明胶/细菌纤维素复合材料生物相容性的实验研究

目的探讨明胶/细菌纤维素复合支架材料生物相容性。方法将明胶（Gel）和细菌纤维素（BC）通过物理混合法和化学交联法制备成物理组Gel/BC和化学组Gel/BC,以BC为对照组,对3种支架材料进行细胞粘附实验,MTT比色法测定细胞增殖情况,扫描电镜观察细胞的生长情况。将3种材料分别植入20只雄性新西兰大白兔下颌骨缺损模型中,分别于4,8,12 w进行组织学染色分析、电镜扫描指标检测,统计学分析,比较各组修复骨缺损的效果。结果与对照组比较,实验组细胞增殖有统计学差异（P〈0.05）,SEM观察可见3组材料中均有细胞的粘附,细胞在物理组Gel/BC上生长状态好于其他两组,胞体均较饱满,伪足较多。体内植入后分别于4,8,12 w经扫描电镜和组织学观察,观察期间材料和骨组织由纤维结缔组织构成,物理组Gel/BC更加致密,空隙更小,骨小梁,新生骨均优于对照组。结论物理组Gel/BC对骨的修复效果最好,化学组Gel/BC次之,均优于BC。明胶/细菌纤维素复合支架材料具有良好生物相容性,有望成为新一代骨组织工程替代材料。     

成骨细胞与BC/PLA/HA复合支架材料体外培养的初步结果

目的探讨成骨细胞在细菌纤维素/聚乳酸/羟基磷灰石复合支架中的生长和增殖情况。方法将成骨细胞以5×104/ml的密度接种于细菌纤维素(BC)、细菌纤维素/聚乳酸(BC/PLA)、细菌纤维素/聚乳酸/羟基磷灰石(BC/PLA/HA)三种支架中,进行体外培养。采用MTT比色法测定1、3、5、7 d的成骨细胞增殖情况;碱性磷酸酶活性测定法检测3、6、9 d的碱性磷酸酶活性变化,并通过扫描电镜观察细胞在复合支架中的形态变化。结果实验组与对照组比较1、3、5、7 d细胞的增殖量(OD值)有统计学差异(p<0.05),其中BC/PLA/HA组的OD值高于其他实验组;第3 d至第9 d三组细胞的ALP分泌量均呈上升趋势,各组间比较均有统计学差异(p<0.05);复合培养6d SEM观察可见三组材料中均有细胞的粘附,BC/PLA/HA组的细胞生长状态好于其他两组材料。结论 BC/PLA/HA较BC/PLA和BC有利于成骨细胞的增殖和生长。     

3种复合支架材料用于成骨细胞株体外复合培养的比较

目的检测细菌纤维素/明胶/羟基磷灰石(BC/GEL/HAP)复合支架材料对成骨细胞附着增殖的影响。方法实验采用小鼠胚胎成骨细胞株(MC3T3-E1)与细菌纤维素(BC)、细菌纤维素/明胶(BC/GEL)、细菌纤维素/明胶/羟基磷灰石(BC/GEL/HAP)3种支架材料进行体外复合培养。通过倒置显微镜观察MC3T3-E1细胞形态,分别于细胞与支架材料复合培养3、6、9 d后采用碱性磷酸酶活性测定法检测成骨细胞与支架材料结合能力,同时扫描电镜观察细胞生长的情况。结果细胞与支架材料复合培养3、6、9 d,实验组与对照组比较,各组之间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 3种支架材料均有利于细胞生长,其中细菌纤维素/明胶/羟基磷灰石复合支架材料的增殖效果更好。     

