三黄泻心汤血清药物化学初步研究

目的对三黄泻心汤进行血清药物化学研究。方法采用血清药物化学的研究方法,建立三黄泻心汤及口服三黄泻心汤后大鼠血清的HPLC指纹图谱,分析比较三黄泻心汤、单味生药给药后所得血清样品,鉴定口服三黄泻心汤后大鼠血中移行成分。结果口服三黄泻心汤后从血中发现了20个入血成分,其中3个为代谢产物;17个为原型成分。结论三黄泻心汤入血成分主要来自大黄和黄芩,其血清药物化学表征可以为阐明三黄泻心汤药理作用和作用机理提供依据。     

三黄泻心汤抗炎作用的研究

目的：通过三黄泻心汤对不同炎症模型的比较,探讨三黄泻心汤的抗炎作用。方法：同时检测三黄泻心汤作用下白细胞游出数目、棉球肉芽肿系数、脏器指数,考察三黄泻心汤的抗炎作用。结果：高剂量三黄泻心汤能显著减少大鼠皮下羧甲基纤维素囊中白细胞游出数目。各剂量三黄泻心汤液均无明显抑制大鼠棉球肉芽肿的形成。结论：三黄泻心汤有抗炎作用。     

半夏泻心汤对偏头痛模型大鼠血液流变学及神经递质影响的实验研究

目的:研究半夏泻心汤(BXXXT)对实验性偏头痛模型大鼠血液流变学及神经递质的影响。方法:60只SD健康大鼠随机分成6组,分别为正常对照组、模型组、阳性组、半夏泻心汤高、中、低剂量组。正常对照组,模型组动物灌胃(ig)给予生理盐水(NS),其余各组动物灌胃(ig)给予半夏泻心汤,每组动物连续给药7 d。末次给药后1 h皮下注射硝酸甘油(NTG 10 mg/kg)建立实验性偏头痛动物模型。观察模型动物行为学症状,检测血液流变学指标及血浆NO,NOS水平。结果:半夏泻心汤可降低模型动物爬笼挠头次数,药物各剂量组血粘度较模型组有明显降低(P0.05)。半夏泻心汤高剂量组(10 g/kg)可降低模型动物红细胞聚集指数,中剂量(5 g/kg)降低模型动物血浆粘度。药物各剂量组对模型动物凝血酶原时间(PT),活化部分凝血酶时间(APTT)以及体内血浆NO,NOS水平均有明显的降低。结论:半夏泻心汤可改善NTG致偏头痛模型动物行为学表现,降低血液流变学相关指标,降低单胺类神经递质NO及其合酶NOS水平。     

一氧化氮对烟雾吸入性损伤早期中性粒细胞趋化功能的影响

目的研究烟雾吸入性损伤后吸入 0 .0 0 2 %一氧化氮 (nitricoxide ,NO)对大鼠中性粒细胞趋化功能的影响。方法 72只雄性Wistar大鼠 ,随机分为 3组 ,每组 2 4只。每组再按伤后 6、12及 2 4h 3个时间点均分为 3组 ,每组 8只。各组致伤后 2h开始应用动物呼吸机进行定容机械通气 ,1组吸入空气 ,2组吸入氧气 (FiO2 =0 .4 ) ,3组除吸氧外再吸入 0 .0 0 2 %NO。在麻醉下抽取腹主动脉血处死大鼠 ,分别测定中性粒细胞趋化指数及肺组织匀浆肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α,TNF α)和白细胞介素 8(interleukin 8,IL 8)含量。结果趋化指数、TNF α和IL 8含量伤后 12和 2 4h 3组均明显低于 2组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论吸入 0 .0 0 2 %NO能抑制烟雾吸入性损伤大鼠中性粒细胞的趋化功能     

针刺联合药物治疗血管性痴呆大鼠行为学观测

血管性痴呆(vasculardementia ,VD)是目前唯一可以预防治疗的一种痴呆类型,本研究旨在观测针刺联合银杏叶制剂治疗VD大鼠的行为学改变。材料与方法一、实验材料1 动物:SD雄性大鼠,体质量2 5 0～3 0 0 g。2 .药物:银杏叶制剂采用银杏叶片。二、实验方法1.动物分组:将15 0大鼠随机分为5组,每组各3 0只,分别为正常对照组、实验对照组、药物组、针刺组与针药组。正常对照组为假手术组,其余4组均为VD模型组。按照王蕊改进方法制备VD大鼠模型[1] 。2 .治疗方法:药物组与针药组的药物为银杏叶片,口服,3粒/次,3次/日,采用灌胃方法给药,对照组与…     

