纤毛摆动频率、嗅觉与鼻窦内窥镜手术

为评价功能性鼻内窥镜手术 (FESS)对嗅觉和纤毛摆动频率的影响 ,对 70例慢性鼻窦炎患者 (除外有鼻外科手术史、哮喘、囊性纤维病、鼻息肉、过敏症以及系统性疾病患者 )进行了纤毛摆动频率 (CBF)和嗅觉功能的测定。所有患者均经正规药物治疗无效。术式包括从筛漏斗切除到全蝶筛切除术的各种 FESS手术。测量方法 :取中鼻甲内面粘膜 ,3小时内在室温下采用显微图像分析技术测定 CBF。在 50 0倍光镜下 ,将直径5μm的光斑定位在纤毛横截面上 ,纤毛摆动引起光密度的变化即转化为电讯号输入计算机进行分析、储存。每次测量取每份标本的 10个不…     

呼吸道纤毛运动状况的高速数字化显微成像

目的 通过对呼吸道纤毛摆动的频率和形式进行精确测量,以建立客观评价呼吸道上皮纤毛传输功能的指标。方法 采用高速数字化显微成像技术,对体外培养的兔和鼠气管黏膜以及人鼻腔黏膜的纤毛摆动状况进行观察。结果 ①数字化图像中测量点灰度的变化反映纤毛运动的状况,通过分析图像灰度的变化过程,可评价纤毛运动周期中各个时段的特征变化;②图像采集系统的采样速率为240帧/s时,可清晰显示纤毛运动状况,而当采样速率下降为30帧/s时,则无法获得正确的纤毛摆动频率(ciliary beat frequency,CBF)数据;③30℃时,鼠呼吸道CBF基值(x±sx)为(15.6±0.7)Hz(n=5);兔呼吸道CBF基值为(13.2±0.9)Hz(n=7);人鼻腔CBF基值为(13.4±1.1)Hz(n=5),3者间差异无显著性(P>0.05)。当向培养液中加入ATP后,CBF将在数秒内快速升高。结论 高速数字化显微成像和精确的数据处理技术,能够准确反映呼吸道纤毛运动状况,为客观评价呼吸道黏液纤毛传输功能提供临床实用指标。     

鼻腔药物纤毛抑制效应的分级

鼻腔药物多为复合剂 (formulations) ,常用于鼻腔疾病的局部治疗。由于鼻粘膜对药物的吸收性强 ,药物适用范围相对较宽 ,有时也可经鼻用药治疗全身性疾病。在新的鼻腔药物研制过程中 ,其对粘膜纤毛清除功能的毒性作用需首先确定。为此 ,该作者通过体外实验 ,以光电记录法观察了目前欧美国家常见的鼻腔药物及其赋形剂对鸡胚气道粘膜上皮纤毛摆动频率(ciliary beat frequency,CBF)的影响 ,并进行了分级 ,其分级标准为 :不影响纤毛功能的药物 (cilio- friendly)指用药后间隔 6 0分钟 ,CBF恢复至用药前 75 %或以上的 :纤毛抑制药 (cilio- inh…     

体外培养的人鼻腔黏膜纤毛的摆动频率

目的通过测量体外培养的人鼻腔纤毛上皮细胞的纤毛摆动频率（ciliray beat frequency,CBF）,为人鼻腔黏液纤毛运输系统功能的研究提供理论依据。方法应用组织块培养法和高速数字化摄像系统,测量体外培养的人鼻腔钩突、下鼻甲黏膜的CBF。结果体外培养的正常鼻腔黏膜上皮细胞和鼻窦炎鼻腔黏膜上皮细胞的CBF,两者之间差异无统计学意义（t=0.419,P=0.678）;测量来源相同体外培养的钩突和下鼻甲纤毛上皮细胞的CBF,两者的CBF是一致的,之间的差异无统计学意义（t=-0.087,P=0.931）。结论体外培养的鼻窦炎患者的鼻腔黏膜可代表正常人的鼻腔黏膜进行黏液纤毛运动的研究;钩突黏膜更容易获得,可代替下鼻甲黏膜进行体外培养。     

