支气管哮喘模型大鼠支气管肺组织eotaxin的表达

目的:观察支气管哮喘的病理改变及嗜酸细胞趋化因子eotaxin在支气管肺组织中的表达,探讨extaxin在哮喘发病中的可能作用。方法:①实验于2003-07/2004-01在解放军第三军医大学西南医院中心实验室完成。选用雄性Wistar大鼠40只。随机将动物分为4组:哮喘1d组、哮喘3d组、哮喘10d组和对照组,每组10只。②以卵白蛋白致敏法制备大鼠哮喘模型,哮喘1,3,10d组均造成哮喘模型,并分别诱喘1,3和10d后处死,取材行病理观察并作相应测定。对照组以生理盐水代替卵白蛋白与哮喘10d组同步实验。③对肺组织行苏木精-伊红染色,分别观察各组病理改变。用免疫组化法检测支气管肺组织eotaxin蛋白表达。制备肺组织匀浆,用反转录聚合酶链反应法测定eotaxinmRNA表达。④各组间计量资料差异比较采用q检验。结果:大鼠40只均进入结果分析。①病理观察结果:哮喘组支气管管壁周围组织及肺间质有大量中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及淋巴细胞等炎细胞浸润,诱喘时间愈长,嗜酸细胞浸润愈明显。哮喘1,3,10d组病理变化依次加重。对照组:无明显异常。②eotaxin蛋白及其mRNA表达:各哮喘组均明显高于对照组(P<0.01),且哮喘10d组明显高于哮喘1d组(P<0.01)。结论:eotaxin是诱导嗜酸粒细胞趋肺的重要趋化因子,在哮喘发病中起重要作用。     

支气管哮喘小鼠模型的建立

哮喘是一种多因素影响的疾病，是以支气管高反应性为主要病理生理特征的，以嗜酸性粒细胞浸润为主的气道慢性炎症性疾病。支气管哮喘小鼠模型的建立为我们进一步研究支气管哮喘的病理生理以及分子生物学等改变提供了平台。探讨如下。     

脑缺血缺氧性模型大鼠脑红蛋白表达变化及氯化血红素的刺激效应

目的：观察脑缺血缺氧性模型大鼠脑红蛋白表达的变化及氯化血红素对其表达的影响。 方法：实验于2006-0I／03在华北煤炭医学院神经内科实验室完成。150只雄性Wistar大鼠按数字表法随机分成3组，即模型组、氯化血红素组、对照组，每组50只。①模型组：动物麻醉后切开颈前皮肤，游离双侧颈总动脉，同时阻断双侧颈总动脉血流。缺血过程中动物出现眼发白、呼吸加快、竖毛、癫痫、抽搐等并发症为模型成功。②氯化血红素组：除给予模型组同样的处理外，于造模前注射氯化血红素9次（30mol／kg．腹膜注射，3次／d）。③对照组：为假手术组，同样麻醉，剥离双侧颈总动脉，但不阻断血流。分别在血流阻断（对照组在手术后）后1，5，15，30．60min将大鼠麻醉下断头，迅速取大脑。每组每个时间点10只大鼠。各组大鼠分别行免疫组化染色和免疫蛋白印迹法，观察大鼠脑内脑红蛋白表达变化： 结果：大鼠实验过程中无死亡，150只全部进入结果分析。①模型组大鼠脑红蛋白在缺血1min表达迅速增加达高峰，5min仍维持在高水平，与对照组比较差异有显著性意义（P〈0．05）；缺血15min后迅速降低，以后又见缓慢升高，但与对照组相比差异无显著性意义（P〉0．05）。②氯化血红素干预组缺血1min和5min脑红蛋白表达快速升高，但与模型组相比差异无显著性意义（P〉0．05）；缺血15min脑红蛋白仍维持在高水平，与模型组和对照组相比差异有显著性意义（P〈0．05）；缺血30min和60min脑红蛋白已迅速降低，与对照组相比差异无显著性意义（P〉0．05）。 结论：脑缺血缺氧性模型大鼠脑红蛋白呈规律性变化；氯化血红素可以刺激脑缺血缺氧性模型大鼠脑红蛋白表达增多。     

