川芎嗪对体外培养的黑素细胞的抑制作用

目的观察川芎嗪(TMP)对体外培养的黑素细胞的抑制作用.方法采用MTT法测定细胞增殖情况;NaOH裂解法测定黑素合成;Takahashi法测定酪氨酸酶含量;用透射电镜观察黑素小体的生成.结果川芎嗪对黑素细胞的增殖有抑制作用,能使细胞数明显减少(P＜0.05),并能使黑素合成显著下降(P＜0.01),使酪氨酸酶活性逐渐减弱(P＜0.01);透射电镜观察显示,加川芎嗪后黑素小体明显减少.结论川芎嗪能抑制黑素细胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性,这可能是临床应用中药川芎治疗皮肤色素性疾病的机制.     

阿司匹林对正常人表皮黑素细胞系PIG1细胞黑素生成的影响

目的:观察阿司匹林对体外培养的正常人表皮黑素细胞系PI G1细胞的活力、黑素生成及酪氨酸酶活性的影响。方法:用不同浓度的阿司匹林处理PIG1细胞72h,CCK-8比色法测定阿司匹林对PIG1细胞活力的影响;光学显微镜观察细胞形态学变化;氢氧化钠裂解法测定黑素的含量;体外多巴氧化反应法测定酪氨酸酶活性的变化。结果:阿司匹林浓度小于或者等于500μmol/L时无明显细胞毒性;浓度大于或者等于125μmol/L时以剂量依赖方式抑制黑素生成,差异有统计学意义(P<0.05);黑素细胞酪氨酸酶活性无显著性变化(P>0.05)。结论:阿司匹林抑制PIG1细胞的黑素生成,可能应用于色素增多性皮肤病。     

氨甲环酸对中波紫外线照射后黑素细胞影响的研究

目的:探讨氨甲环酸对中波紫外线照射后黑素细胞增殖及酪氨酸酶代谢的影响。方法:设立紫外线照射组和非照射组,以不同浓度的氨甲环酸作用于黑素细胞,cck-8法测定黑素细胞增殖;多巴氧化方法测定酪氨酸酶活性,RT-PCR方法测定酪氨酸酶mRNA表达水平。结果:氨甲环酸对两组黑素细胞的增殖均无明显抑制作用(P0.05);而对酪氨酸酶活性和酪氨酸酶的mRNA表达有抑制作用(P0.05),两组结果比较无明显差异;结论:氨甲环酸对黑素细胞的酪氨酸酶的抑制作用与中波紫外线照射无直接关系。     

川芎嗪对中波紫外线诱导黑素细胞黑素生成的影响

目的:研究川芎嗪(TMP)对不同剂量中波紫外线(UVB)诱导正常人黑素细胞黑素合成的影响,并初步探讨其机理。方法:常规分离培养正常人黑素细胞,分别用30mJ/cm2、90mJ/cm2的UVB照射细胞,然后加入100μg/ml、300μg/ml、600μg/ml的TMP孵育至72h,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性;NaOH裂解法测定黑素含量。结果:30mJ/cm2的UVB能诱导黑素细胞增殖,加强酪氨酸酶活性,促进黑素生成,TMP能显著抑制该效应,并呈剂量依赖性;90mJ/cm2的UVB对黑素细胞产生明显的细胞毒作用,细胞增殖下降,黑素合成减少,TMP则能减轻其细胞毒作用,并也表现为剂量依赖性,以600μg/ml的TMP作用最为显著,差异有统计学意义。结论:TMP不但能抑制低剂量UVB照射诱导的黑素细胞增殖和黑素合成,而且还能减轻高剂量UVB照射对黑素细胞的细胞毒作用,对黑素细胞起一定的光保护作用。     

含己烯雌酚血清对体外培养正常人黑素细胞的作用

目的:观察不同浓度含己烯雌酚(DES)血清对体外培养人黑素细胞的增殖和酪氨酸酶活性的影响。方法:采用MTT法测定黑素细胞增殖情况;参考Nakajima M方法测定酪氨酸酶活性;NaOH溶解法测定黑素含量。结果:己烯雌酚血清不同剂量对人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性均有促进作用。结论:己烯雌酚能促进体外培养人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性,对相关皮肤色素性疾病可能有一定的治疗作用。     

