TGF—β1对瘢痕对纤维细胞α—SMA表达的诱导作用

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对瘢痕成肌纤维细胞中α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）表达的诱导作用。方法 以５例增生性瘢痕为标本,３例正常瘢痕为对照,２成纤维细胞二维培养和三维培养体系及ＬＳＡＢ免疫组织化学染色技术,观察了在不同ＴＧＦ－β１浓度条件作用下,来源的于增生性瘢痕和正常瘢痕在成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的情况。结果 （１）不同浓度的ＴＧＦ－β１诱导瘢痕成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的作用不     

成釉细胞纤维肉瘤间叶细胞的电镜和免疫组化研究

为探讨成釉细胞纤维肉瘤（ＡＦＳ）间叶细胞的本质及特征,作者爱采免疫组化和电镜技术,对３例ＡＦＳ间叶细胞进行了研究,并与６例成釉细胞纤维瘤比较。结果显示：ＡＦＳ的间叶细胞主要由成纤维细胞构成,此外尚有少许未分化间叶细胞和细胞,偶见肌纤维母细胞。成纤维细胞仅表现Ｖｉｍｅｎｔｉｎ阳性,肌纤维母细胞呈Ｖｉｍｅｎｔｉｎ,ＨＨＦ３５及α－ＳＭＡ阳性,组织细胞ＰＧ－Ｍ１和ＫＰ１标记均一,可能是炎症或钢疫反应的产     

瘢痕成纤维细胞的MMP-3 mRNA表达及其基因转染

目的：探讨增生性瘢痕组织中细胞外间质（ＥＣＭ）的过度沉积机制，并探索其基因治疗途径。方法：体外培养瘢痕成纤维细胞（ＨＳＦ），构建间质溶解素１（ＭＭＰ－３）逆转录病毒载体，利用基因转染技术将ＭＭＰ－３基因转入ＨＳＦ，核酸分子杂交检测ＭＭＰ－３的ｍＲＮＡ表达水平。ＤＮＰ－多肽降解法检测间质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）活性，辅以正常皮肤成纤维细胞作对照。结果：ＨＳＦ表达ＭＭＰ－３ｍＲＮＡ水平及降解ＤＮＰ－多肽     

硫酸软骨素A对NIH－3T3鼠成纤维细胞及人皮肤成纤维细胞增殖的影响

用ＭＴＴ法检测了硫酸软骨素Ａ（４－硫酸软骨素，ＣＳ－Ａ）对ＮＩＨ－３Ｔ３鼠成纤维细胞和人皮肤成纤维细胞存活与增殖的影响。发现所侧ＯＤ值随ＣＳ－Ａ浓度的增高而增大，两者呈正相关（３Ｔ３鼠成纤维细胞：ｒ＝０．８１５４，Ｐ＜０．０５；人皮肤成纤维细胞：ｒ＝０．９１５，Ｐ＜０．０１），表明ＣＳ－Ａ对这两类成纤维细胞的存活和增殖有促进作用。采用ＰＡＰ和ＡＢＣ免疫细胞化学染色，观察到两类细胞的胞膜上有ＣＳ分布，提示ＣＳ可能参与膜结构的组成，对细胞－细胞与细胞－基质之间的相互作用有重要意义；为进一步探讨硫酸软骨素在肝纤维化中的作用提供了可靠的实验依据。     

地塞米松对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的影响

目的：探讨地塞米松对人α１（Ⅰ）原胶原基因调控序列的作用。方法：用组织块法原代培养人皮肤成纤维细胞并进行传代培养作为本研究的模型细胞。（１）采用ＢｒｄＵ掺入的ＥＬＩＳＡ法，测定经不同浓度地塞米松处理２４ｈ后成纤维细胞的增殖情况。（２）构建含长短不一的人α１（Ⅰ）原胶原基因５’侧翼序列与氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）报告基因的３种重组质粒，以脂质体法转染人皮肤成纤维细胞，ＥＬＩＳＡ法测定不同浓度地塞米     

瘢痕成纤细胞整合素表达实验研究

目的：了解在体外培养的瘢痛及正常皮肤来源的成纤维细胞整合素表达情况。方法：应用β１及α１￣α４整合素单克隆抗体对成纤维细胞进行整合素原侠ＥＬＩＳＡ检测，观察不同培养时期瘢痛成纤维细胞的β１及α１￣α４整合素表达水平，辅以正常皮肤成纤维对细胞做对照。结果：培养的瘢痛成纤维细胞整合素各亚型表达均明显高于同期培养的正常皮肤成纤维细胞表达水平（Ｐ〈０．０１）；细胞经较长时间培养后，整合素的表达均有所下降，     