杜仲叶提取物/细菌纤维素/胶原支架材料修复骨缺损的实验研究

目的探讨细菌纤维素（BC）/胶原（Col）/杜仲叶提取物支架材料修复骨缺损的效果。方法将3种材料BC,BC/Col,BC/Col/杜仲叶提取物分别植入不同大白兔下颌骨的缺损区,分为对照组,胶原组和杜仲组,在术后4、8、12 w将大白兔处死后,在缺损区周围0.5 cm取材,锥体束CT检测缺损区新生骨的密度情况,扫描电镜观察新生骨和材料的衔接情况,组织学观察新生骨长入材料的情况。结果每时间点CT检测表明,杜仲组的数值最大,与其他两组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;扫描电镜显示各时间点杜仲组与材料的衔接最紧密;组织学表明缺损区均有成骨细胞的长入,其中杜仲组对骨的修复效果最好,胶原组次之,均优于对照组。结论杜仲叶提取物/细菌纤维素/胶原支架材料具有明显加速成骨的作用。     

细菌纤维素/明胶支架材料在成骨细胞体外培养中的应用

目的探索物理混合及化学交联两种方法制备的细菌纤维素(BC)/明胶支架材料用于成骨细胞体外培养的可行性。方法采取物理混合和化学交联两种方法将BC和明胶两者结合制备出海绵状复合体,接种成骨细胞后培养观察细胞形态,考察ALP活性表达,HE染色和共聚焦观察材料表面细胞情况和粘附。结果物理混合法制备的BC/明胶细胞增殖和粘附性能,ALP表达量优于单纯BC和化学交联制备的BC/明胶。结论物理混合法制备BC/明胶复合支架材料可以作为成骨细胞体外培养的良好载体。     

微束等离子喷涂羟基磷灰石涂层的细胞生物相容性研究

目的微束等离子喷涂由于喷涂功率低,喷涂温度低,可以解决等离子喷涂羟基磷灰石分解这一问题。因此,本研究以大气等离子喷涂羟基磷灰石涂层（APS-HA）为对照组,微束等离子喷涂羟基磷灰石涂层（MPS-HA）为实验组,研究微束等离子喷涂羟基磷灰石涂层（MPS-HA）的细胞生物相容性。方法以MC3T3-E1小鼠成骨细胞为实验细胞,将成骨细胞接种到两种喷涂方法的生物材料表面,采用扫描电镜（SEM）、四唑盐比色法（MTT）、碱性磷酸酶检测（ALP）,研究成骨细胞在两种生物材料表面形态、粘附、增殖、分化的影响。结果 APS-HA组和MPS-HA组均具有良好的生物相容性,MPS-HA组更有利于成骨细胞的生长、粘附、增殖,能促进成骨细胞向成熟的表型分化。结论微束等离子喷涂羟基磷灰石涂层（MPS-HA）与成骨细胞具有良好的相容性,材料表面有利于成骨细胞的粘附和增殖。为其成为新型口腔种植体提供理论依据。     

纯镁含锌微弧氧化生物涂层对成骨细胞生物活性的影响

目的为了调控纯镁的医用活性,将纯镁超声微弧氧化涂层进行化学镀锌,研究其对成骨细胞增殖和分化的影响。方法将纯镁超声微弧氧化后,进行化学镀锌,制备出表面含锌的涂层材料。实验分为三组:A组为超声微弧氧化对照组(MAO),B组为化学镀锌实验组(MAO-Zn),C组为碱处理后化学镀锌实验组(MAO-Na OH-Zn),用扫描电镜(SEM)测量与研究各组试件表面的形态,激光共聚焦显微镜观察成骨细胞的早期形态,用CCK-8法检测细胞增殖,并检测成骨细胞ALP活性。结果扫描电镜和激光共聚焦显示C组和B组表面细胞的生长和黏附均优于A组,C组优于B组。CCK-8和ALP的检测结果显示三组材料表面细胞的增殖、活性为C组>B组>A组,三组的比较差异均具有统计学意义。结论含锌MAO涂层具有良好的生物相容性,而经碱处理后的镀锌涂层生物相容性最佳。     