含己烯雌酚血清对体外培养正常人黑素细胞的作用

目的:观察不同浓度含己烯雌酚(DES)血清对体外培养人黑素细胞的增殖和酪氨酸酶活性的影响。方法:采用MTT法测定黑素细胞增殖情况;参考Nakajima M方法测定酪氨酸酶活性;NaOH溶解法测定黑素含量。结果:己烯雌酚血清不同剂量对人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性均有促进作用。结论:己烯雌酚能促进体外培养人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性,对相关皮肤色素性疾病可能有一定的治疗作用。     

Q-开关激光对黄褐斑动物模型黑素细胞黑素合成的影响

目的：观察Q开关激光不同能量照射对黄褐斑动物模型黑素细胞的增殖、黑素生成及酪氨酸酶活性的影响。方法：用Q开关激光不同能量照射黄褐斑动物模型,取表皮黑素细胞进行细胞培养,采用MTT法测定细胞活力的影响;氢氧化钠裂解法测定黑素的含量;体外多巴氧化反应法测定酪氨酸活性的变化;光学显微镜观察细胞形态学变化。结果：除高能高频组外各能量密度和频率组激光照射后即刻黑素细胞形态无明显变化。第5次治疗后高能量密度照射组明显可见黑素细胞数目减少、体积变小、树突数量减少,长度缩短。而低能量高频率照射组仅黑素细胞体积变小,树突数量减少,长度缩短。与术前比较,低能量低频率照射组黑素细胞增殖、黑素含量、酪氨酸活性无显著差异,但其他三组显著性下降。然而,3周术后黑素细胞增殖、黑素含量、酪氨酸活性增强趋势,有显著性意义（P〈0．05）。结论：当激光能量和频率达到一定阈值时能抑制黑素细胞的合成和酪氨酸活性,而这种损伤在一定范围内是可逆性的。从而为临床应用Q开关Nd：YAG 1064nm激光治疗色素性疾病提供了实验依据。     

芦荟苦素对色素化皮肤类似物模型中黑素细胞的影响

目的 观察芦荟苦素、熊果苷及茶多酚对色素化皮肤类似物模型中黑素细胞的影响.方法 体外构建色素化皮肤类似物模型,检测芦荟苦素、熊果苷及茶多酚作用于此模型后对细胞形态、黑素细胞酪氨酸酶活性以及黑素合成的影响.结果 在色素化皮肤类似物模型中3种退色剂对黑素细胞酪氨酸酶活性有明显抑制作用,可显著减少黑素生成,其中以茶多酚的抑制作用最强,芦荟苦素次之.但茶多酚对细胞的毒性最大,熊果苷和芦荟苦素毒性均较小.结论 3种退色剂对色素化皮肤类似物中黑素细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成均呈浓度依赖性抑制,而茶多酚则显示出较大的细胞毒性(P＜0.05).芦荟苦素所表现出的对酪氨酸酶和黑素的合成有较强的抑制作用及对细胞较低的毒性作用,有可能成为一种比较安全的退色剂.     

白介素-1对培养人表皮黑素细胞增殖及黑素合成的影响研究

目的:建立正常人表皮黑素细胞体外培养体系,观察不同浓度的白介素-1α,白介素-1β对体外培养正常人黑素细胞的细胞增殖及黑素合成的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定白介素-1α及白介素-1β对黑素细胞增值的影响,NaOH裂解法测定黑素生成量,流式细胞仪检测黑素细胞的凋亡率。结果:白介素-1α及白介素-1β对黑素细胞活力有抑制作用,能使细胞增殖能力降低,黑素合成减少,增加黑素细胞的凋亡率。结论:白介素-1α及白介素-1β对体外培养的黑素细胞增殖及黑素生成都有抑制作用,这为临床应用白介素-1α及白介素-1β治疗色素性疾病提供了实验依据。     

莫诺苷对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响

目的:探讨莫诺苷对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响。方法:将黑素瘤细胞(A375)与角质形成细胞(Hacat)以1:2比例建立共培养模型,以不同浓度莫诺苷进行干预,通过MTT法测定细胞增殖率;NaOH裂解法测定黑素含量;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性。结果:与阴性对照组相比,10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L莫诺苷均对细胞增殖无影响(P>0.05),10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L莫诺苷均对共培养体系酪氨酸酶活性和黑素合成有极显著差异(P<0.01);与阳性对照药熊果苷组相比,10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L莫诺苷均对共培养体系酪氨酸酶活性和黑素合成有差异(P<0.05或P<0.01)。结论:莫诺苷可能通过抑制酪氨酸酶活性来抑制共培养模型的黑素合成。     

