双抗体夹心-ELISA用于旋毛虫活动性感染的诊断及疗效考核

目的检测宿主血清中旋毛虫循环抗原 ( CAg)以诊断本病和考核药物疗效。方法双抗体夹心 -ELISA法。结果 94只实验感染旋毛虫小鼠 ,受染 3d后 ,即有 7%的小鼠显示阳性反应 ,受染 30 d,无论受染幼虫数目多寡 ( 50、1 50及 30 0条幼虫 /只 ) ,全部受染鼠 ( 1 0 0 % )均显示阳性反应。给予丙硫咪唑治疗后的第 1周 ,CAg的阳性率仍为 1 0 0 % ,但在治疗后第 2、3及 4周 ,则分别降为 60 %、2 0 %及 1 0 %。检测 61头感染旋毛虫猪血清中 CAg,4 0头 ( 65.6%± 6.1 % )呈阳性反应。 1 0 0头正常猪均为阴性 ,30头感染囊尾蚴和 30头感染弓形虫的猪 ,仅 1头感染弓形虫的猪出现轻度交叉反应。检测 36例旋毛虫病人血清中 CAg,2 6例 ( 72 .2 % )呈阳性反应。 50例正常人皆为阴性。 1 4 2例其他 9种寄生虫病人 ,仅 1例囊尾蚴病人出现轻度交叉反应。结论旋毛虫 CAg的检测具有早期诊断和考核药物疗效的价值。     

间接荧光抗体试验诊断人体旋毛虫病的研究

应用旋毛虫幼虫冰冻切片抗原ＩＦＡＴ检测２１６份旋毛病人血清，抗体阳性率为９０．７４％，发病后第１周抗体阳性率７０．５９％，第２周升至９１．３０％，有显著差异（Ｘ＾２＝６．５９，Ｐ〈０．０２５），至第３、４周分别达９５．８３％和１００％，丝虫，日本血吸虫及包虫病人和健康人血清均为阴性反应，华支睾吸虫，并殖吸虫及囊虫病人的假阳性率分别为３．３３％，２２．２２％及３．３３％，旋毛虫幼虫抗原片在－２０℃至     

间接荧光抗体试验诊断人体旋毛虫病的研究

应用旋毛虫幼虫冰冻切片抗原ＩＦＡＴ检测２１６份旋毛虫病人血清，抗体阳性率为９０．７４％，发病后第１周抗体阳性率７０．５９％，第２周升至９１．３０％，有显著差异（ｘ￣２＝６．５９，Ｐ＜０．０２５），至第３、４周分别达９５．８３％和１００％。丝虫、日本血吸虫及包虫病人和健康人血清均为阴性反应。华支睾吸虫、并殖吸虫及囊虫病人的假阳性率分别为３．３３％、２２．２２％及３．３３％。旋毛虫幼虫抗原片在－２０℃至少可保存２．５年而不丧失活性。ＩＦＡＴ诊断人体旋毛虫病具有较高的敏感性和特异性及良好的重复性和稳定性。     

BALB／C小鼠感染卫氏并殖吸虫后血清中循环抗原的动态

用滤纸血以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠血中循环抗原（ＣＡｇ），结果显示：小鼠感染卫氏并殖吸虫囊蚴后第３天检出ＣＡｇ，其阳性率为３８％，第１５天起ＣＡｇ达高峰，阳性率１００％，２６～５６天ＣＡｇ维持高水平，第７１天ＣＡｇ滴度下降，以后维持在一定水平，说明滤纸血可以代替血清作ＣＡｇ检测。以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫小鼠血中ＣＡｇ时，具有简便，敏感和特异的优点，可试用于肺吸虫感染的早期诊断和流行病学调查。     

小鼠实验感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化

目的观察小鼠感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化。方法将50只小鼠随机分成5组（每组10只），分别感染旋毛虫（T1）、乡土旋毛虫（T2）、布氏旋毛虫（T3）、伪旋毛虫（T4）及纳氏旋毛虫（T7），每只感染300条幼虫，感染后1～6周每周尾部静脉采血，6周后每2周尾部静脉采血，至感染后20周，用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清中抗旋毛虫IgG抗体水平。结果小鼠感染旋毛虫、乡土旋毛虫、布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫后3～5周，血清IgG抗体水平快速升高，至感染后第8周达高峰，此后旋毛虫和乡土旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平缓慢下降，布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平迅速下降；小鼠感染伪旋毛虫后3～5周血清IgG抗体水平快速升高，至第16周达高峰，之后缓慢下降。5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平差异具有显著性（P〈0．05）。结论5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平和动态变化不同；旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫（乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫）感染的血清学诊断及流行病学调查。     

