电针足三里对迟发型过敏反应小鼠炎症反应的影响

目的观察电针干预对卵白蛋白(OVA)诱导的迟发型超敏反应(DTH)模型小鼠的作用及炎症反应的影响。方法将32只小鼠随机分为对照组(Contro1)、模型组(OVA-DTH)、电针治疗组(DTH+EA)、假电针治疗组(DTH+Sham),每组8只。电针治疗组予电针"足三里"穴,假电针组在"足三里"穴下0.5cm处的非穴位施行电针。测量小鼠足垫厚度;HE染色检测炎性细胞浸润;ELISA法检测血清IgG、IgE及足垫组织匀浆上清炎性因子(IFN-γ、TNF-α、IL-4和IL-5)水平。结果电针"足三里"缓解DTH病理进程,减轻足垫肿胀,减少炎症细胞浸润,抑制IgG和IgE分泌,降低组织匀浆液IFN-γ、TNF-α含量。结论电针"足三里"减轻了迟发型过敏反应的炎症反应,可作为治疗过敏性炎症的有效疗法。     

沙棘油对小鼠变应性接触性皮炎的治疗作用

目的研究沙棘油对小鼠变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)的治疗作用。方法60只ICR小鼠随机分为6组:空白对照组、模型对照组、高中低3个剂量沙棘油外用组(100%,50%和25%)及阳性药对照组(复方醋酸地塞米松乳膏),每组10只。以2,4-二硝基氯苯(DNCB)致敏和激发建立小鼠ACD模型,耳部皮损情况评分作为模型建立成功与否的指标,在激发后48 h测定各试验组小鼠的耳廓肿胀度和脾指数,并以苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察小鼠耳部皮肤炎性细胞浸润等病理变化情况。结果小鼠耳肿胀度测定结果表明沙棘油高剂量组(9 m L/kg,外用)可明显抑制DNCB诱发的小鼠耳廓肿胀,与模型组比较差异有显著性(P0.01),与阳性对照组比较差异无显著性(P0.05),小鼠脾指数测定结果表明沙棘油各剂量组可能通过促进免疫器官发育来发挥一定的免疫调节作用。病理学检查结果表明,沙棘油各剂量组与模型组比较耳组织表皮增厚程度减小,表皮及真皮水肿明显减轻,淋巴细胞浸润明显减少,真皮血管扩张充血现象缓解,抑制炎性细胞浸润。结论沙棘油对DNCB诱发的小鼠ACD有明显的治疗作用,其作用机制有待进一步考察。     

C3在迟发型超敏反应中的作用

目的 探讨补体成分3（C3）在迟发型超敏反应（DTH）中的作用。方法用卵白蛋白（OVA）诱导C3基因敲除（C3^-/-）和野生型（C3^＋/＋）小鼠足垫部位的DTH，测量足垫厚度的变化，并对反应部位组织进行HE和免疫组化染色检测。分离小鼠脾脏T淋巴细胞，用巨噬细胞作为抗原提呈细胞，在体外分别用丝裂原和特异性抗原刺激，用^3H-TdR掺入法评价T淋巴细胞的增殖活性。结果OVA诱导足垫DTH后，C3^-/-小鼠足垫厚度和局部浸润单个核细胞的数量都显著低于C3^＋/＋小鼠的，其中浸润的单个核细胞主要为CD4^＋T淋巴细胞。2种小鼠的T淋巴细胞对丝裂原刺激的反应相似，而已致敏C3^-/-小鼠脾脏T细胞对特异性抗原再次刺激后的增殖反应显著低于C3^＋/＋小鼠。结论C3缺陷明显影响DTH应答，提示C3在DTH中起了重要作用.     

黄芪甲苷抑制迟发型超敏反应的作用

目的 考察黄芪甲苷(AS-IV)对迟发型超敏反应的影响.方法 应用2,4-二硝基氯苯(DNCB)造成小鼠变态反应性接触性皮炎(ACD)模型,分别考察(AS-IV)诱导相和效应相给药对耳廓肿胀的影响,并进行耳病理组织学检查;ELISA方法 检测小鼠血清IFN-γ水平.MTT法检测ConA诱导的脾细胞增殖.结果 (AS-IV)诱导相给药可明显抑制ACD小鼠耳肿胀,而效应相给药未观察到明显效应;病理组织学结果 显示(AS-IV)诱导相给药可减轻模型小鼠局部水肿及血管扩张,减少淋巴细胞浸润;(AS-IV)诱导相给药明显降低血清IFN-γ水平;离体实验未发现(AS-IV)对ConA诱导的脾细胞增殖有明显影响.结论 (AS-IV)诱导相给药有抑制迟发型超敏反应的作用,该作用可能与抑制IFN-γ有关.     

