新生大鼠骨骺前软骨干细胞培养及细胞库建立

目的　建立新生大鼠骨骺前软骨干细胞 (precartilagious stem cells,PSCs)库 ,为 PSCs作为组织工程种子细胞修复骨骺损伤的研究奠定基础。　方法　利用磁性细胞分选系统分离纯化有成纤维细胞生长因子受体 3(fibroblast growth factor receptor3,FGFR- 3)表面标志的骨骺 PSCs。将纯化后的 PSCs体外扩增至第 3代 ,采用液氮深低温保存细胞 ,应用 RT- PCR、免疫组织化学及免疫荧光等技术定期 (2、4周 )对复苏 PSCs行生物学特性鉴定。　结果　复苏后 PSCs存活率高 (>95 % ) ,细胞生长周期稍滞后。RT- PCR、免疫组织化学及免疫荧光检测均有较强的 FGFR- 3表达。经液氮冻存的 PSCs在细胞增殖、表型特征方面无显著变化 ,基本保持了原代 PSCs的生物学特性。　结论　成功建立了新生大鼠 PSCs细胞库 ,为应用组织工程技术修复骨骺损伤的研究提供良好的种子细胞。     

骨骺干细胞相关研究进展

骨骺干细胞是近年来发现的保持有干细胞特性并能定向分化的成体干细胞之一,它的分离纯化使得尚未找到十分理想的种子细胞的关节软骨损伤组织工程修复研究看到了希望.研究发现PTHrP、Ihh和Notch等信号转导系统在调节骨骺干细胞分化和软骨内成骨中起着重要作用.软骨发育不良、原发性滑膜软骨瘤等多种软骨发育障碍性疾病与骨骺干细胞的特征性标记物成纤维细胞生长因子受体-3的基因突变有关.骨骺干细胞在修复软骨与骨缺损方面的研究已取得可喜进展,在未来临床研究中将有广泛的应用价值.     

免疫磁珠分选前列腺肿瘤细胞的方法优化

目的优化免疫磁珠分选前列腺肿瘤细胞的方法,提高阳性细胞得率。方法对比静置孵育、连续旋转孵育磁珠对分选后细胞得率的影响,并比较分离柱的大小对细胞得率的影响。结果连续旋转法孵育磁珠后,分选细胞得率显著升高。分离柱大小与分选后细胞得率无显著相关。结论免疫磁珠分选前列腺癌细胞的细胞得率与磁珠和细胞的孵育方式有关。     

免疫磁珠分选两步法纯化原代小胶质细胞

目的 神经系统感染研究需获得纯度高、细胞生物学状态接近体内的小胶质细胞.既往分离纯化方法 不能满足研究需要,需建立新的高效纯化方法.方法 获得小鼠全脑单细胞悬液后,应用磁珠分选阳选法,经过两步分选获得小胶质细胞.用流式细胞仪检测小胶质细胞的纯度,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,采用7-AAD染色鉴定分选后细胞的活性.结果 应用免疫磁珠分选一步法可以获得纯度达(59.98 ± 13.61)%的小胶质细胞;两步法进一步将细胞纯度提高至(97.62 ± 1.35)%.该方法 所获得的小胶质细胞活性良好,形态正常.结论 免疫磁珠分选两步法能够稳定地获得高纯度的小胶质细胞,对小胶质细胞的活性和形态无显著影响,可用于后续中枢神经系统急性感染的体外研究.     

