系统性红斑疮患者血清催乳素水平和外周血单一核细胞催乳素受体的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清催乳素(PRL)水平和外周血淋巴细胞的催乳素受体(PRLR)的表达与SLE活动性的关系.方法应用时间分辨免疫发光试验(TrFIA)测定血清PRL,用SLEDAI指数评估了113例SLE患者的病情活动性,并用Logistic多元回归研究临床表现、免疫学指标与高PRL血症的关系;采用放射性受体配基结合试验(RLBA)及RT-PCR研究外周血淋巴细胞PRLR变化.结果①63例SLE活动期患者血清PRL水平(14.45±7.25 μg/L)显著高于50例静止期患者(11.79±8.08μg/L)和28例正常人对照组(7.08±6.26 μg/L);②79.37%的活动期患者血清PRL水平在9～51.2μg/L;③113例SLE患者血清PRL水平与dsDNA抗体、SLEDAI活动指数呈线性正相关④Logistic多元回归研究发现蛋白尿、低C3和高dsDNA抗体滴度与高PRL血症相关;⑤24例SLE活动期患者外周血单一核细胞(PBMC)的PRLR的特异性结合率(SB,5.03%±2.51%)、总结合率(TB,15.34%±6.98%)和mRNA的表达水平(0.85±0.45)均显著高于22例静止期患者(SB 4.18±2.26,TB14.03±6.54%,mRNA 0.58±0.43)和15例正常人对照组(SB 1.62%±1.05%,TB8.19%±1.47%,mRNA 0.20±0.13).结论SLE患者血清PRL轻度升高,PBMC的PRLR mRNA高表达以及相应特异性结合率的增加与SLE的病情活动性相关.     

催乳素对系统性红斑狼疮患者单一核细胞产生IgG和抗dsDNA抗体的影响

目的 探讨催乳素(PRL)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)产生抗体和自身抗体的影响。方法 体外培养SLE患者和正常人PBMC,用催乳素(PRL)和白介素2(IL-2)、白介素10(IL-10)和植物凝集素(PHA)刺激外周血淋巴细胞,采用³H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖情况,用ELISA测定PBMC分泌的IgG型抗体和抗dsDNA抗体。结果 ①10^-9mol/LPRL可刺激SLE患者的PBMC增殖。②10^-9mol/L的PRL分别可以刺激SLE患者PBMC分泌IgG型抗体和抗dsDNA抗体,且活动期患者显著高于静止期患者和正常人对照(P<0.01)。③PHA+PRL、IL-2+PRL刺激SLE患者PBMC分泌IgG型抗体和抗dsDNA抗体分别显著高于PRL组(P<0.01);抗IL-2抗体+PRL组低于PRL组,差异有显著性(P<0.01);IL-10+PRL组与PRL组间差异无显著性(P>0.05)。结论 PRL能够刺激体外培养的SLE患者PBMC分泌IgG型抗体和抗dsDNA抗体;PHA、IL-2与PRL有协同作用。     