硫酸软骨素A对NIH—353鼠成纤维细胞及人皮肤成纤维细胞增…

用ＭＴＴ法检测了硫酸软骨素Ａ（４－硫酸软骨素，ＣＳ－Ａ）对ＮＩＨ－３５３鼠成纤维细胞和人皮肤成纤维细胞存活与增殖的影响。发现所测ＯＤ值随ＣＳ－Ａ浓度的增高而增大，两者呈正相关（３Ｔ３鼠成纤维细胞；ｒ＝０．８１５４，Ｐ＜０．０５；人皮肤成纤维细胞；ｒ＝０．９１５，Ｐ＜０．０１），表明ＣＳ－Ａ对这两类成纤维细胞的存活和增殖有促进作用。采用ＰＡＰ和ＡＢＣ免疫细胞化学染色，观察到两类细胞的胞膜上有ＣＳ分布     

肌成纤维细胞凋亡与肥厚性瘢痕消退的关系

目的：探讨肥厚性瘢痕消退与细胞凋亡的关系。方法：应用光镜,电镜,ＴＵＮＥＬ技术和免疫组织化学染色对６１例肥厚性瘢痕,２０例非肥厚性瘢痕和８例正常皮肤进行细胞凋亡,α－ＳＭ－ａｃｔｉｎ表达的分析。结果：肥厚性瘢痕中大多数肌成纤维细胞表达α－ＳＭ ａｃｔｉｎ;肥厚性瘢痕中存在细胞凋亡现象,肥厚性瘢痕消爱过程中成纤维细胞数的减少与肌成纤维细胞凋亡增加相一致。结论：细胞凋亡现象是了性瘢痕退化过程中肌成纤维     

c-ski 对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响

目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达,并在转染c-ski基因后,利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR检测型胶原分泌、α-SMA细胞免疫组化检测肌成纤维细胞分化的改变。结果大鼠皮肤成纤维细胞内有c-Ski蛋白的表达,且主要表达在细胞核内,c-ski可以以剂量依赖的方式增加皮肤成纤维细胞的增殖活力,并可降低型胶原蛋白和mRNA的水平,但不改变皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程。结论c-ski促进细胞增殖但降低胶原分泌的作用可能对促进创伤愈合、降低瘢痕形成有着重要的意义。     

c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响

目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、Ⅰ型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达，并在转染c-ski基因后，利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR检测Ⅰ型胶原分泌、α-SMA细胞免疫组化检测肌成纤维细胞分化的改变。结果大鼠皮肤成纤维细胞内有c-Ski蛋白的表达，且主要表达在细胞核内，c-ski可以以剂量依赖的方式增加皮肤成纤维细胞的增殖活力，并可降低Ⅰ型胶原蛋白和mRNA的水平，但不改变皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程。结论c-ski促进细胞增殖但降低胶原分泌的作用可能对促进创伤愈合、降低瘢痕形成有着重要的意义。     

聚乳酸对体外培养的骨髓基质细胞生物学行为的影响

目的 检测聚乳酸（ＰＬＡ）对骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）体外成骨的过程及其生物学行为的影响。方法 将ＢＭＳＣ传代细胞分别与ＰＬＡ进行复合培养，观察细胞生长基与生物材料附着情况，检测ＭＢＳＣ的增殖能力，蛋白含量及碱性磷酸酶（ＡＬＰ）含量。结果 ＢＭＳＣ可以在ＰＬＡ表面贴附，ＰＬＡ对ＢＭＳｃ的增殖及功能表现无明显差异。结论 ＰＬＡ的生物相容性良好，有望作为ＢＭＳｃ的载体用于骨组织工程研究。     

四氯化碳诱导大鼠肝纤维化过程中肝内细胞骨架蛋白表达的变化

探讨肝纤维化发生过程中，细胞骨架蛋白—结蛋白（Ｄｍ）和α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）阳性细胞动态变化的规律以及这些阳性细胞之间的关系。方法用四氯化碳辅以低胆碱饲料诱导大鼠肝纤维化，应用免疫组化、电镜技术和图像分析方法对肝纤维化过程中出现的Ｄｍ和α－ＳＭＡ阳性细胞进行定位和定量研究。结果α－ＳＭＡ阳性细胞的变化几乎与Ｄｍ阳性细胞同步，两者于实验早期均有增生，但前者少于后者，至纤维间隔大量形成时（１２周），两者增生均达到最高峰，但前者多于后者，以后两者均逐步下降；从形态分析，Ｄｍ和α－ＳＭＡ阳性细胞主要为贮脂细胞（ＦＳＣ），部分卵圆细胞和新生胆管上皮细胞也表达此两种骨架蛋白。结论除了ＦＳＣ以外，α－ＳＭＡ和Ｄｍ阳性卵圆细胞也可能在肝纤维化发生发展中起重要作用。     

