免疫性血小板减少症患者T细胞亚群及相关细胞因子的临床意义

目的 探讨T细胞亚群及相关细胞因子水平在免疫性血小板减少症(Immunethrombocytopenia ITP)患者中的临床意义.方法 分别采用流式细胞术与双抗体夹心酶联免疫吸附法检测HP患者和健康体检者的外周血T细胞亚群及相关细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17)水平.结果 入院时,观察组CD8 +/CD3+细胞水平高于对照组,CD4+/CD3+、CD4+ CD25、CD4 +/CD8+细胞水平低于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);观察组治疗后,CD8/CD3+、CD4 +/CD3、CD4+ CD25+、CD4 +/CD8水平均无明显变化(P＞0.05).入院时,观察组IFN-γ、IL-17水平高于对照组,IL-4水平低于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);观察组治疗后,IFN-γ、IL-17水平明显降低,IL-4水平明显升高(P＜0.05).结论 免疫性血小板减少症患者T细胞亚群发生失衡,同时出现细胞因子紊乱,ITP患者血液中T细胞亚群及相关因子水平变化可作为评估预后的参考指标.     

细胞因子诱导的杀伤细胞联合同步放化疗治疗直肠癌术后局部复发的临床研究

目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合三维适形放疗同步XELOX方案化疗对直肠癌术后局部复发的临床疗效.方法 将81例直肠癌术后局部复发的患者按照随机数字表法分为治疗组41例和对照组40例.治疗组患者给予三维适形放疗同步XELOX方案化疗,放化疗结束后给予CIK回输治疗；对照组患者给予三维适形放疗同步XELOX方案化疗.比较两组患者的免疫功能、生活质量(QOL)评分、近期疗效、生存率及不良反应.结果 治疗组患者治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+ CD56+显著上升(0.671±0.012比0.625±0.022、0.378±0.043比0.315±0.035、1.59±1.41比1.02±1.14和0.184±0.008比0.121±0.023,P＜ 0.05),CD8+显著下降(0.237±0.030比0.308±0.031,P＜ 0.05),与对照组治疗后比较,治疗组患者治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+ CD56+显著上升,CD8+显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组患者治疗前后比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗组患者QOL评分改善率为70.7％(29/41),显著高于对照组的32.5％(13/40) (P=0.001).治疗组患者客观有效率为92.7％(38/41),显著高于对照组的75.0％(30/40)(P=0.030).治疗组患者1年生存率为90.2％(37/41),对照组为85.0％(34/40),两组比较差异无统计学意义(P=0.473).治疗组和对照组患者的不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CIK联合同步放化疗可以提高直肠癌术后局部复发患者的免疫功能,改善QOL,提高近期疗效.     

GP方案联合鸦胆子油乳一线治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的 探讨GP方案联合鸦胆子油乳对初治晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的近期疗效和不良反应.方法 136例初治晚期NSCLC患者按随机数字表法分成两组,每组68例,对照组给予GP方案化疗,化疗4个疗程;观察组在对照组基础上给予鸦胆子油乳30 ml加入0.9％氯化钠250 ml静脉滴注,每天1次,30d为1个疗程,共4个疗程,比较两组的近期疗效及不良反应.结果 观察组近期客观有效率为32.4％( 22/68),对照组为17.6％(12/68),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).观察组近期主观有效率为52.9％(36/68),对照组为32.4％(22/68),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).两组治疗前CD3+、CD4+、CD8+、CD56+比较差异无统计学意义(P＞0.05),观察组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD56+显著优于对照组(0.552±0.072比0.468±0.080、0.368±0.062比0.288±0.061、0.268±0.052比0.212±0.044、0.226±0.044比0.168±0.042),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).两组Ⅲ+Ⅳ度不良反应比较差异无统计学意义(P＞ 0.05).结论 GP方案联合鸦胆子油乳治疗晚期NSCLC有协同作用,并且可以减轻化疗不良反应.     