SLE患者外周血白细胞B7-H1分子的表达

目的 探讨B7-H1分子在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞的表达.方法 心用荧光抗体染色技术,经流式细胞仪检测30例SLE患者和20例正常人对照者外周血白细胞表面B7-H1的自然表达水平,同时收集SLE患者的实验室检查指标,并用SLE疾病活动指数(SLEDAI)来判定患者疾病活动程度.结果 活动期SLE组单核细胞、淋巴细胞和粒细胞上B7-H1表达水平均明显高于正常人对照组(P<0.01);SLE患者单核细胞和淋巴细胞B7-H1表达水平与SLEDAI呈正相关(r₁=0.42,P₁<0.05;r₂=0.52,P₂<0.05);抗dsDNA抗体阳性患者组淋巴细胞表面B7-H1分子数较抗dsDNA抗体阴性组明显增高(t=3.20,P<0.01).治疗后SLE患者外周血单核细胞、淋巴细胞和粒细胞B7-H1表达均明显下降,t值分别为10.00、6.75和4.33,P<0.01.结论 活动期SLE患者外周血白细胞B7-H1表达增加,且与SLEDAI成正相关,B7-H1可能与SLE的发病机制有关.     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞Caspase-1和Caspase-3mRNA的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞Caspase-1和Caspase-3的表达水平及其与淋巴细胞凋亡的关系。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中Caspase-1和Caspase-3mRNA的表达水平。结果 活动期SLE患者PBMC中Caspase-1mRNA的平均表达水平(1.20±0.33)明显高于正常人对照组(0.79±0.25),差异有非常显着性(P<0.01);Caspase-3mRNA的平均表达水平(0.87±0.16)高于正常人对照组(0.66±0.10),差异有显着性(P<0.05).活动期SLE患者PBMC中Caspase-1和Cas-pase-3的阳性表达率与正常人对照组相比差异无显着性(P>0.05).结论 活动期SLE患者外周血淋巴细胞Caspase-1和Caspase-3mRNA表达水平增高,Caspase级联反应可能参与了SLE患者淋巴细胞的凋亡过程。     

系统性红斑狼疮患者白介素13和神经生长因子的测定及其临床意义

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中白介素13和神经生长因子的水平变化.方法 应用酶联免疫吸附法检测35例SLE患者和15例正常人血清白介素13和神经生长因子水平.结果 SLE活动期患者血清白介素13水平为(92.69±9.87)pg/mL及神经生长因子水平为(339.69±25.60)pg/mL,SLE稳定期患者分别为(54.22±9.31)pg/mL和(300.89±33.51)pg/mL,正常人对照组分别为(35.20±12.70)pg/mL和(111.40±32.54)pg/mL.SLE活动期、稳定期患者血清白介素13和神经生长因子水平均显著高于正常人对照组(P<0.05或<0.01),SLE活动期显著高于稳定期(P值均<0.01).SLE患者血清白介素13水平与SLEDAI积分、血沉、C3均呈显著相关(r值分别为0.813、0.504、-0.605),神经生长因子水平与上述指标也呈显著相关(r值分别为0.442、0.338、-0.463),同时白介素13和神经生长因子水平呈显著正相关(r=0.506,P<0.01).结论 白介素13和神经生长因子在SLE的发病中可能发挥一定的作用.     

系统性红斑狼疮患者血清催乳素水平的检测

催乳素(prolactin,PRL)是由垂体前叶PRL分泌细胞分泌的肽类激素。80年代以来发现PRL与免疫系统的调节作用有关系。有报道在SLE患者血清中PRL水平升高,并与疾病活动有关。为探讨PRL与SLE发生的关系及在活动期与静止期水平比较,我们采用放射免疫法检测66例SLE患者的PRL水平,并以非结缔组织病(NCTD)     

可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞的表达

目的 探讨可诱导共刺激分子(ICOS)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞的表达。方法 应用双色荧光抗体染色技术经流式细胞仪检测了33例SLE患者和16例正常人对照者外周血中T淋巴细胞表面ICOS的自然表达水平,同时收集SLE患者的实验室检查指标,并用SLE疾病活动指数(SLEDAI)来判定SLE患者疾病活动程度,比较分析不同组别SLE患者ICOS表达水平与SLEDAI的相关性。结果 活动期SLE组T淋巴细胞ICOS表达水平明显高于正常人对照组(P<0.01)和非活动期SLE组(P<0.01),非活动期SLE组与正常人对照组T淋巴细胞ICOS表达水平则差异无统计学意义(P>0.05)。活动期组与非活动期组SLE患者T淋巴细胞ICOS表达水平均与SLEDAI呈显著正相关(r=0.71,P=0.001、r=0.56,P=0.03)。结论 活动期SLE患者T淋巴细胞ICOS表达增高,ICOS可能与SLE的发病机制有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞白介素6受体水平的研究

