谷氨酰胺全肠外营养减少急性放射性肠炎大鼠细菌易位及其机理

目的探讨谷氨酰胺(glutamine,GLN)全肠外营养减少急性放射性肠炎大鼠细菌易位及其作用机理。方法 SD大鼠行全腹部60Coγ射线8Gy放射后,实验动物随机分为三组,即:常规全肠外营养组(standard total parenteral nutrition,STD组,n=10),大鼠输入常规静脉营养液;谷氨酰胺组(glutamine-enriched total parenteral nutrition,GLN组,n=10),大鼠输入附加谷氨酰胺的静脉营养液;正常组(n=10)为未经腹部照射的正常大鼠,连续7d全肠外营养。采用组织化学、免疫组织化学、透射光镜、电镜观察、结合图像分析系统和无菌采取肠系膜淋巴结做细菌培养的方法。结果 GLN组小肠蛋白质和DNA的含量明显高于STD组;GLN组回肠绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度、全层壁厚度均显著大于STD组。透射电镜下可见GLN组小肠上皮细胞微绒毛明显高于STD组。GLN组肠系膜淋巴结细菌易位率明显低于STD组。结论附加丙氨酰-GLN二肽的全肠外营养能有效减少肠黏膜辐射性损伤后肠细菌易位,其作用机理可能是GLN对小肠黏膜有明显的营养作用,促进肠上皮细胞合成DNA和蛋白质,维持肠黏膜上皮的正常代谢,加速修复损伤的肠黏膜,降低细菌易位率。     

谷氨酰胺胃肠外营养对放射性肠炎鼠小肠上皮细胞的增殖作用

目的探讨谷氨酰胺(GLN)二肽胃肠外营养对急性放射性肠炎大鼠小肠上皮细胞产生营养作用的机制。方法19只SD大鼠行全腹部放射后,随机分为三组,常规胃肠外营养组(STD组,n=6):大鼠输入常规静脉营养液;谷氨酰胺组(GLN组,n=7):大鼠输入含谷氨酰胺的静脉营养液;正常组(n=6)为未经腹部照射的正常大鼠。连续7d胃肠外营养,在实验结束前经颈静脉注入5-溴脱氧尿苷(BrdU),采用ABC方法及光镜观察小肠隐窝细胞有丝分裂相、细胞增殖核抗原(PCNA)和5-溴脱氧尿苷(BrdU)阳性细胞。结果GLN组小肠隐窝细胞有丝分裂相细胞数多于STD组(P<0.05)。GLN组小肠增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数多于STD组(P<0.05)。GLN组小肠BrdU阳性细胞数多于STD组(P<0.05)。结论GLN二肽可促使急性放射肠炎大鼠小肠上皮细胞的分裂增殖。     

含谷氨酰胺二肽肠外营养对急性放射性肠炎大鼠脾脏的作用

目的探讨谷氨酰胺(GLN)二肽全肠外营养对急性放射性肠炎大鼠脾脏的营养作用。方法应用19只SD大鼠行全腹部放射后,实验动物随机分为三组:常规肠外营养组(STD组,n=6),大鼠输入常规肠外营养液;谷氨酰胺组(GLN组,n=7),大鼠输入含谷氨酰胺的静脉营养液;正常组(n=6)为未经腹部照射的正常大鼠,连续7d肠外营养。实验结束前经颈静脉注入5-溴脱氧尿苷(BrdU),光镜下观察脾脏的形态学变化及脾脏BrdU阳性细胞,电镜下观察脾脏淋巴细胞超微结构的变化。结果GLN组脾脏白髓内淋巴细胞增多,脾脏BrdU阳性细胞数多于STD组,电镜下观察GLN组可见明显的淋巴细胞激活征象,表现为核染色质凝集,异染色质减少,胞质内线粒体和粗面内质网增多。结论GLN二肽可促使受辐射性损伤后脾脏内淋巴细胞的增殖,并保护淋巴细胞的结构。     

谷氨酰胺二肽胃肠外营养对短肠大鼠小肠上皮细胞的增殖作用

目的探讨谷氨酰胺(GLN)二肽胃肠外营养对短肠大鼠小肠上皮细胞产生营养作用的机制。方法18只Wistar大鼠,手术切除其大部分空肠及近端回肠,然后经右颈内静脉插管,建成短肠大鼠胃肠外营养模型;大鼠随机分为3组:常规胃肠外营养组(STD组),3%丙氨酰-谷氨酰胺胃肠外营养组(GLN组)和正常对照组(n=4),连续7d胃肠外营养后,在实验结束前经颈静脉注入5-溴脱氧尿苷(BrdU),采用ABC方法及光镜观察方法。结果GLN组小肠PCNA阳性细胞数多于STD组,差异有显著性(P<0.05)。GLN组小肠BrdU阳性细胞数多于STD组,差异有显著性(P<0.05)。结论提示GLN二肽可促进短肠大鼠小肠上皮细胞的分裂增殖。     