三黄泻心汤组分配伍方的图谱表征及活血化瘀优势方的成分分析

目的 对9个三黄泻心汤成分配伍方进行特征图谱表征,并对活血化瘀作用优势方进行成分分析.方法 采用高效液相色谱法,Agilent C18柱,乙腈-1％甲酸梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温30℃,对三黄泻心汤成分配伍方进行特征图谱分析,并对活血化瘀优势方进行配伍成分的含量测定.结果 9个三黄泻心汤组分配伍方特征图谱中均包含24个特征峰,以化学对照品为对照归属了其中的9个色谱峰.并对活血化瘀优势组分配伍方(组方7)进行了成分分析,该方中黄芩苷、蒽醌苷、蒽醌苷元及盐酸小檗碱的含量比例约为2.8∶ 1.7∶ 1.6∶1.0.结论 所建立的三黄泻心汤组分配伍方特征图谱及含量测定方法稳定可靠,可用于组分配伍方的质量控制.同时,基于三黄泻心汤的活血化瘀组分配伍优势方的成分分析也为进一步揭示组分配伍与其功效的相关性奠定了基础.     

一氧化氮与牙周病发病相关性的实验研究（摘要）

目的 :(1)检测正常大鼠和牙周炎症大鼠牙龈组织NO含量 ,分析NO含量与牙龈炎症程度的相关性 ,探讨NO在牙周炎发生和发展过程中的作用 . (2 )分析牙周局部滴注硝酸盐后 ,NO含量的变化与局部炎症的关系 ,初步探讨硝酸盐在炎症治疗中的作用 .方法 :(1)建立大鼠实验性牙周炎动物模型 . (2 )采用酶法检测实验动物牙龈组织中NO-2 和NO-3 含量 ,以间接反映NO水平 . (3)肉眼和组织切片观察滴注硝酸盐后牙周组织的炎症变化情况 .结果 :(1)正常对照组、龈炎组和牙周炎组牙龈组织NO含量存在显著性差异P <0 0 1,NO随牙周炎的发展呈先降低后升高…     

脑肠相通理论的初步实验研究

本实验旨在探讨腑气不通对脑的影响 ,并进一步揭示其发生改变的内在机制 ,从而为“脑肠相通”理论提供实验基础。1　材料与方法1 .1　实验动物Wistar大鼠 3 0只 ,雌雄各半 ,体重 2 5 0± 2 5 g(1 2周龄 ) ,购于山东大学实验动物中心。1 .2　试剂NO、NOS试剂盒 ,购自南京聚力生物医学工程研究所。1 .3　主要仪器72 1分光光度计、酶标仪 BIO- TEK EL3 4 0、CHAMPION系列数字图像处理系统、日立 H- 80 0型透射电子显微镜 (H- 80 0 TEM)。1 .4　动物造模将 A组大鼠分 2 0笼单独饲养 ,给予自制饲料(6 0 %高粱面、2 0 %黄豆面、2 0 %…     

糖尿病大鼠肾脏一氧化氮合酶异构体mRNA表达初步研究

目的 :研究糖尿病大鼠肾脏三种一氧化氮合酶异构体mRNA表达。方法 :大鼠随机分成 2组 :单肾切组、糖尿病组。实验第 8周 ,应用RT -PCR技术检测大鼠肾皮质诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)、内皮型一氧化氮合酶 (ecNOS)及神经元型一氧化氮合酶 (bNOS)的mRNA表达。并同时检测大鼠肾皮质总一氧化氮合酶(NOS)活性及NO含量。结果 :糖尿病大鼠尿蛋白排泄率较单肾切组明显升高 (P <0 .0 1) ;糖尿病大鼠肾皮质iNOS、ecNOS及bNOS的mRNA表达较单肾切组明显增强 (均P <0 .0 1) ;糖尿病大鼠肾皮质NOS活性也较单肾切组明显增强 (P <0 .0 5 ) ;然而糖尿病大鼠肾皮质NO含量却较对照组大鼠明显降低 (P <0 .0 1)。结论 :糖尿病大鼠肾脏一氧化氮合成障碍 ,灭活加速。     

