培哚普利和洛沙坦对心肌细胞间粘附分子-1表达的影响

目的：研究血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）培哚普利和血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体（ＡＴ１）拮抗剂洛沙坦对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α刺激的心肌细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）表达的影响。　　方法：运用流式细胞仪观察培养的乳鼠心肌细胞ＩＣＡＭ－１的表达量。　　结果：ＴＮＦ－α可明显增加心肌细胞ＩＣＡＭ－１的表达量。从时间变化看,以刺激６ 小时表达量最高,但随作用时间延长表达量减少。培哚普利（１０－ ６ ｍ ｏｌ／Ｌ,１０－ ８ ｍ ｏｌ／Ｌ）和洛沙坦（１０－ ６ ｍ ｏｌ／Ｌ,１０－ ８ ｍ ｏｌ／Ｌ）均可明显抑制ＴＮＦ－α刺激的心肌细胞ＩＣＡＭ－１ 的表达量。　　结论：培哚普利和洛沙坦均可抑制培养的心肌细胞因子ＴＮＦ－α诱导而上调的ＩＣＡＭ－１ 的表达,这可能是ＡＣＥＩ和ＡＴ１受体拮抗剂治疗心力衰竭时的心脏保护效应的重要原因     

血管利钠肽减弱去甲肾上腺素对心肌生长的刺激作用

本实验目的在于研究血管利钠肽（ Ｖ Ｎ Ｐ）对去甲肾上腺素（ Ｎ Ｅ）促心肌生长作用的影响,并对其机制进行探讨。分离、培养乳鼠心肌细胞,完全随机分为三组:对照组、 Ｎ Ｅ组和 Ｖ Ｎ Ｐ＋ Ｎ Ｅ组。以 Ｍ Ｔ Ｔ法和总蛋白含量测定法观察各组细胞的生长情况。进而采用放射免疫方法研究了 Ｖ Ｎ Ｐ对细胞内ｃ Ｇ Ｍ Ｐ,ｃ Ａ Ｍ Ｐ水平的影响。结果发现: Ｎ Ｅ（１０－ ７ ｍ ｏｌ／ Ｌ～１０－ ５ ｍ ｏｌ／ Ｌ）可以使培养的乳鼠心肌细胞 Ｍ Ｔ Ｔ Ｏ Ｄ值显著升高（ Ｐ＜ ０．０５ ｖｓ 对照组）,并且具有剂量依赖性。 Ｖ Ｎ Ｐ（１０－ ７ ｍ ｏｌ／ Ｌ）可以显著降低 Ｎ Ｅ（１０－ ６ ｍ ｏｌ／ Ｌ） 刺激的心肌细胞 Ｍ Ｔ Ｔ Ｏ Ｄ值和细胞内总蛋白含量（ Ｐ＜０．０５ ｖｓ Ｎ Ｅ组）。对照组和 Ｎ Ｅ组细胞内ｃ Ｇ Ｍ Ｐ,ｃ Ａ Ｍ Ｐ水平无显著差异,而 Ｖ Ｎ Ｐ（１０－ ７ ｍ ｏｌ／ Ｌ）能升高细胞内ｃ Ｇ Ｍ Ｐ水平,降低ｃ Ａ Ｍ Ｐ水平（ Ｐ＜ ０．０５ ｖｓ对照组、 Ｎ Ｅ组）。提示 Ｖ Ｎ Ｐ能减弱 Ｎ Ｅ对心肌生长的刺激作用,其机制可能与ｃ Ｇ Ｍ Ｐ,ｃ Ａ Ｍ Ｐ等信号转导分子有关。     

胃癌组织DCC基因（VNTR）的杂合性丢失和Bcl—2蛋白的表达

目的：为了研究ＤＣＣ基因的杂合性丢失（ＬＯＨ）和Ｂｃｌ－２蛋白过度表达在胃癌发生中的作用，方法：采用ＰＣＲ方法及免疫组织化学技术检测了胃癌组织ＤＣＣ基因的ＬＯＨ和Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：结果发现，胃癌（信息个体）ＬＯＨ发生率为５４５％（１８／３３），Ｂｃｌ－２蛋白表达阳性率为６０％（３０／５０）；ⅢⅣ期胃癌ＬＯＨ发生率（８２２％，１５／１８）显著高于ⅠⅡ期胃癌２０％，３／１５）（Ｐ＜００１）；Ｂｃｌ－２蛋白的表达与ＤＣＣ基因的ＬＯＨ及胃癌大小、分化、淋巴结转移、浆膜浸润、临床分期及Ｌａｔｌｒｅｎ’ｓ分型无显著相关。结论：以上结果提示，ＤＣＣ基因的ＬＯＨ和Ｂｃｌ－２蛋白的高表达均参与了胃癌的发生，ＤＣＣ基因的ＬＯＨ是胃癌发生的晚期事件，其致癌机制与Ｂｃｌ－２有所不同     