结节性筋膜炎的免疫组织化学检测

①目的探讨结节性筋膜炎的组织来源和细胞分化，以及免疫组织化学检测对其鉴别诊断的意义。②方法用波形蛋白（Ｖｉｍ）、结蛋白（Ｄｅｓ）、平滑肌肌纤蛋白（ＳＭＡ）、肌红蛋白（ＭｙＧ）、肌球蛋白（Ｍｙｓ）、Ｓ１００蛋白（Ｓ１００）、神经原纤维（ＮＦ）、Ⅷ因子相关抗原（Ⅷｆ）、溶菌酶（Ｌｙｓ）和α１抗胰蛋白酶（ＡＡＴ）进行免疫组化标记。③结果病灶中纤维母细胞样细胞对Ｖｉｍ，ＳＭＡ，ＭｙＧ，Ｍｙｓ，Ｓ１００蛋白、Ｌｙｓ和ＡＡＴ呈不同程度阳性反应，实验结果支持病灶起源于间叶组织细胞，并具有向平滑肌、横纹肌、组织细胞及血管等多向分化能力。④结论多种抗体标记对本病的组织来源及诊断与鉴别诊断有一定的应用价值     

成釉细胞纤维肉瘤间叶细胞的电镜和免疫组化研究

为探讨成釉细胞纤维肉瘤（ Ａ Ｆ Ｓ）间叶细胞的本质及特征, 作者采用免疫组化和电镜技术,对３例 Ａ Ｆ Ｓ间叶细胞进行了研究,并与６例成釉细胞纤维瘤进行比较。结果显示： Ａ Ｆ Ｓ的间叶细胞主要由成纤维细胞构成,此外尚有少许未分化间叶细胞和组织细胞, 偶见肌纤维母细胞。成纤维细胞仅表现 Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ 阳性。肌纤维母细胞呈 Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ, Ｈ Ｈ Ｆ３５及 α Ｓ Ｍ Ａ 阳性。组织细胞 Ｐ Ｇ Ｍ１ 和ｋｐ１标记均阳性, 可能是炎症或免疫反应的产物。与成釉细胞纤维瘤比较, Ａ Ｆ Ｓ间叶细胞具备较高的 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 阳性标记率, 提示 Ａ Ｆ Ｓ的增生活性较高。     

病理性瘢痕和正常皮肤来源成纤维细胞CD90、α-SMA表达的研究

目的检测体外培养的病理性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中CD90、α-SMA表达情况,并分析二者的相关性。方法取手术切除的瘢痕疙瘩4例、增生性瘢痕12例、正常皮肤（瘢痕边缘）16例,每组标本中选取特异性较强的组织块各3例,原代培养不同组织来源的成纤维细胞,取第3代细胞制成细胞爬片,免疫荧光双重标记（CD90和α-SMA）细胞,通过计算每系成纤维细胞CD90、α-SMA的荧光值,检测成纤维细胞中CD90、α-SMA的表达情况,并分析CD90和α-SMA表达的关系。结果增生性瘢痕来源成纤维细胞的CD90表达强于正常皮肤的成纤维细胞（P〈0.05）,瘢痕疙瘩来源成纤维细胞的CD90表达和正常皮肤的表达无差异（P〉0.05）;增生性瘢痕与其周围皮肤、瘢痕疙瘩与其周围正常皮肤来源成纤维细胞的α-SMA表达均无差异（P〉0.05）;在同一细胞内CD90和α-SMA具有共区域和共趋势表达的特点。结论增生性瘢痕来源的成纤维细胞存在CD90多量表达的特异表型,瘢痕成纤维细胞CD90和α-SMA有共区域表达的特点和一致的表达趋势,二者可能有一定的协同关系。     

