STAGO Compact血凝检测系统测定FIB的性能评价

目的 验证STAGO Compact血凝检测系统测定FIB的分析测量范围(AMR)和临床可报告范围(CRR).方法 按照NCCLS EP6-A文件要求,对本实验室STAGO公司COMPACT血凝检测系统检测FIB进行AMR和CRR的验证实验.结果 FIB的功能灵敏度为0.47 g·L-1;AMR在1.3～8.83 g·...     

化学发光法检测涎液化糖链抗原KL-6的方法学评价

目的按美国病理家协会(CAP)实验室认可的要求,对Lumipulse G1200化学发光系统检测涎液化糖链抗原(KL-6)进行方法学评价和本实验室参考区间验证。方法取高、中、低浓度混合血清,分别进行批内20次和连续20d检测,分析批内不精密度和批间不精密度;将高浓度和低浓度血清按一定比例混合进行检测,验证分析测量范围(AMR);取接近厂商提供最低检测限值的样本连续检测12d,进行可报告低限值(LoQ)验证;将高浓度血清按一定比例稀释,分析样本稀释后理论值和检测值的符合程度,得出临床可报告范围(CRR);取206名健康人群血清检测KL-6,进行参考区间验证。结果高、中、低浓度样本批内不精密度评价变异系数的CV分别为2.63%、2.52%和2.74%;批间不精密度评价的CV分别为3.48%、2.72%和3.86%;AMR为52~10000U/mL;LoQ为54.6U/mL;CRR为5.2~100 000U/mL;本实验室206名健康人群KL-6的检测结果为82~465U/mL,平均(183±71)U/mL。结论该系统检测性能符合CAP要求。     

HPLC法测定阿奇霉素片的含量

目的:建立HPLC法测定阿奇霉素片的含量.方法:采用Shodex Asahipak ODP-50(4.6 mm×250mm,5μm)C18柱,流动相为0.04 moL·L-1磷酸氢二钾溶液(称取6.97 g磷酸氢二钾,加水750 mL使溶解,用1moL·L-1的氢氧化钾溶液调节pH值至11.0±0.1再加水稀释至1 000 mE)-乙腈(40:60),流速为1.0 mE·min-1,检测波长为215 mn;柱温40℃;结果:阿奇霉素的线性范围为2.187～8.399 g·L-1,平均回收率为99.9%(RSD 0.15%).结论:本方法简便、迅速、灵敏度高、重现性好,可用于测定阿奇霉素片的含量.     

甲醛残留检验方法研究

目的通过对用乙酰丙酮光度测定甲醛含量方法的研究,确定甲醛残留量用该检验方法检测的线性、灵敏度和回收率(准确度)。确保该方法对甲醛残留浓度检测结果的准确性。方法乙酰丙酮光度法,本方法的最低检出浓度为0.04mg.L-1甲醛;测定上限为3.20mg·mL-1甲醛。结果该方法的线性范围是0～3.2g.mL-1,检测方法的回收率为98.9%,定量限为0.0413μg.mL-1,确定了凡残留量浓度在0.04～3.2μg.mL-1的范围内,均可采用此方法检测。结论此方法操作简单,精密度、准确度、重复性较好。     

HPLC法测定谷维素双维B片中维生素B1和维生素B6的含量

目的:建立HPLC同时测定谷维素双维B片中维生素B1和维生素B6的含量.方法:采用C18柱;以0.04%戊烷磺酸钠-2%冰醋酸.甲醇(35:45:20)为流动相;检测波长:276nm;流速:1.0 mL·min-1.结果:维生素B1在50.64～118.16μg·L-1范围内峰面积与浓度具有良好线性关系,维生素B6在117.84～274.96μg·L-1范围内峰面积与浓度具有良好线性关系;维生素B1的回收率为:99.41%,RSD 1.45%(n=6);维生素B6的回收率为:99.16%,RSD 1.42%(n=6).结论:该方法准确、灵敏度高、重现性好、结果准确.     

高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法快速测定人尿中帕洛诺司琼的浓度

目的:建立快速测定人尿中帕洛诺司琼浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法:以AgilentTCC18柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱;流动相为乙腈-0.04mol.L-1甲酸铵水溶液(含0.04%甲酸)(69∶31),流速0.6mL·min-1;柱温25℃;醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,样品通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对帕洛诺司琼(m/z297.2→82.2)和内标地西泮(m/z285.1→154.0)测定。结果:帕洛诺司琼高(80μg.L-1)、中(50μg.L-1)、低(5μg.L-1)3个浓度的平均回收率RSD均小于15%;线性范围为2.5～100μg.L-1,回归方程为F=27.135ρ-0.0582,r=0.9999(n=6),权重系数为1/ρ,分析方法的最低定量限为2.5μg.L-1。结论:该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于帕洛诺司琼临床尿药浓度监测和药动学研究。     