皮炎冲剂对变应性接触性皮炎模型小鼠的治疗作用机制研究

目的探讨皮炎冲剂对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的作用及机制。方法 60只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、醋酸地塞米松组,皮炎冲剂大、中、小剂量组(51. 8%、25. 9%、2. 95%),每组10只,以2,4-二硝基氯苯(DNCB)致敏和激敏建立小鼠ACD模型,在激敏后24 h采用酶联免疫法(ELISA)方法检测血清中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平的变化,测定各组小鼠的耳廓肿胀度和脾指数、胸腺指数,并以苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠耳部皮肤炎性细胞浸润等病理变化情况,并进行炎细胞计数。结果与模型对照组比较,皮炎冲剂中、高剂量组IFN-γ、IFN-γ/IL-4比值显著降低,IL-4水平显著升高(P 0. 05,P0. 01);与模型对照组比较,皮炎冲剂大剂量组和中剂量组小鼠耳肿胀度、胸腺指数、脾指数均降低(P 0. 05,P0. 01); HE显示,与模型对照组比较,各给药组小鼠表皮增厚程度减轻,伴轻微或轻度角化过度,个别细胞水肿,血管周围轻度炎细胞浸润,中、大剂量炎细胞数均显著降低(P 0. 01)。结论皮炎冲剂对小鼠ACD具有明显的治疗作用,其作用机制可能与皮炎洗剂调节Th1、Th2型细胞因子有关。     

变应性接触性皮炎小鼠模型评价指标探讨

目的 探讨变应性接触性皮炎小鼠模型的评价指标.方法 首先用DNFB致敏小鼠,分别于激发后24、48、72 h及96 h检测激发后耳肿度、双侧耳重量之差、组织切片显微镜下耳双面距离之差、组织切片中浸润细胞种类及数量、双侧耳引流淋巴结细胞数目及淋巴细胞增殖活性,观察各指标与激发后耳肿度之间的一致性.结果 与激发后耳肿度一样,其他各指标均显示出一致的随时间变化趋势,即:24 h及48 h时炎症程度达到高峰,随后逐渐减弱,至96 h时已减弱至一半左右.结论 除激发后耳肿度之外,激发后双侧耳重量之差、组织切片显微镜下耳双面距离、组织中炎症细胞浸润程度及局部引流淋巴结中淋巴细胞的增殖活性等亦可反映炎症的程度,且更客观.从而丰富了该模型的评价指标,便于我们从多方面客观地评价药物的干预作用.     

C3在迟发型超敏反应中的作用

目的 探讨补体成分3(C3)在迟发型超敏反应(DTH)中的作用。方法 用卵白蛋白(OVA)诱导C3基因敲除(C3^-/-)和野生型(C3^+/+)小鼠足垫部位的DTH,测量足垫厚度的变化,并对反应部位组织进行HE和免疫组化染色检测。分离小鼠脾脏T淋巴细胞,用巨噬细胞作为抗原提呈细胞,在体外分别用丝裂原和特异性抗原刺激,用³H-TdR掺入法评价T淋巴细胞的增殖活性。结果 OVA诱导足垫DTH后,C3^-/-小鼠足垫厚度和局部浸润单个核细胞的数量都显著低于C3^+/+小鼠的,其中浸润的单个核细胞主要为CD4⁺ T淋巴细胞。2种小鼠的T淋巴细胞对丝裂原刺激的反应相似,而已致敏C3^-/-小鼠脾脏T细胞对特异性抗原再次刺激后的增殖反应显著低于C3^+/+小鼠。结论 C3缺陷明显影响DTH应答,提示C3在DTH中起了重要作用。     

地塞米松对哮喘小鼠Th17细胞因子IL-17表达的影响

目的 初步探讨地塞米松对哮喘小鼠肺组织中Th17细胞因子IL-17的影响及其机制.方法 采用卵清蛋白致敏方法建立支气管哮喘小鼠模型,Balb/c小鼠30只随机分为对照组、哮喘组、地塞米松治疗组各10只.采用EUSA检测小鼠肺泡灌洗液、IL-17水平;HE染色评价各组小鼠气道炎症程度;RT-PCR检测肺组织IL-17、RORγtmRNA表达水平.免疫组织化学方法检测肺组织RoRγt脚蛋白表达水平.结果 哮喘组小鼠肺组织RORγt、IL-17mRNA和蛋白水平均高于对照组(P<0.01),地塞米松治疗组RORγt、IL-17mRNA和蛋白水平均低于哮喘组(P<0.05).结论 地塞米松可抑制哮喘小鼠肺组织RORγt表达,阻止Th17的分化,从而减少IL-17的分泌,减轻哮喘气道炎症反应.     

