内皮型一氧化氮合酶基因导入对高血压大鼠细胞凋亡的影响

目的研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因导入对高血压大鼠心脏、肾脏细胞凋亡的影响。方法将实验大鼠分为自发性高血压大鼠(SHR)组、AAV-LacZ组和AAV-eNOS组,每组8只,另设8只正常血压(WKY)大鼠为WKY组。AAV-eNOS组经尾静脉注射AAV-eNOS 200μl(含eNOS基因拷贝1×1012),AAV-LacZ组注射AAV-LacZ 200μl,WKY及SHR组大鼠分别经尾静脉给予等量0.1 mol/L PBS。应用原位末端标记(TUNEL)法检测各组大鼠心、肾组织中的细胞凋亡,免疫组织化学方法检测eNOS的表达。结果①SHR组大鼠心肌组织及肾脏组织染色阳性信号明显增多,与WKY组比较具有显著性差异(P<0.05),AAV-eNOS组凋亡阳性信号明显低于SHR组,差异显著(P<0.05)。②SHR组及AAV-LacZ组大鼠心肌组织eNOS表达低于WKY组,差异具有显著性(P<0.05);与SHR组大鼠比较,AAV-eNOS组eNOS表达明显增加,差异具有显著性(P<0.05)。各组大鼠肾脏eNOS蛋白表达未见明显差异。结论 eNOS基因导入可明显抑制心肌及肾脏组织细胞的凋亡,保护靶器官。     

补锌对衰老大鼠睾丸细胞凋亡和一氧化氮合酶的影响

探讨补锌对衰老过程睾丸细胞凋亡的影响及其可能机制。方法选用２４月龄Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠１６只,均分为实验组和对照组,实验组和对照组分别喂养补锌和常锌饲料,喂养４ｗ后,采用原子吸分光光度法测定血清锌含量;采用放射免疫分析法测定血清睾丸酮酮含量;采用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学法显示睾丸细胞一氧化氮合酶活性;采用原位缺口平移技术显示睾丸凋亡细胞数目。结果与对照组相比,老年大鼠补锌４ｗ后,血清锌含量明显升高;     

老年大鼠大脑组织一氧化氮、一氧化氮合酶的变化及神经细胞凋亡研究

目的研究一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)在老年大鼠大脑中的变化及其与神经细胞凋亡的关系. 方法选用5月龄大鼠和30月龄大鼠,利用Griess反应和高压液相技术间接测量大脑NO水平和NOS活性;免疫组化和原位杂交技术分别检测神经元NOS(nNOS)蛋白质水平和nNOS、bcl-2基因水平;末端转移酶标记法原位检测大脑神经细胞凋亡状况. 结果老年大鼠大脑组织NO水平和nNOS活性分别是(2.61±0.10)μmol*L-1和(398.22±21.62)fmol*mg-1*min-1,显著高于青年大鼠的(1.54±0.15)μmol*L-1和(234.38±16.24)fmol*mg-1*min-1.老年大鼠大脑nNOS的基因水平和蛋白表达水平均升高,抗凋亡基因bcl-2水平降低.在老年大鼠大脑质皮检测到散在的凋亡细胞. 结论老年大鼠大脑组织NO水平升高是由于nNOS活性升高所致.nNOS活性的增高部分是由其基因和蛋白水平来决定的.老年大鼠大脑组织NO异常升高可能是导致神经组织损伤进而凋亡的原因之一.     