应用长片段PCR扩增全长HIV— 1DNA的研究

目的 探讨长征段ＰＣＲ（ＬＤ－ＰＣＲ）扩增特点,并将它用于对全长ＨＩＶ ＤＮＡ的研究。方法 应用ＬＴＤ（Ｕ５）／ＬＴＤ（Ｒ）,ＣＬ－ＮＳＣ／ＣＬ－ＮＥＦ和ｇａｇＡｌ／ｇａｇＡ２等不同引物,＾３２Ｐｇａｇ,ｐｏｌ,ｎｅｆ和ｔａｔ等为片段探针,对克隆有ＨＩＶ－１完整基因片段,部分基因片段的质粒和ＨＶＩ感染者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＩＶ－１ ＤＮＡ进行扩增。结果 ＬＤ－ＰＣＲ对０．４－９ｋｂ的第     

原位杂交检测肝癌组织c—myc和HBx基因的表达

应用光敏生物素标记基因探针原位杂交技术（ＤＮＡ－ｍＲＮＡ）检测２３例新鲜肝癌和癌旁组织中的ｃ－ｍｙｃ和ＨＢｘ基因表达状况。结果发现，１１例肝癌和癌旁组织ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ均为阳性，６例均为阴性，５例仅ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ阳性１例仅ＨＢｘｍＲＮＡ阳性，Ｘ＾２检验显示肝癌组织ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ地明显相关关系（Ｐ〉０．０５），提示ＨＢｘｍＲＮＡ不能直接激活ｃ－ｍｙｃ交响曲在     

血管紧张素Ⅱ对单核细胞中转录因子的作用

目的：研究血管紧张素Ⅱ与单核细胞活化的相互关系。方法：采用脱氧核糖核酸蛋白质凝胶漂移泳动检测技术分析血管紧张素Ⅱ对单核细胞Ｕ９３７中的激活蛋白１（Ａｐ１）、激活蛋白２（Ａｐ２）、糖皮质激素应答元件结合蛋白（ＧＲＥ）、环磷酸腺苷应答元件结合蛋白（ＣＲＥＢ）、ＧＣ框特异结合蛋白（Ｓｐ１）、核因子１（ＣＴＦ／ＮＦ１）、核因子κＢ（ＮＦκＢ）等转录因子结合活性的影响。结果：血管紧张素Ⅱ使单核细胞中的Ａｐ１、ＣＲＥＢ和ＮＦκＢ转录因子结合活性明显增强，未标记一致寡核苷酸和单克隆抗体竞争实验证明转录因子结合反应具有特异性。结论：血管紧张素Ⅱ对单核细胞Ｕ９３７的Ａｐ１、ＣＲＥＢ和ＮＦκＢ转录因子具有激活作用，该作用可能使单核细胞活化而粘附血管内皮。     

急性髓系白血病Bcl—2基因表达及其临床意义

目的：探讨Ｂｃｌ－２基因在急性髓系白血病（ＡＭＬ）中的作用。方法：应用ＡＰＡＡＰ法检测６７例ＡＭＬ患者骨髓单个核细胞Ｂｃｌ－２基因表达，半固体培养法检测ＣＦＵ－Ｌ形成能力，并观察临床化疗效果．结果：发现ＡＭＬ患者Ｂｃｌ－２基因表达显著高于正常对照组（Ｐ〈０．００１），分化较成熟的Ｍ３型白血病表达率显著低于其它各亚型白血病（Ｐ〈０．０１），Ｂｃｌ－２蛋白表达表达与ＣＦＵ－Ｌ形成无相关性同，与患者外周     