GLN二肽肠外营养对急性放射性肠炎大鼠小肠上皮细胞的作用

目的探讨谷氨酰胺(GLN)二肽肠外营养对急性放射性肠炎大鼠小肠上皮细胞产生营养作用的机制。方法采用19只SD大鼠,给予60Co8Gy剂量的全腹部照射,经右颈内静脉插管,建成急性放射肠炎全肠外营养大鼠模型,实验大鼠随机分成模型常规全肠外营养组(STD组)、谷氨酰胺(GLN)组和正常对照组(正常组)。连续7d全肠外营养后,取相应部位的空、回肠,测定其蛋白质及DNA含量,并对其DNA倍体和细胞核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)进行定量分析。结果GLN组空、回肠分裂期细胞数、上皮细胞和腺上皮细胞内核仁组成区AgNOR数目、蛋白质和DNA含量均显著大于STD组。结论提示GLN二肽全肠外营养能加速急性放射性肠炎受损小肠黏膜细胞的修复,对维持小肠黏膜结构和功能的稳定性有良好的作用。     

大鼠失血性休克肠黏膜形态学变化及与肠道菌移位的关系

目的:观察大鼠失血性休克复苏后肠黏膜损伤修复的形态学特征与肠道细菌移位的关系.方法:将雄性SD大鼠42只随机分为对照组(n=7)和休克组(n=35),休克组又分为复苏后0、3、6、12和24 h 5个亚组,每个亚组均7只.建立大鼠肠缺血-再灌注模型,通过光镜观察不同时段回肠黏膜的改变及肝、肠系膜淋巴结和肾匀浆细菌培养.结果:休克组从复苏0 h起回肠黏膜上皮发生损伤改变,6 h大部分黏膜已修复,24 h肠黏膜结构恢复正常;对照组大鼠肝、肠系膜淋巴结和肾匀浆平均组织含菌量与休克组比较差异均有统计学意义(P<0.05);休克组各亚组细菌培养除0 h和24 h,以及3 h和6 h外,其余亚组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论:失血性休克致肠缺血-再灌注损伤从而导致肠黏膜屏障受累,小肠黏膜通透性增加,引起细菌移位.     

肠内、肠外序贯营养支持对重症颅脑损伤患者肠黏膜屏障的影响

目的探讨肠内、肠外序贯营养支持对重症颅脑损伤患者肠黏膜屏障的影响。方法选择2011年8月~2014年8月入院的90例重症颅脑损伤患者为研究对象,随机分为两组,观察组(n=45)行肠内、肠外序贯营养支持,对照组(n=45)行单纯肠内营养支持。对比两组血浆谷氨酰胺、白蛋白水平,甘露醇/乳果糖(L/M)比值,并发症及预后。结果营养支持10 d后,观察组血浆谷氨酰胺及白蛋白水平明显高于对照组(P<0.05),L/M比值明显低于对照组(P<0.01);观察组并发症发生率及死亡率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论由肠外营养序贯过渡至肠内营养,可有效改善重症颅脑损伤患者肠黏膜屏障功能,更好地预防感染、改善机体营养。     

全腹照射后大鼠的肠粘膜病理损害及防治

６０只大鼠分为四组：未接受照射的Ａ组口服谷氨酰胺，Ｂ组口服甘氨酸，接受照射的Ｃ组口服谷氨酰胺，Ｄ组口服甘氨酸，均为标准颗粒饲料喂养，一周后杀死动物，无菌取肠系膜淋巴结，肝和脾制成匀浆，行细菌培养，统计细胞移位率。对回肠粘膜进行光镜检查，光镜切片用显微图象分析仪进行计算机图象分析，结果说明：大鼠全腹照射可引起肠粘膜损伤，并由此引起细菌位移，而口服谷氨酰胺能预防大鼠全腹照射后的肠粘膜病理损害，而减少细菌移位的发生。     