肝纤维化过程中一氧化氮、一氧化氮合酶水平的动态变化

一氧化氮 (ＮＯ )作为一种新的细胞间信息交换的重要载体 ,广泛参与生理功能的调节和病理过程的发生。肝脏中存在典型的ＮＯ合成通路 ,能催化合成ＮＯ ,而且肝纤维化时ＮＯ水平升高。为进一步研究肝纤维化过程中ＮＯ、一氧化氮合酶(ＮＯＳ)水平的变化规律 ,建立肝纤维化模型 ,动态观察肝纤维化过程中ＮＯ、ＮＯＳ水平的变化。材料与方法一、肝纤维化模型的建立ＳＤ雄性大鼠。体重 180～ 2 2 0 ｇ ,皮下注射 40 %ＣＣｌ4 (橄榄油配制 ) ,0 .2 5ｍｌ/ 10 0 ｇ体重 ,每隔 3ｄ 1次 ,共 15次。对照组则用同样方法注射等量橄榄油。二、ＮＯ、ＮＯ…     

一氧化氮及一氧化氮合酶与骨质疏松

一氧化氮（NO）是体内重要的信号分子和效应分子，一氧化氮合酶（NOS）是NO合成的限速酶。在骨组织中，由骨细胞生产的NO可通过自分泌或旁分泌或旁分泌方式影响骨重建。病理条件下，NO异常分泌可使骨形成与骨吸收失平衡，这与骨质疏松的发病密切相关，因此药物调节NO量成为探索治疗骨质疏松症的新途径之一。     

一氧化氮合酶表达与肝癌增殖凋亡的关系研究

目的 研究一氧化氮合酶（ＮＯＳ）表达与肝癌增殖凋亡的关系。方法 用免疫组化的方法对２１世纪肝癌及癌旁组织中的诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达进行原位检测和观察,并与脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）的凋亡细胞进行比较。结果 癌旁组织ｉＮＯＳ阳性,非癌组织多阴性或弥浊弱阳性;ｉＮＯＳ在周边的癌组织及侵入纤维组织中的癌细胞阳性,癌组织核心多阴性或弥温     

幽门螺杆菌感染时胃黏膜一氧化氮合酶基因异常表达与细胞凋亡

幽门螺杆菌(Ｈｐ)是胃癌发生的高危因素之一,究其机制尚不清楚。一氧化氮(ＮＯ)是机体内的一种特殊效应分子,具有第二信使分子和靶细胞毒功能。当ＮＯ过量产生可诱发基因突变、细胞凋亡或肿瘤的发生[1]。本研究旨在探讨Ｈｐ感染状态下胃黏膜组织内一氧化氮合酶(ＮＯＳ)基因表达、ＮＯ含量改变与细胞凋亡增殖变化的意义。一、对象与方法1.对象:经胃镜及病理证实为慢性活动性胃炎患者28例,其中Ｈｐ感染阳性16例,年龄24～64岁;Ｈｐ阴性12例,年龄19～56岁。正常对照组8例。内镜下于胃窦大和小弯侧、前和后壁分别活检2～3块黏膜组织行Ｈｐ病理检…     

一氧化氮及一氧化氮合酶与肝病

一氧化氮（ＮＯ）是普遍存在于脊椎动物各种细胞中的一种生物介质，是细胞间信息传递的重要调节因子，作为第二信使和神经递质起着各种不同的功能。ＮＯ参与机体生理及病理过程，其对疾病发生及发展的影响是近年来研究的热点。现就有关ＮＯ及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在肝病...     

当归多糖对糖尿病大鼠肾组织抗氧化能力及NOS、NO水平的影响

目的探讨当归多糖的抗糖尿病(DM)机制及对DM大鼠肾脏的保护作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(60 mg/kg)的方法建立大鼠DM模型,灌胃给予模型大鼠当归多糖(60、120、240 mg/kg),1次/d;28 d后,检测当归多糖对模型大鼠体重、糖耐量、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素敏感指数(ISI)、肾组织抗氧化能力及一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)水平的影响。结果当归多糖可以增加DM大鼠体重,并且能够改善对葡萄糖的耐受能力;当归多糖可以降低FBG水平,增加FINS水平,升高ISI;当归多糖也可以显著降低模型大鼠肾组织中丙二醛(MDA)含量、升高超氧化物歧化酶(SOD)活性;当归多糖还可以显著性降低模型大鼠肾组织中NOS、NO水平。结论当归多糖具有抗DM及保护DM大鼠肾脏损伤的作用,该作用与增加抗氧化能力及抑制NOS、NO水平有关。     