新型羟基磷灰石基支架材料的细胞相容性

目的观察成骨细胞与羟基磷灰石基支架材料的细胞相容性,并探讨中药作为骨支架材料的可行性,为骨组织工程学的临床应用提供依据。方法采用来自胎鼠颅盖骨成骨细胞为种子细胞,冷冻干燥技术制备羟基磷灰石(HA)/壳聚糖(CS)—丝素(SF)—中药淫羊藿(EP)多元混构支架材料,并以HA/CS、HA/CS-SF作为对照进行体外复合培养,通过倒置显微镜、MTT比色法、ALP活性检测和扫描电镜观察分析细胞在材料上的增殖、分化、生长情况。结果成骨细胞在3种材料上皆有细胞附着,3种材料对细胞活性的影响规律为HA/CS-SF-EP优于HA/CS-SF优于HA/CS。结论HA/CS-SF-EP材料有望成为具有发展潜力的新型骨组织工程支架材料。     

Ⅳ型胶原对耐顺铂人肺腺癌细胞化疗诱导凋亡的影响

目的:探讨细胞外基质(extracelluarmatrix,ECM)成分中Ⅳ型胶原对耐药NSCLC细胞的药物敏感性和凋亡的影响,及磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3′kinase,PI3K)在其信号转导通路中的作用。方法:体外培养顺铂耐药人肺腺癌细胞株A549(A549/DDP),应用MTT比色法测定细胞增殖抑制率;通过细胞粘附实验观察细胞粘附状况;流式细胞仪检测DDP作用前后Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ,CⅣ)及PI3K抑制剂LY294002对细胞凋亡的影响。结果:CⅣ组及多聚赖氨酸(polylysine,PLL)组与不包被组相比,细胞粘附明显增加(P<0.001);而纤连蛋白(fibronectin,FN)的粘附与不包被组相比无明显差异(P>0.05)。CⅣ包被后DDP对A549/DDP的IC50由169.9μmol/L升高至258.3μmol/L,再联合LY294002则DDP对A549/DDP的IC50降至87.1μmol/L;CⅣ明显降低DDP引起的A549/DDP细胞凋亡,LY294002则可阻断CⅣ的这种保护作用(均为P<0.05)。结论:Ⅳ型胶原可能参与NSCLC耐药形成,PI3K可能是其信号转导通路之一。     

纯镁微弧氧化-NaOH(HF)-硅烷复合处理涂层细胞相容性研究

目的针对纯镁微弧氧化涂层存在孔隙,研究纯镁经过微弧氧化-氢氟酸-硅烷偶联和微弧氧化-氢氧化钠-硅烷偶联后处理的材料细胞相容性。方法试验材料分为三组,A组纯镁微弧氧化涂层,B组为微弧氧化-HF-硅烷偶联剂处理涂层,C组微弧氧化-Na OH-硅烷偶联剂处理涂层。采用CCK-8检测成骨细胞增值情况,碱性磷酸酶检测细胞活性,激光共聚焦检测成骨细胞粘附能力,扫描电镜观察细胞附着情况。结果三组试样随着时间增加,细胞的粘附、增殖、分化能力均得到提高;在相同时间内,C组高于B组,B组高于A组。结论纯镁微弧氧化经后处理材料细胞相容性好于纯镁微弧氧化材料,其中纯镁微弧氧化-Na OH-硅烷偶联处理的材料,生物相容性最好。     