细胞因子激活的杀伤细胞对局部晚期非小细胞肺癌同步放化疗患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞的影响

目的 探讨细胞因子激活的杀伤细胞(CIK)对局部晚期非小细胞肺癌同步放化疗患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞(NK)的影响.方法 将61例局部晚期非小细胞肺癌患者应用抽签法随机分为治疗组和对照组,治疗组31例,先给予三维适形放疗同步化疗,然后给予CIK回输治疗;对照组30例,给予三维适形放疗同步化疗.结果 治疗组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+ CD56+分别由0.6374±0.0325、0.3217±0.0287、0.0102±0.0093及0.1224±0.0177上升至0.7125±0.0154、0.3921±0.0461、0.0178±0.0179及0.1855±0.0321,CD8+由0.3147±0.0307下降至0.2209±0.0257,治疗前与治疗后比较差异有统计学意义(P＜0.05).对照组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及CD16+ CD56+分别为0.6218±0.0040、0.3311±0.0278、0.3265±0.0257、0.0101±0.0108及0.1327±0.0298,与治疗前0.6325±0.0114、0.3347±0.0209、0.3316±0.0178、0.0101±0.0117及0.1479±0.0354比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗组和对照组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CIK治疗可以改善局部晚期非小细胞肺癌患者机体的免疫功能.     

早期肠内营养对胃癌根治术患者术后免疫功能及抗氧化功能的影响

目的 探讨早期肠内营养对胃癌根治术患者术后免疫功能及抗氧化功能的影响.方法 80例胃癌根治术患者分为观察组和对照组各40例,术后均给予常规静脉滴注营养,在此基础上,观察组给予肠内营养,疗程为1周;比较两组患者术前1天和术后第8天营养状况(白蛋白水平、前白蛋白水平及体重)、免疫指标(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值、NK细胞的比例和IFN-γ/ IL-4)、抗氧化功能(T-SOD、MDA、GSH-Px).结果 术前1天,2组患者的营养状况、免疫指标及抗氧化功能差异无统计学意义(P＞0.05).术后第8天,观察组患者CD8+T细胞降低,CD4+/CD8+、NK细胞和GSH-Px水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);其他指标与术前比较差异无统计学意义(P＞0.05).对照组患者术后第8天体重、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IFN-γ/ IL-4降低,MDA水平升高,与术前比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 胃癌根治术后给予早期肠内营养有利于维持患者术后的免疫功能和抗氧化-氧化系统的平衡,促进术后恢复.     

微波消融联合自体CIK细胞治疗中晚期肝癌的临床疗效分析

目的 探讨应用微波消融(PMCT)联合自体CIK细胞治疗中晚期肝癌的临床价值,为中晚期肝癌的治疗提供依据.方法 收集2008年1月至2011年8月收治的有完整病例资料的中晚期原发性肝癌住院患者67例,随机分为PMCT组(n=32)和PMCT+CIK联合治疗组(n=35),对两组的疗效、肿瘤坏死程度及外周血淋巴细胞亚群百分比的变化情况进行分析.结果 PMCT组与PMCT+CIK联合治疗组治疗后患者甲胎蛋白(AFP)定量明显下降(下降＞50％)率分别为40.6(13/32)和65.7％(23/35),两组间差异有统计学意义(P＜0.05);PMCT组的完全坏死率为15.6％(5/32),而联合治疗组的完全坏死率为40.0％(14/35),差异有统计学意义(P＜0.05).联合治疗组CIK细胞治疗后CD3+、CD4+、CD 16+CD56+和CD4+/CD8+比值明显上升,CD8+效应细胞比例下降,与治疗前比较差异均有统计学意义(P＜0.05),且与PMCT组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).结论 PMCT联合早期CIK细胞过继免疫治疗可改善患者外周血淋巴细胞比例和机体免疫状态,为不能手术切除或其他治疗效果不佳的中晚期肝癌患者提供了一种有效方法.     