免疫分选软骨前体细胞并诱导永生化的研究

目的建立永生化大鼠软骨前体细胞株,为细胞移植和转基因治疗提供稳定的细胞来源。方法利用免疫磁珠技术分离纯化具有特异性表面标志成纤维生长因子受体-3(FGFR-3)的软骨前体细胞,用基因转染技术将含有猿肾病毒40大T抗原基因(SV40Tag)的重组质粒pEGFP- IRES2-SV40Tag转染原代培养的新生大鼠软骨前体细胞,经G418筛选,抗性克隆扩大培养。应用FGFR-3、Ⅱ型胶原和X型胶原抗体进行细胞鉴定,检测其分化能力,观察细胞的形态及其生长状况,绘制生长曲线。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Southern blot和免疫细胞化学法鉴定SV40Tag在转染细胞中的表达。结果获得1个阳性细胞克隆,免疫细胞化学证实为FGFR-3阳性的具有较强增值能力和多分化潜能的软骨前体细胞。经Southern印迹杂交证实,SV40Tag已稳定转染入软骨前体细胞,表达mRNA及其蛋白。贴壁培养的永生化软骨前体细胞株(IPSC),群体倍增时间为23.62 h,传代、冻存和复苏对细胞形态及生长无明显影响。结论SV40Tag导入可诱导软骨前体细胞永生化,为软骨前体细胞的实验研究及其介导的细胞移植治疗提供了稳定的细胞来源。     

Kartogenin对兔滑膜间充质干细胞增值及成软骨分化的对比研究

【】 目的 探讨Kartogenin(KGN)对兔滑膜间充质干细胞成软骨分化的作用方法 取6-10月龄新西兰大白兔(体重1.8~2.2kg)膝关节处滑膜分离培养SMSCs,通过形态学观察、流式细胞术对其进行鉴定.使用PELLET法,将聚丙烯管中的SMSCs团块分成3组,分别加入KGN,TGF-β3/BMP-2/地塞米松(Dexamethasone,DEX)以及二甲亚砜(DMSO)。通过比较增值速度、各组软骨微球的直径、重量,Ⅱ型胶原(免疫组织化学染色)表达,成软骨分化相关标志基因表达以及蛋白质合成量来评价KGN对SMSCs增值及成软骨能力的影响,结果 经鉴定,成功从兔膝关节滑膜分离出SMSCs。KGN对SMSCs增值能力弱于TGF-β3/BMP-2/DEX组,KGN组诱导产生的软骨微球直径最大,重量最重,均显著高于其他组(P<0.05),且Ⅱ型胶原合成量最多。qRT-PCR及Western Blot结果表明KGN组成软骨分和相关基因的表达水平最强,蛋白质合成量最大。结论 KGN促进SMSCs成软骨分化能力,但并没有增强SMSCs的增值能力。     

生长因子促成年兔关节软骨细胞增殖的研究

目的　研究促进成年兔关节软骨细胞迅速增殖的方法。方法　将体外培养 2 4～ 2 8月龄的新西兰大白兔的原代关节软骨细胞中加入不同浓度的胰岛素样生长因子 - (IGF- )、碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)及 IGF- b FGF联合应用。于 2 4、4 8及 72小时分别进行 MTT检测软骨细胞的成活数 ;检测传 3代后各组软骨细胞的总增殖倍数 ;第 14天后 ,用流式细胞仪检测各组软骨细胞的增殖倍数 ,观察 IGF- 、b FGF及 IGF- b FGF联合应用对成年兔关节软骨细胞各时间点的促增殖作用。结果　 1施加不同浓度的 IGF- 、b FGF或两者联合应用后各时间点软骨细胞活细胞数明显高于对照组 (P<0 .0 1) ;2传 3代后 ,三组总增殖倍数也都明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,且两种因子联合应用 ,增殖倍数明 显比应用单个因子时高 ,有统计学意义 (P<0 .0 1) ;3培养 14天后 ,增殖指数明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,两种因子联合应用时 ,增殖指数明显比应用单个因子时高 (P<0 .0 5 ) ;而施加两次因子时 ,增殖指数比施加一次因子时高 (P<0 .0 5 )。结论　 IGF- 、b FGF对成年兔关节软骨细胞有明显的促增殖作用 ,两者之间有协同效应。     