卵白蛋白诱导的急性过敏性腹泻小鼠结肠组织的病理学特征

目的 建立急性过敏性腹泻模型,观察结肠组织的病理学特征.方法 5～6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组;用卵白蛋白（OVA）和完全弗氏佐剂对实验组小鼠隔1周2次腋窝皮下预致敏,第2次致敏1周后2组小鼠均每隔1d给予等量溶解在灭菌PBS的OVA灌胃;于第10次灌胃后处死小鼠,取血分离血清测OVA-IgE,取结肠近端组织行HE染色观察肠组织病理改变并在油镜下计数嗜酸性粒细胞.结果 与对照组相比,实验组小鼠结肠黏膜充血水肿,上皮排列不规则,腺区有大量炎细胞浸润,固有层可见大量嗜酸性粒细胞,血清OVA-IgE水平显著升高.结论 OVA 可诱导过敏性腹泻炎症,结肠黏膜组织以充血水肿和大量嗜酸性粒细胞浸润为特征.     

黄柏对小鼠DTH及其体内几种细胞因子的影响

为进一步探讨黄柏免疫抑制作用 ,我们以二硝基氟苯 (DNFB)所致迟发型超敏反应 (DTH)小鼠模型观察黄柏对小鼠DTH及其体内几种重要细胞因子的影响。采用 1%DNFB腹部致敏、耳廓发敏的方法建立DTH小鼠模型 ,以巨噬细胞 (MΦ)亚硝基 (NO )释放法测定血清γ干扰素 (IFN γ)水平 ,胸腺细胞法检测白细胞介素 1(IL 1)水平 ,丝裂原激活的淋巴母细胞法检测白细胞介素 2(IL 2 )水平 ,L92 9细胞结晶紫染色法测定肿瘤坏死因子α(TNF α)水平。结果发现黄柏可抑制DNFB诱导的小鼠DTH ,降低其血清IFN γ水平 ,抑制其腹腔MΦ产生IL 1及TNF α ,抑制其脾细胞产生IL 2。这表明黄柏有抑制小鼠DTH的作用 ,其机制可能是抑制了IFN γ、IL 1、TNF α、IL 2等细胞因子的产生和分泌 ,从而抑制免疫反应 ,减轻炎症损伤     

蒲公英甾醇通过TGF-β/Smad通路对小鼠痤疮模型炎症因子水平、胸腺组织形态的影响

目的 探讨蒲公英甾醇是否通过转化生长因子β（transforming growth factor-β,TGF-β）/Smad）通路对小鼠痤疮模型炎性因子水平、胸腺组织形态的影响。 方法 将C57BL/6小鼠分为对照组(A组)、模型组(B组)、蒲公英甾醇低剂量组(C组)、蒲公英甾醇高剂量组(D组);观察各组小鼠耳部变化;苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）观察各组小鼠耳组织和胸腺组织病理变化;酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测各组小鼠血清中白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）和IL-8表达水平;免疫组织化学检测各组小鼠耳组织中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）阳性细胞表达率;Western blot检测各组小鼠耳组织中转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、Smad3蛋白表达。 结果 与B组相比,C组和D组减轻了痤疮小鼠耳部肿胀、发红和红斑、质地干燥粗糙等状态,且耳朵厚度也明显降低(P＜0.05);蒲公英甾醇经灌胃治疗后,痤疮小鼠的炎症得到了有效缓解,并且浸润的炎症细胞数量明显减少,表皮增厚也减轻;与B组相比,C组和D组增加了小鼠痤疮模型胸腺皮质厚度和淋巴细胞数量(均P＜0.05);蒲公英甾醇明显降低了小鼠血清中IL-1β和IL-8的表达水平(P＜0.05或P＜0.01),且小鼠耳组织中 TNF-α的阳性表达率减少(P＜0.05);与B组相比,C组和D组使小鼠耳组织中TGF-β1、Smad3蛋白表达下调(均P＜0.05)。 结论 蒲公英甾醇对小鼠耳廓痤疮模型有较好的治疗效果,调节炎性因子的表达、改善小鼠胸腺组织形态,其可能与TGF-β/Smad通路有关。     