哮喘患儿血清T细胞亚群、细胞因子和免疫球蛋白的动态变化及意义

目的 探讨哮喘患儿血清T细胞亚群、细胞因子和免疫球蛋白的动态变化及临床意义,为哮喘的发病机制及抗变态反应治疗提供理论依据.方法 对40例哮喘患儿(哮喘发作组和哮喘缓解组)及25例健康体检儿童(对照组)应用流式细胞仪测定CD3+、CD4+、CD8+T细胞,应用ELISA法测定TNF-α、白细胞介素(IL)-6、IL-8和IgE,应用免疫比浊法测定Igc、IgA和IgM.结果 哮喘发作组CD3+、CD4+T细胞及CD4+/CD8+.显著高于对照组(P＜0.01),CD4+T细胞及CD4+/CD8+明显高于哮喘缓解组(P＜0.05);哮喘缓解组CD4+T细胞及CD4+/CD8+明显高于对照组(P＜0.05).哮喘发作组IL-6、IL-8及TNF-α.均明显高于哮喘缓解组和对照组(P＜0.05或＜0.01).哮喘缓解组TNF-α与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).哮喘发作组I-E及IgG水平显著高于哮喘缓解组和对照组(P＜0.01或＜0.05),IgA水平显著低于对照组(P＜0.01);哮喘缓解组IgE水平仍显著高于对照组(P＜0.01).结论 哮喘患儿发作期和缓解期均存在免疫失衡,提示哮喘患儿应长期抗变态反应治疗.     

宫颈癌患者血清细胞因子与细胞免疫的水平及关系

目的:探讨宫颈癌患者血清Th1/Th2细胞因子及细胞免疫的水平及关系.方法:选择67例宫颈癌患者作为病例组并进行临床分期,同时选择30例健康体检女性作为对照组,Elisa法检测白介素-2(IL-2)和白介素-4(IL-4)细胞因子水平并计算IL-2/IL-4,流式细胞术检测CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群水平并计算CD4+/CD8+.结果:病例组患者血清IL-2、IL-4水平以及CD8+高于对照组,而CD4+、CD4+/CD8+和IL-2/IL-4低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);随着宫颈癌临床分期的加重,血清IL-2、IL-4水平以及CD8+逐渐增高,而CD4+、CD4+/CD8+和IL-2/IL-4则逐渐降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);病例组患者血清IL-2/IL-4与CD4+/CD8+呈明显正相关(r=0.573,P＜0.05).结论:宫颈癌患者细胞因子和T细胞亚群动态平衡发生紊乱,机体处于免疫功能抑制状态,并且二者互相影响共同参与宫颈癌的发生发展.     

煤工尘肺壹期患者周围血CD4+ CD25+调节性T细胞与CD4+ 、CD8+T细胞表达及意义

目的 探讨周围血CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)与CD4+、CD8+T细胞在煤工尘肺(CWP)壹期中的水平变化及临床意义.方法 采用流式细胞术检测103例CWP壹期患者(CWP组)、45例具有与CWP组相同接尘条件的健康井下接尘矿工(接尘对照组)及48例井上健康检查人员(正常对照组)周围血CD4+ CD25+ Treg及其CD4+、CD8+T细胞水平.结果 与接尘对照组和正常对照组比较,CWP组CD4+ CD25+ Treg、CD4+T细胞水平及CD4+CD25 +/CD4+、CD4+ CD25 +/CD8+比值明显升高,差异具有统计学意义(均P＜0.01),CD8+T细胞则无明显改变(P＞0.05),但接尘对照组CD8+T细胞水平明显低于正常对照组(P＜0.05).CWP组吸烟患者CD4+ CD25+ Treg水平和CD4+ CD25 +/CD4+比值均明显高于非吸烟患者,差异有统计学意义(均P＜0.01).CWP组CD4+ CD25+ Treg与CD4+T细胞呈正相关[相关系数(r) =0.627,P＜0.01],与CD8+T细胞呈负相关(r=-0.362,P＜0.01),CD4+T细胞与CD8+T细胞呈负相关(r=-0.436,P＜0.01).结论 CWP壹期患者周围血CD4+ CD25+ Treg表达增加,可能影响CD4+T细胞和CD8+T细胞的分布平衡,导致细胞免疫功能紊乱;吸烟可加重T细胞亚群分布失衡.     

紫癜肾汤治疗儿童紫癜性肾炎早期肾损害的疗效观察

目的:探讨紫癜肾汤治疗儿童紫癜性肾炎的疗效.方法:选取2009年1月～2014年6月在该院住院的紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)患儿100例为研究对象,随机分成观察组和对照组,每组各50例.观察组接受常规西医治疗的基础上加用紫癜肾汤,对照组接受常规西医治疗.结果:观察组总有效率98.00％,高于对照组的总有效率72.00％,差异有统计学意义(P＜0.01).随访6个月,观察组复发率8.00％,低于对照组的复发率28.00％,差异有统计学意义(P＜0.01).治疗后,观察组患儿尿IgG、α1微球蛋白、β2微球蛋白水平、CD4+/CD8+水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05、P＜0.01).治疗后,观察组患儿CD3+、CD4+及CD8+水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).治疗后,观察组患儿血清IL-6、IL-18、TNF-α均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01、P＜0.05).治疗后,观察组患儿血清IL-10高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:紫癜肾汤治疗儿童紫癜性肾炎疗效显著,可有效调节患者免疫功能,减轻患者炎症反应,改善肾组织病理损伤.     