旋毛虫病治疗前后血清抗体的观察

应用旋毛虫幼虫冰冻切片抗原免疫酶染色试验（ＩＥＳＴ）观察旋毛虫病治疗前和阿苯达唑治疗后血清抗体水平的变化，结果表明，感染后（治疗前）第２ｗｋ开始出现阳性反应，第４ｗｋ后阳性率均达以９０％以上，治疗后抗体阳性率第１ｗｋ为１００％，第３ｗｋ开始下降，第５ｗｋ后抗体滴度维持于了性低水平，１２ｗｋ后未见阳性反应，此现象可作为一种治疗有效的客观指标，对旋毛虫病近期及远期疗效考核均有一定价值。     

旋毛虫病治疗前后血清抗体的观察

应用旋毛虫幼虫冰冻切片抗原免疫酶染色试验（ＩＥＳＴ）观察旋毛虫病治疗前和阿苯达唑治疗后血清抗体水平的变化。结果表明，感染后（治疗前）第２ｗｋ开始出现阳性反应，第４ｗｋ后阳性率均达到９０％以上；治疗后抗体阳性率第１ｗｋ为１００％，第３ｗｋ开始下降，第５ｗｋ后抗体滴度维持于阳性低水平，１２ｗｋ后未见阳性反应。此现象可作为一种治疗有效的客观指标，对旋毛虫病近期及远期疗效考核均有一定价值。     

维生素C对实验性氟中毒大鼠血清氟及骨氟含量的影响

为研究维生素Ｃ对氟中毒的影响，以Ｗｉｓｔａｒ大鼠７２只随机分为３组，第１组为阴性对照组：２４只，自由饮用自来水（氟含量＜１ｍｇ／Ｌ）；第２组为氟中毒＋维生素Ｃ组：２４只．自由饮用５０ｍｇ／Ｌ含氟水１２０ｄ后，加用ＶＣ１ｇ／ｋｇ·ｄ灌胃治疗；第３组为氟中毒后脱离氟源＋维生素Ｃ组：２４只，自由饮用５０ｍｇ／Ｌ含氟水１２０ｄ，然后去除含氟水，自由饮用自来水，同时用ＶＣ１ｇ／ｋｇ·ｄ灌胃治疗。实验第１２０ｄ及ＶＣ治疗第１周、３周、６周末分别检查体重、血清氟及骨氟含量。结果显示；实验第１２Ｏｄ，氟中毒大鼠血清氟及骨氟含量均明显高于阴性对照组，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。氟中毒＋ＶＣ组第１周、３周、６周后，血清氟明显降低，体重明显增加，与氟中毒大鼠相比，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。脱离氟源＋ＶＣ治疗第１、３、６周后，血清氟明显降低，体重明显增加，第３周、６周后，骨氟有明显降低，与氟中毒大鼠相比，差异均有显著性（Ｐ＜０．０５）。实验结果表明；ＶＣ具有明显降低血清氟、骨氟及增加体重的作用。     

旋毛虫肌蚴抗原诱导小鼠抗日本血吸虫保护性免疫的研究

目的：探讨旋毛虫幼虫抗原免疫小鼠对日本血吸虫攻击感染的交叉保护作用。方法：用４种不同的旋毛虫幼虫抗原制剂经颈部皮下多点免疫小鼠，然后用日本血吸虫尾蚴３０条或１００条攻击感染，攻击后４５ｄ剖杀小鼠，收集成虫、肝组织和粪便中的虫卵，并计数。结果：４种不同制剂均可诱导不同程度的保护性免疫效应，以旋毛虫幼虫匀浆上清可溶性抗原（ＴｓＳＡ）效果较好，减虫率为２１．３％，加用福氏佐剂时，其减虫率为２９．３％，肝组织和粪便中的虫卵减少率分别达４８％和５８．５％，平均每鼠肝组织和粪便中的虫卵ＥＰＧ减少率分别为４１．７％和４８．９％；当抗原剂量为１００００条旋毛虫并加用福氏佐剂时，其减虫率达３９．６％。结论：旋毛虫抗原免疫小鼠能诱导抗日本血吸虫攻击感染的免疫效应     