不同激发方式对大鼠哮喘模型的影响

【目的】探讨泵雾化和超声雾化两种激发方式制备大鼠哮喘模型的优劣。【方法】将24只SD大鼠分为三组：对照组、超声雾化组和泵雾化组,每组各8只。对照组予1mL生理盐水腹腔注射,其余两组予10％卵蛋白（0VA）混合液1mL致敏。2周后再以0VA进行激发,泵雾化组用高频雾化器雾化吸入2％0VA进行激发,超声雾化组用超声雾化器进行激发,对照组以生理盐水激发。各组实验大鼠均采用BUXCO测定气道阻力;取右肺组织用于HE、Masson和AB_PAs染色,分析气道炎症和气道重塑情况;做左肺支气管肺泡灌洗（BAL）,其灌洗液（BALF）行细胞学分析。【结果】①激发结束时,超声雾化组和泵雾化组大鼠均出现呼吸急促、点头状呼吸、腹肌痉挛等表现,而对照组大鼠激发前后无明显变化,呼吸平稳,运动敏捷。与对照组比较,泵雾化组和超声雾化组支气管周围炎性细胞浸润评分、支气管管壁周围嗜酸性粒细胞（EOS）显著增高（P〈0．01）;泵雾化组与超声雾化组无显著差异（P〉0．05）;②与对照组比较,泵雾化组与超声雾化组气道平滑肌面积、杯状细胞占上皮细胞百分比以及胶原沉积面积均明显增高（P〈0．01）;泵雾化组较超声雾化组更高（P〈0．01）;③相对于对照组,泵雾化组及超声雾化组BALF细胞总数、各细胞分类中EOS,淋巴细胞显著增高（P〈0．01）;但泵雾化组与超声雾化组无显著差异（P〉0．05）;④超声雾化组及泵雾化组大鼠Raw值均大于对照组（P〈0．01）;泵雾化组大鼠Raw值较超声雾化组明显增高（P〈0．05）。【结论】①0VA超声雾化或泵雾化激发均能够成功复制哮喘大鼠模型。②使用改良后泵雾化激发的方式复制哮喘大鼠模型优于传统的超声雾化激发方式。     

不同浓度的卵蛋白泵雾化激发方式对大鼠哮喘模型的影响

[目的]探讨不同浓度的卵蛋白（OVA）泵雾化激发方式对大鼠哮喘模型的影响。[方法]将32只SD大鼠按照OVA激发浓度的不同分为4组：用PARIBOY高频雾化器激发浓度分别为0％、1％、2％、4％（0％浓度为对照组,激发以生理盐水代替）。各OVA先按常规建立哮喘模型。各组实验大鼠于末次激发24h后（即d57）麻醉,采用BUXCO测定气道阻力。取右肺组织做HE、Masson和AB-PAS染色检测,分析气道炎症和气道重塑情况;做左肺支气管肺泡灌洗（BAL）后,行其灌洗液（BALF）细胞学分析。[结果]①一般观察：OVA各组大鼠均出现呼吸急促、点头状呼吸、腹肌痉挛等表现,而对照组大鼠激发前后一般观察无明显变化,呼吸平稳,运动敏捷。②与对照组相比较,OVA各组支气管周围炎性细胞浸润评分、支气管管壁周围EOS、气道平滑肌面积、杯状细胞占上皮细胞百分比、胶原沉积面积显著增高（P＜0．01）;OVA各组之间无显著差异（P＞0．05）。③相对于对照组,OVA各组BALF细胞总数、各细胞分类中嗜酸性粒细胞（EOS）,淋巴细胞显著增高（P＜0．01）;但OVA各组之间无显著差异（P＞0．05）。④OVA各组大鼠Raw值均大于对照组（P＜0．01）;而OVA各组之间无显著差异（P＞0．05）。[结论]①不同浓度泵雾化激发均能够成功复制哮喘大鼠模型。②在一定范围下,卵蛋白泵雾化激发浓度对模型制作无明显影响。     