依那普利对自发性高血压大鼠血压、一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶的影响

目的 :观察依那普利对自发性高血压大鼠 (SHR)血压、血清一氧化氮 (NO)及组织诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)的影响。方法 :SHR2 2只 ,随机分为生理盐水组、依那普利正常剂量组及其低剂量组 ,每天灌胃 1次 ,连续 1 5 d,实验前后测定 3组的血压 ,末次给药后摘眼球取血以及取动物脏器 ,分别测定血清 NO的含量和 i NOS的活性。结果 :灌胃 1 5 d后 ,依那普利正常剂量组的血压明显降低 (P <0 .0 1 ) ,其 NO含量为 (80 .3± 5 .5 ) μmol/L,与生理盐水组 [(1 1 0 .7± 6 .2 ) μmol/L]相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1 ) ;依那普利低剂量组血压亦降低 ,NO含量为 (90 .1± 2 .2 ) μmol/L,与生理盐水组相比 ,差异亦有统计学意义 (P <0 .0 1 ) ,依那普利正常剂量组组织中 i NOS活性 (1 .0 2± 0 .1 2 )降低 ,低剂量组为 1 .83± 0 .32 ,两组与生理盐水组 (2 .97± 0 .88)相比 ,差异均有统计学意义 (均 P <0 .0 1 )。结论 :依那普利在有效降低血压的同时 ,可提高血清 NO的含量 ,并且可使组织中 i NOS的活性降低     

四逆泻心汤对慢性乙酸胃溃疡大鼠血浆ET、CGRP含量的影响

目的探讨四逆泻心汤治疗慢性消化性溃疡的作用机理。方法用乙酸侵蚀胃壁制造胃溃疡大鼠模型，分别灌胃四逆泻心汤、雷尼替丁及生理盐水，3W后处死动物，取大鼠血检测血浆ET、CGRP含量。结果四逆泻心汤组大鼠血浆ET含量较模型组明显降低（P〈0．05）；血浆CGRP含量较模型组和雷尼替丁组明显升高（P〈0．05）。结论四逆泻心汤通过降低胃溃疡大鼠血浆ET含量及升高CGRP含量，从而改善胃黏膜微循环，增高胃黏膜保护因子的水平，降低胃黏膜攻击因子的能力而达到治疗消化性溃疡的目的。     

建立四氧嘧啶糖尿病动物模型的研究

目的　建立合适大鼠糖尿病动物模型。方法　选取健康大鼠 2 2只 ,体重为 180～ 2 40 g ,随机分为实验组 1、实验组 2、实验组 3、正常组。实验 1～ 3组腹腔注射四氧嘧啶 ,注射剂量分别为 15 0mg/kg、175mg/kg、2 0 0mg/kg(按体重计算 ) ,经 48h后取血清测定其血糖的变化。结果　实验 1～ 3组大鼠血糖均显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ;实验 3组的血糖显著高于实验 2组和实验 1组 (P <0 .0 1) ;实验 2组显著高于实验 1组 (P <0 .0 1)。结论　大鼠腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病模型是一种可靠、易控制的方法。血糖的升高与体重、鼠龄有关。     

新三黄片中黄芩苷在大鼠体内的药物动力学研究

目的:建立新三黄片中黄芩苷在大鼠体内的药物动力学研究方法.方法:以雄性Wistar大鼠为实验动物,按照1650mg/kg(相当于黄芩苷200mg/kg)的剂量灌胃给予新三黄片,于给药后不同时间点取血,应用RP-HPLC方法测定大鼠血浆中黄芩苷的含量.应用3p97药动学软件处理血药浓度数据,拟合新三黄片中黄芩苷在大鼠体内的吸收模型,获得药动学参数.结果:黄芩苷的线性范围为0.32μg/ml-6.4μg/ml,在大鼠体内呈二室吸收模型,主要的药物动力学参数为T1/2(α)272min、T1/2(β)353min、T1/2(ka)102.1min、AUC 1431.9μg·min/ml、V 584ml、CL(s)1.15 L/min.结论:本实验建立的HPLC测定黄芩苷血药浓度的方法,灵敏度高,专属性强,易操作,结果准确可靠,可用于新三黄片中黄芩苷的药物动力学研究.     

半夏泻心汤及其拆方对TNBS致溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织细胞因子的影响

目的观察半夏泻心汤及其拆方对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织细胞因子含量变化的影响,探讨半夏泻心汤及其拆方治疗UC的作用机制。方法以SD大鼠为研究对象,采用TNBS乙醇灌肠法复制溃疡性结肠炎动物模型,通过半夏泻心汤及其拆方给药,双抗体一步夹心酶联免疫法检测结肠组织TNF-α、IL-1、IL-10、PGE2、MPO含量; HE染色行病理组织学观察。结果与模型组比较,半夏泻心汤组、寒热并用组(半夏、干姜、黄芩、黄连)、辛温组(半夏、干姜)、甘调组(人参、炙甘草、大枣)和苦降组(黄芩、黄连) TNF-α、IL-1和MPO含量均降低(P 0. 05);与半夏泻心汤组比较,寒热并用组、辛温组、甘调组、苦降组TNF-α、IL-1含量较高(P 0. 05),辛温组、甘调组MPO含量较高(P 0. 05);与寒热并用组比较,辛温组和苦降组TNF-α、IL-1含量较高(P 0. 05),辛温组MPO含量较高(P 0. 05)。结论半夏泻心汤及其拆方对UC大鼠结肠组织TNF-α、IL-1、MPO、PGE2影响最明显的是半夏泻心汤组,其次是寒热并用组、辛温组、苦降组、甘调组;半夏泻心汤及其拆方对UC大鼠结肠组织病理学改变影响最明显的是半夏泻心汤组和寒热并用组,其次是苦降组和辛温组。     