lncRNA PVT1沉默对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及STAT3通路的影响

目的:研究沉默变异性浆细胞瘤异位1（plasmacytoma heterotopic 1,PVT1）基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、信号转导及转录活化因子（STATs）3通路的影响。方法:体外培养卵巢癌SKOV3细胞株,设计PVT1 siRNA序列,转染细胞,分为siRNA组、阴性对照组（NC）、空白对照组（BC）,利用qRT-PCR检测各组细胞PVT1相对表达量,利用MTT法检测细胞增殖情况,利用划痕实验检测细胞迁移能力,利用Transwell实验检测细胞侵袭能力,利用WB法检测STAT3通路相关蛋白表达情况。结果:转染后,siRNA3组细胞中PVT1表达水平较BC组与NC组显著降低（P＜0.05）;转染后,与BC组与NC组比较,siRNA3组细胞增殖率较BC组与NC组显著降低（P＜0.05）,迁移、侵袭细胞数显著降低（P＜0.05）,p-STAT3蛋白,MMP2、MMP9、CD44、PCNA蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。结论:沉默PVT1可能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭,其具体机制可能与STAT3信号通路有关。     

叶酸修饰埃洛石纳米管负载姜黄素对乳腺癌细胞及移植瘤的放射增敏作用

目的:探究叶酸修饰埃洛石纳米管负载姜黄素（HNTs-PEG-FA/Cur）对乳腺癌MCF-7细胞及4T1荷瘤鼠的靶向放射增敏作用。方法:用化学改性和物理吸附的方法合成纳米放疗增敏药物HNTs-PEG-FA/Cur，采用透射电子显微镜、傅里叶红外光谱仪和X射线光电子能谱仪进行形貌和化学组分表征，MTT法检测不同浓度纳米药物对人乳腺癌MCF-7细胞活性的影响，流式细胞术、活/死细胞荧光染色和克隆形成实验评估HNTs-PEG-FA/Cur联合放疗对MCF-7细胞的促凋亡作用和放射增敏作用。最后，通过建立乳腺癌4T1细胞小鼠移植瘤模型，评估联合治疗对小鼠肿瘤体积生长的抑制效果。结果:成功将姜黄素负载于叶酸修饰的HNTs管腔内。所制备的HNTs-PEG-FA/Cur在等效姜黄素浓度为5 μmol/L时对MCF-7细胞无明显毒性，并能有效增强X射线诱导的细胞凋亡和杀伤作用（增敏比为1.25）。体内抑瘤实验结果显示HNTs-PEG-FA/Cur联合放疗对小鼠肿瘤生长抑制率（56.75%）>单独射线组（24.16%）>单独药物组（6.67%）。结论:HNTs-PEG-FA作为姜黄素的新型纳米药物载体，能有效提高姜黄素生物利用度并且对乳腺癌具有靶向放射增敏潜力。     

BC200在乳腺癌细胞系中的表达及其作用

目的:探究长链非编码RNA BC200在不同侵袭力的人乳腺上皮细胞中的差异性表达，阐明BC200对人乳腺癌细胞迁移、增殖、侵袭及凋亡的生物学行为的影响。方法:通过实时定量PCR方法检测BC200在不同乳腺癌细胞系中的表达，通过慢病毒转染下调、过表达BC200，比较各组细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的变化。结果:BC200在MDA-MB-453细胞中表达最高，在BT549细胞中表达最低。转染过表达BC200慢病毒的BT549细胞的增殖、迁移、侵袭能力高于对照组，细胞凋亡低于对照组；转染下调BC200慢病毒的MDA-MB-453细胞的增殖、迁移、侵袭能力低于对照组，细胞凋亡高于对照组。结论:BC200在乳腺癌细胞中呈异常过表达。过表达BC200的乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力均增强并抑制凋亡，提示BC200在乳腺癌的发生发展中可发挥重要的促进作用。     

Physical and psychosocial functioning and adjustment to breast cancer. Long-term follow-up of a screening population

