肝细胞癌抗原基因在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的　探讨肝细胞癌抗原 (HCA)基因mRNA在肝细胞癌 (HCC)组织中的表达。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织及肝硬化和正常肝组织中的 4种HCAmRNA的表达进行检测 ;结合临床病理资料进行分析。　结果　 46例HCC患者中 ,HCA90、HCA51 9、HCA52 0、HCA587基因mRNA阳性率分别是 65 2 %、76 1 %、45 7%和 32 6 % ;至少表达一种HCA者达 82 6 % ;而癌旁组织中仅HCA51 9基因有 6 5 %mRNA表达为阳性。 1 0例肝硬化和正常肝组织中 4种HCA基因均不表达。 4种HCA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无显著相关性 (P >0 0 5)。在部分AFP正常的患者中存在HCA基因的表达。　结论　HCA基因在HCC中呈高比例、高特异性表达 ,为HCC免疫治疗提供了新的潜在靶位     

Pokemon在肝细胞癌及癌旁、癌以远组织、肝硬化组织及正常肝组织中的表达

目的检测和分析Pokemon在肝细胞癌及癌旁组织、癌以远组织、肝硬化组织及正常肝组织中的表达。方法40例肝癌组织、距癌组织1cm以上的癌旁组织、距癌组织5 cm以上癌以远组织取自肝细胞癌合并乙型肝炎后肝硬化行肝移植患者切除病肝。20例肝硬化组织取自肝硬化行断流手术患者。20例正常肝组织取自健康供体标本。用real-time PCR(实时定量PCR,RT- PCR)法检测Pokemon蛋白mRNA在这些组织中的表达。结果肝癌组织、癌旁组织的Pokemon蛋白tuRNA的表达水平显著高于癌以远组织、肝硬化组织、正常肝组织(P<0.05)。肝癌组织与癌旁组织则差异无统计学意义(P>0.05)。癌以远组织、肝硬化组织及正常肝组织之间差异也无统计学意义(P>0.05)。结论Pokemon在肝细胞癌中存在异常高表达。癌旁组织可能存在着亦有Poke- mon蛋白mRNA高表达的的癌前病变。癌以远组织、肝硬化组织Pokemon蛋白mRNA表达水平与正常肝组织差异无统计学意义。     

含缬酪肽蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达与其临床病理特点及复发的关系.方法 运用RT-PCR、荧光定量PCR检测HCC组织70例、正常无肝硬化肝组织70例中VCP mRNA的表达水平,应用免疫组织化学法检测HCC组织30例、正常无肝硬化肝组织25例中VCP的蛋白表达情况,并结合HCC患者的临床病理因素及复发情况进行分析.结果 HCC患者的组织标本中VCP mRNA表达量显著高于正常无肝硬化肝组织,差异有统计学意义(P<0.05);HCC组织中VCP的蛋白表达阳性率(76.7%)显著高于正常无肝硬化肝组织(25.0%),差异有统计学意义(P<0.05);HCC组织VCP的表达与门静脉癌栓、肿瘤大小和复发相关(P<0.05).结论 HCC组织中VCP的表达明显高于正常无肝硬化肝组织,其表达与肿瘤大小、门静脉癌栓及复发关系密切.     

人宫颈癌致癌基因和Pokemon在肝细胞癌中的表达及其相关性

目的 观察人宫颈癌致癌基因(HCCR)和Pokemon在肝细胞癌中的表达水平,探讨两者间的关系.方法 应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测41例肝癌组织、43例癌旁组织及其相应44例血液标本、3例肝硬化组织及其相应的3例血液标本以及3例正常肝组织中HCCR、Pokemon的表达水平,分析肝细胞癌(HCC)患者血液样本中HCCR、Pokemon表达水平与临床指标的关系.结果 肝癌、癌旁、肝硬化及正常肝组织HCCR阳性表达率分别为100.00%、97.67%、100.00%、100.00%;Pokemon阳性表达率分别为97.56%、97.67%、100.00%、100.00%.但HCCR、Pokemon在各类组织中的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),肝细胞癌、癌旁、肝硬化、正常肝等组织中的表达水平呈递减趋势.肝细胞癌患者血液中HCCR、Pokemon阳性率分别为79.55%及50.00%.两者的表达水平显著相关.结论 HCCR和Pokemon可能可以做为HCC相关的肿瘤标记物.HCCR和Pokemon在肝细胞癌患者中存在某种程度的关系.     

