大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖过程中Wnt-1的表达

目的:探讨大鼠脊髓损伤后信号蛋白Wnt-1的表达及其与脊髓内源性神经干细胞(ENSCs)早期增殖的关系.方法:30只Wister成年大鼠,随机分为正常对照组(A组,n=5)和损伤组(B组,n＝25).A组不损伤脊髓,B组在大鼠T10采用经典Allen′s 打击法(25g·cm)造成脊髓损伤,于造模后1d、3d、1周、2周、4周进行取材,对距离损伤中心5mm的脊髓行免疫组化染色,检测ENSCs的增殖及Wnt-1蛋白表达的动态变化,与A组比较,并统计分析二者之间的相关性.结果:30只大鼠均进入结果分析.A组脊髓在中央管周围、外周软膜可见极少数BrdU/Nestin阳性细胞,白质中几乎没有.B组中BrdU/Nestin阳性细胞于损伤后24h表达于室管膜以及软膜,灰质和白质亦有少量表达,3d时明显增多,1周达到高峰(P<0.05),2周开始逐渐下降,4周时仍可见少量BrdU/Nestin阳性细胞.B组各时间点与A组比较差异有显著性意义(P<0.05).B组大鼠各时间点均有Wnt-1蛋白的表达,损伤后第1天开始表达,3d达到高峰,一直至脊髓损伤后2周Wnt-1都维持在较高的表达水平.Wnt-1蛋白的表达与Nestin的表达具有相关性(r=0.893,P<0.05).结论:大鼠脊髓损伤后信号蛋白Wnt-1表达增加,其可能与大鼠ENSCs的早期增殖有关.     

大鼠脊髓损伤后巢蛋白在脊髓组织中的表达

目的探讨大鼠脊髓损伤后巢蛋白(nestin)的表达规律及其意义。方法30只Wister成年大鼠,随机分为正常对照组(A组)、损伤组(B组)。采用Allen打击模型(25g·cm),在T10段造成急性脊髓损伤,于损伤后1d、3d、1周、4周、8周进行取材,对距离损伤中心5mm处脊髓进行nestin免疫组化检测。应用图像分析软件进行nestin阳性区域面积侧算。结果A组脊髓室管膜细胞只可见极少数细胞胞浆内nestin表达,白质中几乎无表达。B组中nestin于损伤后24h表达于室管膜以及软膜,灰质和白质亦有少量表达,1周达到高峰(P<0.05),4周明显下降,8周时很少或几乎无表达。结论脊髓组织的许多部位可能存在具有分化和更新潜能的祖细胞,脊髓损伤后这些细胞被激活,在功能恢复中可能发挥着重要的作用。     

不同剂量盐酸戊乙奎醚对老年病人术后认知功能的影响

目的 探讨不同剂量盐酸戊乙奎醚对老年病人术后认知功能的影响.方法 拟在全麻下行腹部手术的老年病人93例,年龄≥65岁,体重55～ 71 kg,性别不限,ASA分级Ⅰ级或Ⅱ级,简易智力量表评分(MMSE评分)＞27分,采用随机数字表法,将病人随机分为3组(n=31)∶盐酸戊乙奎醚0.010 mg/kg组(A组)、盐酸戊乙奎醚0.015 mg/kg组(B组)和阿托品0.010 mg/kg组(C组).麻醉前30min,A组肌肉注射盐酸戊乙奎醚0.010 mg/kg,B组肌肉注射盐酸戊乙奎醚0.015 mg/kg,C组肌肉注射阿托品0.010 mg/kg.于术后72 h内行MMSE评分,≤27分为发生认知功能障碍(24～ 27分为轻度;19 ～ 23分为中度;0～18分为重度).记录术后72 h内术后认知功能障碍的发生情况和程度.结果 与A组比较,B组术后各时点认知功能降低,术后认知功能障碍发生率升高(P＜0.05),A组和C组差异无统计学意义(P＞0.05);与B组比较,C组术后各时点认知功能增强,术后认知功能障碍发生率降低(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚可抑制老年病人术后认知功能,且与剂量有关.     

