白花蛇舌草悬浮细胞摇瓶补料对多糖量的研究

通过摇瓶实验,研究补料方式对白花蛇舌草细胞悬浮培养细胞生长及多糖产量的影响.以细胞干重、多糖量为指标,对白花蛇舌草悬浮细胞进行了补糖(蔗糖)、补氮(氨水)和补碱(氢氧化钠)的摇瓶补料分批发酵实验.结果表明,4次补氮时白花蛇舌草悬浮细胞干重及多糖分别达到3.50 g/L和64.59 g/L;4次补碱时白花蛇舌草悬浮细胞干重及多糖产量分别达到3.27 g/L和58.87 g/L.补碱和补氮无论是对细胞干重还是多糖的产量等都有着明显的提高,说明它们对白花蛇舌草细胞悬浮培养细胞生长影响较大.     

白花蛇舌草细胞悬浮培养的建立与条件优化

目的利用白花蛇舌草茎尖的愈伤组织建立细胞悬浮培养系,并通过实验研究不同条件对白花蛇舌草细胞悬浮培养细胞生长的影响。方法采用单因素试验对不同种类、不同浓度的激素及其组合、碳源的种类以及碳源浓度、起始的pH值对白花蛇舌草细胞悬浮培养细胞生长的影响作用进行研究。结果最适pH=6.5,激素以NAA效果最好,其中NAA最佳浓度为1.5mg·L-1。组合激素对细胞的生长的促进作用和单种激素相比,没有明显增强。蔗糖比葡萄糖更适合作为碳源,蔗糖的最佳浓度为30g·L-1。结论本试验建立了白花蛇舌草的细胞悬浮培养系,提出了培养的最优条件,可以用以大量生产。     

高山红景天细胞悬浮培养生长和产物积累动力学

目的研究高山红景天悬浮细胞生长、红景天多糖和红景天苷合成动力学特征,为培养过程的优化控制提供理论依据。方法考察1个培养周期内高山红景天细胞的鲜重、干重和红景天苷、红景天多糖的含量,绘制生长曲线、生长速率曲线和比生长速率曲线。结果高山红景天细胞悬浮培养的生长周期约为16 d,0~4 d为细胞的延滞期,4~12 d为对数期,13~15 d为稳定期,在第14天时细胞鲜、干质量达到最大,分别为266.13 g.L-1和13.41 g.L-1;红景天苷在培养的第12天达到最大,其质量分数为0.585%;第10天时红景天多糖的含量达到最大,其(质量分数为13.824%)。结论确定细胞生长和产物积累的变化规律,可以提高生产效率,为培养过程的优化控制提供理论依据。     

白花蛇舌草注射液诱导SKOV-3细胞株凋亡的研究

目的研究白花蛇舌草注射液对体外培养条件下卵巢癌细胞SKOV-3细胞增殖的影响以及诱导其凋亡的情况。方法取对数生长期的SKOV-3细胞（细胞数为5X104^／mL）分别接种于不同细胞培养板上,试验组每孔加入200μL不同质量浓度的白花蛇舌草注射液,空白对照组加入等体积PRMI-1640培养液孵育,采用四甲基偶氮唑盐（MTF）比色法检测吸光度（A490值）并计算SKOV-3细胞增殖抑制率;Annexin—V—FITC／PI染色细胞后,用流式细胞仪技术检测空白对照组与试验组的细胞凋亡率,并置荧光显微镜下观察不同组细胞的凋亡形态变化。结果MTT法检测结果显示,随着白花蛇舌草注射液质量浓度和作用时间的增加,SKOV-3细胞增殖抑制率均明显增大,12mL／L的试验组培养48h的抑制率最高,达（35．67±2．16）％;流式细胞仪检测显示,白花蛇舌草注射液处理后可引起SKOV-3细胞凋亡率随着白花蛇舌草注射液质量浓度的增加呈升高趋势,且荧光镜下试验组细胞可呈现典型凋亡改变。结论白花蛇舌草注射液能诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡。     

白花蛇舌草多糖的提取纯化工艺研究

目的优选白花蛇舌草多糖的提取及纯化工艺。方法采用正交试验设计法优选白花蛇舌草多糖的最佳提取工艺;通过乙醇沉淀法、鞣酸沉淀法并联用活性炭对传统多糖的纯化工艺进行改进。结果最佳提取工艺为:白花蛇舌草药材预先加12倍量水浸泡2h,加热至70℃,提取3次,每次1.5h,采用鞣酸沉淀法联合活性炭可有效去除多糖中的蛋白质和色素等杂质。结论提取时间对多糖的提取效率影响较大;所优选的纯化工艺方法简便,蛋白去除率高,色素脱除完全,多糖损失少,工艺可行性强。     