目的 探讨白介素6(IL-6)及其受体(IL-6R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法 应用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中IL-6RmRNA的表达水平,用ELISA法检测血清中IL-6水平。结果 ①活动期SLE患者和非活动期SLE患者及正常人IL-6R阳性表达率为100%。②PBMC中,IL-6RmRNA表达水平:活动期SLE患者为0.902±0.273,非活动期SLE患者为0.519±0.11,正常人为0.573±0.24。活动期组和非活动期组和对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.00),非活动期组和对照组比较差异无统计学意义(P=0.289)。③血清中IL-6水平:活动期组为71.89±20.02pg/mL,非活动期组为17.96±6.93pg/mL,对照组为0.035±0.035pg/mL。活动组显著高于非活动组和对照组(P=0.00),非活动组显著高于对照组(P=0.00)。活动期SLE患者和非活动期SLE患者血清中的IL-6水平与PBMC上的IL-6R的表达水平呈正相关(r=0.887和r=0.615,P<0.05)。结论 IL-6及其受体的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用。检测SLE患者PBMC中IL-6受体的表达水平可作为评估疾病活动性的参考指标之一。     

催乳素与促生长素对体外培养系统性红斑狼疮患者单一核细胞产生细胞因子的影响

目的 研究催乳素、促生长素对系统性红斑狼疮(SLE)患者Th1/Th2型细胞因子的影响。方法 对SLE患者和正常人对照的淋巴细胞进行体外培养,并测定细胞因子。结果 在自分泌情况下,SLE活动期患者白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)的分泌量显著增高,而干扰素γ(IFN-γ)的分泌量低于静止期和正常人,但差异无统计学意义。经促生长素和催乳素干预后,活动期SLE患者IL-6、IL-10分泌量显著高于自分泌量和正常人对照组。IFN-γ分泌量经促生长素和催乳素干预后,与自分泌量相比,活动期患者无显著升高。促生长素对SLE患者IL-6、IL-10、IFN-γ分泌量的影响与催乳素的影响差异无统计学意义。结论 SLE患者不但存在Th2型细胞因子增高,而且促生长素和催乳素均能刺激Th2型细胞因子进一步增高,且刺激能力相当,并呈正相关。     

系统性红斑狼疮患者转录因子T-bet和GATA3基因的表达

目的 观察转录因子T-bet和GATA3与系统性红斑狼疮(SLE)病情的关系,探讨T细胞在SLE中的发病机制.方法 利用半定量PCR及实时荧光定量PCR技术检测活动期SLE患者、稳定期SLE患者、正常人外周血单一核细胞(PBMC)中T-bet和GATA3mRNA表达状况.结果 GATA3实时荧光定量PCR△Ct值:活动期(8.92±1.29)明显低于稳定期(12.20±1.18)和正常人(11.80±0.80),所以活动期患者GATA3mRNA表达明显高于稳定期患者和正常人,差异具有非常显著性(P<0.01);半定量PCR显示活动期(0.15±0.15)也明显高于稳定期(0.04±0.05)和正常人(0.03±0.03),差异有显著性(P<0.05);两种方法均显示稳定期患者与正常人GATA3表达差异无显著性(P>0.05).T-bet实时荧光定量PCR△Ct值:活动期为10.52±0.82,稳定期为9.93±1.13,正常人为10.23±1.32;半定量PCR:活动期为0.30±0.23,稳定期为0.28±0.14,正常人为0.22±0.11,两种方法均显示活动期患者、稳定期患者、正常人T-bet表达差异无显著性(P>0.05).结论 调控Th2细胞的转录因子GATA3的升高可能与SLE活动有关,而调控Th1细胞的转录因子T-bet可能与SLE活动无关.     