术前应用盐酸戊乙奎醚对老年患者术后早期认知功能的影响

目的 观察术前应用盐酸戊乙奎醚对老年全麻患者术后早期认知功能障碍(POCD)的影响.方法 择期全麻下行非心脏手术老年患者(≥65岁)120例,随机均分成二组,麻醉前30min分别肌注盐酸戊乙奎醚0.5mg(A组)、阿托品0.5 mg(B组)或东茛菪碱0.3 mg(C组),于术前24 h及术后24、48、72 h由同一测试者采用简易智力状态检查法(MMSE)评估患者认知功能.结果 手术后3 d内A、B和C组POCD发生率分别为25%、27.5%和30%,三组间差异无统计学意义.术后24、48和72 h MMSE评分A组略高于B组和C组.结论 术前肌注盐酸戊乙奎醚0.5 mg不增加老年非心脏手术患者POCD发生率.     

粒细胞集落刺激因子对大剂量盐酸戊乙奎醚所致大鼠认知功能障碍的影响

目的观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大剂量盐酸戊乙奎醚所致大鼠认知功能障碍的影响。方法 24只14个月龄Wistar成年雄性大鼠随机分为三组:空白组(N组)、盐酸戊乙奎醚组(P组)和G-CSF治疗组(G组),每组8只。N组腹腔注射生理盐水1ml,P组腹腔注射盐酸戊乙奎醚2.56mg/kg,G组腹腔注射盐酸戊乙奎醚2.56mg/kg后皮下注射G-CSF 50μg/kg,连续5d。第1、3、5天给药后用Morris水迷宫测试其空间学习记忆能力的改变,末次水迷宫实验后用免疫组化法观察海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性细胞表达个数。结果与第1天比较,第3天和第5天三组潜伏期和游泳距离均明显缩短(P<0.05),且第5天N组和G组明显短于P组(P<0.05)。与P组比较,N组和G组海马区ChAT阳性细胞个数均明显增多(P<0.05)。结论 G-CSF可以改善大剂量盐酸戊乙奎醚引起的大鼠认知功能障碍。     

盐酸戊乙奎醚对老龄大鼠认知功能的影响

目的 比较盐酸戊乙奎醚与东莨菪碱对老龄大鼠认知功能及大鼠海马乙酰胆碱酯酶(ACHE)阳性纤维和基底前脑胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性细胞数量的影响.方法 24只老龄SD大鼠,随机均分为盐酸戊乙奎醚组(P组)、东莨菪碱组(S组)及对照组(C组).P、S组连续3 d腹腔给药,剂量分别为0.64、0.29 mg·kg-1·d-1,C组给予同等容积的生理盐水2 ml.于停药后1 d行水迷宫测试,记录潜伏期及游泳距离,连续测试3 d.末次水迷宫测试后1 h处死大鼠,用组织化学方法测定大鼠海马AChE以及免疫组化方法测定大鼠基底前脑ChAT的表达.结果 三组3 d潜伏期较1 d缩短(P＜0.05);S、C组3 d游泳距离较1 d缩短(P＜0.05);S组水迷宫2 d及3 d潜伏期及游泳距离较C组显著延长(P＜0.05).S组大鼠海马AChE阳性纤维数量较C组显著增加(P＜0.05),S组基底前脑ChAT阳性细胞数量较C组显著减少(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚对老龄大鼠的认知功能无显著影响,东莨菪碱则对认知功能产生一定程度的抑制作用.     

丙戊酸对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响

目的：探讨丙戊酸（valproic acid,VPA）对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响.方法：45只Wister成年大鼠,随机分为正常对照组（A组,n=5）、单纯损伤组（B组,n=20）、损伤后VPA治疗组（C组,n=20）.B组和C组采用Allen＇s打击模型（25gcm）,在T10段造成急性脊髓损伤,C组损伤后半小时给予VPA治疗,每日300m/kg,经腹腔分两次注射,直至取材;B组以相同方法给予等量生理盐水.于损伤后1d、3d、1周、4周、8周进行取材,对距离损伤中心5mm处脊髓进行巢蛋白Nestin免疫组化检测,应用图像分析软件进行Nestin阳性区域面积测算.结果：A组脊髓室管膜细胞中极少数细胞胞浆内有Nestin表达,白质中几乎无表达.B组损伤后24h Nestin表达于室管膜以及软膜,1周达到高峰（P＜0.05）,并相向延伸至脊髓白质和灰质;损伤后4周Nestin表达明显下降,8周时很少或几乎无表达.C组Nestin表达在伤后24h与B组无显著性差异,1周时在中央管周围Nestin阳性细胞明显较B组多（P＜0.05）,持续至4周时仍高表达,8周时仍有表达.结论：VPA在大鼠脊髓损伤后能够激活内源性神经干细胞.     