金属硫蛋白在肝细胞癌中表达的临床意义

目的 探讨金属硫蛋白（metallothionein,MT)在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC)组织中、癌旁组织和正常肝组织中的表达及其临床意义。方法 对30例HCC病人的癌组织、10例癌旁组织和10例正常肝组织标本进行免疫组化染色，观察MT的表达状况，分析MT在HCC中的表达与癌旁组织、正常肝组织、细胞分化和预后等的关系。结果 正常肝组织有很强而稳定的MT染色；癌旁组织（包括肝硬化结节）有较高的MT着色；癌组织中MT染色很弱，甚至无MT染色。相互比较有显著性差异（P＜0．05）。MT在肝细胞癌组织中的表达与生存率之间存在着正相关关系（P＜0．05）。结论 MT在正常肝组织、癌旁组织和肝细胞癌组织中的表达呈递减趋势，肝细胞癌组织中MT表达与癌细胞分化无关，而与瘤体组织坏死及肝切除术后病人生存状况相关。     

肝素酶与肝细胞癌侵袭转移的关系

我们应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 33例原发性肝细胞肝癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)标本中肝素酶 (heparanase,HPA)的基因表达 ,并结合病人的临床病理学和随访资料 ,以探讨HPA可否作为HCC转移潜能的可靠标志。对象与方法1.研究对象 :新鲜冷冻的标本取自 2 0 0 0年 8月至 2 0 0 1年 4月浙江大学医学院附属第二医院普外科、肿瘤外科手术切除并经病理学检查证实的 33例HCC(包括癌和癌旁肝组织 )和 9例肝脏良性肿瘤 (取瘤旁肝组织作正常对照 )。收集病人临床病理学检查资料 ,HCC组中 ,男 2 8例 ,女 5例 ;年龄2 9～ …     

UNC5b基因表达下调与肝细胞癌血管生成的关系

目的 探讨UNC5b基因在肝细胞癌(HCC)血管生成中的作用.方法 收集中南大学湘雅医院外科2004年10月至2005年8月期间手术切除并经病理确诊为HCC的肿瘤标本和相应距瘤体1 cm外的癌旁肝组织各38例,另取5例正常肝组织作为对照.采用组织原位杂交的方法检测UNC5b mRNA在HCC组织、痛旁组织以及正常肝组织中的表达情况,并分析其与HCC临床病理特征之间的关系.分离培养人脐动脉内皮细胞(HUAEC),用HCC组织匀浆及血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)联合刺激活化HUAEC,应用RT-PGR方法分析其活化前后UNC5b基因的表达水平.结果 原位杂交结果显示,UNC5b主要表达于正常肝组织以及部分癌旁组织的血管内皮细胞胞质中;在HCC组织的血管内皮细胞中呈弱表达或不表达;HCC组织内皮细胞中UNC5b的表达强弱与肿瘤分化程度、肿瘤结节的数目、肿瘤大小、有无包膜、肝硬化程度无相关性(P>0.05);癌旁组织内皮细胞中UNC5b的表达与有无包膜显著相关(P=0.003).UNC5b基因在未活化的HUAEC中呈强表达(0.973±0.012),在联合刺激活化后的HUAEC中表达明显下调(0.451±0.113,P<0.05).结论 UNC5b基因在HCC组织血管内皮细胞及活化后的HUAEC中的表达均明显下调,提示UNC5b的表达下调可能与HCC的血管生成相关.     

UNC5b基因表达下调与肝细胞癌血管生成的关系

目的 探讨UNC5b基因在肝细胞癌(HCC)血管生成中的作用.方法 收集中南大学湘雅医院外科2004年10月至2005年8月期间手术切除并经病理确诊为HCC的肿瘤标本和相应距瘤体1 cm外的癌旁肝组织各38例,另取5例正常肝组织作为对照.采用组织原位杂交的方法检测UNC5b mRNA在HCC组织、痛旁组织以及正常肝组织中的表达情况,并分析其与HCC临床病理特征之间的关系.分离培养人脐动脉内皮细胞(HUAEC),用HCC组织匀浆及血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)联合刺激活化HUAEC,应用RT-PGR方法分析其活化前后UNC5b基因的表达水平.结果 原位杂交结果显示,UNC5b主要表达于正常肝组织以及部分癌旁组织的血管内皮细胞胞质中;在HCC组织的血管内皮细胞中呈弱表达或不表达;HCC组织内皮细胞中UNC5b的表达强弱与肿瘤分化程度、肿瘤结节的数目、肿瘤大小、有无包膜、肝硬化程度无相关性(P>0.05);癌旁组织内皮细胞中UNC5b的表达与有无包膜显著相关(P=0.003).UNC5b基因在未活化的HUAEC中呈强表达(0.973±0.012),在联合刺激活化后的HUAEC中表达明显下调(0.451±0.113,P<0.05).结论 UNC5b基因在HCC组织血管内皮细胞及活化后的HUAEC中的表达均明显下调,提示UNC5b的表达下调可能与HCC的血管生成相关.     