一氧化氮及一氧化氮合酶与骨质疏松

一氧化氮(NO)是体内重要的信号分子和效应分子,一氧化氮合酶(NOS)是NO合成的限速酶。在骨组织中,由骨细胞产生的NO可通过自分泌或旁分泌方式影响骨重建。病理条件下,NO异常分泌可使骨形成与骨吸收失平衡,这与骨质疏松的发病密切相关,因此药物调节NO量成为探索治疗骨质疏松症的新途经之一。     

肝病患者一氧化氮合酶表达异常及其临床意义

目的 探讨肝病患者抗氧化能力及一氧化氮合酶（NOS） 表达的临床价值。方法 收集26例急性肝炎（AH）、36例慢性肝炎（CH）、13例肝炎后肝硬化（LC）和23例原发性肝癌（HCC）患者的血清,分别检测其总抗氧化能力（TAO）、NOS浓度及一氧化氮（NO）水平,分析它们在肝脏疾病中的改变机制。结果 患者血清TAO在AH、CH中异常率为80％,在LC和HCC为50％;血清中NOS活性在肝病患者中的异常率在70％ 左右;NO水平在AH、CH和LC中异常率为70％,HCC组为48％。AH组、CH组TAO平均水平明显高于对照组,但LC和HCC组的差异不明显;肝病患者NO和NOS平均浓度显著高于对照组,但HCC患者NOS和NO平均浓度均低于AH、CH和LC组患者。结论 肝病患者血清NOS水平与NO浓度呈高度正相关,NO增加可能 对肝细胞起保护作用。     

Temporal expression of hepatic inducible nitric oxide synthase in liver cirrhosis

AIM: Nitric oxide (NO) has been implicated in the pathogenesis of liver cirrhosis. We have found inducible nitric oxide synthase (iNOS) can be induced in hepatocytes of cirrhotic liver. This study further investigated the temporal expression and activity of hepatic iNOS in cirrhosis development. METHODS: Cirrhosis was induced in rats by chronic bile duet ligatjon (BDL). At different time points after the operation, samples were collected to examine NO concentration, liver function, and morphological changes. Hepatocytes were isolated for determination of iNOS mRNA, protein and enzymatic activity. RESULTS: Histological examination showed early cirrhosis 1-2 wk after BDL, with advanced cirrhosis at 3-4 wk. Bilirubin increased dramatically 3 d after BDL, but decreased by 47% on d 14. Three weeks after BDL, it elevated again. Systemic NO concentration did not increase significantly until 4 wk after BDL, when ascites developed. Hepatocyte iNOS mRNA expression was identified 3 d after BDL, and enhanced with time to 3 wk, but reduced thereafter. iNOS protein showed a similar pattern to mRNA expression. iNOS activity decreased from d 3 to d 7, but increased again thereafter till d 21. CONCLUSION: Hepatic iNOS can be induced in the early stage, which increases with time as cirrhosis develops. lts enzymatic activity is significantly correlated with protein expression and histological alterations of the liver, but not with systemic NO levels, nor with absolute values of liver function markers.     

一氧化氮及其合酶在哮喘发病机制中的作用

探讨一氧化氮及其合酶在哮喘发病机制中的作用。方法 采用哮喘豚鼠模型，将豚鼠分为４组；１．哮喘组，用１０％卵白蛋白腹腔注射１ｍｌ致敏，２周后用１％卵白蛋白超声雾化吸入致其哮喘发作．２；肾上腺皮质激素预防组；诱喘同哮喘组，在每次诱喘前腹腔滴注地塞米松０．５ｍｇ／ｋｇ。３．硝基精氨酸甲酯预防组；诱喘同哮喘组，每次诱喘产腹腔注射ＬＮＮＡ０．４ｍｇ／ｋｇ。４．正常对照组；用生理盐水代替诱喘剂。每组分别测定其     