细胞凋亡调控基因Bcl—XL,Bcl—Xs在胃癌组织中的表达及临床意义

细胞凋亡调控基因与肿瘤发生的关系已成为当前肿瘤研究的热点。为此,我们应用免疫组化技术对６０例胃癌、癌旁组织及６１例癌前病变胃镜活检组织进行了细胞凋亡相关调控基因Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－ＸＳ蛋白的检测,结合临床病理学指标,探讨它们在胃癌、癌旁组织及癌前病变中的表达及临床意义。１．材料与方法１．１　一般资料　６０例胃癌及癌旁（距肿瘤边缘２ｃｍ）组织,４０例萎缩性胃炎伴肠上皮化生,２１例萎缩性胃炎伴不典型增生组织,３０例浅表性胃炎（对照）组织均为我院胃镜室１９９５年５月～１９９８年１月胃镜活检标本。所有…     

G—CSF配合大剂量CTX和VCR动员自体外周血干细胞的研究

本研究对１２例拟行ＡＰＢＳＣＴ的患者予ＶＣＲ１－２ｍｇ／ｍ２，体表面静注及ＣＴＸ７ｇ／＾２体表面积静滴，５－７天后予Ｇ－ＣＳＦ１００μｇ／ｍ＾２体表面积静注５－７天，白细胞升至３．０×１０＾９／Ｌ以上时，用ＣＳ３０００血细胞分离机单次收集单个核细胞ＭＮＣ〉２．８×１０＾８／ｋｇ，ＣＤ＾＋３４〉．６×１０＾６／ｋｇ，ＣＦＵ－ＧＭ〉３．９×１－０＾４／ｋｇ，ＡＰＢＳＣＴ后，全部患者于＋５天－＋１０天白     

急性白血病bcl-2、p53基因蛋白细胞表达水平及与化疗效果的关系

为探讨ｂｃｌ－２、ｐ５３基因蛋白在急性白血病（ＡＬ）细胞表达水平、相互关系及对化疗药耐受的影响，采用免疫组化方法检测ｂｃｌ－２及ｐ５３蛋白阳性水平，临床及体外实验以细胞凋亡为指标观察ｂｃｌ－２蛋白与ＡＬ对ＤＮＲ的耐受。结果：ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白在４６例ＡＬ细胞的阳性率分别为２１７％和６３０％（Ｐ＞００５），与细胞类型、病情有关。ｂｃｌ－２阳性在耐药组多于在缓解组（８８５％、３５０％，Ｐ＜００１）。两种蛋白均阳性的８例均不缓解，均阴性者的缓解率为１１／１３。１例ｂｃｌ－２低表达ＡＬ细胞与ＤＮＲ（１０ｍｇ／Ｌ）共育后有明显的细胞凋亡，４例高表达者加大药物剂量才发生。结果提示，成人ＡＬ细胞有ｂｃｌ－２和ｐ５３蛋白异常表达，且与ＡＬ类型、病情及耐药有关，联合检测基因蛋白更有助于对化疗效果的预测。克服ｂｃｌ－２所致的耐药应设法下调ｂｃｌ－２的表达     

反义c-mycRNA的表达对大鼠血管平滑肌细胞c-mycmRNA和c-Myc蛋白水平的影响

为探讨反义ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒载体是否影响血管平滑肌细胞表达ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ和ｃ－Ｍｙｃ蛋白水平，用基因重组方法，将第二外显子及其两则部分内含子共１．５３ｋｂ序列的ｃ－ｍｙｃ基因片段反向连接于Ｐ＾ＬＸＳＮ的５′长末端重复序列下游，通过Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将反义ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒导入ＰＡ３１７包装细胞系，并经Ｇ４１８筛选获得抗性克隆。反义－ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒上清液转染的平滑肌细胞经ＤＮＡ印迹     

Wegener肉芽肿误诊为全身结核一例

患者男性,２６岁,１９９８年５月２８日入院。半月前鼻塞、流脓涕、ＣＴ示左侧副鼻窦炎,青霉素治疗１２天无好转,出现发热、咳嗽、咳痰带血,无盗汗,胸片示右肺上中野斑片状阴影,右肺中野见类圆形影,其内见１－５ｃｍ×２－７ｃｍ圆形透光区,无液平。体检：体温３８－６℃,血压１１３／８３ｍｍＨｇ（１ｍｍＨｇ＝０－１３３ｋＰａ）,双眼结膜充血,鼻粘膜肿胀,少量脓性分泌物,鼻中隔无溃疡,心肺腹未见异常。实验室检查：ＲＢＣ４－６０×１０１２／Ｌ,Ｈｂ１３８ｇ／Ｌ,ＷＢＣ１０－３×１０９／Ｌ,Ｌ０－１１３,Ｎ０－８…     