肝细胞癌Tenascin蛋白和微血管密度检测及临床意义

目的:研究细胞外基质Tenascin(TN)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达,探讨TN对HCC肿瘤微血管生成、浸润、转移及预后的影响.方法:采用免疫组织化学方法检测63例HCC癌组织、癌旁组织及15例肝炎后肝硬化组织、10例正常肝组织中TN表达,同时检测HCC组织微血管密度(CD105-MVD),分析TN表达与HCC病理学特点及肿瘤微血管生成的关系.结果:HCC组织TN阳性率65.1%,癌旁组织69.8%,肝硬化组织20.0%,正常肝组织无阳性表达;HCC组织及癌旁组织TN表达阳性率及表达强度评分显著高于肝硬化组织及正常肝组织(χ2=27.67,P<0.01;F=12.82,P<0.01);HCC组织TN表达阳性率与癌旁组织比较差异无统计学意义(χ2=0.325,P>0.05);TN表达与HCC的组织学分级,病灶数量,有否包膜浸润、肿瘤转移及肿瘤微血管生成密切相关.结论:HCC组织TN的表达上调促进了肿瘤的新生血管形成,导致术后肿瘤的早期复发和转移;HCC组织TN检测可有效反映其恶性程度、浸润、转移及预后.     

肝癌、肝硬化组织中CD3、CD57、CD20细胞数量与临床病理表现及预后的关系

目的探讨CD3、CD57、CD20细胞在原发性肝细胞癌(HCC)、癌旁、肝硬化及正常肝组织中的数量及意义.方法HCC 60例,单纯性肝硬化62例,正常肝组织23例,以免疫组化SP法进行CD3、CD57、CD20染色,对阳性细胞数进行定量分析并与临床资料进行相关探讨.结果(1)各组CD3+细胞平均数从高到低为癌旁组织、癌组织、肝硬化组织、正常肝组织(P＜0.05);各组CD57+细胞平均数从高到低为癌组织、癌旁组织、正常肝组织、肝硬化组织(P ＜0.05);各组CD20+细胞平均数从高到低为癌组织、癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织(P ＜0.01).(2)HCC中CD3+细胞、CD57+细胞、CD20+细胞与组织学分级均无明显关系.(3)HCC中CD57+细胞和CD20+细胞随着临床分期的发展有下降的趋势(P ＜0.05);HCC中CD3+细胞平均数与临床TNM分期无关.(4)HCC中15月内有转移组的CD57+、CD3+细胞数均少于无转移组(P＜0.01).HCC患者15月内有无转移与HCC和癌旁组织中的B细胞分布均无关.结论临床上,随着HCC患者的病情恶化,CD3+、CD57+、CD20+细胞逐渐减少.CD3+、CD57+、CD20+细胞可成为反映机体抗肿瘤特异性细胞免疫状态和生物学行为及判断患者预后的重要指标.     

NF-κBp65、VEGF在肝癌血管生成中的作用与相关性研究

目的 通过对肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织中核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达和微血管密度(MVD)的检测,探讨NF-κBp65、VEGF的蛋白表达与HCC新生血管生成的关系及相关性,阐述二者在HCC血管生成中的机制.方法 选用45例HCC组织和32例癌旁肝组织、15例肝硬化组织、10例正常肝组织标本作对照,采用免疫组化法(SABC)检测其NF-κBp65、VEGF的表达和计数MVD值,并结合患者的临床病理指标进行统计学分析.结果 HCC中NF-κBp65、VEGF的表达和MVD值显著高于癌旁肝组织、肝硬化组织和正常肝组织(P＜0.05);HCC组织中NF-κBp65、VEGF阳性表达组显著高于阴性表达组(P＜0.05);NF-κBp65、VEGF的表达在有血管侵犯组显著高于无血管侵犯组(P＜0.05);Spearman等级相关分析NF-κBp65与VEGF表达之间存在正相关性(r=0.72,P＜0.05).结论 HCC中NF-κBp65、VEGF的表达与肝癌血管生成有关;HCC组织中NF-κBp65的表达与VEGF存在相关性,它们之间在肝癌血管生成中可能存在调节关系.     