哮喘大鼠大脑和肺组织c-fos蛋白表达与神经免疫调节

背景越来越多的研究事实表明免疫系统不是一个仅有自主调节的孤立系统,而是与中枢神经系统之间存在双向联系.目的探讨哮喘大鼠肺脏和大脑中c-fos表达的分布及其意义.设计随机对照实验.单位南方医科大学南方医院肿瘤科和珠江医院神经外科.材料实验在2004-01/08在南方医科大学南方医院肿瘤科实验室和珠江医院神经外科完成.选择成年健康雄性大鼠14只.随机分为实验组10只和对照组4只.方法实验组第1天用卵蛋白10mg加氢氧化铝干粉200 mg与灭活百日咳菌苗5×109个配成2 mL混悬液腹腔注射,于第15天开始用10 g/L卵蛋白超声雾化吸入,2次/h,共3 d,制作卵蛋白致敏大鼠哮喘模型,对照组第1天用生理盐水2 mL腹腔注射,于第15天用生理盐水雾化吸入,30 mL/d,共3 d.所有大鼠在麻醉状态下灌流固定取肺和脑组织,采用免疫组织化学卵白素-生物素-过氧化物复合物法和图像分析等技术观察Fos蛋白在肺脏和大脑内的分布情况.主要观察指标Fos蛋白在脑内不同区域和肺脏中的分布.结果14只大鼠均进入结果分析.①哮喘组大鼠肺脏和大脑中c-fos表达明显高于对照组(P＜0.05); Fos阳性产物在脑内主要集中分布在额顶皮质、边缘前脑(扣带皮质、梨状皮质和中央杏仁核等)、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区、下丘脑室周核、孤束核、最后区和延髓腹外侧区内;小脑内无明显Fos分布密集区.②哮喘组气道壁及肺组织中可见大量的c-fos阳性细胞,阳性炎症细胞主要分布于黏膜层、黏膜下层及平滑肌周围;而对照组动物气道及肺组织中无或偶见免疫反应极弱的c-fos阳性细胞.结论哮喘大鼠不仅肺脏中c-fos表达明显增加,而且在延髓内脏带及其上行投射神经核团(下丘脑、杏仁核等)表达也较多,说明原癌基因c-fos表达可能与哮喘神经免疫调节密切相关.     

炎性细胞因子在支气管哮喘发病机制中的作用

支气管哮喘(BA)简称哮喘,是由嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞(MC)、T淋巴细胞等多种炎性细胞及其细胞因子参与的,以可逆性气道阻塞、气道高反应性和气道重塑等为主要特征的慢性气道炎性反应。而这些炎性细胞的增殖、生长、分化、移行、聚集、浸润、活化与其自身分泌的细胞因子(CK)息息相关,细胞-细胞、细胞-因子、因子-因子相互促进和制约,构成了     