高效绿色荧光蛋白基因修饰前软骨干细胞与骨基质明胶复合体异位成软骨的研究

目的 观察高效绿色荧光蛋白(EGFP)基因修饰前软骨干细胞(PSCs)与骨基质明胶(BMG)复合体的成软骨活性.方法 EGFP基因转染PSCs得到EGFP基因修饰PSCs.将其与BMG的复合体体外培养后植入裸鼠右后肢肌袋中,左后肢植入BMG作对照.定期取材测定移植物的重量、细胞数,观察GFP表达,免疫组织化学检测Ⅱ型胶原表达.结果 EGFP基因修饰PSCs体外培养6周仍有较强GFP表达.移植后1～6 周均有较强GFP表达,3～6周有较强Ⅱ 型胶原表达.移植后2～6周复合体平均重量分别为(0.71±0.07)、(1.35±0.32)、(1.76±0.48)、(1.96±0.54)、(1.89±0.13)g,均比对照组重(P<0.01);1～6周时复合体平均所含细胞总数分别为(40.0±2.1)×106、(67.0±5.6)×106、(139.0±11.2)×106、(169.0±2.9)×106、(173.0±13.5)×106、(169.0±6.9)×106个,均大于对照组(P<0.01).结论 EGFP基因修饰PSCs与BMG复合体能在异位形成软骨组织.

Abstract：

Objective To evaluate the chondrogenesis potential of composite of enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene-modified precartilaginous stem cells (PSCs) and bone matrix gelatin (BMG) ectopically. Methods PSCs were transfected with pEGFP by means of lipofectamine. The composite of EGFP gene-modified PSCs and BMG was cultured in vitro, then implanted into the right thigh of athymic mice, and BMG implanted into the left thigh as control group. The harvested implants were weighed, and the number of cells and the expression of GFP were examined. The expression of type Ⅱ collegen was detected by using immunohistochemistry. Results EGFP gene-modified PSCs had high expression of GFP in vitro 6 weeks after purification. The composite had high expression of GFP from 1 to 6 weeks after implantation, and high expression of type Ⅱ collagen from 3 to 6 weeks. The mass of the composite was (0.71±0.07), (1.35±0.32), (1.76±0.48), (1.96±0.54), (1.89±0.13) g from 2 to 6 weeks, respectively, which was significantly greater than that in control group (P<0.01). The total number of cells in the composite was (40.0±2.1)×106, (67.0±5.6)×106, (139.0±11.2)×106, (169.0±2.9)×106, (173.0±13.5)×106, (169.0±6.9)×106 from 1 to 6 weeks, respectively, which was significantly greater than that in control group (P<0.01). Conclusion The composite of EGFP gene-modified PSCs and BMG could generate ectopic cartilaginous tissue.     

利用脂肪干细胞构建软骨修复兔膝关节软骨缺损的初步研究

目的 利用兔同种异体软骨脱细胞基质支架和脂肪干细胞体外构建组织工程软骨,探讨其修复关节软骨损伤的可行性.方法 将新西兰大白兔的脂肪干细胞与软骨脱细胞基质支架复合,于软骨细胞方向诱导培养基中培养两周,构建组织工程软骨.兔24只随机分为A、B、C 3组, A组关节软骨缺损处置入经诱导的脂肪源干细胞复合软骨基质支架, B组缺损处只置入软骨基质支架, C组软骨缺损处不做任何处理.分别于术后第12周处死动物,修复处行大体、组织学、Ⅱ型胶原免疫组化染色和透射电镜检测.结果 A组软骨缺损处被类软骨组织填充,修复区表面光滑;Ⅱ型胶原免疫组化染色和甲苯胺蓝染色阳性;电镜下可见软骨陷窝内有细胞结构存在,且有大量均匀颗粒状细胞分泌基质成分存在,细胞周围大量胶原纤维.B组软骨缺损处为纤维组织状物填充,C组软骨缺损处无修复组织填充.结论 脂肪干细胞与软骨脱细胞基质复合并向软骨诱导后可良好地修复关节软骨缺损,具有替代正常软骨的潜力.     

