGF-β1的mRNA表达;免疫印迹法检测TGF-β1的蛋白表达:免疫组织化学染色观察TGF-β1在黄韧带组织中的定位表达.结果 退变组的黄韧带厚度[(4.70±0.40mm)]明显厚于对照组[(2.50±0.36mm)](P<0.001).退变组黄韧带的型胶原mRNA表达高于对照组(P=0.007).退变组黄韧带的TGF-β1 mRNA和蛋白表达均高于对照组(P=0.008、P=0.004).TGF-β1阳性表达定位于黄韧带成纤维细胞的胞浆.结论 TGF-β1在退变黄韧带中过度表达,表明它可能在腰椎黄韧带退变过程中起重要作用.     

IL-17与BMP-7在退变腰椎间盘髓核组织中的表达及其意义

目的检测IL-17及BMP-7在突出退变腰椎间盘及正常间盘中的表达,分析其在退变腰椎间盘中的作用。方法收集30例腰椎间盘突出手术切除的髓核标本;10例正常髓核取自脊柱侧弯患者髓核标本,经免疫组化染色（S-P法）检测2组IL-17及BMP-7的表达情况,进行统计学分析。结果对照组中IL—17与BMP-7的阳性表达较少或无表达,实验组中IL-17与BMP-7的平均灰度值分别为（112．077±4．353）、（椎间盘退变的重要调节因子。IL-17表达增加可能是导致腰椎间盘突出的原因之-。     

MMP-13在大鼠退行性变腰椎间盘中的表达及意义

目的检测MMP-13在大鼠退行性变腰椎间盘中的表达,探讨其在大鼠腰椎间盘退变中的作用。方法雄性大鼠24只,随机分为两组,实验组建立大鼠手术制备腰椎间盘退变模型,正常组不做处理,采用免疫组织化学方法检测两组椎间盘组织中MMP-13的表达。结果组织病理学显示实验组髓核细胞数目较正常组减少。实验组和正常组椎间盘组织中均有MMP-13的表达,实验组表达较对照组显著增高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MMP-13在腰椎间盘退变的过程中发挥着重要作用。     

HIF-1α与IL-1β在退变腰椎间盘组织中的表达

目的探讨HIF-1α与IL-1β在退变腰椎间盘组织中的表达情况。方法选取26例手术切除的退变腰椎间盘组织和12例正常腰椎间盘组织为研究对象,通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定HIF-1α与IL-1β的含量。结果退变腰椎间盘组织中HIF-1α的含量为(25.12±3.79)pg/g、IL-1β的含量为(72.53±5.31)pg/g,相应正常腰椎间盘组织中的含量分别为(7.65±2.31)pg/g、(22.16±1.31)pg/g,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HIF-1α与IL-1β在退变腰椎间盘组织中的表达含量均增高,可能参与了人类腰椎间盘退变过程。     

HIF-1α、MMP-2在退变腰椎间盘髓核中的表达及相关意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在人类退变腰椎间盘髓核组织中的表达变化情况.方法 对照组为取自青壮年腰椎爆裂性骨折患者的正常椎间盘髓核组织;实验组为腰椎间盘突出症患者的退变椎间盘髓核组织,依据术前MRI影像表现分为3组.分别进行免疫组织化学染色,比较4组椎间盘组织中HIF-1α、MMP-2表达.结果 HIF-1α在对照组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组椎间盘髓核组织中的表达分别为(8.92±3.411%、(46.81±3.63)%、(66.88±4.60)%、(89.63±2.27)%;MMP-2在对照组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组椎间盘髓核组织中的表达分别为(9.61±3.03)%、(47.31±4.4)%、(69.54±5.96)%、(90.05±3.16)%.HIF-1α、MMP-2在实验组退变的椎间盘中的表达显著高于对照组(P<0.05),而且不同退变程度的表达也不同(P<0.05),统计学分析均有显著差异,HIF-1α和MMP-2在退变的椎间盘组织中的表达呈正相关关系.结论 HIF-1α、MMP-2均可能参与了人类腰椎间盘组织的退变过程,且HIF-1α、MMP-2在人类退变腰椎间盘组织中有相同的增高趋势,HIF-1α可能作为MMP-2的一个重要调节因素,与MMP-2相互协调、共同促进椎间盘退变.     