大鼠心肌梗死模型中心肌组织胶原代谢变化对心室重塑的意义

目的：观察大鼠心肌梗死模型胶原的变化规律，认识心室重塑及心脏功能变化的机制。方法：实验选用SD大鼠68只，随机将其分为对照组(n=10)、手术对照组(n=10)、心肌梗死后1d组(n=12)、心肌梗死后1周组(n=12)、心肌梗死后2周组(n=12)、心肌梗死后4周组n=12)。通过结扎68只SD大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型。分别于术后第1天，及1，2，4周取心肌组织，采用羟脯氨酸消化法和免疫组化分别测定胶原总量和Ⅰ／Ⅲ胶原比例变化。结果：心肌梗死后2，4周组大鼠心肌Ⅰ／Ⅲ胶原比例(2．12&;#177;0．62，2．18&;#177;0．71)明显高于对照组(2．71&;#177;0．30)(t=2．84，2．79，P&;lt;0．05)。心肌梗死后2，4周组大鼠心肌胶原【(37．16&;#177;2．67)，(38．19&;#177;1．41)mg／g】明显高于对照组【(35．61&;#177;1．52)mg／g】(t=3．12．5．23，P&;lt;0．01)。手术对照组、心肌梗死后1d、1周组与对照组大鼠心肌胶原含量、Ⅰ／Ⅲ胶原比例比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：SD大鼠心肌梗死后心肌组织内胶原总量增加，Ⅰ／Ⅲ胶原比例减少，这种胶原代谢变化规律是心室重塑发生机制重要组成部分。     

脑卒中后抑郁大鼠模型的建立

目的：探索制备理想的脑卒中后抑郁大鼠模型的方法，为研究脑卒中后抑郁的中西医药物治疗提供一个良好的动物模型。 方法：实验于2002-07／2003—02在成都中医药大学实验室完成。SD大鼠45只随机分为正常对照组10只、单纯脑卒中组10只、孤养应激组10只、脑卒中后抑郁组15只。采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型，在此基础上综合孤养、中度的不可预测应激处理复合制备脑卒中后抑郁大鼠模型。运用Longa 5评分法（评分越高，神经功能缺损越严重）和水平木棒法（正常大鼠放置其上可以在上面持续时间超过3min）评定脑卒中大鼠神经功能恢复程度。运用糖水实验、敞箱实验、被动躲避实验评定脑卒中后抑郁大鼠的兴趣感变化、自发活动和探究行为等抑郁行为学改变。采用荧光分光度法测定大鼠脑内单胺类神经递质（去甲肾上腺素、5-羟色胺、多巴胺）水平。 结果：①在造模中6只大鼠死亡，3只大鼠造模未成功，36只大鼠进入结果分析。②脑卒中大鼠22只（包括单纯脑卒中组9只，脑卒中后抑郁组13只），清醒后第4，8，24小时的神经功能缺损评分分别为2．58&;#177;0．69，2．32&;#177;0．58，1．37&;#177;0．60。③脑卒中动物20只（包括单纯脑卒中组8只，脑卒中后抑郁组12只），脑卒中后第1，3，5天在圆棒上停留时间分别为（110．94&;#177;31．40）s，（149．53&;#177;16．56）s，（169．88&;#177;8．44）s。④脑卒中后抑郁组脑卒中后第7，14天的体质量显著低于正常对照组[（348．8&;#177;47．7）g，（390．9&;#177;22．9）g，P〈0．05；（321．7&;#177;43．8）g，（392．6&;#177;23．5）g，P〈0．01]。（5）脑卒中后抑郁组糖水消耗量显著低于正常对照组[（8．48&;#177;1．15）mL／kg，（113．0&;#177;11．8）mL／kg，P〈0．011。⑥脑卒中后抑郁大鼠敞箱活动低下，被动躲避缺陷。⑦脑卒中后抑郁组双侧额顶皮质及脑干的去甲肾上腺素、5-羟色胺显著降低。 结论：在局灶性脑缺血大鼠模型的基础上复合孤养和应激处理可以制备出较理想的脑卒中后抑郁大鼠模型。     

小鼠嗜酸粒细胞性支气管炎模型与哮喘模型的蛋白组学差异表达分析

【目的】探讨小鼠嗜酸粒细胞性支气管炎模型（EB模型）与哮喘模型的蛋白组学差异表达。【方法】EB模型小鼠（实验组）、哮喘模型小鼠（哮喘组）及对照组小鼠各4只,取肺组织提取总蛋白质,采用基质辅助电离解析飞行时间质谱对蛋白质进行序列分析,并比较三组肺组织蛋白差异。【结果】双向电泳图像显示三组肺组织蛋白表达比较差异有显著性（P＜0．05）,经质谱检测肽质量指纹谱与标准分子量、等电点对照分析鉴定出20个蛋白,分别为谷胱甘肽-S-转移酶 M1（GSTM1）、热休克蛋白 B1（HSPB1）等,其中 GSTM1在哮喘组表达下调、HSPB1在哮喘组表达上调。【结论】GSTM1、HSPB1等可能参与气道高反应性的发生机制。     