盐酸戊乙奎醚预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤时缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的 评价盐酸戊乙奎醚预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤时缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 健康成年雌性SD大鼠120只,体重180 ～ 220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=40):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(P组).采用腹腔注射内毒素5 mg/kg制备大鼠内毒素性急性肺损伤模型.C组腹腔注射等量生理盐水,P组于注射内毒素前30 min时腹腔注射盐酸戊乙奎醚2 mg/kg.于注射内毒素后2、4、8和24 h时各组随机取8只大鼠处死取肺,采用RT-PCR法检测肺组织HIF-1α mRNA的表达.于注射内毒素后6h时随机取8只大鼠处死取肺,测定湿干重比(W/D比),用ELISA法检测肺组织IL-6的含量,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组和P组注射内毒素后6h时W/D比、IL-6含量、各时点HIF-1α表达水平升高(P＜0.05);与ALI组比较,P组注射内毒素后6h时W/D比、IL-6含量、各时点HIF-1α表达水平降低(P＜0.05).P组肺组织病理学损伤程度较ALI组减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药通过下调肺组织HIF-1α表达,抑制炎性反应,从而减轻大鼠内毒素性急性肺损伤.     

盐酸戊乙奎醚对体外循环致大鼠脑损伤的影响

目的 评价盐酸戊乙奎醚对体外循环(CPB)致大鼠脑损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠30只,随机分为5组(n=6),假手术组(S组)仅进行动脉和静脉穿刺置管,CPB组、低剂量盐酸戊乙奎醚组(PL组)、中剂量盐酸戊乙奎醚组(PM组)和高剂量盐酸戊乙奎醚组(PH组)建立CPB模型,PL组、PM组和PH组分别在预冲液中加入盐酸戊乙奎醚0.2、0.6、2.0 mg/kg,CPB组加入等容量生理盐水.停CPB后2 h采集上腔静脉血样,测定血浆神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S-100β蛋白浓度.然后取脑组织,透射电镜下观察海马区神经元的超微结构.结果 与S组比较,其余4组血浆NSE和S-100β蛋白浓度升高(P＜0.05);与CPB组和PL组比较,PH组和PM组血浆NSE和S-100β蛋白浓度降低(P＜0.05);与PM组比较,PH组血浆S-100β蛋白浓度降低(P＜0.05).PH组和PM组海马区神经元损伤程度轻于CPB组和PL组.结论 预充液中加入盐酸戊乙奎醚0.6或2.0 mg/kg可减轻CPB致大鼠脑损伤,且呈剂量依赖性.     

盐酸戊乙奎醚对横纹肌溶解所致急性肾损伤炎症因子影响

目的:探讨盐酸乙奎醚对横纹肌溶解所致急性肾损伤患者炎症因子的影响。方法:选择横纹肌溶解所致急性肾损伤患者60例,随机分为盐酸戊乙奎醚治疗组和对照组;同时随机选择正常人30例作为健康对照组。盐酸戊乙奎醚治疗组(n=30):每日行持续肾脏替代治疗(CRRT)8h+常规治疗的基础上,加常规剂量盐酸戊乙奎醚0.01 mg/kg,肌肉注射,每天1次;对照组(n=30):每日行持续肾脏替代治疗(CRRT)8h+常规治疗,分别测定第1次给药前1h,治疗24h后,48h后,5 d后的炎症指标IL-6、CRP、PCT、TNF-α,监测患者平均住院时间,肌肉溶解复发率及患者转归情况;健康对照组分别测定炎症指标IL-6、CRP、PCT、TNF-α值。结果:组内比较,盐酸戊乙奎醚治疗组,在治疗24h、48h、5 d的时间点,炎症指标CRP、IL-6、PCT、TNF-α均较治疗前明显降低;对照组,在治疗48h、5 d的时间点,炎症指标CRP、IL-6、PCT、TNF-α均较治疗前明显降低,在治疗24h时间点无明显变化。组间比较,盐酸戊乙奎醚治疗组与对照组比较,在治疗24h、48h、5 d的时间点,盐酸戊乙奎醚组炎症指标CRP、IL-6、PCT、TNF-α均较对照组降低明显(P<0.05)。盐酸戊乙奎醚治疗组与健康对照组比较,在治疗前、治疗24h、48h的时间点,炎症指标CRP、IL-6、PCT、TNF-α均较健康对照组升高明显(P<0.05),在治疗5 d的时间点两组差异无统计学意义;对照组与健康对照组比较,在治疗24h、48h、5 d的时间点,炎症指标CRP、IL-6、PCT、TNF-α均较健康对照组升高明显(P<0.05)。盐酸戊乙奎醚组患者平均住院时间9±3天,较对照组16±6天,明显减少(P<0.05);盐酸戊乙奎醚组肌肉溶解无1例复发,复发率为0,对照组为5例复发,复发率为16.7%;盐酸戊乙奎醚组1例死亡,死亡率为3.3%,对照组4例死亡,死亡率13.3%,盐酸戊乙奎醚组死亡率,较对照组明显下降(P<0.05)。结论:盐酸戊乙奎醚可以调控横纹肌溶解所致急性肾损伤的炎症反应,改善患者预后。     