肝硬化大鼠食管一氧化氮合酶分布定位研究

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）在肝硬化食管静脉曲张及血流动力学改变中的作用。方法应用还原型辅酶Ⅱ－黄递酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组化染色观察ＣＣＩ４所致肝硬化大鼠食管下段一氧化氮合酶（ＮＯＳ）分布；应用荧光法检测大鼠食管组织匀浆及血清中ＮＯ含量；应用５７Ｃｏ标记微球测定大鼠血流动力学指标。结果肝硬化鼠食管粘膜及粘膜下血管内皮ＮＯＳ呈强阳性反应，而正常鼠则呈弱阳性或阴性反应；肝硬化大鼠食管及血清中ＮＯ含量显著升高。且全部出现门脉高压和高动力循环状态。结论ＮＯ在肝硬化大鼠食管静脉曲张及血流动力学改变中可能起重要作用。     

硫化氢供体对实验性门静脉高压及内源性一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的探讨硫化氢供体一硫氢化钠（sodium hydrosulfide，NaHS）对大鼠门静脉高压及内源性一氧化氮（nitric monoxide，NO）／一氧化氮合酶（nitricoxide synthase，NOS）体系的影响。方法将30只健康成年雄性sD大鼠随机分为4组：部分门静脉结扎（partly portal vein ligation，PPVL）组（10只）、PPVL＋NariS组（10只）、假手术组（5只）和正常组（5只）。PPVL组和PPVL＋NaHS组行部分门静脉结扎术建立门静脉高压的动物模型。模型制作14天后，分别测定各组大鼠的门静脉压力（PVP）和平均动脉压力（MAP）；采用免疫组织化学检测大鼠肝细胞中一氧化氮合酶（NOS2、NOSS）的蛋白水平表达情况，RT-PCR方法检测大鼠肝组织中NOS2和NOS3的mRNA水平的表达情况。结果术后14d，假手术组和正常组比较，各项检测指标无显著差异，NOS2蛋白及mR-NA水平未见明显表达；NOS3蛋白及mRNA表达水平无显著差异。PPVL组与假手术组比较，PVP明显升高（P〈0．05），MAP则下降（P〈0．05），PPVL＋NaHS组与PPVL组相比较，PVP进一步升高（P〈0．05），MAP则进一步降低（P〈0．05）。PPVL组和PPVL＋NaHS组NOS2在蛋白及mRNA水平均有表达，且后者NOS2蛋白及mRNA表达水平减少（P〈0．05）。4组之间NOS3的蛋白及mRNA表达水平则无显著差异。结论H2S参与了门静脉高压的形成与发展，NaHS可以加重门静脉高压，其作用可能与NO／NOS2体系有关。．     

胃食管反流病患者食管NOS表达及血清NO含量变化的临床意义

目的探讨一氧化氮(NO)在胃食管反流病(GERD)发病机制中的作用.方法应用PC polygraf HR高分辨多通道测压系统检测GERD患者的食管下段括约肌压力(LESP)、食管下段括约肌长度(LESL)及食管远端蠕动幅度等动力参数;应用Digitrapper MK Ⅲ动态食管PH监测仪检测其24小时食管内PH各项参数;应用NADPH-d组化染色观察食管一氧化氮合酶(NOS)表达;应用硝酸还原酶法测定血清NO含量.结果GERD患者的LESP及LESL显著低于对照组(P＜0.01);前者的食管下段蠕动幅度明显低于后者(P＜0.01);前者的食管内24小时PH值明显高于后者;患者食管粘膜NOS呈强阳性反应;其血清NO含量也显著高于对照组.结论内源性NO可能参与GERD的致病机理.     