茶多酚对原代培养的大鼠皮肤角朊细胞和成纤维细胞生长的影响

目的　探讨茶多酚对原代培养的皮肤角朊细胞和成纤维细胞生长作用的影响。方法　利用原代培养的两种主要的皮肤细胞———角朊细胞和成纤维细胞,采用丙酮酸比色法、ＴＢＡ比色法和ＤＴＮＢ（双硫代对硝基苯甲酸）法测定细胞培养的上清液胞浆酶（ＬＤＨ）释放情况、脂质过氧化产物（ＭＤＡ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）,并测定培养细胞的生长情况,对茶多酚在皮肤中可能起到的作用进行评价。结果　在加入茶多酚后不同时间,发现茶多酚具有保护细胞膜的功能,即减少ＬＤＨ的释放、减少ＭＤＡ产生、增加ＧＳＨＰｘ含量、促进细胞生长。结论　体外实验表明茶多酚具有促进皮肤细胞生长、抗脂质过氧化的功效,其最低有效作用浓度为０．０５％～０．１％。     

肺血管周细胞增生分化与慢性肺动脉高压发生的关系

为证实周细胞增生和分化与慢性肺动脉高压的关系,用ＭＴＴ法、流式细胞术及免疫组化分别检测低氧对培养的大鼠肺血管周细胞的增生及活性、细胞周期和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ） 表达的影响。同时复制慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型,定量分析腺泡内肺动脉（ＩＡＰＡ）三种类型血管的构成比及其结构改变。结果表明,低氧组周细胞的ＭＴＴ和ＰＣＮＡ吸光度均较常氧组高。细胞周期中, 处于Ｇ０、Ｇ１ 期的细胞百分值, 低氧组较常氧组低, 但Ｓ期细胞百分值升高。低氧组大鼠ＩＡＰＡ内环肌型动脉构成比和α－ＳＭ－ａｃｔｉｎ 抗原表达的吸光度较常氧组者高。结论： 低氧促进肺血管周细胞的增生、分化可能是无肌型肺动脉肌化的重要细胞来源和慢性肺动脉高压发生的重要结构基础     

低氧对人胚肺成纤维细胞表型与增生的影响

采用单层细胞超薄切片技术和免疫细胞化学方法， 观察常氧（Ｎ）、低氧（Ｈ）、常氧和低氧猪肺动脉内皮细胞条件培养液（ＮＥＣＣＭ 和ＨＥＣＣＭ） 等不同条件， 对肺血管外膜成纤维细胞的表型与增殖的影响。结果表明： （１） 仅ＨＥＣＣＭ 组成纤维细胞显示表型转变，胞浆内出现微肌丝、致密体、基膜等平滑肌细胞超微结构，粗面内质网明显减少；且此组细胞α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ） 表达较其余３ 组明显增高（Ｐ＜ ０． ０１）； （２） Ｈ 和ＨＥＣＣＭ 组增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ） 表达较Ｎ 和ＮＥＣＣＭ 组明显升高（Ｐ＜ ０． ０１）。结果提示： （１） 低氧可经肺动脉内皮细胞介导， 引起人胚肺成纤维细胞向平滑肌样细胞转化，而单纯低氧无此作用；（２） 低氧可直接或经内皮细胞介导，刺激人胚肺成纤维细胞增殖。     

PDGF-AB对成纤维细胞表达α-SM actin的影响

目的:研究PDGF-AB对成纤维细胞表达α-SM actin的影响,探讨PDGF-AB促进伤口愈合的作用机制. 方法:取体外培养的人正常皮肤成纤维细胞,用免疫组化(SABC)观察PDGF-AB对成纤维细胞表达α-SM actin的影响. 结果:PDGF-AB能诱导成纤维细胞表达α-SM actin,且呈剂量依赖性关系. 结论:PDGF-AB可能通过刺激成纤维细胞表达α-SM actin,促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,增加伤口收缩,促进伤口愈合.     

实验性低氧性肺血管改建的α—平滑肌肌动蛋白表达和超微结构观察

用α－ＳＭＡ免疫组化标记及透射电镜观察低氧对Ｈｉｌｌｔｏｐ大鼠肺血管床的影响，结果显示：肌性动脉α－ＳＭＡ阳性细胞分布范围增宽，强度增强，非肌性血管内膜下有阳性细胞出现；肺泡隔内出现α－ＳＭＡ阳性细胞；肺泡道的肺泡开口处理α－ＳＭＡ阳性细胞增多且反应增强；肺血管密度增加；电镜显示肺间质中可见浆内有肌丝的肌纤维母细胞及成熟的平滑肌细胞。观察结果提示：低氧使肺血管床肌化延伸到远端微小血管；低氧性肺动脉