巢蛋白和胶质纤维酸性蛋白在成年大鼠脊髓损伤后不同时期的表达变化

目的 探讨成年大鼠脊髓损伤后不同时期、不同部位巢蛋白(nestin)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)的表达变化。方法 8周龄SD大鼠72只，雌雄各半；体重180～220g。随机分为实验组66只(n=6)，对照组6只(n=6)。实验组：用动脉夹压迫法建立动物模型，于造模后1、3、5d，1，2．3．4、5、6、7和8周各时间点，分别在脊髓损伤部位和损伤邻近部位取材，进行甲苯胺蓝染色及免疫荧光染色，随机选取不同时间点的组织片，用LeicaQ5001W图像处理系统观察脊髓损伤后不同时期、不同部位(损伤部位和其周围)nestin和GFAP的表达变化。对照组：打开椎管，暴露脊髓相应节段，不压迫，彻底止血后缝合伤口，伤口愈合后，取材和检测同上。结果 甲苯胺蓝染色：对照组显示脊髓神经元胞体和突起轮廓清晰，胞核为深蓝色；实验组于脊髓损伤1d后，显示大、中型神经元数目明显减少，神经元胞浆呈深蓝色，尼氏体模糊，胞体塌陷皱缩或碎裂，胞核椭圆或三角形、染成淡蓝至深蓝色，2～8周胞核呈深蓝色。免疫荧光染色：对照组显示除脊髓中央管周围可见到少量nestin表达外，其它部位几乎不表达；GFAP在脊髓各个部位均有表达；实验组：脊髓损伤1d后，损伤区域nestin和GFAP表达增加，3～7d后，除损伤区域外，邻近及周边区域nestin和GFAP的表达显著增加，并逐渐达到高峰，随着时间的推移其表达逐渐下降，nestin和GFAP的表达于损伤2周后逐渐恢复到对照组水平。结论 成年大鼠脊髓损伤可诱导nestin表达，神经干细胞对脊髓损伤有反应，nestin表达和反应性星形胶质细胞增生呈正相关，并可能参与中枢神经系统损伤修复。     

The influence of spinal canal narrowing and timing of decompression on neurologic recovery after spinal cord contusion in a rat model.

STUDY DESIGN: The effect of spinal canal narrowing and the timing of decompression after a spinal cord injury were evaluated using a rat model. OBJECTIVE: To evaluate whether progressive spinal canal narrowing after a spinal cord injury results in a less favorable neurologic recovery. Additionally, to evaluate the effect of the timing of decompression after spinal cord injury on neurologic recovery. SUMMARY OF BACKGROUND DATA: Results in previous studies are contradictory about whether the amount of canal narrowing or the timing of decompression after a spinal cord injury affects the degree of neurologic recovery. METHODS: Forty adult male Sprague-Dawley rats were equally divided into a control group, in which spacers of 20%, 35%, and 50% were placed into the spinal canal after laminectomy, and an injury group in which the spacers were placed after a standardized incomplete spinal cord injury. After spacer removal, neurologic recovery in both was monitored by Basso, Beattie, Bresnahan (BBB) Locomotor Rating Scale (Ohio State University, Columbus, OH) motor scores and transcranial magnetic motor evoked potentials for 6 weeks followed by histologic examination of the spinal cords. Subsequently, 42 rats were divided into five groups in which, after spacer placement, the time until decompression was lengthened 0, 2, 6, 24, and 72 hours. Again, serial BBB motor scores and transcranial magnetic motor evoked potentials were used to assess neurologic recovery for 6 weeks until the animals were killed for histologic evaluation. RESULTS: Spacer placement alone in the control animals resulted in no neurologic injury until canal narrowing reached 50%. All of the control groups (spacer only) exhibited significantly better (P < 0.05) motor scores compared with the injury groups (injury followed by spacer insertion). Within the injury groups the motor scores were progressively lower as spacer sizes increased from the no-spacer group to the 35% group. The results in the 35% and 50% groups were not statistically different. The results of the time until decompression demonstrated that the motor scores were consistently better the shorter the duration of spacer placement (P < 0.05) for each of the time groups (0, 2, 6, 24, and 72 hours) over the 6-week recovery period. Histologic analysis showed more severe spinal cord damage as both spinal canal narrowing and the time until decompression increased. CONCLUSION: The results in this study present strong evidence that the prognosis for neurologic recovery is adversely affected by both a higher percentage of canal narrowing and a longer duration of canal narrowing after a spinal cord injury. The tolerance for spinal canal narrowing with a contused cord appears diminished, indicating that an injured spinal cord may benefit from early decompression. Additionally, it appears that the longer the spinal cord compression exists after an incomplete spinal cord injury, the worse the prognosis for neurologic recovery.     