肾素—血管紧张素系统基因多态性与糖尿病肾病

糖尿病肾病（ＤＮ）的遗传易感性已成为其发病的重要原因之一。近年研究发现,肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）与ＤＮ的关系密切。该系统各成分－－血管紧张素原（ＡＧＴ）、肾素（ＲＥＮ）、血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）、血管紧张素Ⅱ受体（ＡＴ）的基因均存在多种多态性,之些基因的变异可能导致该系统不适当的激活,引起其产物血管紧张素Ⅱ（ＡｇⅡ）的增加,从而通过一生物学效应引发ＤＮ。     

原位杂交检测肝癌组织c－myc和HBx基因的表达

应用光敏生物素标记基因探针原位杂交技术（ＤＮＡ－ｍＲＮＡ）检测２３例新鲜肝癌和癌旁组织中的ｃ－ｍｙｃ和ＨＢｘ基因表达状况。结果发现，１１例肝癌和癌旁组织的ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ均为阳性，６例均为阴性，５例仅ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ阳性，１例仅ＨＢｘｍＲＮＡ阳性。ｘ~２检验显示肝癌组织ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ无明显相关关系（Ｐ＞０．０５），提示ＨＢｘｍＲＮＡ不能直接激话ｃ－ｍｙｃ癌基因。     

C-myc,Bcl-2与胃癌生物学行为和细胞凋亡

目的探讨癌基因Ｂｃｌ２，Ｃｍｙｃ的表达变化与胃癌生物学行为和细胞凋亡的关系．方法采用免疫组化ＬＳＡＢ法，检测６０例原发性胃癌组织（男３８例，女２２例，年龄３７岁～７５岁）癌基因Ｂｃｌ２，Ｃｍｙｃ蛋白的表达变化；在普通光学显微镜下对受检组织的ＨＥ片进行形态学测量和凋亡细胞计数．结果受检组织６０例中，Ｃｍｙｃ阳性表达３７例（６２％），其表达与分化程度和临床分期呈显著性相关，且Ｃｍｙｃ阳性组织细胞凋亡指数（０７±０３）明显高于阴性组织（０３±０２）；所检标本中，Ｂｃｌ２阳性表达率为６８％（４１／６０），其中高分化胃癌的阳性表达率明显高于低分化胃癌（３２％ｖｓ９％）（Ｐ＜００５），阳性Ｂｃｌ２组织与阴性Ｂｃｌ２组织比较，前者凋亡指数明显低于后者（０４±０３ｖｓ０９±０５）（Ｐ＜００５）．结论Ｃｍｙｃ与Ｂｃｌ２基因的异常表达是胃癌生物学行为的重要影响因素，二者在胃癌形成过程中均起着一定的作用，并对细胞增生与凋亡有重要调节作用．     

胃癌前病变不同转归中p53,bcl—2基因的表达以及细胞增？…

目的 探讨ｐ５３、ｂｃｌ－２基因和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）等生物学指标在胃癌前病变不同转归中的作用。方法 采用免疫组化（ＬＳＡＢ）法检测５２例胃癌患者胃癌及癌的病变组织标本及５６例非胃癌患者有病变「胃黏膜中度以上肠上皮化生和（或）异型增生」组织标本的ｐ５３、ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达。结果 ⑴在癌前病变中,ｐ５３、ｂｃｌ－２在癌组与非癌组之间的表达差异无显著性（ｐ〉０．０５）,ＰＣＮＡ标记指数（     

含弓形虫ROP1基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究Ⅴ.IFN-γ基因真核表达重组质粒的构建及其在DNA免疫中基因佐剂的作用