系统性红斑狼疮患者血清生长激素和泌乳素动态变化的研究

目的 探讨ＳＬＥ患者生长激素和泌乳素对促甲状腺激素释放激素反应。方法 用双抗体ＲＩＡ法测定促甲状腺激素释放激素注射前及注射后１５、３０、６０、１２０ｍｉｎＳＬＥ患者和正常人对照组的血清生长激素和泌乳素。结果 ＳＬＥ活动期患者注射前和注射后１５、３０、６０、１２０ｍｉｎ血清泌乳素水平以及在６０、１２０ｍｉｎ时血清生长激素水平显著高于ＳＬＥ静止期及正常人对照组（Ｐ〈０．０１）；ＳＬＥ静止期与正常人对照     

SLE患者T淋巴细胞TNFSF7基因启动子区域的甲基化状态

目的探讨系统性红斑狼疮患者(SLE)T淋巴细胞TNFSF7基因启动子区域DNA甲基化状态及其在发病机制中的作用。方法分离15例活动期SLE患者、15例非活动期SLE患者和15例正常人对照外周血CD4+与CD8+T细胞,并分别提取DNA。采用亚硫酸氢钠测序法对CD4+与CD8+T细胞TN-FSF7基因启动子区域DNA甲基化水平进行检测。结果在TNFSF7基因启动子区域,活动期、非活动期SLE患者组的CD4+T淋巴细胞的TNFSF7基因启动子序列-600～-300bp区域平均甲基化水平(0.32±0.05,0.36±0.05)明显低于正常人对照组(0.62±0.05,P=0.000),且活动期平均甲基化水平明显低于非活动期SLE患者组(P=0.000)。活动期、非活动期SLE患者组的CD8+T淋巴细胞的TN-FSF7基因启动子序列平均甲基化水平与正常人比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论活动期、非活动期SLE患者的CD4+T淋巴细胞的TNFSF7基因启动子区域处于低甲基化状态,且启动子甲基化水平与SLE的活跃性相关。     

SLE和皮肌炎患者下丘-垂体-甲状腺轴的研究

应用促甲状腺激素释放激素（ＴＲＨ）兴奋试验探讨３４例ＳＬＩ活动期患者、１３例ＳＬＥ静止期和８例皮肌炎患者下丘－垂体、甲状腺轴活动。结果显示,ＳＬＥ活动期血清促甲状腺激素（ＴＳＨ）和催乳素（ＰＲＬ）水平在０、１５、３０、６０分钟和１２０分钟与正常对照组及ＳＬＥ静止期比较显著升高,而静止校无显著性差异’;皮肌炎在０、１５、３０、６０分钟及１２０分钟与正常组比较有显著性差异,而皮肌炎各时点表ＴＳＨ水平与     

SLE患者生长激素和泌乳素对促甲状腺激素释放激素的反应及与下丘 -垂体 -肾上腺皮质轴间的相互作用

为了探讨垂体分泌泌乳素（PRL）和生长激素（GH）以及下丘－垂体－肾上腺皮质轴活动。采用RIA法测定未治疗SLE活动期和正常对照组、SLE静止期血清PRL、GH、促甲状腺激素释放激素（TSH），促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质醇水平。结果显示SLE患者活动期血清PRL和GH水平与静止期患者及年龄性别配对的正常对照组比较显著升高，而血清ACTH和皮质醇水平显著下降；SLE患者活动期（PRL＋GH）／皮质醇比值与dsDNA抗体滴度正相关。提示SLE活动期患者存在垂体GH和PRL的分泌与下丘－垂体－肾上腺皮质轴活动失衡。     

SLE患者血清抗中性粒细胞胞质抗体的临床意义

目的 探讨抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）与SLE的关系及其临床意义。方法 选择60例SLE新发病例和60例正常人对照，用ELISA法将其分为ANCA阳性和阴性组，调查表收集所有患者的一般情况、临床表现及实验室检查。结果 60例SLE新发病例中ANCA阳性率为33.3%，对照组中ANCA阳性率为3.3%，两组差异具有统计学意义（P < 0.001）。SLE活动组ANCA阳性率（84.62%）显著高于非活动组（19.15%，P < 0.01）。ANCA阳性组中神经系统紊乱、心肌炎、肾损害、浆膜炎、抗dsDNA抗体阳性、抗Sm抗体阳性、γ-球蛋白升高、补体下降以及血清IgG升高的发生率明显高于阴性组（P < 0.05）。ANCA阳性组中，SLE疾病活动指数评分（SLE-DAI）（24.40 ± 10.16）及ESR（84.45 ± 29.03）显著高于阴性组的SLE-DAI（11.30 ± 6.07）及ESR（47.07 ± 26.31）（P < 0.05）。狼疮性肾炎（LN）组ANCA阳性率（46.7%）显著高于非狼疮性肾炎（非LN）的SLE组（21.9%，P < 0.05）。结论 ANCA可作为评价SLE疾病活动及鉴别LN与非LN的一个参考指标。     