肾癌中CD133＋细胞和CD133-细胞生物学特性差异的研究

目的：研究人肾癌细胞系786-O和OS-RC-2中CD133＋细胞和CD133-细胞的生物学特性差异。方法：应用流式细胞仪检测肾癌细胞系786-O和OS-RC-2中CD133的膜表达状况;以免疫磁珠法将CD133＋细胞和CD133-细胞分离纯化,比较两者在光镜下的形态、生长特点、体外增殖能力、长期分化能力及体外克隆形成率的差异;流式细胞术分析两者细胞周期分布的变化,采用MTT法分析两者对化疗药物顺铂（DDP）（10、20、50、80／Lg／ml）敏感性的差别。结果：786-O和0S-RC-2均有CD133的少量表达,表达率为（8．12±0．86）％、（6．83±0．20）％,CD133＋细胞和CD133-细胞相比具有较强的体外增殖、克隆形成及长期分化能力;细胞耐药性实验表明CD133＋细胞、CD133-细胞对50bcg／m1DDP敏感性差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：肾癌细胞系中CD133＋细胞具有肾癌干细胞的部分特征,能否作为肾癌干细胞的表面标志还需要进一步的实验加以明确。     

碱性成纤维细胞生长因子基因转染对鼠胎肝干细胞培养的优化作用

：目的 观察以重组腺相关病毒（rAAV）为载体介导碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因转染对体外培养的鼠胎肝干细胞增殖及细胞周期的影响.方法 体外培养鼠胎肝干细胞,经rAAV作为载体介导bFGF基因转染,分为对照组、空载病毒转染组和bFGF转染组.用逆转录PCR和蛋白质印迹法检测鼠胎肝干细胞转染前、后bFGF基因和蛋白的表达.应用细胞生长曲线和CCK-8法观察细胞生长速度;采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化.结果 转染bFGF后,bFGF转染组与对照组、空载病毒转染组相比,bFGF基因和蛋白水平均有表达,细胞的生长速度增快（q=20.43,P=0.001;q=26.52,P=0.001）,G0/G1期细胞减少,S期细胞增多（q=72.56,P=0.000;q=32.28,P=0.001）.结论 通过rAAV作为载体介导bFGF基因转染能促进体外培养的鼠胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用.     

人碱性成纤维细胞生长因子基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究

目的 观察人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因体外转染对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)bFGF表达的影响.方法 密度梯度离心、贴壁法培养分离SD雄性大鼠MSCs,体外扩增,流式细胞仪检测MSCs表面抗原表达.利用慢病毒载体系统介导将具有人源性bFGF基因转染至第2代MSCs,在倒置荧光显微镜下观察转染后细胞形态和生长的变化,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法鉴定bFGF在MSCs中的表达.结果 密度梯度离心、贴壁法培养分离可获得MSCs,P3代大鼠细胞利用流式细胞仪检测CD11b/c阳性细胞表达率为(13.2±0.6)%,CD34阳性细胞表达率为(1.2±0.5)%,CD44阳性细胞表达率(97.8±0.9)%,CD90阳性细胞表达率(96.8±1.4)%.MSCs转染48 h后,绿色荧光蛋白的表达明显增强.RT-PCR证实转基因MSCs表达bFGF mRNA明显增强,Western blot检测证实转基因MSCs在49 KDr出现特异性条带,而空白和空载组的MSCs则未见阳性条带.结论 采用慢病毒介导的基因转染技术可以将bFGF基因转染至MSCs中,并有外源性bFGFmRNA和蛋白的有效表达,MSCs可作为bFGF基因治疗的载体.     

血管内皮生长因子基因稳定转染兔骨髓基质干细胞的研究

目的 检测人血管内皮生长因子(VEGF)基因稳定转染对兔骨髓基质干细胞(BM-SC)VEGF表达的影响.方法 分离并培养兔骨髓基质干细胞,利用脂质体介导pcDNA3.1-VEGF165转染兔BMSC,G418筛选稳定表达pcDNA3.1-VEGFl65的细胞克隆,RT-PCR、Western blot法检测转染前后细胞中VEGF165 mRNA和蛋白的表达.结果 通过筛选获得了稳定表达pcDNA3.1-VEGF165的细胞克隆.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot结果显示:稳定转染组BMSC中可检测到VEGF165 mRNA和蛋白的表达,空白和空载体组未见VEGF表达.结论 pcDNA3.1-VEGF165载体转染的兔BMSC可稳定表达外源性VEGF165 mRNA和蛋白,可作为治疗骨缺损和骨缺血性坏死研究的种子细胞.     