大鼠脊髓损伤后不同时期移植异体骨髓间充质干细胞的局部分布

目的 观察大鼠脊髓损伤后不同时间点经尾静脉注射移植异体骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)后,MSCs在损伤局部的聚集情况.方法 取成年雄性大鼠48只,建立脊髓半横断模型,术后即刻、1 d、1周、2周、3周、4周、5周、6周,经尾静脉注射移植Hoechst预标记的同种异体MSCs(5×106个/只),每个时间点6只.另设立未损伤组(空白对照)及假损伤组(实验对照)作为对照,每组6只.细胞移植后2周,处死实验动物.损伤脊髓部位连续水平纵行切片,在荧光显微镜下观察,计数单张切片平均阳性细胞数.结果 行方差分析.结果 对照组脊髓内仅见零星标记细胞[末损伤组(14+2)个,假损伤组(11±3)个],损伤后即刻至损伤4周进行细胞移植组脊髓损伤部位可见大量标记细胞聚集,其中损伤1周组最多达(2197±14)个,损伤5周组标记细胞数明显减少至(259±66)个,损伤6周组标记细胞仪为(43±15)个.标记的移植细胞集中在距离损伤部位0.5 cm区域内,主要分布于白质.结论 大鼠脊髓损伤后1个月内经静脉移植同种异体骨髓MSCs,移植细胞可向脊髓损伤部位聚集.     

改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的应用研究

目的 探讨新型改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的实用性。 方法 将40只普通级成年SD大鼠按照随机数字表法分为2组：传统组（20只,采用传统蚕食法椎管开窗进行造模）、改良组（20只,采用椎板揭盖开窗法进行造模）,比较2组切口长度、手术时间、术中出血量及术后死亡率,并于术后不同时间点评价2组大鼠运动功能（basso beattie bresnahan,BBB）评分及HE染色结果判定脊髓功能障碍及造模成功与否。 结果 切口长度、手术时间、出血量及术后28 d死亡率的比较,改良组明显优于传统组,差异具有统计学意义（P<0.05）。2组大鼠术后BBB评分及HE染色结果提示以椎板揭盖开窗法制备大鼠脊髓损伤模型成功率与传统方法比较,差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 改良大鼠脊髓损伤模型椎板开窗相较传统椎管开窗方法有明显的优势,可广泛运用于脊髓损伤基础研究的模型制作。     

移植定向诱导的人骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤

目的研究脊髓损伤后植入定向诱导的人骨髓间充质干细胞是否有助于动物功能的恢复及不同植入时间对其是否存在影响。方法SD大鼠36只，制成脊髓损伤模型并随机分为A、B、C三组，A组于脊髓损伤后立即进行细胞移植，B组于损伤后1周进行细胞移植，C组作为对照组观察。在脊髓损伤后的1～6周，对各组动物进行BBB评分，应用SPSS12．0进行数据分析，并通过免疫荧光技术检测Brdu标记细胞的存活及与宿主脊髓的整合情况。结果B组动物的BBB评分提高显著，较其他两组差异有统计学意义。B组免疫荧光显示，移植细胞大量存活并与再生的宿主神经纤维形成网状结构，桥接于脊髓损伤区的两端。结论延期移植定向诱导的hMSCs可促进脊髓损伤动物功能的恢复。     