TRP-1在黑素细胞中作用的初步研究

目的：构建TRP-1反义核酸、转染黑素细胞并观察细胞生长和黑素代谢功能的改变，探讨TRP-1在黑素细胞中的作用。方法：将TRP-1反义核酸真核表达载体转染黑素细胞，以测定的MTT结果绘制细胞生长曲线：测定TRP-1反义核酸转染黑素细胞后细胞内黑素含量的变化。结果：从生长曲线可以看出，TRP-1反义核酸转染的黑素细胞增殖速度明显低于对照细胞；黑素含量明显降低。结论：TRP-1反义核酸能显著抑制黑素细胞生长并降低黑素含量，表明TRP-1在维持黑素细胞正常的生长和黑素代谢中发挥重要作用。     

Hypopigmentation in burns is associated with alterations in the architecture of the skin and the dendricity of the melanocytes

Hypopigmentation is a major problem in deep dermal burns. To date, no standard treatment is available for the post burn hypopigmentation disorder. Therefore, understanding the molecular and cellular events are of benefit for therapeutic intervention. Hematoxylin and Eosin (H&E) and Fontana Masson (FM) staining of post burn hypopigmented skin (PBHS) showed an altered architectural pattern in cellular organization, cornified layer and melanin pigment as compared to the normal skin. This was confirmed by immunohistochemistry (IHC) analysis of PBHS samples using specific marker cytokeratin 5 (CK5) for keratinocytes and melanocortin 1 receptor (MCIR) for melanocytes. Validation of these observations was performed by IHC using proliferation and differentiation markers, Ki67 and Loricrin respectively and the melanocyte specific marker tyrosinase related protein 1 (TRP1). Taking a cue from the IHC study, the interaction of keratinocytes and melanocytes was studied by developing a co-culture model from PBHS and normal skin. Culture data exhibited a change of dendritic structure, reduced proliferation rate, faulty melanin synthesis and transfer of melanin from melanocytes to keratinocytes in PBHS samples. To the best of our knowledge, this is the first study showing structural and functional aberrations of melanocytes and keratinocytes, as a potential cause of hypopigmentation in burned patients. Our study, therefore, provides valuable insight for the basis of hypopigmentation in post burn patients, which may pave the way for clinical intervention in the future.     

维A酸在细胞和基因水平调控黑素表达的研究

目的探讨维A酸治疗皮肤色斑的作用机制。方法应用不同浓度的维A酸作用于B16F10黑素瘤细胞及正常人黑素细胞,观察对酪氨酸酶mRNA的表达、酪氨酸酶活性、黑素含量及黑素细胞增殖率的影响。结果维A酸的作用浓度为100μmol／L时,黑素细胞酪氨酸酶mRNA表达下调均值为30．13％;当浓度为500μmol／L以上时,可使酪氨酸酶活性降低82．79％,并随着浓度的增加作用越明显;而对黑素含量的降低则需要更高的浓度（1000μmol／L）;同时,还有促进黑素细胞增殖的作用。对照组氢醌对酪氨酸酶mRNA的表达无明显影响,对色素细胞有抑制和毒性作用。结论维A酸能够抑制黑素产生,是通过下调酪氨酸酶的表达和活性来完成。     

胶原三肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的：研究胶原三肽对B16黑素瘤细胞的影响,探讨其美白作用与机制。方法：本文以B16黑素瘤细胞作为受试细胞,以浓度为10μg/ml曲酸作为阳性对照,研究胶原三肽对其增殖、细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。结果：胶原三肽浓度范围为50～400μg/ml时对B16黑素瘤细胞增殖无明显影响,但均能显著抑制黑色素合成。且400μg/ml胶原三肽抑制酪氨酸酶活性具有极显著性。结论：胶原三肽具有一定的美白功能。     

杏仁油对黑色素瘤细胞B16细胞增殖及黑素合成的影响

目的探讨杏仁油对小鼠黑色素瘤细胞B16增殖及黑素合成的影响。方法采用MTT法测定杏仁油对小鼠黑色素瘤细胞B16增殖的影响,L-dopa氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素合成。结果杏仁油浓度在0.1～100μg/mL时对小鼠黑色素瘤细胞B16增殖无影响（P〉0.05）,对酪氨酸酶活性和黑素含量均呈浓度依赖性抑制,均具有显著性抑制作用（P〈0.05）。结论杏仁油对黑色素瘤细胞B16酪氨酸酶活性和黑素生成有较强的剂量相关性抑制作用。