肿瘤-睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌中的表达

目的：检测肿瘤－睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌（HCC）中的表达情况。方法：用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）对47例HCC患者的癌组织和相应癌旁组织以及15例肝硬化和15例正常肝组织的SSX1基因mRNA表达情况进行检测，随机选择4例RT－PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果：47例HCC患者中，39例表达SSX1 mRNA，阳性率为83％，相应的癌旁组织中有3例为弱阳性，其中2例患者获得了离癌灶更远处的活检组织，对其进行RT－PCR检测，结果显示阴性；所测的15例肝化和15例正常肝组织均未检测到SSX1的表达。4例DNA测序结果表明RT－PCR产物确为SSX1 cDNA。SSX1的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清甲胎蛋白（AFP）水平、乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染无显著相关性（P＞0．05）。结论：SSX1在HCC中呈高比例、高特异表达，可望成为HCC免疫治疗的理想靶位。     

Sonichedgehog在肝细胞癌中的表达及其预后价值

目的 探讨Sonic hedgehog(SHH)在肝细胞癌(HCC)和癌周肝组织中的表达及其临床意义.方法 检测145例HCC和癌周肝组织SHH的表达,了解其表达与患者根治性切除术后预后的关系.检测4种肝癌细胞株以及正常肝细胞株SHH mRNA的含量.结果 SHH主要表达于肝细胞和肝癌细胞的胞质,肝癌与癌周肝组织表达差异无统计学意义(P＞0.05).癌和癌周高表达的患者总体生存率显著高于低表达患者(P＜0.05).肝癌细胞株SHH表达量显著高于正常肝细胞株(P＜0.01).结论 SHH在HCC和癌周肝组织中高表达,其表达可用于区分患者预后,SHH可能参与HCC的发生和发展.     

新生血管生成与肝细胞癌侵袭、转移和预后的关系

目的　探讨原发性肝细胞癌 (HCC)新生血管生成与临床病理指标的关系及其可否用于预测HCC侵袭、转移和预后。方法　采用免疫组织化学方法 ,检测了 2 0例正常肝组织、2 0例肝硬化组织、85例HCC及癌旁组织中CD34的表达 ,以及HCC的微血管密度 (MVD)。结果　CD34的染色定位在血管内皮细胞上 ,HCC窦样血管CD34表达为强阳性 ;除门管区小血管分支及中央静脉外 ,癌旁肝组织、肝硬化组织、正常肝组织基本不表达CD34 ;HCC的MVD范围 (18～ 36 0 ) / 0 74mm2 、(15 6 5±6 2 4) / 0 74mm2 。HCC的MVD与肿瘤大小、病灶数目、分化程度、门静脉瘤栓形成、包膜状况均有显著关系 (P <0 0 5或 0 0 1) ;与HBsAg是否阳性、术前AFP水平无关 (P >0 0 5 ) ;与预后亦有关 ,少血管组(MVD <15 6 )预后显著优于多血管组 (MVD≥ 15 6 ) ,术后平均无瘤生存期少血管组为 5 3个月 ,多血管组为 14个月 ,(P <0 0 0 1)。结论　CD34的表达反映了HCC的新生血管化 ,与HCC的发展有关。MVD可作为判断HCC侵袭、转移和预后的指标。     

Survivin在肝癌中的表达及其与肝癌增殖活性的相关分析

目的研究survivin在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与肝癌增殖活性的相关意义.方法应用免疫组织细胞化学技术检测31例肝细胞癌组织,8例肝硬化组织和4例正常肝组织中survivin及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平.结果正常肝组织和肝硬化组织中均无survivin表达,31例肝细胞癌组织中19例(61.3%)survivin表达阳性.与正常肝组织和肝硬化组织相比,survivin在肝癌组织中表达率显著升高(P＜0.001).低分化肝癌其survivin表达阳性率显著高于高分化肝癌.此外,survivin表达与肝癌增殖活性显著相关,survivin阳性肿瘤具有较高的增殖活性,其PCNA指数30.5%明显高于survivin表达阴性肿瘤15.8%(P＜0.05).结论 survivin在肝癌中呈现高表达,这种特异性表达与肝癌的低分化性和高增殖有关,可能涉及到肝癌的发生和进展.survivin基因有望成为肝癌诊断和治疗的新靶点.     