BXSB小鼠肾组织诱生型一氧化氮合酶的异常表达及甲泼尼龙干预效应

目的探讨诱生型一氧化氮合酶(iNOS)是否参与介导BXSB小鼠狼疮肾炎(LN)及甲泼尼龙(MPS)是否可通过影响iNOS表达而缓解LN。方法用MPS对BXSB自发狼疮小鼠进行体内实验,利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术研究了MPS对狼疮小鼠肾脏iNOS表达的影响,并观察了狼疮小鼠MPS治疗前后24h尿蛋白和NO3-/NO2-排泄量。结果BXSB狼疮小鼠肾组织检测到了iNOSmRNA的表达,而BALB/C小鼠未见表达;免疫组织化学示iNOS表达于BXSB小鼠肾小管上皮细胞、血管内皮细胞、肾间质及肾小球浸润的炎症细胞胞质内。MPS治疗组BXSB狼疮小鼠肾组织iNOSmRNA表达量显著低于未治疗组(P<0.01);治疗组24h尿蛋白及NO3-/NO2-排泄量显著低于未治疗组(P<0.01,P<0.05)。结论iNOS及其合成的一氧化氮(NO)可能参与介导了LN。MPS可能通过抑制肾组织iNOS的表达缓解LN。     

Thioacetamide-induced liver regeneration involves the expression of cyclooxygenase 2 and nitric oxide synthase 2 in hepatocytes

BACKGROUND/AIMS: A regeneration process intended to restore organ function follows liver hepatotoxicity induced by a necrogenic dose of thioacetamide (TAM). METHODS: The expression of genes related to inflammation such as nitric oxide synthase-2 (NOS-2) and cyclooxygenase-2 (COX-2) has been analyzed in the course of the regenerative response, using NOS-2 KO mice or animals treated with selective inhibitors of COX-2. RESULTS: All animals lacking both activities survived to the hepatotoxic administration. However, animals deficient for NOS-2 exhibited more severe organ damage in view of the levels of hepatic serum markers of function, as well as an attenuated activation of NF-kappaB. The levels of C/EBPs were determined as markers of hepatocyte de-differentiation and regeneration, and the expression of COX-2 in TAM treated animals was concomitant with a decrease in C/EBP-alpha level. Analysis of cyclin D1, E and PCNA correlated with hepatocytes entering into the S phase of cell cycle by the effect of TAM. CONCLUSIONS: These data indicate that hepatocytes from TAM-treated mice express NOS-2 and COX-2 proteins and initiate the regeneration process that follows acute liver injury. However, the absence of NO delays hepatocyte regeneration, whereas COX-2-inhibition appears to decrease liver damage.     

一氧化氮在ConA诱发小鼠急性肝损害中的作用

目的：观察一氧化氮（NO）在刀豆素（ConA）诱发急性小鼠肝损害中的作用。方法：25只昆明小鼠随机分为5组，ConA(40mg/kg)自小鼠尾静脉注入复制急性肝损害，为ConA组；应用ConA前半小时，给予NO合成的抑制剂（L-NAME，5mg/只），为LN组；应用ConA前半小时，给予NO合成底物（L-精氮酸），为L-精氮酸组；单独给予L-NAME(5mg/只)者为L-NAME组；对照组只给予尾静脉注射生理盐水。各组8小时后取血分别测定丙氮酸转氮酶（ALT），取肝组织测定亚硝酸盐（NO2^-）和丙二醛（MDA）含量。结果：ConA造成肝损害后，肝组织中亚硝酸盐（NO2^-）较对照组显著升高；以L-NAME抑制NO合成，肝组织中NO2^-含量下降，肝细胞损害反而加重，且肝组织MDA增加，肝窦内血细胞淤集加重；L-精氮酸组未见明显的肝脏保护作用。结论：在ConA性肝损害中，NO通过消除氧自由基和抑制血细胞在肝窦内淤而发挥一定的保护作用。