B淋巴细胞激活因子及其受体mRNA与系统性红斑狼疮关联性研究

目的:研究建立实时荧光定量(RFQ)-PCR法测定B淋巴细胞激活因子(BLyS)及其受体mRNA含量的方法,探讨其在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)中表达的检测价值。方法:在BLyS及其受体基因保守区设计特异性的引物和荧光探针,用反转录(RT)-PCR扩增目的片段实时检测产物的荧光强度,用所建立的RFQ-PCR方法检测23例SLE患者、23名正常人外周血BLyS及其受体mRNA表达。结果:SLE患者B淋巴细胞成熟抗原(BCMA)、穿膜蛋白活化物(TACI)和B淋巴细胞活化因子受体(BAFF)-RmRNA的表达明显高于正常人(P<0.01),活动期患者的表达高于缓解期(P<0.01),抗ds-DNA抗体阳性和尿蛋白阳性的SLE患者BCMA、TACI和BAFF-RmRNA的表达高于阴性患者(P<0.01)。结论:RFQ-PCR检测BLyS及其受体mRNA含量的方法具有较好的灵敏度和重复性;SLE患者BLyS、TACI和BAFF-RmRNA表达含量升高,提示BLyS、TACI和BAFF-R可能与SLE的发病有关。     

首诊系统性红斑狼疮住院患者ANA、抗ds-DNA与病情活动的研究

目的探讨首诊系统性红斑狼疮(SLE)住院患者的ANA及抗ds-DNA与病情活动的关系。方法400例首诊SLE住院病例根据SLEDAI计分按病情分为基本无活动组、轻度活动组、中度活动组及重度活动组,从ANA和抗ds-DNA的阳性率和水平两方面来分析各组ANA及抗ds-DNA的特点。结果ANA,抗ds-DNA阳性率分别为98.00%,68.50%;各病情活动组间ANA和抗ds-DNA的阳性率和水平差异均无显著性(P>0.05);治疗前后ANA及抗ds-DNA水平差异均有显著性(P<0.05),出院时明显好转。结论ANA及抗ds-DNA水平与SLE病情活动度未见明显关联;ANA及抗ds-DNA水平是评定治疗反应与效果的重要参考指标。     

系统性红斑狼疮患者皮损及血清黏附分子及一氧化氮水平的研究

目的：探讨血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、E-选择素水平及一氧化氮（N0）在皮损表达和血清水平与系统性红斑狼疮（SEE）活动性的关系。方法：①应用ELISA试剂盒测定血清细胞黏附分子。血清NO的检测使用NO硝酸还原酶试剂盒;②采用SABC免疫组化技术检测细胞黏附分子和NO的表达。结果：①血清中可溶性VCAM-1（sVCAM—Ⅰ）、可溶性ICAM-1（sICAM—Ⅰ）、NO水平病例组均较对照组明显升高（P均〈0．01）;病例组活动期较非活动期升高（P〈0．01）。②SLE活动期皮损处血管内皮细胞VCAM-1、ICAM-1、E-选择素和NO的表达与对照组比较．均明显上调（P〈0．05）。③SLE患者sICAM-1水平与SLE疾病活动指数（SLEDAI）有相关性（r=0．590,P=0．026）,NO水平与抗ds—DNA抗体呈正相关（r=0．777,P=0．001）。④血管内皮细胞内各黏附分子、NO表达的强度依次为VCAM-1〉ICAM—1〉NO〉E-选择素。结论：VCAM-1、ICAM-1、E-选择素和NO可能在SLE的发生、发展中起重要的组织损伤作用。