目的　构建ＩＦＮ－γ基因真核表达重组质粒作为基因佐剂,观察其与ｐｃＤＮＡ３－ＲＯＰ１（ｐｃ－ＲＯＰ１） ＤＮＡ共同免疫小鼠所诱导的免疫应答。方法　将ＩＦＮ－γ基因片段定向插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３,双酶切鉴定,获得ｐｃＩＦＮ 重组子;碱裂解法大量制备,经肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,每只鼠注射ｐｃＩＦＮ、ｐｃ－ＲＯＰ１ 各１００μｇ,两周后同量加强免疫一次,以ｐｃＤＮＡ３空质粒及生理盐水组为对照。分别于免疫后第３０ 天、５０ 天、７０天共三次用ＭＴＴ法测定小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖活性及ＮＫ细胞活性;双夹心ＥＬＩＳＡ 测定血清细胞因子ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２及酶法测定ＮＯ含量;ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ抗体滴度。结果　构建成功的作用下,该两项指标均明显提高,且ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２ 及ＮＯ水平均较不加佐剂组显著提高（Ｐ＜ ０．０１）;而对ＩｇＧ抗体滴度无显著影响（Ｐ＞ ０．０５。结论　ＩＦＮ－γ基因佐剂具有协同ｐｃ－ＲＯＰ１ＤＮＡ免疫的作用,可增强免疫鼠细胞免疫应答,ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２细胞因子及ＮＯ的产生     

反复呕血、黑便2个月

１　病历简述男,２０岁。反复呕血、黑便２月。院外治疗无效转来我院。病人３个月前外伤造成双下肢及多发肋骨骨折病史。无肝、胃等病史。查体：Ｔ３７℃Ｐ１００次／分Ｒ２４次／分Ｂｐ１４／１０ｋＰａ,贫血貌,面色苍黄,皮肤、粘膜轻度黄染。心、肺、腹无异常。血常规：ＷＢＣ１３－１×１０９／Ｌ,Ｈｂ７３ｇ／Ｌ;便潜血》;Ｂ超示：胆系扩张,胆总管２－３ｃｍ,门静脉不宽。胃镜正常,全消化道钡餐正常。腹部ＣＴ示：肝门处有３－５ｃｍ×３－４ｃｍ×５－１ｃｍ囊实性包块,与门脉及左肝管关系密切。２　术前讨论进修医师：上消…     

含弓形虫ROP1基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究：Ⅴ.I …

构建ＩＦＮ－γ基因真核表达重组质粒作为基因佐剂,观察其与ｐｃＤＮＡ３－ＲＯＰ１（ｐｃ－ＲＯＰ１）ＤＮＡ共同免疫小鼠所诱导的免疫应答。方法将ＩＦＮ－γ基因片段定向插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３,双酶切鉴定,获得ｐｃＩＦＮ重组子;碱裂解法大量制备,经肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／小鼠,每只鼠注射ｐｃＩＦＮ、ｐｃ－ＲＯＰ１各１００μｇ,两周后同时加强免疫一次,以ｐｃＤＮＡ３空质粒及生理盐水组为对照。分别于免疫后第     

缓释维拉帕米对高血压患者交感活性的影响

通过握力试验激发高血压患者的交感活性。分析交感活性与血压、心率及循环中内分泌激素的变化关系，及缓释异搏定对交感活性的影响。　方法：对４６ 例高血压患者选用握力试验方法，测量握前握中握后的血压、心率，并测定血浆中儿茶酚胺（ Ｃ Ａ）及肾素－ 血管紧张素－ 醛固酮（ Ｒ Ａ Ｓ）的浓度，经６ 周缓释异搏定２４０ ｍ ｇ／ｄ 的治疗，重复测定上述指标， Ｃ Ａ采用高压液相色谱方法， Ｒ Ａ Ｓ采用放免方法操作完成。　结果：（１）治疗前最大握力试验时血压上升百分比 Ｓ Ｂ Ｐ／ Ｄ Ｂ Ｐ２０．３／２０．４％ ，心率则增快１４．５％ ，治疗６ 周后，最大握力时血压仅上升７．８％ ／７．３％ ， Ｐ＜ ０．０５。心率增快为５．３％ ， Ｐ＜ ０．０５；（２）缓释异搏定治疗后去甲肾上腺素（ Ｎ Ｅ）、血管紧张素（ Ａ）、醛固酮（ Ａｌｄ）浓度明显下降，与治疗前比 Ｐ＜ ０．０１，血压明显下降 Ｐ＜ ０．０１。　结论：通过握力试验方法可以判断高血压患者的交感活性，钙拮抗剂缓释异搏定能明显降低血浆中 Ｎ Ｅ、 Ａ、 Ａｌｄ 水平及交感神经活性，使血压平稳下降。