Regional lung function in patients with bronchial asthma

The regional distribution of pulmonary ventilation and perfusion and regional alveolar ventilation/perfusion ratios were measured with radioactive xenon ((133)xenon) in 10 patients with asthma in remission. Four subjects had normal ventilation distribution, four had hypoventilation in some regions and normal ventilation in others, and two patients had abnormal ventilation in almost all lung regions. The lung bases were involved most frequently and the middle zones least frequently. Correlation was good between the degree of over-all ventilatory impairment calculated from (133)xenon values and measurement of the maximal midexpiratory flow rate the same day.Regions which were hypoventilated had low ventilation/perfusion ratios and also tended to be hypoperfused. In the eight subjects who had been studied similarly 5 yr previously, changes in regional function correlated in general with changes in over-all function.     

Parameters of bone tissue density in patients with bronchial asthma

AIM: To study bone density in patients with bronchial asthma (BA). MATERIALS AND METHODS: Bone densitometric indices were evaluated in 123 patients with BA in relation to the basic therapy, dosage, and the duration and severity of the disease. RESULTS: The bulk (59.3%) of BA patients is found to have the osteopenic syndrome whose detection rate increases with longer duration and greater severity. Decreased bone density is more evident with oral glucocorticoids (GCs) than with inhaled ones. The effect of topical GCs on bone density is determined by their bioavailability. The decrease in bone density is more noticeable in patients taking beclomethasone and minimal in those on basic fluticasone therapy. CONCLUSION: Considerable decreases in bone density in BA patients may be prevented by a rational basic therapy with first-line inhaled GCs with low bioavailability.     

自然流产大鼠蜕膜组织中ENA-78和IL-8的表达

[目的]比较正常妊娠大鼠与自然流产模型大鼠胎盘组织中上皮细胞和中性粒细胞的活化肽(ENA-78)、白细胞介素-8(IL-8)表达特征的差异,探讨ENA-78、IL-8在自然流产中的可能作用机制。[方法]建立妊娠正常大鼠模型与自然流产模型大鼠,免疫组化SABC法测定两组模型大鼠孕14d胎盘组织中两个细胞因子的表达。[结果]与正常妊娠模型组相比,自然流产模型组大鼠胎盘组织中ENA-78、IL-8的表达显著升高(P0.05)。[结论]胎盘组织中ENA-78、IL-8的表达与自然流产的发生发展有关。     

炎性因子在支气管哮喘急性发作患者血清中的表达及意义

目的 探讨支气管哮喘急性发作患者血清中炎性因子的变化。方法 将支气管哮喘急性发作患者92例,根据病情严重程度分为2组,选择体检健康人作为对照,检测肺功能及血清白细胞介素（IL） 6、IL 17、肿瘤坏死因子（TNF） α、γ 干扰素(IFN γ)、转化生长因子β2（TGF β2）水平。结果 与对照组相比,哮喘组IL 6、IL 17、TNF α均明显增高,而IFN γ明显降低（P＜0.01）,3组TGF β2差异无统计学意义（P＞0.05）。哮喘严重程度与IL 6、TNF α、IL 17呈正相关（r=0.970、0.868、0.723,P＜0.05）。与FEV1/FVC及IFN γ呈负相关(r=-0.957、-0.934,P＜0.05);与TGF B2无相关性(r=0.321,P>0.05)。结论 血清炎性因子变化与哮喘的发病密切相关,对哮喘严重程度的评估具有一定的参考价值。