The effects of age, recency of breast cancer (BC) diagnosis, and severity of the disease on adjustment outcomes were investigated in a sample of 349 women from the 10,056 women screened for BC by the University of Michigan Breast Cancer Detection Demonstration Project between 1974 and 1981. In the 1985 follow-up, data were collected from the 173 surviving BC patients who had invasive BC, and from a matched control group of 176 women who were asymptomatic of BC. Fifty-five percent of the BC patients were 5 years past diagnosis and treatment at the time of data collection. The BC patients group as a whole did not differ from the asymptomatic control group on indicators of mental health, social and psychological well-being, or physical functioning. However, the BC group reported a greater number of diagnosed medical conditions that limited their activities, and taking more medications, than the asymptomatic group. Within the BC group, severity and recency of the cancer had strong independent adverse effects on several of the indicators of mental health and physical functioning. Advanced age had the same main effects in both groups: greater number of medications and diagnosed medical conditions that cause limitations in activities, but, in contrast, better mental health and well-being. Age had interactive effects with the recency and with severity of BC: more recent and severe cases of BC appeared to produce particularly serious difficulties in psychological adjustment for younger patients, and particularly serious medical problems and physical difficulties in adjustment for older patients.     

RNA干扰联合长春新碱对U937细胞体内外生长的影响

目的 从体外和体内两个方面探讨慢病毒载体介导小发卡shRNA(short harpin RNA,shRNA)靶向沉默同源盒A10(homeoboxA10,HOXA10)基因联合长春新碱（Vincristine,VCR）对U937细胞增殖和凋亡的影响。方法 将U937细胞分为干扰（KD）组、阴性对照（NC）组、空白对照（BC）组,经Western blot方法测定对HOXA10基因的沉默作用;MTT法检测各组细胞的IC50;流式细胞术（Flow cytometry,FCM）检测各组细胞的凋亡率;通过流式细胞仪分选出干扰组和阴性对照组绿色荧光蛋白（Green Fluorescent Protein,GFP）阳性的细胞,建立裸鼠AML皮下移植瘤模型（细胞活力>90%）,计算干扰组的抑瘤率。结果 流式细胞仪测得慢病毒对U937细胞的感染率>90%,干扰组HOXA10的蛋白水平为较BC组下降89.78%。下调HOXA10的表达水平可降低VCR对U937细胞的半数抑制浓度（half-inhibitory concentration,IC₅₀）,提高VCR诱导的U937细胞凋亡率,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。体内实验：干扰组肿瘤组织增长受到抑制。结论 慢病毒载体介导的RNA干扰下调HOXA10的表达水平可在体外和体内增强U937细胞对VCR的敏感度。     

Upregulation of Mir-34a in AGS Gastric Cancer Cells by a PLGA-PEG-PLGA Chrysin Nano Formulation

Background: Nano-therapy has the potential to revolutionize cancer therapy. Chrysin, a natural flavonoid, was recently recognized as having important biological roles in chemical defenses and nitrogen fixation, with anti-inflammatory and anti-oxidant effects but the poor water solubility of flavonoids limitstheir bioavailability and biomedical applications. Objective: Chrysin loaded PLGA-PEG-PLGA was assessed for improvement of solubility, drug tolerance and adverse effects and accumulation in a gastric cancer cell line (AGS). Materials and Methods: Chrysin loaded PLGA-PEG copolymers were prepared using the double emulsion method (W/O/W). The morphology and size distributions of the prepared PLGA-PEG nanospheres were investigated by 1H NMR, FT-IR and SEM. The in vitro cytotoxicity of pure and nano-chrysin was tested by MTT assay and miR-34a was measured by real-time PCR. Results: 1H NMR, FT-IR and SEM confirmed the PLGA-PEG structure and chrysin loaded on nanoparticles. The MTT results for different concentrations of chrysin at different times for the treatment of AGS cell line showed IC50 values of 68.2, 56.2 and 42.3 μM and 58.2, 44.2, 36.8 μM after 24, 48, and 72 hours of treatment, respectively for chrysin itslef and chrysin-loaded nanoparticles. The results of real time PCR showed that expression of miR-34a was upregulated to a greater extent via nano chrysin rather than free chrysin. Conclusions: Our study demonstrates chrysin loaded PLGA PEG promises a natural and efficient system for anticancer drug delivery to fight gastric cancer.