基因疫苗诱导小鼠抗HBV皮下移植瘤免疫研究

目的　观察 ＨＢＶ ＤＮＡ 疫苗（ｐＣＲ３－１Ｓ） 诱导Ｂａｌｂ／ ｃ 小鼠（ Ｈ２ｄ） 的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达ＨＢｓＡｇ 的小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５ 细胞（Ｐ８１５ＨＢＶＳ） （ Ｈ２ｄ） 成瘤性的影响．方法　肌肉注射ＤＮＡ 疫苗,背部皮下接种Ｐ８１５ＨＢＶＳ 细胞,观察成瘤情况,４ ｈ ５１Ｃｒ 释放法检测小鼠脾细胞ＣＴＬ 活性．结果　接种 ＤＮＡ 疫苗后小鼠成瘤率为１２－５ ％ , 对照组为１００ ％ ． 小鼠平均存活期大于３８－２ ｄ ,对照组为２８－４ ｄ ,４０ ｄ 后小鼠存活率为８７－５ ％ ,对照组为０ ％ ． ＣＴＬ 细胞杀伤活性明显增加,ｐＣＲ３－１Ｓ 组５１ ％ ,对照组为２１ ％ （ Ｐ＜ ０－００１） ．结论　ＤＮＡ 疫苗可以诱导细胞免疫应答,对体内ＨＢＶ 感染具有预防及治疗作用．     

混合或单一单抗检测肺吸虫病人血清中循环抗原的研究

本文报道应用由７种抗卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫单克隆抗体（ＰｗＭ和ＰｗＡ一ＭｃＡｂ）组成的混合ＭｃＡｂ一ＥＬＩＳＡ法检测辽宁省凤城县肺吸虫病流行区２０８份滤纸血循环抗原（ＣＡｇ），阳性率为３８％（７９／２０８）。对１００份同时有滤纸血和血清样本者同步检测进行比较，滤纸血ＣＡｇ阳性率为６２％（６２／１００），血清ＣＡｇ阳性率５７％（５７／１００），符合率为９１％，经确切概率法处理两者无显著性差异，说明滤纸血可代替血清作ＣＡｇ检测。分别用７种ＭｃＡｂ检测５５份混合ＭｃＡｂ检测为阳性的样本，４种抗囊蚴ＭｃＡｂ中Ｇ＿２Ｂ＿３检出率最高，Ａ＿３Ａ＿７次之，３种抗成虫ＭｃＡｂ中Ａ＿３Ｄ＿３检出率最高，表明用Ｇ＿２Ｂ＿３或Ａ＿３Ａ＿７与Ａ＿３Ｏ＿３混合检测Ｐｗ病人ＣＡｇ更省更好。但在斯氏肺吸虫流行区应首选Ａ＿２Ｅ＿７，因其与斯氏Ａｇ有强烈的交叉反应，对斯氏肺吸虫患者血清ＣＡｇ检出率高达９４．７％（１８／１９）。本研究结果提示上述７种ＭｃＡｂ单独应用或不同组合后应用有助于提高ＣＡｇ的检出率并有助于肺吸虫感染虫种和虫期的判别。     

恶性疟原虫FCC—1／HN株pcDNA3—EBA175／HRPII重组质粒直？…

为观察恶性疟原虫ＦＣＣ－１／ＨＮ株ｐｃＤＮＡ３－ＥＢＡ１７５／ＨＲＰⅡ重组质粒肌肉途径接种后在宿主体内的表达。ＢＡＬＢ／ｃ小鼠分为３组,１组（实验组）经后腿股四头肌注射重组粒ｐｃＤＮＡ３－ＥＢＡ１７５／ＨＲＰⅡ１００μＧ;２组（实验对照组）注射空白质粒ｐｃＤＮＡ３１００μＧ,３组（正常对照组）注射ＰＢＳ（ｐＨ７．４）１００μｌ。每隔２０ｄ加强注射,于第１次接种后２０ｄ和第２次接种后１０ｄ取小鼠双侧     