双Cuff双造口大鼠异位小肠移植模型的建立

1　实验资料1 1　近交系雄性ＢＮ大鼠　体质量约 2 5 0 - 30 0 ｇ ,作为供体 .ＬＥＷ大鼠 ,雄性 ,体质量约 30 0 - 35 0 ｇ ,作为受体 .动物购自中国医学科学院实验动物中心 .实验前于实验室饲养 4 8ｈ ,禁食 2 4ｈ ,不禁水 .1 2　动物分组　动物分为 4组 ,Ａ组 :动脉袖套 +静脉 5Ｆ套管 (ｎ =2 0 ) ;Ｂ组 :动脉袖套 (ｎ =2 0 ) ;Ｃ组 :动脉袖套 +静脉5Ｆ套管 +ＦＫ5 0 6 (ｎ =2 0 ) ;Ｄ组 :动脉袖套 +ＦＫ5 0 6 (ｎ =2 0 ) .ＦＫ5 0 6量为 0 5ｍｇ·ｋｇ-1,ｉｍ .1 3　静脉套管的制作　采用 5Ｆ儿童用心血管鞘管 .切为 2- 3ｍｍ长的鞘管段…     

补肾活血化痰方对AD大鼠学习记忆功能及脑神经元型一氧化氮合酶的影响

目的　探讨补肾活血化痰方改善学习记忆功能的作用机理。方法 15月龄Wistar大鼠 6 0只 ,随机分成 6组 :正常组、假手术组 (PBS组 )、老年性痴呆 (AD)模型组、脑复康组 ,补肾活血化痰方低、高剂量组。大鼠双侧前脑基底核 (BasalnucleusofMeynert,NBM)注射鹅膏覃氨酸 (Ibotenicacid ,IBO)损毁前脑基底核造痴呆模型。动物经治疗处理2 8d后 ,各组大鼠进行Morris水迷宫行为学试验 ,并检测大鼠海马区神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)阳性细胞数。结果　行为学实验显示 :脑复康组、补肾活血化痰方低高剂量组与其它 3组比较有统计学差异 (P <0 0 1) ;模型组nNOS阳性细胞数明显低于正常组和PBS组 (P <0 0 1) ,高剂量组nNOS细胞的表达近似于正常。结论　补肾活血化痰方能抑制痴呆大鼠模型海马区nNOS神经元受损 ,从而达到提高学习记忆水平。     

正常大鼠吸入一氧化氮对肾脏毒副作用的影响

目的探讨吸入外源性一氧化氮 (nitricoxide,NO)对正常大鼠肾脏的毒副作用。方法 72只大鼠随机分为三组 ,均行气管切开 ,插气管导管。吸氧组 (G1 )单纯吸氧 (FiO2 0 .4 0 ) ,低浓度NO吸入组 (G2 )和高浓度NO吸入组(G3 )除吸氧外 ,分别吸入 4 0ppm和 80 ppm的NO ,于 2、8、1 2、2 4h取标本检测 ;另取 6只大鼠建立正常值和组织学对照。数据行多个样本均数间方差分析。结果三组肾脏含水量无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,三组呼出气NO2 浓度G3 组比G1 和G2 组显著增高 (P <0 .0 5、P <0 .0 1 ) ;三组Cr变化不显著 (P >0 .0 5 ) ,G3 组血尿素氮和高铁血红蛋白分别高于G1 和G2 组 (P >0 .0 5、P <0 .0 1 ) ,G1 和G3 组均出现肾脏组织形态和超微结构的病理性变化 ,但G2 组病理变化较轻。结论吸入低浓度NO对肾脏无明显毒副作用 ,吸入 80 ppm的NO对肾组织有不同程度的损害     