基于体外消化/Caco-2细胞模型测定白花蛇舌草中镉的生物有效性及风险评估

目的:通过考察白花蛇舌草中镉(Cd)的生物有效性，以科学地评价Cd对人体的健康风险，并为限量标准的制定提供依据。方法:采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS法)测定白花蛇舌草中Cd的残留量，并建立体外生理提取试验(PBET)体外模拟消化/Caco-2细胞模型考察白花蛇舌草中Cd的生物有效性。此外，采用危害指数法(HI法)对白花蛇舌草中Cd的残留总量以及生物有效量的风险进行评估。结果:3批白花蛇舌草中Cd的残留总量范围为10.970～81.492 mg·kg^-1。经Caco-2细胞转运后，白花蛇舌草中Cd的生物有效性分别为3.06%、1.60%、6.62%。风险评估的结果表明：Caco-2细胞转运前，所有批次白花蛇舌草Cd的HI值均大于1,健康风险不可接受；Caco-2细胞转运后，3批白花蛇舌草中Cd的HI值均≤1,风险降低至安全范围内。结论:白花蛇舌草中的Cd可能不能被人体完全吸收。本研究为更加科学、客观地评估中药中重金属对人体的健康风险，制定更加科学、合理的重金属限量标准提供了重要的技术支撑。     

福建产白花蛇舌草活性成分提取与含量测定

目的 研究福建产白花蛇舌革多糖和总黄酮的提取与含量测定。方法 采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用亚硝酸钠-三氯化铝法测定总黄酮含量。结果 测得多糖含量为9．26％．总黄酮含量为10．33％。结论 与其它产地白花蛇舌草比较,福建产白花蛇舌草多糖和总黄酮的含量较高．适用于工业化制备。     

白花蛇舌草抗肿瘤有效成分的研究进展

随着白花蛇舌草在临床上被广泛的应用于治疗各类肿瘤,关于白花蛇舌草抗肿瘤活性成分的研究越来越多,主要集中在三萜类、黄酮类、甾醇类、多糖等成分。本文对近10年来白花蛇舌草的抗肿瘤活性成分研究进行了综述,并探讨其进一步的研究方向。     

白花蛇舌草注射液无菌检查方法验证

目的通过验证试验探讨白花蛇舌草注射剂的无菌检查方法,考察其抑菌作用及测定方法的可行性,为该品种制定可靠的无菌检查方法提供科学依据。方法按中国药典2010年版附录xIIIB无菌检查法要求,对白花蛇舌草注射液进行无菌检查,并进行无菌方法学验证。结果采用薄膜过滤法检查无菌,取冲洗量200mL／桶,白花蛇舌草注射液对大肠埃希菌的活性可消除。结论采用薄膜过滤法进行白花蛇舌苹注射液无菌检查时,缓冲液冲洗量以200ml／桶为宜,选择大肠埃希菌为阳性对照菌,能达到检测目的。     

白花蛇舌草的毒理学安全性研究

<正>白花蛇舌草系茜草科耳草属植物,广泛分布于我国长江以南地区,又名蛇舌草、矮脚白花蛇利草等,含有丰富的黄酮、多酚、有机锗、熊果酸、齐墩果酸、多糖等化合物。具有清热解毒,利尿消肿,活血止痛等多种功效,可用于治疗多种癌症及炎症[1],现代药理研究亦表明其具有抗菌消炎[1]、增强免疫功能[2]、抗肿瘤[3-4]、抗氧化[5-6]等作用。近些年,多种饮料中添加白花蛇舌草作为其主要卖点,但目前对其毒性研究极     

白花蛇舌草多糖提取工艺研究

目的优选适合生产的白花蛇舌草多糖的提取工艺条件。方法以总多糖的提取量为指标,采用正交设计试验优化提取条件,并对其进行抗肿瘤活性研究以及毒性试验。结果多糖对肿瘤细胞有一定的抑制率;最佳提取工艺条件为：95%乙醇脱脂,一次冷提,三次热提,每次2h,浓缩后80%醇沉过夜,过滤洗涤即得。结论该提取工艺有效、可行。     

白花蛇舌草水提物通过抑制MAPK通路致肺癌细胞的凋亡

目的：研究白花蛇舌草（BHSSC）水提物对肺癌细胞增殖、凋亡的影响以及体内抑制肿瘤活性,进一步通过研究其对凋亡关键通路MAPK信号通路的影响,以阐明白花蛇舌草抗肺癌分子机制。方法：制备BHSSC水提取物,采用MTT法研究其对人肺癌细胞株A549和PC-9细胞体外增殖的抑制活性,并进一步构建人肺癌的裸鼠移植瘤模型,研究BHSSC水提物的体内抗肿瘤活性;通过Western blot技术研究BHSSC水提取物对MAPK通路中关键蛋白 Erk、JNK、p38的表达水平和磷酸化水平的影响,进而阐明白花蛇舌草诱导肺癌细胞凋亡机制。结果：BHSSC水提取物可以剂量依赖性地促进肺癌细胞的凋亡,从而抑制肺癌细胞的增殖。当剂量达到600 μg·mL-1 时,肺癌细胞抑制率达到95%（P<0.01）。荷瘤裸鼠模型结果显示,在给药21天后,给药组与肺癌模型组相比,肿瘤体积显著减小,平均抑瘤率达到70%（P<0.01）。Western blot结果提示,BHSSC水提物能够显著抑制MAPK通路中关键蛋白p38、Erk、JNK的磷酸化水平。结论：BHSSC水提物能够通过抑制肺癌细胞MAPK通路的活化,促进肺癌细胞凋亡,从而抑制肺癌的体内体外增殖。     