小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡相关蛋白的表达

目的 探讨嗜鼠心肌Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）诱导的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠病毒性心肌炎（ＶＭＣ）细胞凋亡的机制。方法 给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种０．１ｍｌ１００ＴＣＤ５０ＣＶＢ３ｍ，感染后批断脊处死小鼠，应用双重荧光染色技术、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和共聚焦显微镜对小鼠心肌细胞凋亡及部分相关蛋白表达进行检测。结果 ＣＶＢ３ｍ可诱发小鼠ＶＭＣ。感染病毒后９～１２ｄ病变达到高峰，检出率达１     

DIAGNOSIS OF TRICHINOSIS BY INDIRECT FLUORESCENT ANTIBODY TEST WITH TRICHINELLA LARVA SECTION *

目的：评价幼虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）诊断旋毛虫病的价值。方法：应用纯净幼虫冰冻切片间接荧光抗体试验检测感染旋毛虫小鼠和旋毛虫病患者血清中的抗旋毛虫抗体,在患者发病后及应用阿苯达唑治疗后不同时间采集血清,以其他寄生虫病患者和健康人血清为对照。结果：１５只小鼠感染旋毛虫后２ｗｋ即可检出抗体,４６７例旋毛虫病患者的抗体阳性率为８６．５％,而丝虫病、包虫病患者各４５例和健康人血清５６份均为阴性。４８份并殖吸虫病患者的交叉反应率为１６．６７％。旋毛虫病患者发病后１ｗｋ的抗体阳性率为７０．２１％,至发病后２ｗｋ、３ｗｋ及４ｗｋ则分别升至９１．０％、９５．８％及１００％。幼虫冰冻切片的抗原活性于－２０℃可保存至５年。旋毛虫病患者治疗后１ｗｋ抗体阳性率从治疗前的８７．５％上升到１００％,血清抗体滴度比治疗前也有明显升高,治疗后１个月的抗体转阴率为２４％,至治疗后４个月达７５％。结论：幼虫冰冻切片间接荧光抗体试验诊断旋毛虫病具有较高的敏感性和特异性,并可用于疗效考核     

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46—58kD抗原诱发小鼠保护性免疫的研究

为探讨旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴｓＬ１－ＥＳ）中４６－５８ＫＤ抗原的保护性免疫作用，本文用该纯化原组分加福氏完全佐剂（ＦＣＡ）腹腔注射免疫昆明小鼠３次，继以旋毛虫感染性幼虫３００条攻击感染，感染后第７天计数小鼠肠道成虫数、第３０天肌肉继虫数和血清抗体ＩｇＧ滴度。结果：４６－５８ＫＤ抗原免疫鼠的肠道成虫减虫率、肌肉幼虫减虫率和血清抗体ＩｇＧ的几何平均倒数滴度分别为４１．８％、４６．１％和２８４１     

幼虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验诊断旋毛虫病

目的：评价幼虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）诊断旋毛虫病的价值。方法：应用纯净幼虫冰冻切片间接荧光抗体试验检测感染旋毛虫小鼠和旋毛虫病患者血清中的抗旋毛虫抗体,在患者发病后及应用阿苯达唑治疗后不同时间采集血清,以其他寄生虫病患者和健康人血清为对照。结果：１５只小鼠感染旋毛虫后２ｗｋ即可检出抗体,４６７例旋毛虫病患者的抗体阳性率为８６．５％,而丝虫病、包虫病患者各４５例和健康人血清５６份均为阴性。４８份并殖吸虫病患者的交叉反应率为１６．６７％。旋毛虫病患者发病后１ｗｋ的抗体阳性率为７０．２１％,至发病后２ｗｋ、３ｗｋ及４ｗｋ则分别升至９１．０％、９５．８％及１００％。幼虫冰冻切片的抗原活性于－２０℃可保存至５年。旋毛虫病患者治疗后１ｗｋ抗体阳性率从治疗前的８７．５％上升到１００％,血清抗体滴度比治疗前也有明显升高,治疗后１个月的抗体转阴率为２４％,至治疗后４个月达７５％。结论：幼虫冰冻切片间接荧光抗体试验诊断旋毛虫病具有较高的敏感性和特异性,并可用于疗效考核     