盐酸羟甲唑啉对慢性鼻窦炎离体钩突黏膜纤毛细胞纤毛摆动频率的短期影响

目的 观察不同浓度盐酸羟甲唑啉对体外培养的人钩突黏膜纤毛细胞纤毛运动的影响.方法采用组织块培养法,观察在加有羟乙基哌嗪乙磺酸[4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid,HEPES]的Hank平衡盐溶液(Hank balanced salt solution,HBSS)、0.25、0.50、1.00和2.00g/L的盐酸羟甲唑啉作用下,体外培养人鼻腔纤毛细胞的纤毛摆动频率(ciliarybeat frequency,CBF),并进行配对分析.结果 ① CBF在HBSS中20 min内无显著性变化(F=0.098,P=1.00);②0.25g/L盐酸羟甲唑啉组在20 min内与加药前CBF无明显变化,差异无统计学意义(F=0.124,P=1.00);③0.50g/L盐酸羟甲唑啉组与1.00g/L盐酸羟甲唑啉组类似,CBF轻微升高,并在1～2min内达到高峰,保持3～4min后,CBF开始缓慢下降,在测量最后达到最低值,但0.50g/L盐酸羟甲唑啉组与加药前相比,差异无统计学意义(F=2.94,P=0.05);1.00g/L盐酸羟唑啉组较加药前CBF降低,加药16 min后,差异有统计学意义(F=3.78,P=0.00);④2.00g/L盐酸羟甲唑啉组CBF在最初3min保持稳定,然后持续下降,差异有统计学意义(F=5.69,P=0.00);⑤各组在加药后的最大增加值,差异无统计学意义(F=0.85,P=0.50);加药后的最大下降值在1.00和2.00g/L的CBF明显降低,差异有统计学意义(F=23.74,P=0.00).结论 0.25～2.00g/L的盐酸羟甲唑啉对体外培养的人鼻腔纤毛细胞的纤毛运动存在一定浓度依赖性的抑制作用,且随着药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强;0.50g/L盐酸羟甲唑啉可能更适用于临床应用.     

呼吸道纤毛上皮细胞的组织块法培养

目的建立组织块法呼吸道纤毛上皮细胞原代培养模型,观察细胞生长分化情况,为深入研究黏液纤毛传输系统提供方法学基础。方法应用组织块法在鼠尾胶原上培养兔气管纤毛上皮细胞,对培养7天的标本行苏木素-伊红染色、黏蛋白5AC(mucin-5AC,MUC5AC)单克隆抗体免疫组织化学染色、扫描电镜及透射电镜观察、纤毛摆动频率测量。结果①细胞培养7天后可以见到大量的纤毛细胞和杯状细胞,纤毛形态正常,摆动活跃;②苏木素-伊红染色和黏蛋白MUC5AC单克隆抗体免疫组织化学染色可见分化良好的纤毛细胞和杯状细胞;③扫描电镜及透射电镜观察见纤毛细胞分化良好,纤毛形态正常;④(30±1)℃下测得纤毛摆动频率为(13.2±0.9)次/s。结论应用组织块法进行兔气管纤毛上皮细胞培养,可以得到分化良好的纤毛细胞和杯状细胞,纤毛摆动活跃,可应用此模型对黏液纤毛传输系统进行深入研究。     

第二信使对呼吸道纤毛上皮细胞调控

呼吸道纤毛运输系统在呼吸道免疫防御中起着非常重要的作用，纤毛运输能力主要是由纤毛摆动频率决定的，目前研究第二信使对纤毛摆动频率的调节机制已成为热点，本对钙离子(Ca2 )、环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)、三磷酸肌醇(IP3)对纤毛摆动的调控作用综述如下。     

第二信使对呼吸道纤毛上皮细胞调控

呼吸道纤毛运输系统在呼吸道免疫防御中起着非常重要的作用,纤毛运输能力主要是由纤毛摆动频率决定的,目前研究第二信使对纤毛摆动频率的调节机制已成为热点,本文对钙离子(Ca2+)、环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)、三磷酸肌醇(IP3)对纤毛摆动的调控作用综述如下.     

鼻腔和鼻窦疾病纤毛上皮细胞功能状态的活体检查

鼻腔粘膜清除功能降低时,会增加某些有害化学物质、细菌及变应原对鼻腔和鼻窦粘膜的损害作用。通过观察上皮细胞的纤毛摆动频率可判断其清除功能。作者用尼龙刷从鼻腔获得上皮细胞放入199培养基,观察纤毛摆动频     

慢性鼻窦炎抗生素治疗对纤毛摆动频率的长期效果

以10名（女6，男4）年龄13～55岁有慢性化脓性或粘液脓性鼻溢液3～30年（平均87年）的慢性界窦炎病人为对象，用支气管镜刷直视下在下鼻甲刷拭进行纤毛摆动频率（CBF）的评估。依以前从鼻窦或中道拭子细菌培养结果为基础，选择恰当的抗生素治疗3个月，前2周用全量，后10周用半量，结束时在一天的同一时间重复作纤毛刷试。另以正常人对照评估正常的变化。结果正常人的CBF为12．5～16Hz，表示个体特征的频率在同一次变化小平10％，在不同的标本中差异小于20％。10例病人除1例外，CBF均值低于对照组。2例未见纤毛摆动外，其余的CBF均值为…     