大黄对肠缺血再灌注大鼠肠黏膜和通透性的影响及其机制

目的：观察肠缺血再灌注损伤后,肠内补充大黄对大鼠肠黏膜结构和通透性的影响,并探讨其作用机制。方法：雄性SD大鼠30只,随机分为3组（n=10）。大黄组：夹闭肠系膜上动脉建立肠缺血再灌注损伤模型,肠外营养＋肠内大黄液;模型组：建立肠缺血再灌注损伤模型,肠外营养;对照组：分离肠系膜上动脉但不夹闭,自由饮食。术后第3天收集尿液,采用双糖法（乳果糖/甘露醇）反应肠黏膜通透性,第6天处死大鼠留取小肠检测黏膜结构和热休克蛋白70（HSP70）含量。结果：对照组和大黄组肠黏膜通透性均低于模型组（P〈0.01）。大黄组肠黏膜通透性虽高于对照组,但无统计学意义（P〉0.05）;模型组小肠绒毛高度、黏膜厚度显著低于对照组和大黄组（P〈0.01）,大黄组接近于对照组（P〉0.05）;小肠全层厚度各组间无统计学差异;对照组和大黄组HSP70含量均高于模型组（P〈0.01）。大黄组HSP70含量虽略高于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：大黄可减少肠缺血再灌注损伤引起的肠黏膜通透性增加,保护肠黏膜结构。大黄的肠道保护作用与多种机制有关,诱导小肠HSP70表达增加可能是其中之一。     

胰炎合剂对大鼠重症急性胰腺炎肠屏障影响的实验研究

目的 研究胰炎合剂对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜屏障和肠道细菌移位的影响.方法 选择健康Wistar大鼠,雌雄不限,体质量(250±30)g,共90只,随机分为假手术组(SO,n=30)、模型组(SAP,n=30)、胰炎合剂治疗组(SAP+YH,n=30).通过向大鼠胰胆管内逆行注射5%牛磺胆酸钠(0.1 ml/100 g)制备成SAP模型,术后分别用0.9%氯化钠注射液、胰炎合剂进行灌胃治疗.术后72 h处死大鼠,剪取肠系膜淋巴结,称重后分别匀浆,做细菌培养,观察匀浆体外培养后的细菌量、细菌移位率;取回肠末段标本,剪成1 mm×3 mm小条块,用4%戊二醛固定,用作透射电镜检查,观察末端回肠组织电镜下变化.应用统计学软件对数据进行分析.结果 假手术组有15%的肝脏细菌培养阳性,胰炎合剂组细菌移位率为22.5%,明显低于SAP组的90.0%(P＜0.01);胰炎合剂组的细菌移位量为(1.98±0.97)×103CFU/g,明显低于SAP组(P＜0.01);电镜下观察SAP组回肠黏膜微绒毛稀疏脱落,排列紊乱,细胞内部分线粒体肿胀,细胞问紧密连接增宽.胰炎合剂组回肠黏膜微绒毛排列整齐,略变短稀疏,细胞内线粒体肿胀,细胞间紧密连接增宽不明显.结论 胰炎合剂有明显减轻SAP时肠黏膜损害,保护肠黏膜屏障,抑制肠道细菌移位的作用.     

肠梗阻大鼠小肠黏膜屏障功能变化的实验研究

目的：探讨大鼠肠梗阻时肠黏膜屏障功能的动态变化。方法建立急性完全性小肠梗阻模型,按肠梗阻时间不同进行分组,采血测定血清二胺氧化酶（DAO）的活性和肠型脂肪酸结合蛋白（IFABP）的浓度,取肠系膜淋巴结鉴定细菌移位的发生率并观察小肠组织病理变化。结果肠梗阻12 h后血清IFABP浓度开始升高,随着肠梗阻时间的推移,血清IFABP浓度值逐渐上升,与肠黏膜损伤程度变化趋势一致,两者呈正相关关系（r＝0．841,P＜0．01）。肠梗阻24 h后血清DAO活性升高,至48 h后达峰值,随后下降。大鼠肠梗阻48 h后才开始发生肠系膜淋巴结细菌移位,明显高于假手术组（P＜0．01）。结论肠梗阻早期就发生肠黏膜屏障功能损害,细菌移位滞后于血清生物学指标改变。肠型脂肪酸结合蛋白浓度变化可用来判断肠黏膜损伤程度的生物学指标,为肠梗阻严重并发症的防治和预后评估提供有益的参考和实验依据。     

高渗溶液复苏大鼠创伤失血性休克对肠道粘膜形态学和屏障功能的影响

目的观察小容量高张溶液和大容量晶体联合小量胶体溶液分别复苏创伤失血性休克大鼠后肠道屏障功能的变化.方法SD大鼠24只按随机原则分成假创伤休克对照(Sham)组、创伤失血性休克高张溶液(HTH)组和大容量晶体(LRH)组,应用光镜、常规电镜和电镜化学技术观察小肠黏膜形态学变化,采用细菌培养技术观察肠源性细菌肠道外组织移位发生率,以判定肠道屏障功能状况.结果假创伤失血性休克组大鼠肠道黏膜层上皮细胞结构完整,固有层有少量淋巴细胞;电镜下上皮细胞膜肠腔侧微绒毛排列紧密、整齐,细胞膜完整;电镜化学技术仅偶见"暗细胞";无细菌移位现象.LRH组光镜下见黏膜上皮细胞水肿,部分细胞甚至坏死脱落形成糜烂,固有层水肿疏松,并见较多淋巴细胞及多少不等的中性粒细胞浸润;电镜下小肠黏膜上皮细胞表面微绒毛脱落,部分上皮细胞膜破损,胞浆基质外溢,有的细胞胞浆内线粒体肿胀,上皮细胞间和固有层内可见较多淋巴细胞及中性粒细胞浸润;电镜化学技术单宁酸染色可见小肠黏膜上皮"暗细胞"明显增多;细菌移位发生率达87.5%.HTH组光、电镜下形态学损伤性改变明显减轻;单宁酸染色仅见少量"暗细胞";细菌移位率仅12.5%,明显低于LRH组.结论大鼠创伤失血性休克大容量晶体复苏后肠道黏膜形态结构有明确的损伤性改变,肠道上皮层细胞膜通透性增高,导致肠道屏障功能不全、细菌移位;小容量高张溶液复苏可明显减轻肠道黏膜的损伤,改善肠道屏障功能.     