慢性乙型肝炎患者树突状细胞分离培养及其功能测定

目的探讨树突状细胞（DCs）在慢性乙型肝炎发病过程中的功能特点，为进一步研究慢性乙型肝炎的发病机制提供科学依据。方法对10例慢性乙型肝炎患者、10例乙型肝炎病毒（HBV）携带者及10例正常对照者的外周血DCs进行体外培养，应用流式细胞技术检测DCs表面分子HLA-DR、CD80、CD86的表达，并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测DCs上清液白细胞介素（IL）-12的水平，比较DCs在慢性乙型肝炎不同感染阶段的功能特点。结果培养7天的DCs在透射电镜下观察，DCs充满每个视野，细胞体积较大，细胞表面突起较丰富，胞浆内粗面内质网及溶酶体丰富，线粒体结构较清楚，核大而圆，核膜清晰，染色质分布较均匀。正常对照组的HLA-DR、CD80和CD86的表达率均〉54％，而慢性乙型肝炎及HBV携带者组上述DCs表面分子的表达率普遍降低，与正常对照组比较，差异有显著性（P〈0．01），慢性乙型肝炎与HBV携带者组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。培养第7天DCs上清IL-12的表达水平在慢性乙型肝炎、HBV携带者组明显低于正常对照组（P〈0．05），而慢性乙型肝炎与HBV携带者组之间无明显差异（P〉0．05）。结论慢性乙型肝炎患者及HBV携带者均存在DCs表型和功能的缺失。     

全自动血细胞处理仪的研制

目的:研制全自动血细胞处理仪,确定血细胞处理仪基本工艺流程,对仪器相关结构主要功能部件进行研制。方法:在研制全自动血细胞处理仪过程中,对悬浮红细胞进行洗涤、甘油化及冻融后去甘油化处理。结果:确定仪器各项最佳性能参数及仪器各项最佳功能指标,对不同工作条件下血细胞处理仪对红细胞处理后的实验室指标进行检测,并对处理后的红细胞进行临床验证,制定血细胞处理仪注册产品标准。结论:为满足战时及临床使用需要,研制全自动血细胞处理仪,用于军队采供血机构建立稀有血型库,同时可用于全血或悬浮红细胞制剂的全自动洗涤处理。     

体外胚胎干细胞神经发育毒性评价模型的建立及有效性研究

目的建立体外胚胎干细胞神经发育毒性评价模型,并对其有效性进行验证。方法胚胎干细胞(ES)体外悬滴、悬浮培养后,经5×10-7mol/L视黄酸诱导培养分化获得神经细胞,利用RT-PCR方法分析不同浓度青霉素G、苯妥英钠(DPH)和氟尿嘧啶(5-FU)对ES细胞定向分化为特异表达巢蛋白基因的神经细胞的影响,计算其对ES细胞神经定向分化能力的抑制作用。同时应用MTT法测定5-FU、DPH和青霉素G对ES和BALB/c细胞活性的抑制作用,结合分化抑制作用结果评价受试物的发育毒性。结果青霉素G、苯妥英钠和氟尿嘧啶的ID50D3巢蛋白分别为0.017、49.4和1139μg/ml,其发育毒性的判定依次无、弱和强。结论建立的胚胎干细胞神经发育毒性评价模型能够正确判定氟尿嘧啶、苯妥英钠和青霉素G的神经发育毒性。     

Comparing human T cell and NK cell responses in viral-based malaria vaccine trials