Immunomagnetic separation of normal rat testicular cells from Roser's T-cell leukaemia cells is ineffective

Elimination of contaminating malignant cells is crucial to avoiding cancer relapse in association with transplantation of autologous spermatogonial stem cells. In the clinical setting, there is presently no effective procedure for separating testicular cells from cancer cells. Here, CD4, a selective surface marker for Roser's rat leukaemic T-cells, was utilized to eliminate cancer cells from testicular cell samples from leukaemic piebald variegated (PVG) rats by magnetic-activated cell sorting (MACS). All animals receiving MACS-selected testicular cells died within 14–15 days. Only one-third of the contaminating leukaemic cells could be removed from testicular samples. An increase in antibody concentration enhanced the proportion of leukaemic cells removed from 27 to 49%. Variations in the cell size and expression of surface antigens on testicular leukaemic cells were the major obstacles to purification based on this marker. It is concluded that MACS does not prevent transmission of leukaemia to syngenic PVG rats when cells from leukaemic testes are used for testicular cell transplantation.     

负载碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白-12基因的兔脂肪干细胞向成纤维细胞分化的实验研究

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、骨形态发生蛋白(BMP)-12基因序贯转染兔脂肪干细胞向成纤维细胞分化的可能性。方法:2017年1月至2018年12月,原代培养兔脂肪干细胞(取自新西兰大耳兔颈背部皮下脂肪),细胞表面抗原CD44、CD49d、CD106检测结合成骨细胞诱导分化对培养的细胞进行鉴定,脂质体介...     

大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞向内皮细胞分化的研究

目的 观察大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞(MDSCs)在血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)共同作用下向内皮细胞分化的潜能.方法 采用Preplate差速贴壁法结合密度梯度离心法分离、纯化大鼠阴茎海绵体MDSCs,获得差速贴壁细胞(PP1-PP6),免疫荧光细胞化学法检测PP6细胞干细胞抗原-l(Sca-1)和结蛋白(Desmin)的表达,并传代培养.取PP6第3代细胞在VEGF和bFGF共同诱导21 d后,免疫荧光细胞化学法鉴定内皮细胞标志物[CD31、胎肝激酶-l(Flk-1)]的表达;分别在诱导0、5、10、15、21 d,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测干细胞标志物(Oct-4)和内皮细胞标志物[CD31、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、Flk-1] mRNA的表达量;通过Dil-Ac-LDL摄取实验检测细胞吞噬低密度脂蛋白的能力;划痕24h后观察划痕空白处的距离,评估细胞的迁移能力.结果 PP6细胞表达肌源性干细胞标志物Sca-1和Desmin;PP6诱导21 d后表达内皮细胞标志物(CD31和Flk-1),诱导21 d后与诱导0d比较,干细胞标志物Oct-4的mRNA表达量下降(下降倍数为0.445±0.025),而内皮细胞标志物mRNA表达量升高(CD31、eNOS、Flk-1升高倍数分别为2.541±0.146、2.364±0.175、2.538±0.100),差异均有统计学意义(P＜0.05).Dil-Ac-LDL摄取实验提示诱导后的细胞具有吞噬低密度脂蛋白的能力;划痕实验观察到诱导组空白处距离为282.01±3.84,未诱导组空白处距离为450.35±1.86,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠阴茎海绵体MDSCs在VEGF和bFGF的共同诱导下可分化为内皮细胞,且具有成熟内皮细胞的功能.     