巨噬细胞在肝细胞肝癌中的分布及意义

目的　检测巨噬细胞在肝细胞肝癌(HCC)中的分布特征。方法　收集 14 例 HCC患者资料。取术后无出血坏死的肿瘤组织标本行下列检测:利用流式细胞仪定量检测肝脏巨噬细胞(CD68)在肝组织中的表达量;采用免疫组织化学法(SP法) 定性检测巨噬细胞在肝组织中的位置及分布情况。结果　癌组织中的巨噬细胞数量明显少于癌旁组织(P<0.01),且主要存在肝血窦处,呈卵圆、星形或纺锤形,胞浆呈棕黄染色。结论　巨噬细胞在肝癌组织中的分布少于癌旁组织,导致组织抗肿瘤能力低下。     

输出蛋白5 的表达与肝细胞癌患者临床病理特征及预后的关系

目的:探讨输出蛋白5(XPO5)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:用Western blot和免疫组化检测XPO5蛋白在92例HCC癌组织及癌旁组织手术标本中的表达,用统计学方法分析XPO5表达水平与HCC患者临床病理因素及预后的关系。结果:XPO5蛋白在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁组织。XPO5蛋白表达与HCC患者肿瘤大小、分化程度、临床分期、远处转移及肝硬化有关(均P0.05)。XPO5高表达患者1、5年无瘤生存率以及1、5年总生存率均明显低于XPO5低表达者(46.8%vs. 78.5%、20.3%vs. 37.4%;75.9%vs.91.2%、36.1%vs. 58.8%,均P0.05)。XPO5高表达是HCC患者术后无瘤生存及总生存的独立危险因子(P=0.036;P=0.013)。结论:XPO5基因在HCC组织中高表达,且与HCC的恶性病理特征及患者的不良预后有关。     

肝癌中Smac和Caspase-3的表达及在细胞凋亡中的关系

目的探讨Smac和Caspase-3在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及二者在肝癌细胞凋亡中的作用和关系.方法免疫组化法检测43例肝癌组织、20例癌旁组织和11例正常肝组织中Smac和Caspase-3蛋白表达情况.RT-PCR检测Smac和Caspase-3 mRNA表达情况.结果43例HCC标本中Smac表达有20例(46.5%),而除2例癌旁组织外,其它癌旁组织和正常肝组织中均见Smac表达;Caspase-3在癌组织、癌旁组织和正常肝组织中分别有18例(41.9%)、15例(75%)和11例(84.6%)表达.Smac和Caspase-3在肝癌组织中的表达具有明显的正相关性(P＜0.05,r=0.6264).Smac mRNA表达阳性的肝癌组织的细胞调亡指数明显升高.结论Smac在肝癌组织中低表达,其表达和Caspase-3呈明显的正相关,二者可能是肝癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环.     

PSCA和Oct-4蛋白在肝细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨PSCA和Oct-4蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义.方法 利用免疫组织化学技术检测PSCA和Oct-4蛋白在肝硬化、肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达.结果 结果PSCA和Oct-4蛋白阳性信号主要位于细胞质和细胞膜;HCC组织中PSCA和Oct-4蛋白的阳性率和阳性表达强度明显高于癌旁肝组织和肝硬化组织(P＜0.01);HCC中PSCA和Oct-4蛋白的阳性表达率和表达强度与其组织学分级无关.在肝硬化及癌旁肝组织中,非典型增生的肝细胞PSCA和oct-4蛋白呈强表达,且其表达率和表达强度与HCC的差异无统计学意义(P＞0.05).在肝硬化、HCC及其癌旁肝组织中,2种蛋白的表达强度呈显著正相关.结论 肝硬化及癌旁肝组织中高表达PSCA和Oct-4蛋白的细胞可能是"癌干细胞",它们主要参与HCC的发生,且两者可能具有协同作用,检测肝硬化组织中PsCA和/或oct-4蛋白的表达水平可能有助于早期发现HCC.     

microRNA-616在肝癌中的表达及临床意义

目的:探讨micro RNA-616(mi R-616)在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法:应用实时定量PCR检测80例HCC患者的肿瘤组织与癌旁组织标本,以及正常肝细胞与不同分化程度的HCC细胞mi R-616表达;分析mi R-616表达与HCC患者临床病理因素及预后的关系;观察HCC细胞过表达或抑制mi R-616表达后侵袭及转移能力的变化。结果:与癌旁组织比较,HCC组织中mi R-616的表达明显升高,且复发患者明显高于非复发患者,有转移患者明显高于无转移患者(均P0.05);所有HCC细胞株的mi R-616表达均明显高于正常肝细胞,且在高侵袭性HCC细胞株中的表达明显高于低侵袭性HCC细胞株(均P0.05);mi R-616表达与HCC患者是否存在门静脉癌栓、Edmondson-Steiner分级、TNM分期有关(均P0.05);mi R-616表达是影响HCC患者生存的独立危险因素(P0.05),mi R-616高表达患者的总生存率和无病生存率均明显低于mi R-616低表达患者(均P0.05)。HCC细胞过表达mi R-616后侵袭迁移能力明显增强,mi R-616表达抑制后侵袭迁移能力明显减弱(均P0.05)。结论:mi R-616在HCC中表达升高,且mi R-616高表达与HCC不良预后密切相关。