诱导幼鼠食物过敏与哮喘发生的免疫学相关性研究

目的研究早期诱导小鼠食物过敏与后期哮喘发生的免疫相关性及其肺部组织病理学改变。方法6周龄断乳雌性BALB／c幼鼠（n=37）随机分为3组,分别为空白对照组（n：12）,食物过敏组（n=13）和哮喘组（n=12）。造模结束后各组均采用卵清蛋白（OVA）雾化激发,检测各组血清IgE水平、支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞因子IL-4、INF-γ水平,计算BALF中炎性细胞与嗜酸性粒细胞（EOS）数量。取小鼠肺部组织做病理切片,观察支气管管壁厚度和EOS浸润。结果食物过敏组与哮喘组血清IgE水平、BALF中IL-4水平、IL-4／INF-γ比值和EOS计数均显著高于空白对照组（P〈0．05）,哮喘组BALF中IL-4水平和EOS计数显著高于食物过敏组（P〈0．05）,而两组间IgE水平差异无统计学意义（P〉0．05）;食物过敏组与哮喘组BALF中IFN-γ水平显著低于空白对照组（P〈0．05）。肺组织病理观察显示,食物过敏组与哮喘组肺部组织嗜酸性细胞浸润均明显增加（P〈0．05）,支气管管壁增厚,哮喘组EOS浸润数显著高于食物过敏组（P〈0．05）。结论食物过敏组和哮喘组模型均存在IgE介导的全身免疫应答增高,食物过敏所致的肺部Th1／Th2免疫失衡和炎性细胞浸润可能是后期哮喘发生的免疫学机制。     

葡萄籽原花青素对小鼠脂肪肝模型缺血再灌注造成的急性肝损伤的保护作用

目的 探讨葡萄籽原花青素对脂肪肝缺血再灌注(IR)损伤小鼠模型的保护作用。方法 将30只C57BL/6小鼠随机分为3组。喂食蛋氨酸胆碱缺乏高脂饲料3周后进行非酒精性脂肪肝造模,实验分3组:假手术组、对照组(肝脏缺血再灌注前灌服蒸馏水)、花青素缺血再灌注组(肝脏缺血再灌注前灌服原花青素)。再灌注6 h后处死小鼠,检测血清中丙氨酸转氨酶(AST)和天冬氨酸转氨酶(ALT)含量,观察肝脏组织形态学变化,分析肝脏组织损伤程度,巨噬细胞浸润程度,炎性因子TNF-α、IL-6、iNOS、INFγmRNA表达水平和肝脏组织内p38蛋白表达水平。结果 与对照组相比较,花青素组血清ALT和AST水平较低(P<0.05),巨噬细胞浸润和凋亡细胞明显减少,炎性因子mRNA的表达明显降低。蛋白水平p38基本无变化,磷酸化的p38表达显著升高。结论 花青素能够减轻脂肪肝小鼠肝脏IR损伤,其机制可能与抑制肝脏再灌注后氧化应激反应和炎症反应,促进p-p38的表达升高有关。     

丙型肝炎病人基因分型与疾病严重程度及免疫活性细胞表达的关系

目的:检测丙型肝炎(CHC)病人丙型肝炎病毒(HCV)基因型与疾病严重程度及免疫活性细胞表达的关系.方法:选取2017年6月至2018年7月169例青海地区藏族CHC病人为研究对象(CHC组),同期选取170名青海地区藏族健康体检者作为对照组.PCR-荧光探针检测HCV-RNA水平,PCR-反向杂交法进行HCV-病毒基...     

Urocanic acid in systemic immune suppression

ＵｒｏｃａｎｉｃａｃｉｄｉｎｓｙｓｔｅｍｉｃｉｍｍｕｎｅｓｕｐｐｒｅｓｉｏｎＢｉＺｈｉｇａｎｇ毕志刚，ＷａｎｇＴａｏ王韬，ＣｈｅｎＨｕａｑｕｎ陈华群，ＮｉＬｉ倪黎ａｎｄＤｉｎｇＸｉａｏｊｉａｎ丁小健ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｈｏｗｕ...     

黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠的免疫调节功能

目的：探讨黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法：以氢化可的松造成免疫低下小鼠模型,用黄芪扶正汤和玉屏风散水煮液进行灌胃,检测小鼠血清溶血素的生成、IL-2和INF-γ的含量以及外周血淋巴细胞CD3+,CD4+和CD8+的表达。结果：黄芪扶正汤能明显提高免疫抑制小鼠的血清溶血素、IL-2和INF-γ的水平,提高CD4+和CD8+的比值,效果比玉屏风散更显著。结论：黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠的免疫功能有正调节作用。     

补肾益髓方促进实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠小胶质细胞向M2极化的作用

目的 观察补肾益髓方（Bu Shen Yi Sui Formula, BSYS）促进实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）小鼠小胶质细胞向M2极化的作用。方法 80只C57BL/6小鼠采用数字表法随机分为正常对照组、模型、醋酸泼尼松及BSYS组。各造模组小鼠以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（myelin oligodendroglia glycoprotein,MOG）_35-55诱导EAE模型。给予BSYS 方干预后,观察小鼠的神经功能评分。于造模第23天和第40天分别取材,HE染色观察小鼠脑和脊髓病理变化,免疫荧光法测定小胶质细胞M1、M2型标志物CD86、Arg-1表达,Western blotting 法检测过氧化物酶体增生物激活受体-γ（peroxisome proliferator activated receptor-γ, PPAR-γ）的表达,酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法测定抗炎因子干扰素-β（interferon-β,INF-β）和转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）的含量。结果 与模型组相比,BSYS组小鼠神经功能评分和炎性细胞浸润评分显著降低（P<0.05）;脑及脊髓组织中CD86表达下降（P<0.05）,Arg-1表达升高（P<0.05）,抗炎因子INF-β、TGF-β1的表达显著升高（P<0.05）,PPAR-γ蛋白表达显著升高（P<0.001）。结论 BSYS对EAE小鼠有神经保护作用,其作用可能与上调PPAR-γ表达,促进小胶质细胞向M2极化有关。     

牛膝不同提取部位抗炎镇痛及抗迟发型超敏反应的作用

目的 观察牛膝不同提取部位的抗炎镇痛及抗迟发型超敏反应的作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验、热板实验及醋酸诱导小鼠扭体实验,观察牛膝不同提取部位的抗炎镇痛作用;采用2,4-二硝基氯苯（2,4-dinitrochlorobenzene, DNCB）诱导的小鼠迟发型超敏反应来观察牛膝不同提取部位的抗迟发型超敏反应作用。结果 牛膝的正丁醇提取部位能显著减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀（P<0.05),显著延长小鼠在热板上的舔足时间以及减少醋酸诱导的小鼠扭体次数（P<0.05）,明显降低DNCB诱导的迟发型超敏反应小鼠的耳肿胀度、胸腺指数及脾指数（P<0.05）;石油醚提取部位和乙酸乙酯提取部位对二甲苯诱导的炎症、热板和醋酸诱导的疼痛及DNCB诱导的迟发型超敏反应之部分指标有明显抑制作用（P<0.05)。结论 牛膝的正丁醇提取部位具有显著的抗炎镇痛以及抗迟发型超敏反应作用。     

广谱半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制剂抗小鼠变应性接触性皮炎的研究

目的 研究广谱半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)抑制剂Z-VAD-FMK对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用.方法 以Franz垂直扩散池进行Z-VAD-FMK的体外透皮实验,高效液相色谱方法 检测其透皮量.建立ACD小鼠模型;实验组分别以0.1、0.5、2.5及5 mmol/L 4种浓度的Z-VAD-FMK溶液外涂于ACD模型小鼠一侧耳背部;阴性对照组以磷酸盐缓冲液(PBS)或含二甲基亚砜(DMSO)的PBS外涂,每组6只小鼠.以耳肿度、双侧耳重量之差及组织切片中双侧耳双面距离之差为指标,观察Z-VAD-FMK对小鼠ACD的抑制作用;以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠耳皮损中自细胞介素2(IL-2)及γ-干扰素(INF-γ)的含量.结果 在供给池为5 mmol/L Z-VAD-FMK 200μl、接收池容积为4 ml、有效扩散面积为1 cm2的条件下,Z-VAD-FMK6、12及24 h的透皮率分别为2.15%、9.62%及12.85%.2.5 mmol/L Z-VAD-FMK组小鼠耳肿度为(12.5±1.4)×10-2mm,重量差为(3.2±0.3)mg,镜下距离差为(11.8±1.3)×10-2mm,均低于阴性对照组[(19.1±2.0)×10-2mm,(4.3±0.4)mg,(16.8±1.7)×10-2mm,q=4.76,4.34,4.87,均P<0.05].2.5mmol/L Z-VAD-FMK组小鼠耳皮损中IL-2及INF-γ的表达均低于阴性对照组[IL-2:(148±10)pg/mlvs(205±18)pg/ml,t=2.205,P<0.05;INF-γ:(650±45)pg/ml vs(1030±58)pg/ml,t=2.375,P<0.05].结论 广谱caspase抑制剂Z-VAD-FMK能够透过皮肤,并抑制T细胞的活化与增殖,抑制ACD.