HPLC法测定复方盐酸林可霉素凝胶中盐酸林可霉素的含量

目的建立复方盐酸林可霉素凝胶中盐酸林可霉素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法(RP-HPLC),色谱柱:AgilentTC-C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:0.01mol.L-1硼砂溶液(用85%磷酸溶液调节pH值至6.0)-甲醇(40∶60,v/v);流速:1.0ml.min-1;检测波长:214nm。结果盐酸林可霉素0.04g.L-1～1.6g.L-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率为99.79%,RSD=1.74%(n=9)。结论此法操作简便、结果准确、重现性好,可用于复方盐酸林可霉素凝胶的质量控制。     

褪黑素对HeLa细胞的生长及NF-κB蛋白表达的影响

目的探讨褪黑素(melatonin,MT)对HeLa细胞生长的影响及其对HeLa细胞中NF-κB蛋白表达的影响。方法 MTT法观察药物对HeLa细胞生长的影响,吖啶橙(acri-dine orange,AO)和溴化乙锭(ethidium bromide,EB)双染荧光显微镜观察MT对HeLa细胞形态学的影响,Western blot法检测HeLa细胞中的NF-κB蛋白水平。结果 MT作用72h,抑制HeLa的IC50为61.71 mg.L-1;MT 1 g.L-1作用1、2、3 d,细胞坏死随作用时间延长而增多;MT 0.2 g.L-1作用1,2、3 d以及MT 0.008、0.04和0.2 g.L-1作用3 d可下调HeLa细胞NF-κB蛋白水平,存在剂量依赖性与时间依赖性。结论 MT抑制HeLa细胞增殖可能与其下调NF-κB蛋白水平有关。     

高脂血清对糖化血清蛋白测定的影响及处理方法

目的探讨不同浓度含脂血清对糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)测定的影响以及处理方法。方法取健康雄性新西兰大白兔血清加脂肪乳模拟不同浓度的高脂血清,果糖胺法测定GSP含量。结果脂血浓度超过5mL.L-1以上,可显著影响GSP测定结果。脂血浓度小于10mL.L-1时,采用生理盐水4倍稀释;脂血浓度达到20mL.L-1及以上时,采用200g.L-1聚乙二醇(PEG)6000等比稀释,可明显消除含脂血清对GSP测定的影响。结论血清中的脂肪含量过高会影响GSP含量的测定结果,采用生理盐水或200g.L-1PEG进行样本预处理可提高GSP测定结果的准确性。     

催化荧光法测定富硒中药中的硒(Ⅳ)含量

目的:建立富硒中药材中硒的测定方法。方法:在稀硫酸介质中,痕量硒(Ⅳ)能够催化溴酸钾氧化中性红使其发生荧光猝灭,且催化前后中性红荧光强度的变化(ΔF)与硒的含量在一定范围内呈良好的线性关系,摸索了实验条件对催化体系的影响。结果:方法的线性范围为12～60μg.L-1,检出限为5.2μg.L-1,回收率为95%～105%。结论:该方法简便、快速、准确,可作为中草药中痕量硒的一种快速分析方法。     

GC-MS法测定广藿香油中塑化剂的含量

目的 建立一种广藿香油中邻苯二甲酸酯类塑化剂的定性检查及含量测定方法.方法 以不同广藿香油作为样品,经正己烷溶解、超声波辅助提取等预处理,以保留时间定性,外标法定量.结果 15种邻苯二甲酸酯类塑化剂检测的线性范围在0.05～1.0 mg·L-1之间,检出限在0.5～5μg·L-1之间,回收率为92.53％～102.4％...     

HPLC法测定复方利血平片中氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪和利血平的含量

目的 建立HPLC法测定复方利血平片中氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪和利血平的含量。方法采用C18柱为固定相（150mm×4．6mm×5μm）,0．01mol·L^-1庚烷磺酸钠：乙腈：三乙胺（53：47：0．1）,用磷酸溶液调节pH至5．5为流动相,检测波长为230～380nm。结果氢氯噻嗪在0．1934—2．9013g·L^-1浓度范围内线性关系良好,r=0．9999,平均加样回收率为100．44％,RSD为0．54％（n=6）;盐酸异丙嗪在0．135～2．025g·L^-1浓度范围内线性关系良好,r=1．0000,平均加样回收率为100．25％,RSD为0．18％（n=6）;利血平在1．965—29．475mg·L^-1浓度范围内线性关系良好,r=1．0000,平均加样回收率为100．73％,RSD为0．47％（n=6）。结论该方法具有操作简便、结果准确的优点,可用于复方利血平片中氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪和利血平的含量。     

荆芥内酯大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的:研究荆芥内酯与大鼠血浆蛋白的结合情况。方法:采用平衡透析法测定体外荆芥内酯对大鼠血浆蛋白的结合率,以HPLC法测定透析袋两侧溶液中荆芥内酯的质量浓度,计算其血浆蛋白结合率。结果:荆芥内酯与内标完全分离,血浆中其他成分无干扰,在0.05～50.3μg.mL-1浓度范围内线性关系良好。日内、日间精密度及提取回收率均符合方法学要求。低、中、高(0.08,0.63,6.30μg.mL-1)质量浓度下,荆芥内酯在大鼠血浆中的蛋白结合率分别为(62.23±1.25)%,(62.71±0.04)%和(63.99±0.79)%。结论:该方法操作简便、快速、准确,灵敏度高,能满足生物样品的分析要求。荆芥内酯具有中等强度的蛋白结合率,蛋白结合率与透析液的药物浓度无关。     