四氯化碳、酒精与四氯化碳联合、胆管结扎致SD大鼠肝纤维化病理学比较

目的 研究四氯化碳、酒精与四氯化碳联合、胆管结扎致SD大鼠肝纤维化模型肝脏的病理学改变,初步探讨肝纤维化发病机制.方法 四氯化碳组SD大鼠以3 mg/kg的剂量(首次剂量加倍)皮下注射50％四氯化碳(四氯化碳∶橄榄油=1∶1),每周2次,连续注射6周;酒精与四氯化碳联合组SD大鼠每日按照10 mL/kg剂量灌服酒精混合物(酒精∶吡唑∶玉米油=10 mL∶25 mg∶2 mL),同时每周2次按0.3 mL/kg剂量给予腹腔注射四氯化碳:橄榄油(1∶3),连续造模60 d;胆管结扎组大鼠按10 mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉,腹部皮肤消毒,无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔,分离出胆管,在胆管近端和远端2处结扎胆管,28 d后结束实验.试验结束后麻醉动物,解剖取动物肝脏组织,用10％福尔马林固定,进行病理学检查.结果 四氯化碳致SD大鼠肝纤维化模型表现为弥漫性脂肪肝、肝炎、肝纤维化;酒精与四氯化碳联合致SD大鼠肝纤维化模型表现为酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化;胆管结扎致SD大鼠肝纤维化模型表现为胆管增生、肝炎、肝纤维化.结论 这3种方法都可以引起大鼠肝脏发生纤维化,其中胆管结扎致SD大鼠肝纤维化造模方法适合于临床胆汁淤积所致肝纤维化的模型建立,其它两种方法适合于化学性、病毒性肝炎引起的肝纤维化模型的建立,可根据不同的实验目的选择不同的方法构建相应的动物模型.     

心房钠尿肽对内毒素休克大鼠动脉血压的作用

目的　探讨心房钠尿肽 (ANP)对内毒素休克大鼠动脉血压的作用及可能的机制 .方法　大鼠静脉给予脂多糖(L PS,2 mg· kg- 1 )后立即静脉给予 ANP(2 μg· kg- 1 ) ,记录动物平均动脉血压 (MAP) ,检测血浆一氧化氮 (NO)和血浆内皮素 (ET)浓度的变化 .结果　给予 L PS的大鼠 MAP持续下降 ,至 4 h时 MAP下降到 (8.1± 2 .6 ) k Pa;ANP治疗组大鼠 MAP在给药初期的短暂下降后逐步回升 ,至 4 h时 MAP仍维持在 (13.4± 2 .9) k Pa,与 L PS组相比有显著差异 (P<0 .0 5 ) .与对照组比较 ,L PS组动物 4 h时血浆 NO和 ET浓度均显著升高 (P<0 .0 1) ;与 L PS组比较 ,ANP治疗组的动物在 4 h时血浆 NO水平和 ET浓度均显著下降 (P<0 .0 5 ) ,但仍明显高于对照组 (P<0 .0 1) .结论　 ANP对 L PS引起的动脉血压的持续下降有作用 ,可能是通过拮抗 ET的产生、降低 NO的分泌而起作用 ,也可能是通过其他的途径     

针刺对拟痴呆大鼠中枢一氧化氮活性和胆碱能系统功能的影响

目的探讨针刺对拟Alzheimer’sDisease(AD)大鼠大脑一氧化氮 (NO)活性和皮质、海马胆碱能系统功能的影响。方法用迷宫试验观测针刺对拟AD大鼠学习记忆能力的影响 ;采用硝酸还原酶法测定NO含量 ;应用巯基比色分析法、免疫组化法测定大鼠海马区乙酰胆碱酯酶 (AchE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)活性变化。结果针刺组走完迷宫全程时间 ( 15 0 .2 2± 12 .47)秒与模型组 ( 2 3 2 .0 0± 15 .5 6)秒比较 ,存在显著性差异 (P <0 .0 1) ;针刺组走迷宫走错次数 ( 3 .0 0± 0 .2 4)次与模型组 ( 4 .3 8± 0 .2 6)次比较 ,具有显著性差异 (P <0 .0 1) ;针刺组大脑皮质NO含量 ( 64 .75± 6.0 1) μmol/L比模型组 ( 111.80± 8.90 ) μmol/L显著降低 (P <0 .0 1) ;针刺组AchE活性 ( 3 .73± 0 .2 2 ) μmol/ml比模型组 ( 2 .3 5± 0 .3 3 ) μmol/ml明显增强 ( P <0 .0 1) ,针刺组ChAT活性 (PU值 2 0 .0 0± 1.0 0 )与模型组 (PU值 13 .86± 1.0 4)相比明显升高 (P <0 .0 1)。结论针刺可减少中枢NO的合成 ,从而减轻对大脑的神经毒作用 ;同时可提高中枢胆碱能系统功能 ,缓解拟AD大鼠的学习记忆障碍。