染矽尘大鼠早期肺组织中转化生长因子-β1的表达

【目的】探讨染矽尘大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白水平的改变在矽肺发病中的意义。【方法】将96只大鼠随机分为对照组、染矽尘组,采用一次性气管内注入矽尘法建立矽肺动物模型。染尘后按不同时间点取大鼠肺组织制作组织芯片,链菌素-过氧化物酶法检测TGF-β1在肺组织中的表达,用Image-ProPlus图像分析系统对TGF-β1表达作定量分析。【结果】对照组大鼠有极少量TGF-β1在肺组织内表达;染矽尘组大鼠肺组织TGF-β1表达明显增强,TGF-β1阳性细胞积分光密度增加,7 d时达高峰,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),14 d时开始下降,至28 d时两组差异无显著性(P>0.05)。【结论】矽尘可以诱导肺组织过度表达TGF-β1,TGF-β1可能与早期矽肺纤维化病变有关。     

汉族与哈萨克族腰椎间盘组织中细胞因子的表达及其意义

目的观察促炎因子白介素-6（IL-6）、抗炎因子白介素-10（IL-10）和Fas蛋白在汉族与哈萨克族椎间盘组织内的表达,并探讨其意义。方法收集30例单节段椎间盘突出症患者及10例非腰椎源性死亡的新鲜尸体的腰椎间盘组织,术前患者临床症状均予JOA评定,术后应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定椎间盘组织中IL-6、IL-10和Fas蛋白的含量,并进行免疫组化染色。结果退变腰椎间盘组织中IL-6、IL-10含量较对照组高（P〈0.01）,而Fas蛋白的含量两组间差异无统计学意义。哈萨克族患者IL-6的表达水平及JOA评分与汉族相比有统计学意义。30例突出腰椎间盘组织中IL-6表达阳性有28例,IL-10表达阳性有27例,Fas蛋白表达阳性有25例,其中24例为三种细胞因子均表达阳性。对照组10例中椎间盘组织3例有Fas蛋白表达阳性。结论细胞因子IL-6、IL-10的表达增高为椎间盘退变的重要原因,年龄因素在细胞凋亡中的作用不容忽视,Fas蛋白可引起细胞凋亡,加重退变;椎间盘退变可能有种族及遗传这方面差异,但有待于进一步证实。     

基质金属蛋白酶-3在实验性腰椎间盘退变中的表达及其意义

目的检测实验性椎间盘退变中MMP-3的表达,进一步研究椎间盘退变的发病机制。方法建立SD大鼠腰椎间盘退变模型为实验组,正常SD大鼠为对照组,每组各16只,采用免疫组织化学、SDS—PAGE进行检测两组椎间盘组织中MMP-3的表达。结果实验组和对照组的椎间盘组织均有MMP-3表达,实验组的MMP-3表达较对照组显著增高（P〈0．05）。结论MMP-3在腰椎间盘退变的发生和发展中起着非常重要的作用。     

细胞因子参与抑制犬椎间盘退变细胞内炎症因子水平的体外实验研究

目的：评价白介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）抑制退变椎间盘细胞释放炎症因子的有效性,探索细胞因子抑制退变椎间盘细胞释放炎症因子的潜在生物学机制。方法建立6条1岁龄比格犬针刺退变模型,2周后处死动物取出退变椎间盘髓核组织,体外分离培养。将培养的退变髓核细胞分为4组：20 ng/ml IL-10治疗组,20 ng/ml TGF-β治疗组,20 ng/ml IL-10联合20 ng/ml TGF-β治疗组,未治疗组;并以正常髓核细胞作为正常对照组。应用流式细胞仪于治疗后12、24、48 h时检测髓核细胞肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达量。结果治疗后12 h,正常髓核细胞组TNF-α的MFI值为7.92±0.32,IL-10治疗组为14.57±3.37,IL-10+TGF-β治疗组为11.9±2.91,均显著低于未治疗组（31.47±4.38,P<0.01）。治疗后24 h,IL-10治疗组为21.23±2.85,TGF-β治疗组为20.27±2.76, IL-10+TGF-β治疗组为12.9±2.91,均显著低于未治疗组（30.8±2.86,P<0.01）,IL-10+TGF-β治疗组较IL-10治疗组及TGF-β治疗组显著降低（P<0.01）。而正常对照组与空白对照组差异无统计学意义。治疗后48 h,TGF-β治疗组与IL-10+TGF-β治疗组TNF-α阳性表达的细胞数达到最低水平,正常对照组TNF-α的MFI值为9.07±0.54,TGF-β治疗组为16.07±2.46,IL-10+TGF-β治疗组为12.3±4.42,均显著低于未治疗组（29.3±2.84,P<0.01）。结论 IL-10和TGF-β能够稳定地抑制TNF-α的表达,IL-10和TGF-β可能用于椎间盘退行性疾病的生物治疗。     