离子色谱法测定天麻中二氧化硫残留量

目的建立离子色谱法测定天麻中二氧化硫残留量的检测方法。方法样品经30mL.L-1盐酸水溶液蒸煮,氮气作载气,导出后用30mL.L-1双氧水氧化吸收,再煮沸除去剩余的双氧水,用去离子水转移至25mL量瓶中,并稀释至刻度作为供试溶液,使用离子色谱仪分析。用A-SUPP5-150阴离子分析柱,3.2mmol.L-1碳酸钠溶液-1.0mmol.L-1碳酸氢钠溶液为淋洗液,流速为0.7mL.min-1;进样量为20μL。结果线性范围(以SO2计)为1.667～133.38μg.mL-1,平均回收率为98.0%。结论测定方法简便,精密度、重复性良好,准确度较高。     

气相色谱法测定恩替卡韦原料药中有机溶剂残留量

目的建立毛细管气相色谱法测定抗病毒原料药恩替卡韦中的有机溶剂残留量。方法采用DB-624毛细管色谱柱,FID检测器。载气为N2,流速为2ml·rain-1,进样口温度250℃,检测器温度为250℃。结果甲醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、三乙胺、甲苯和苯甲醇的线性范围分别为0．06018～0．6018g·L-1（r=0．9973）、0．01202～0．1202g·L-1（r=0．9968）、0．00578～0．0578g·L-1（r=0．9972）、0．10348～1．0348g·L-1（r=0．9972）、0．01706-0．1706g·L-1（r=0．9968）、0．10126～1．0126g·L-1（r=0．9957）、0．01806-0．1806g·L-1（r=0．9983）和0．10074～1．0074g·L-1（r=0．9993）;平均回收率（n=9）分别为98．6％（RSD：2．36％）、95．5％（RSD=5．98％）、96．9％（RSD=4．36％）、100．5％（RSD=2．02％）、102．3％（RSD=3．86％）、100．1％（RSD=1．56％）、102．4％（RSD=1．88％）、99．4％（RSD=1．63％）。结论该方法操作简便、准确、灵敏度高、重复性好,适用于恩替卡韦原料药中有机溶剂残留量的测定。     

伊来西胺片溶出度测定方法研究

目的建立测定伊来西胺片溶出度的高效液相色谱方法。方法以0.1mol.L-1盐酸溶液为溶出介质,转速为75r.min-1,取样时间为45min。结果线性范围为10～100μg.mL-1,R=0.9999;平均回收率为100%。结论本方法操作简便,结果准确可靠。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中紫杉醇的浓度

目的 建立反相高效液相色谱法测定人血浆中紫杉醇的浓度.方法 采用Dima kromasil C18柱;以地西泮为内标;以蛋白沉淀法提取血浆中的紫杉醇;以乙腈-水(53:47 )为流动相;流速为1.0 ml·min-1 ;检测波长为227 nm ;进样量为20 μl.结果 血浆中紫杉醇线性范围为0.078～5.0 mg·L-1,相关系数r=0.999 9 (n=8);平均提取回收率82.97%;平均加样回收率93.29%,日内、日间精密度RSD 均小于10%.结论 该法取样量少,操作简单,分离完全,结果可靠,回收率高,适用于临床紫杉醇的血浆中药物浓度监测和药代动力学研究.     

HPLC法测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱和盐酸苯海拉明的含量

目的建立高效液相色谱法测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明含量的方法。方法采用Kromasil C18色谱柱,流动相A为20mL.L-1乙腈的甲醇溶液,流动相B为0.02mol.L-1 KH2PO4-三乙胺(100∶0.2),用磷酸调pH为3.0,用梯度洗脱方式,检测波长210nm,流速1.0mL.min-1,柱温35℃。结果盐酸麻黄碱质量浓度在0.049 4～0.247 0mg.mL-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.4%,RSD为1.1%(n=9);盐酸苯海拉明质量浓度在0.020 6～0.102 8mg.mL-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率为101.6%,RSD为1.3%(n=9)。结论用HPLC测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明含量的方法准确,能有效控制该制剂的质量。     

HPLC-PDA法测定速效止泻胶囊中盐酸小檗碱的含量

目的建立以高效液相色谱法测定速效止泻胶囊中盐酸小檗碱和没食子酸含量的方法。方法采用SunfireTM C18(5μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱,柱温:35℃。流动相为甲醇-乙腈-0.1%磷酸(3:2:95),采用梯度洗脱程序,流速1.0 ml·min-1,进样量为20μl,检测波长:270 nm。结果盐酸小檗碱在20.931~209.31 mg.L-1范围内呈良好的线性关系,r=1.000 0,平均回收率为100.02%,RSD=1.5%(n=6)。没食子酸在13.075~130.754 mg.L-1范围内呈良好的线性关系,r=1.000 0。结论该方法简单、快速、准确、重现性好,能够较好地控制该产品的质量。