Vaccination with viral-based vaccines continues to hold promise for the prevention of malaria. Whilst antigen-specific T cell responses are considered a major aim of such an approach, a role for induced NK cells as anti-malarial effector cells, or in shaping T cell responses, has received less attention. In this study naïve human volunteers were vaccinated in a prime-boost vaccination regimen comprising recombinant viral vectors fowlpox (FP9) and modified vaccinia Ankara (MVA) encoding liver-stage antigens, or a virosome vaccine. Significant T cell responses specific for the vectored vaccine antigens were demonstrated by IFNγ ELISPOT and intracellular cytokine staining (ICS) for IFNγ and IL-2, the ICS being associated with increased time to parasitaemia following subsequent challenge. Numbers of CD56^bright lymphocytes increased significantly following vaccination, as did CD3⁺ CD56⁺ lymphocytes, whilst CD56^dim cells did not. No such increases were seen with the virosome vaccine. There was no significant correlation of these CD56⁺ populations with the antigen-specific T cell responses nor time to parasitaemia. To investigate pathways of immune activation that could contribute to these lymphocyte responses, viral vectors were shown in vitro to efficiently infect APCs but not lymphocytes, and stimulated inflammatory cytokines such as type I interferons. In conclusion, measuring antigen-specific T cells is more meaningful than NK cells in these vaccination regimens.     

辅助性T细胞17/调节性T细胞免疫失衡与子痫前期相关性的研究进展

子痫前期(PE)是妊娠期特发性疾病,目前我国PE发病率为9.4%,其病因和发病机制尚未阐明。近年来研究结果提示PE的发生、发展与母-胎免疫耐受失衡有关,母体免疫系统不能识别胎儿的同种异型抗原,导致异常免疫系统激活,从而可能在PE的发病机制中起主导作用。PE患者存在辅助性T细胞(Th)1/Th2失衡,Th17/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)免疫失衡也参与其中,并且向Th17免疫偏移。笔者拟就近年来Th17/Treg免疫失衡与PE相关性的最新研究进展进行综述如下。     

DC细胞在辐射损伤抗原递呈及T细胞活化中的作用

目的 利用体外细胞共培养技术模拟体内肺组织微环境,探索树突状细胞（DC）在辐射损伤细胞的抗原提呈作用。方法 60Co γ射线照射的小鼠肺上皮细胞（MLE-12）与骨髓来源DC和/或脾T淋巴细胞培养48 h,流式细胞术检测DC细胞共刺激分子CD80/86和抗原肽识别复合物MHCⅠ/Ⅱ表达水平,T细胞活化标志CD69/28/152表达水平以及CD4+和CD8+亚群细胞数。结果 60Co γ射线照射的MLE-12细胞凋亡率呈剂量依赖性增高,明显刺激DC细胞CD80/86和MHC II表达,但对T细胞无直接活化作用;6 Gy照射的MLE-12细胞与DC细胞和T淋巴细胞共培养48 h,T细胞CD69和CD28表达增加,CD4+和CD8+亚群细胞数均明显高于对照组,同时DC细胞出现CD86和MHCI特异性高表达。结论 辐射损伤细胞可刺激DC细胞抗原提呈功能,并对T细胞进行活化。     

肿瘤甲硫氨酸依赖性分子机制的研究进展

甲硫氨酸(Met)依赖性是肿瘤代谢缺陷的重要特征之一.近年来,从分子水平对肿瘤细胞的Met依赖性进行一系列研究,发现了Met代谢的关键酶功能异常(如Met合成酶单核苷酸多态性,甲基硫腺苷磷酸酶基因缺失,胸苷合成酶蛋白表达下降,甲叉四氢叶酸还原酶基因表达上调).细胞内信号转导障碍是Met限制导致肿瘤细胞凋亡的另一分子机制.     

洛伐他汀对人粒系白血病细胞生长的影响

目的观察洛伐他汀(Lovastatin)对体外培养的人粒系白血病细胞株HL-60生长的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测、流式细胞仪分析等技术。结果洛伐他汀可显著抑制HL-60细胞的增殖．且呈剂量一效应关系。流式细胞仪分析结果显示：洛伐他汀不仅能影响该细胞周期进程而且可诱导该细胞凋亡。结论洛伐他汀可能通过影响细胞的生长周期和诱导细胞凋亡来抑制HL-60细胞的增殖。     

干细胞治疗卵巢早衰研究进展

早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency,POI）也被称为卵巢早衰,作为女性不孕症的主要原因之一,受到广泛关注,主要表现为低雌激素水平和高促性腺激素水平。POI的病因及机制复杂,目前无统一定论,在治疗上也主要采用补充雌激素等综合治疗。随着干细胞研究的深入,干细胞治疗POI成为新...