鼻腔上皮细胞连续单层悬浮培养纤毛形成后的正常摆动频率

评价鼻腔粘膜上皮细胞纤毛功能，广泛采用的指标为纤毛摆动频率（CBF）。研究纤毛的功能最好在细胞培养的条件下进行以排除非上皮细胞、细菌污染等因素的影响，且持续时间较长，但单层细胞培养时纤毛减少以至消失，采用悬浮法可解决这一问题。病例为10例反复上呼吸道感染的患者，无遗传性和继发性的其它异常，并最少在最后一次感染后6个月取下鼻甲后端中部和／或中鼻甲下端的粘膜置培养液中，用计算机显微成像技术测活检时的CBF。一块组织供电镜检查。先作单层培养，3周后再作悬浮培养3周，每周测CBF。所有10例患者活检都观测到纤毛的活…     

NO对鼻窦粘膜纤毛运动的调节和NO合成酶在人类鼻窦上皮细胞中的表达

已有研究证实 ,一氧化氮 (NO)对鼻腔及呼吸道上皮细胞纤毛运动、鼻腔血流有调节作用。为了观察 NO对鼻粘膜上皮纤毛摆动频率 (CBF)的影响以及 NO合酶 (NOS)在健康鼻窦粘膜上皮细胞中的分布 ,该作者选择 12例因患垂体腺瘤经鼻中隔 -蝶窦途径手术切除的患者 (病例选择除外有吸烟史、鼻腔、鼻窦手术史、一个月内上呼吸道感染病史及有过敏性鼻炎、慢性鼻炎、鼻窦炎病史者 ) ,所有病例均经 CT检查 ,除外蝶窦粘膜肥厚等不正常影像学改变。全麻下开放蝶窦前壁 ,取下部分粘膜迅速放入 2 5 %糖溶液中 ,行免疫组化检查 ,观察诱导性 NO合成酶 (i…     

前列腺素E_1、E_2和F_(2α)对家兔上颌窦粘膜纤毛活性的影响

前列腺素E_1(PGE_1)、E_2(PGE_2)及F_(2α)(PGF_(2α))由上呼吸道粘膜合成,在炎症情况下,抗原抗体相互作用时释放。作者采用充电技术研究了其对家兔上颌窦粘膜纤毛活性的影响。实验是在家兔的上颌窦前壁开窗,用带计算机的光电频率检测技术测量粘膜纤毛活动的频率(纤毛摆动数/分钟),PGE_1等所诱发的     

鼻内用药会损害纤毛运动吗?

鼻内用药一般是发挥其局部治疗作用,但近代亦有通过鼻腔给药,使药物进入周身血液循环而治疗全身性疾病者(如心得安)。鼻用药及其添加剂的应用,可损害鼻粘膜的纤毛运动,使粘液毡的廓清速率减慢。由于光电记录器(PERD)的发展,在活体外可记录鸡胚的气管和人腺样体组织的纤毛摆动频率。减充血剂应用后20分钟内纤毛摆动频率减低不到50%,受损功能是可逆的。局麻药及抗组织胺剂在用药20分钟内即能抑制纤毛运动,但局麻药对其功能抑制是可逆的。多数抗生素对鼻粘膜纤毛运动影响不大,且属可     

神经肽Y(NPY)对兔上颌窦粘膜纤毛运动的影响

为研究NPY对粘膜纤毛运动的影响,并确定此影响能否为α-肾上腺能受体或Ca~(++)阻滞剂所阻断,作者选用家兔,面或舌动脉逆行性插管给药,管尖接近上颌动脉,上颌窦粘膜用环钻法暴露2×8mm,并立即盖上防雾窗,用双目显微镜观察粘膜纤毛运动,光电法记录结果,粘膜纤毛运动形式由示波器连续监测,墨水探笔记录,统计纤维运动频率进行计算机分析,同时监测ECG、体温、呼吸和血压。先定出纤毛运动频率基线零点,实验如下进行:①8只兔,增加NPY剂量(0.0001～5.0μg/kg),观察对粘膜纤毛运动的影响;②6只兔,连续     

臭鼻杆菌对离体人鼻粘膜纤毛活力的影响

萎缩性鼻炎(AR)的病理发生和病理生理研究很少,自患者鼻腔内分离出臭鼻杆菌的机率甚高,但是否即其致病菌尚无定论。已知有些急、慢性鼻及鼻窦炎常见的细菌(如流感嗜血杆菌、表皮葡萄球菌)能延缓呼吸道纤毛的摆动,破坏纤毛活力,损害粘纤清除功能;而有些细菌(如卡他球菌、肺炎链球菌)都无此     