改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的实验研究

目的 探讨新型改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的实用性.方法 将40只普通级成年SD(Sprague-Dawley)大鼠按照随机数字表法分为两组:传统组(20只,采用传统蚕食法椎管开窗进行造模)、改良组(20只,采用椎板揭盖开窗法进行造模),比较两组切口长度、手术时间、术中出血量及术后死亡率,并于术后不同时间点评价两组大鼠运动功能(basso beattie bresnahan,BBB)评分及HE染色结果判定脊髓功能障碍及造模成功与否.结果 切口长度、手术时间、出血量及术后28 d死亡率的比较,改良组明显优于传统组,差异均有统计学意义(均P<0.05).两组大鼠术后BBB评分及HE染色结果提示以椎板揭盖开窗法制备大鼠脊髓损伤模型成功率与传统方法比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论改良大鼠脊髓损伤模型椎板开窗相较传统椎管开窗方法有明显的优势,可广泛运用于脊髓损伤基础研究的模型制作.     

骨髓基质细胞经不同移植途径在损伤脊髓中的迁移

目的 观察骨髓基质细胞(BMSCs)经不同移植途径在损伤脊髓中的迁移和分布规律.方法 40只Wistar大鼠随机分成4组,以改良Allen法制备脊髓损伤模型.第3代BMSCs经CM-Dil荧光染料标记后按不同途径移植.A组:脊髓损伤后行第四脑室注射移植;B组:脊髓损伤后行损伤区蛛网膜下注射移植;C组:脊髓损伤后行损伤区远端蛛网膜下注射移植;D组:脊髓损伤后行股静脉注射移植.分别于移植后24 h、1、2、3、4周取损伤脊髓段作冰冻切片,倒置荧光显微镜下观测移植的BMSCs在损伤脊髓中心的聚集情况.结果 移植后24 h:除B组外脊髓损伤区未发现红色荧光;移植后1周,A、C组移植的BMSCs开始向脊髓损伤区迁移;移植后2周,除D组外,各组BMSCs迁移、聚集在损伤脊髓的中心;移植后3-4周,脊髓损伤区BMSCs数量减少,B组减少速度更快.结论 经第4脑室、硬脊膜下移植的BMSCs能迁移聚集在损伤脊髓的中心,经静脉移植的BMSCs极少迁移到损伤脊髓的中心.     

早期手术减压对损伤脊髓caspase-3表达的影响

目的探讨大鼠脊髓损伤后不同减压时间对大鼠脊髓细胞caspase-3表达的影响。方法将动物分为:大鼠脊髓挫伤即刻手术减压组(A组),大鼠脊髓挫伤2小时手术减压组(B组),大鼠脊髓挫伤8小时手术减压组(C组),大鼠脊髓挫伤24小时手术减压组(D组)。手术后1、3、7、14、28天对脊髓损伤区进行细胞凋亡caspase-3蛋白表达的测定(免疫组化法),采用计算机图像分析技术,进行定量分析。并用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况。结果A、B、C、D四组中均发现凋亡caspase-3蛋白阳性表达细胞,图象分析发现,各组凋亡细胞caspase-3免疫反应阳性细胞表达顺序为D>C>B>A,与大鼠后肢功能恢复有平行的变化趋势。结论大鼠脊髓损伤早期手术减压能抑制脊髓损伤后的细胞凋亡,促进大鼠后肢功能恢复。     

血管内皮生长因子在大鼠持续性脊髓压迫伤中的表达

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)在实验大鼠持续性脊髓压迫伤中的表达变化,并探讨其在脊髓压迫伤中的作用和意义。方法健康封闭群W istar大鼠60只,体重280~300 g,采用平头塑料螺钉后路压迫复制大鼠持续性脊髓压迫伤的动物模型(脊髓50%压迫)。以改良Tarlov评分、BBB-21点评分及斜板实验评价其后肢运动功能;应用免疫组织化学和原位杂交技术,检测脊髓组织在持续性压迫适应中不同时段VEGF-mRNA和蛋白的表达,并结合计算机图像分析仪进行定量分析。结果持续压迫各时间组大鼠后肢功能明显减弱,在压迫2 d组大鼠的后肢功能进一步恶化,随着持续压迫时间的推移,大鼠脊髓运动功能有一小幅度的自发性恢复,在持续压迫3周左右时恢复较明显。VEGF的mRNA和蛋白在损伤脊髓组织中广泛表达,压迫1 d组出现大量的免疫阳性细胞,压迫2d组VEGF表达强度达高峰,压迫1周组表达明显下调(P<0.05),压迫3周时降至基础水平。结论在实验大鼠持续性脊髓压迫损伤的发生与发展中,VEGF的表达可能参与了脊髓组织的缺氧耐受及损伤后的修复。