三尖杉悬浮细胞的培养及抗癌生物碱的产生

建立三尖杉悬浮细胞培养系统（ＭＳ＋ＮＡＡ ３ ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ ０．１ｍｇ／Ｌ＋庶糖 ３％）优化培养条件,产生更多的抗癌生物碱。方法：研究不同环境因子：接种量、摇床转速、激素、氮源、碳源、前体及诱导子调控对三尖杉悬浮细胞的生长及三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱产生的影响;以及细胞生长和产物积累的偶联反应。结果：三尖杉悬浮细胞的生长与三尖杉酯类碱的产生呈正相关;接种量、激素与Ｄ－剂（生长素）组合;碳源;前体苯丙氨酸有利于细胞生长及酯类碱的产生。摇床转速;氮源利于细胞生长。激素与ＢＲ（油菜内酯素）的组合;无机氮ＮＯ_３－;蛋白胨;诱导子能显著提高三尖杉酯类碱的含量。结论：择优筛选出有利于三尖杉酯类生物碱的生物、化学、物理因子,是提高悬浮细胞抗癌生物碱的有效途径。     

白花蛇舌草抗肿瘤作用及机制最新研究进展

目的:综述白花蛇舌草抗肿瘤作用及机制的最新进展。方法:通过整理近年来国内外对白花蛇舌草抗肿瘤作用及机制的最新研究成果进行归纳总结。结果:现有文献表明白花蛇舌草在体内外均有抗肿瘤作用,其主要作用机制是诱导肿瘤细胞凋亡、影响其信号通路、增强免疫功能等。结论:白花蛇舌草的抗肿瘤作用已经得到研究者认可,但其作用机制还不完全明确。     

白花蛇舌草与水线草饮片的微距图像鉴别

目的：通过微距图像鉴别白花蛇舌草与水线草。方法：通过微距摄像采集白花蛇舌草与水线草各部位图像。结果：采集到白花蛇舌草与水线草的花序、茎、叶等微距图像。结论：白花蛇舌草和水线草的花序和叶的微距图像可作为其鉴别依据。     

白花蛇舌草联合化疗对癌症治疗的Meta分析

目的 利用Meta分析方法评价白花蛇舌草联合化疗治疗癌症的临床疗效.方法 按照循证医学的要求全面检索中国期刊全文数据库、PubMed数据库等,把符合纳入标准的7篇文献作为Meta分析的对象.采用RevMan 4.2专用软件进行统计分析.结果 7项研究疗效OR合并检验,Z=4.37 （P＜0.01）,表明白花蛇舌草联合化疗与单纯化疗比较,两组临床疗效差异有统计学意义.3项研究KPS评分OR合并检验,Z=3.84（P＜0.01）,表明白花蛇舌草联合化疗与单纯化疗对患者生存质量改善的差异有统计学意义.结论 现有的临床证据表明,白花蛇舌草联合化疗治疗癌症疗效优于单纯化疗,并且比单纯化疗更能提高患者生存质量.     

高效液相色谱法同时测定白花蛇舌草中两组分的含量

目的 :建立白花蛇舌草中齐墩果酸与熊果酸的含量测定方法。方法 :色谱柱为NucledureC18 柱 ,流动相为乙腈 -磷酸盐缓冲液 (45∶55) ,检测波长为220nm。结果 :齐墩果酸的平均回收率为 (96 79±2 42) % ,熊果酸的平均回收率为 (97 15±2 33) %。结论 :本方法可同时测定齐墩果酸和熊果酸的含量 ,可用于药材质量控制     

铁皮石斛种胚原球茎液体悬浮培养研究

目的 建立铁皮石斛原球茎液体悬浮培养体系，为大规模生产石斛奠定基础。方法 对铁皮石斛原球茎悬浮培养条件进行比较选择，并测定生长增殖量。结果液体悬浮培养的原球茎分散性好、整齐均一。悬浮培养的最适培养基为1／4MS＋40mg／LVC，pH5、6，摇床转速为50r／min，15d继代一次，黑暗培养。培养基中添加0、5mg／LABA预培养30d，原球茎的质量更高、同步性更好。结论获得了快速增殖原球茎的液体悬浮培养的最佳条件，为铁皮石斛开发利用创造条件。     

Glucosylation of salicyl alcohol by cell suspension cultures of Solanum laciniatum

Cell suspension cultures of Solanum laciniatum were able to transform exogenously inoculated salicyl alcohol into salicyl alcohol 7-O-β-D-glucopyranoside (isosalicin). The highest level of isosalicin (54.6 mg/g dry weight) in the cells was formed within 2 days after inoculation with salicyl alcohol (37.5 mg/flask containing 50ml of medium). The biotransformation capacity of the cell suspension cultures was about 31.1%.