“夹脊”电针对轴向加压致腰椎间盘退变模型兔IL-1β、TGF-β1表达的影响

目的研究"夹脊"电针对轴向加压致腰椎间盘退变模型兔IL-1β、TGF-β1的影响,探讨电针干预椎间盘退变的可能机制。方法将24只新西兰兔随机分为正常组(n=6)、假模型组(n=6)、模型组(n=6)、电针组(n=6)。采用L4、L5椎体间横穿入两根平行的克氏针并连接轴向加压造模器的方法,建立兔椎间盘退变模型,在验证造模成功后,电针组施以"夹脊"穴电针治疗28 d;模型组仅造模,不予针刺治疗;假模型组仅在L4、L5椎体间穿入克氏针,不安装轴向加压造模器,不做针刺治疗;正常组予以自然饲养,不做特殊处理。造模后第28天处死各组实验兔,取出椎间盘组织,运用免疫荧光及ELISA方法检测IL-1β、TGF-β1的表达情况。结果与正常组同期比较,假模型组实验兔椎间盘组织中IL-1β和TGF-β1的平均光密度及含量差异均无统计学意义(P 0.05);模型组实验兔椎间盘组织中IL-1β和TGF-β1的平均光密度及含量均明显增强,差异有统计学意义(P 0.01);经过"夹脊"电针干预后,电针组实验兔椎间盘组织中IL-1β和TGF-β1的平均光密度及含量均明显减弱,差异有统计学意义(P 0.01)。结论 "夹脊"电针通过下调IL-1β、TGF-β1的表达,减少细胞凋亡,从而抑制和延缓腰椎间盘退变。     

Smad2,3,4,7蛋白在慢性移植性肾病的定位和表达变化

【目的】探讨Smad2,3,4,7蛋白在慢性移植性肾病（chronic allograft nephropathy,CAN）的定位和表达变化。【方法】收集13例经组织病理学明确诊断为CAN并行移植肾切除的肾标本作为实验组;取10例正常肾组织作为对照组。用免疫组化法检测Smad2、Smad3、Smad4、Smad7和TGF-β1蛋白的定位和表达;图像半定量分析肾小球和肾小管间质中Smads蛋白和TGF-β1的含量变化。【结果】Smad2、Smad3和Smad4主要在正常肾组织的肾小管上皮细胞内表达,肾小球偶见;而Smad7主要在肾小球表达。与对照组相比,Smad2、Smad3和Smad4蛋白在CAN中肾小球和肾小管上皮细胞的表达均明显增加（P〈0.01）,与TGF-β1上调成正相关;而Smad7蛋白在肾小球中的表达却明显下降（P〈0.01）,与TGF-β1上调成负相关。并且随着CAN的加重Smad2,3,4蛋白的表达逐渐增加,而Smad7蛋白的表达逐渐减少（P〈0.01）。【结论】TGF-β/Smad信号通路参与了CAN的纤维化进程,Smad2,3,4蛋白过度表达和Smad7负调控不足是导致CAN的纤维化的主要原因。     

腰椎间盘退变患者髓核组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1、白细胞介素-1β表达及相关性研究

目的:探讨在腰椎间盘退变(LDD)患者髓核组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平及相关性。方法:选取LDD患者40例为观察组,选取同期非退行性椎间盘病变患者43例为对照组。根据Pfirrmann分级系统,观察组又分为轻度病变组(10例)、中度病变组(16例)和重度病变组(14例)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平。采用Western blot法及免疫组化染色检测Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平。采用HE染色和病理学评分(HDS)对椎间盘组织的病理损伤程度进行组织学评分。比较各组患者髓核组织Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平。分析Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平与Pfirrmann分级、HDS组织学评分的相关性,以及Caspase-1与IL-1βmRNA表达水平间的相关性。分析LDD患者疾病严重程度的影响因素。结果:观察组Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平高于对照组(均P<0.05);在观察组中,随着疾病程度逐...