旋毛虫编码新生幼虫p46 kDa抗原基因重组融合蛋白对小鼠的免疫保护性研究

目的 探讨旋毛虫编码新生幼虫p46 kDa抗原基因重组融合蛋白WN10对小鼠的免疫保护性。方法 将纯化的重组融合蛋白WN10以20μg/只的剂量分3次免疫小鼠后，攻击感染旋毛虫肌幼虫200条／只，检查旋毛虫7日龄成虫数、雌虫体外产生新生幼虫数、感染35d的肌幼虫数并计算减虫率，同时用ELISA法检测血清中抗WN10抗体IgG滴度。结果WN10免疫小鼠后获得旋毛虫7日龄成虫、肌幼虫的减虫率分别为64．28％和61．21％，均与感染对照组和佐剂对照组差异显著；获得雌虫产新生幼虫的减虫率为16．46％，与感染对照组和佐剂对照组差异不显著；WN10免疫组小鼠在第3次免疫后1周可检测到高滴度的抗WN10抗体IgG，在攻击感染旋毛虫9周后仍维持在较高水平。结论 编码旋毛虫新生幼虫p46 kDa抗原基因重组融合蛋白可诱导小鼠产生较强的抗旋毛虫保护性免疫。     

阿苯达唑对感染仓鼠的美洲钩虫幼虫及虫卵的作用

感染美洲钩虫成虫的仓鼠口服阿苯达唑７５或１５０ｍｇ／ｋｇ的有效率为８３．８％和１００％。治前３ｄ，２个治疗组每鼠每ｇ粪便培养的幼虫数为２９７１６±３２９９和２８２５６±１１８，对照组的为８８２８±２６５９。治后３ｄ，治疗组的粪便培养未查见幼虫，而对照组的为９０６６±７４１６。此外，受治２组的培养粪便残渣用饱和盐水漂浮虫卵时，无或仅查见几个变性虫卵。仓鼠于感染第３期幼虫后３、７或１４ｄ口服１剂阿苯达唑１５０或３００ｍｇ／ｋｇ时，粪便虫卵阳性率为０－９．１％，减虫率为９６．８－１００％。     

三种血清学试验检测旋毛虫病抗体的研究

用免疫酶染色试验（ＩＥＳＴ）、间接血凝试验（ＩＨＡ）和玻片法环蚴沉淀试验（Ｓｌｉｄｅ）３种血清学方法检测感染旋毛虫豚鼠血清，阳性率分别为９７．１％、１００％和９６．７％。用此３种血清学方法检测正常豚鼠、血吸虫病兔、肺吸虫病大白鼠、蛔虫病人和鞭虫病人血清，除１例肺吸虫病大白鼠血清ＩＨＡ出现阳性反应外，其它血清３种方法均为阴性反应。结果表明３种方法对旋毛虫病特异性抗体的检测均有较好的敏感性和特异性。     

环孢素A治疗难治性肾病综合征

目的研究环孢素Ａ（ＣｓＡ）治疗难治性肾病综合征的临床疗效并探讨其机制。方法对３０例肾上腺皮质激素依赖或抵抗的肾病综合征（ＮＳ）患者联合使用了（ＣｓＡ，５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）和泼尼松（３０ｍｇ／ｄ）治疗，并测定了ＣｓＡ治疗前后病人的血生化指标、免疫指标及２４小时尿蛋白排出量。结果２４小时尿蛋白排出量由治疗前的平均７．６７±３．００ｇ／２４ｈ降至治疗后第１、２、３个月的４．９３±３．６４ｇ／２４ｈ、３．５２±２．９４ｇ／２４ｈ、２．２３±１．６０ｇ／２４ｈ；血浆白蛋白由治疗前２７．３±６．４ｇ／Ｌ升至３０．９±８．８ｇ／Ｌ、３４．３±７．６ｇ／Ｌ、３６．０±７．２ｇ／Ｌ；治疗前后血肌酐、ＢＵＮ、尿酸、ＣＤ４／ＣＤ８和可溶性白细胞介素２（ＩＬ２）受体无明显变化，而治疗２个月后外周血单个核细胞产生血清ＩＬ２显著下降。治疗后激素抵抗组ＮＳ完全缓解、部分缓解和无效分别为２２．７％，５０．０％和２７．３％；在激素依赖组分别为５７．１％，４２９％和０。有５例患者因肝肾功能损害或严重腹泻而停用ＣｓＡ。结论本研究提示ＣｓＡ联合小剂量皮质激素治疗难治性肾病综合征，尤其是激素依赖的患者是安全和有效的。