Immunomagnetic separation of antibody-labelled from antibody-free human spermatozoa as a treatment for immunologic infertility. A preliminary report

A method is described where superparamagnetic polymer microspheres coated with monoclonal antibodies are used to isolate antibody-labelled from antibody-free spermatozoa in male autoimmune infertility. Autoimmune sperm samples or antibody-free spermatozoa adsorbed with antisperm-antibodies from sera were incubated with microspheres coated with a specific monoclonal antibody to murine immunoglobulins, after their preincubation with mouse anti-human IgG and IgA. Using a magnet, the microsphere-labelled spermatozoa were separated from the samples. Immunobead binding was performed before and after the treatment in order to detect changes in the percentage of antibody-bound spermatozoa. After the immunomagnetic separation, approximately 50% of the IgA-labelled spermatozoa was isolated while no difference was demonstrated when antisperm antibodies of IgG class were involved. The evaluation of sperm motility and membrane integrity after treatment seemed to indicate that the technique did not have any relevant effect on sperm characteristics. The fact that only a partial success in separation of IgA-bound spermatozoa and no success for IgG-labelled sperm was obtained indicates that the method needs to be improved before its clinical utilization might be postulated.     

大鼠胚胎来源肝干细胞分离纯化方法的比较

目的 观察比较机械分离法和酶消化法分离纯化孕鼠胚胎来源肝干细胞的优劣.方法 取孕13.5 d SD大鼠胚胎肝后分别用机械分离法和酶消化法分离纯化肝干细胞,比较两种方法所得细胞总量和存活率的差异,用免疫荧光染色法鉴定细胞,并比较原代培养前后肝干细胞存活率的变化.结果两种方法分离培养出的细胞形似卵圆形,经免疫荧光染色法检测表达干细胞标志物CD34和胆管细胞标志物CK19,机械分离法分离的肝干细胞数量(57.49±14.25)×106与酶消化法(63.36±12.67)× 106相当,两者比较差异无统计学意义(P>0.05),但机械分离法所得肝干细胞的存活率(96.37±0.82)%高于酶消化法(93.53±0.63)%(P<0.05),并且培养前后细胞存活率也明显高于酶消化法,两两比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 机械分离法是一种简单、经济、实用的胚胎来源肝干细胞分离纯化方法.     

体外碱性成纤维细胞生长因子聚乳酸纳米缓释微球对人脂肪干细胞增殖和成脂分化的影响

目的 体外观察碱性成纤维细胞生长因子(basie fibroblast growth factor,bFGF)聚乳酸纳米缓释微球对人脂肪干细胞增殖和成脂分化的影响,为bFGF缓释微球应用于脂肪组织工程的研究提供理论依据.方法 体外分离培养脂肪干细胞,并行多向诱导分化鉴定.配制含有0、1、2、3、4、5 mg/ml bFGF聚乳酸缓释微球的脂肪干细胞培养液及成脂分化诱导液.将脂肪干细胞接种至96孔板,第2天更换含不同浓度hFGF缓释微球的培养液和成脂诱导液,分别用四甲基偶氮噻唑蓝比色法(MTT)和油红O定量检测法定期检测细胞增殖和成脂分化的情况.所得数据均用SPSS13.0软件进行统计学处理.结果 bFGF聚乳酸缓释微球有明显促进脂肪干细胞增殖和成脂分化的作用.增殖实验和成脂诱导实验合适的作用浓度分别为3 mg/ml和4 mg/ml.结论 bFGF聚乳酸纳米缓释微球体外可以明显促进脂肪下细胞的增殖和成脂分化,可作为一种较理想的细胞因子缓释系统应用于脂肪组织工程的研究.     

碱性成纤维细胞生长因子对骨髓间充质干细胞扩增及分化潜能的影响

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖及其分化潜能的影响.方法 体外培养大鼠BMSCs,分别设对照组和bFGF处理组,bFGF作用浓度分别为1、10、100 μg/L.作用72 h后,噻唑蓝(MTT)测吸光度(A)值反映细胞增殖.细胞免疫组织化学测细胞CD44的累积A值;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞CD44的mRNA相对表达量.结果 在1 μg/L bFGF作用下其MTT A值为0.334±0.036较对照组A值0.251 ±0.033明显增高(P＜0.05).在1 μg/L bFGF作用下其细胞免疫组织化学测得CD44的累积A值较对照组明显增高(P＜0.01);其RT-PCR测得CD44的mRNA相对表达量较对照组明显增高(P＜0.01).结论 作用浓度为1 μg/L的bFGF可促进BMSCs的体外扩增并有助于保持BMSCs的分化潜能.