Protective Effect and Mechanism of TGF- β1 on Intestinal Mucosa against I/R Injury in Rats

Objective To investigate the protective effect and mechanism of TGF-β1 on intestinal mucosa against ischemia-reperfusion (I/R) injury,so as to provide new methods of clinical prevention from and dealing with intestine I/R injury and gut-derived multiple organ dysfunction syndrome(MODS).Methods 30 SD rats were randomly divided into 3 groups (n=10 each),A:namely sham-operation group (group A):superior mesenteric artery (SMA) was only isolated but not blocked; B:control group (group B),ischemia for 60 minutes,...     

添加短链脂肪酸的TPN对大鼠晚期结肠癌吻合口愈合的研究

目的研究添加短链脂肪酸（Short Chain Fatty Acids,SCFA）的全肠外营养（Total Parenteral Nutri-tion,TPN）对晚期结肠癌大鼠模型结肠吻合口愈合的影响。方法应用瘤块转移法建立晚期结肠癌大鼠Ⅰ期结肠吻合模型,随机分为2组①SCFA组,于常规TPN液中添加SCFA②TPN组行常规TPN。术后第6天处死大鼠,标本作病理组织学检查,行肠系膜淋巴结细菌培养,检测黏膜细胞的DNA周期及Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果光学显微镜下和透射电镜下均可见SCFA组吻合口胶原纤维粗大、密集,并趋向与肠轴平行排列;对照组结肠黏膜细胞增殖期（S期）百分比（6.23±2.75）显著低于SCFA组（11.57±3.54,P=0.001）;Ⅰ型胶原蛋白显示棕黄色颗粒位于细胞浆内,SCFA组表达明显,对照组不明显。对照组肠系膜淋巴结细菌培养的阳性率和菌落计数（1.90±1.06）显著高于SCFA组（0.84±1.14,P=0.025）。结论添加SCFA的TPN能减少肠道菌群易位,保护结肠黏膜的屏障功能,能促进荷瘤状态下大鼠结肠上皮细胞的增殖,增强结肠吻合口的胶原代谢和蛋白质合成,促进Ⅰ型胶原蛋白的表达,促进结肠吻合口的愈合。     

Selenium pretreatment prevents bacterial translocation in rat intestinal ischemia/reperfusion model.

Protective role of selenium against free radical damage was first demonstrated in the heart and this effect was further questioned in other systems. In the present study, the effects of exogenously administered selenium on intestinal fine morphology, lipid peroxidation, and bacterial translocation (BT) in experimental intestinal ischemia/reperfusion (I/R) model were examined. Thirty-two male Wistar rats weighing 250-300 g were randomized into four groups. Sham group (n=8) underwent laparotomy only. In the I/R group (n=8), laparotomy was performed and the superior mesenteric artery was occluded using an atraumatic microvascular clamp for 30 min. In corresponding selenium-treated groups (n=8 each), sodium selenate was given 0.2 mg kg(-1)day(-1) intraperitoneally (i.p.) for 3 consecutive days, prior to surgery for either laparotomy only or with I/R. Twenty-four hours later, tissue samples from liver, spleen, and mesenteric lymph nodes were obtained under sterile conditions for microbiological analysis and further evaluation of I/R-induced intestinal injury. Ileum samples were fixed in 10% formaldehyde for histopathological evaluation. In the I/R group, the incidence of bacteria-isolated mesenteric lymph nodes, spleen, and liver was significantly higher than other groups (P<0.05). Selenium supplementation prevented I/R-induced BT and significantly reduced the I/R-induced intestinal injury (P<0.05). Tissue MDA levels from the ileum specimens of selenium-treated rats were significantly lower than that of the I/R group (P<0.05). Our results provide evidence that the relationship between BT and lipid peroxidation in intestinal tissue is crucial. Selenium pretreatment reduces lipid peroxidation which contributes to the maintenance of intestinal mucosal integrity.