扑地松纳气雾剂在体内外对纤毛上皮功能的影响

在许多体内外试验中发现鼻内用药会不同程度地影响鼻纤毛功能。而纤毛运动在上呼吸道洁净功能中起重要用用,因而鼻内用药必须尽可能地减少对纤毛运动的影响。本文通过体内外试验采观察扑地松纳、附加剂(三油酸脱水山梨醇)及氟利昂对纤毛运动的影响。用随机、单盲、安慰剂对照法进行体外实验。在25℃条件下用光电记录仪测定各药物对鸡胚气管纤毛拍击频率(CBF)的影响。在20′、40′、60′时分别测量CBFs值,用双尾T检验,P<0.01为有意义。用随机、对照、双盲、交叉法进行体内试验。每种药连续使用一周,分别在上、下午10点时向左鼻孔     

麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动的影响

目的观察不同浓度麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动的影响。方法采用组织块培养法，观察在加有羟乙基哌嗪乙磺酸[4-（2-hydroxyethyl）-1-piperazineethanesulfonic acid，HEPES]的Hank平衡盐溶液（Hank balanced saltsolution，HBSS）、2．5g／L、5g／L、10g／L和20g／L的麻黄素作用下体外培养人鼻腔纤毛摆动频率（ciliary beat frequency CBF），并进行配对分析。结果①CBF在HBSS中10min内无显著性变化；②在加入2．5g／L、5g／L、10g／L和20g／L的麻黄素后，1～2min内CBF明显升高并达高峰，与加药前相比差异有统计学意义（P值均〈0．05），后渐呈下降趋势，在10min时2．5g／L和5g／L的麻黄素中CBF与加药前相比虽略低，但差异无统计学意义（P值均〉0．05），而10g／L和20g／L麻黄素中CBF与加药前相比明显降低，且差异有统计学意义（P值均〈0．05）；③2．5g／L～20g／L的麻黄素作用1min后CBF的增加量差异无统计学意义（F=0．697，P〉0．05），10min后随着浓度的增加而下降，10g／L～20g／L麻黄素CBF的下降值较2．5g／L～5g／L的下降值差异有统计学意义（P〈0．05）。结论麻黄素作为肾上腺素受体激动药物，2．5g／L～20g／L的麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动早期有一定的刺激作用，后期则表现为抑制作用，且随着药物浓度的增加，刺激作用逐渐缩短，抑制作用逐渐延长。5g／L麻黄素作用于鼻腔纤毛细胞刺激作用最大，而抑制作用较弱。     

鼻息肉患者的鼻腔粘液纤毛功能

鼻息肉患者常出现的鼻塞和流涕症状，一般认为是由于粘液纤毛清除功能减退所致。该文作者测定了鼻息肉患者的纤毛上皮的糖精清除时间和纤毛摆动频率，并研究息肉液、组胺、前列腺素（ＰＧ）Ｄ。、ＰＧＥ。和ＰＧＦ２ｘ对纤毛摆动频率的影响。采用糖精试验测定粘液纤毛清除率。按Ｇｒｅｅｎ等人介绍的方法采用非损伤性刷取技术和体外计算机图像技术测定纤毛摆动频率。健康志愿受试者排除鼻部疾病和鼻息肉，取样前４８小时鼻腔未用药及未用非类固醇药。共测定１０个大于５０ｍｍ纤毛上皮条的纤毛摆动频率。随机从１０例成人鼻息向患者术中切取…     

人鼻腔纤毛上皮细胞的浸没培养

目的：浸没培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞，为纤毛相关研究及经鼻药物安全性评价等研究提供可靠的细胞学模型。方法：采用低温酶消化法，浸没培养人鼻腔纤毛上皮细胞，倒置相差显微镜观察细胞生长状况，扫描电镜及免疫细胞化学方法观察细胞融合及纤毛分化状态，高速数字化显微视频成像系统检测纤毛摆动频率。结果：①相差显微镜下，纤毛细胞数量逐渐增加，至7～10d达到高峰后逐渐减少，纤毛细胞存活时间维持在14～21d；②细胞培养第7天，扫描电镜可见鼻腔上皮细胞表面覆盖纤毛或微绒毛，杯状细胞及无纤毛柱状上皮细胞相间排列；③细胞培养第7天，Ⅳ型β-微管蛋白、闭合小环蛋白-1免疫荧光结果显示细胞融合及纤毛分化良好，纤毛细胞比例可达20％～30％；④培养第7、14、21天纤毛摆动基础频率分别为（10．73±2．15）Hz、（9．92±1．97）Hz、（10．30±2．11）Hz，无明显统计学差异；⑤外源性刺激剂100μmol／L ATP可明显增加纤毛摆动频率。结论：应用酶消化法浸没培养人鼻腔纤毛上皮细胞，细胞融合及纤毛分化状态良好，纤毛摆动活跃，对外源性刺激反应灵敏，是应用于纤毛相关研究及经鼻药物安全性评价等研究的一个较为理想的细胞模型。