细虫草无性型——羽束梗孢胞内多糖的研究

从新疆细虫草Ophiocordyceps grsacilis的子实体分离出无性型——羽束梗孢Paraisaria dubia,为细虫草开发应用奠定基础,增加虫草新资源。经液体发酵培养10 d产生白色小菌球状的菌丝体和清澈透明发酵液,菌丝体经热水提取、乙醇沉淀得胞内粗多糖,再经乙醇脱蛋白得脱蛋白多糖,最后经Sepharose 4B柱色谱纯化得胞内纯多糖。对胞内多糖进行紫外光谱,红外光谱,核磁共振氢谱、碳谱,气相色谱,高效液相等分析。结果表明羽束梗孢胞内多糖由葡萄糖、半乳糖、甘露糖组成,其摩尔比为25. 54∶2∶1,含有吡喃糖苷,为β糖苷键构型,初步获得多糖连接方式为β(1→2)(1→4)(1→6)连接。该实验为羽束梗孢的开发应用提供理论依据。     

红栓菌胞外多糖抗肿瘤及免疫药理作用

目的:考察红栓菌胞外多糖PPS2的抗肿瘤及免疫药理作用.方法:检查了PPS2对实验小鼠体内肉瘤S-180的抑制效果和对脾淋巴细胞的转化率,测定了NK细胞活性、IL-2水平以及EAC瘤株小鼠肿瘤坏死因子的含量.结果:红栓菌胞外多糖可对S-180的抑制率达到52.6%～72.4%,对静止脾淋巴细胞有一定的促进增殖作用,剂量为100μg·mL-1时刺激指数达到1.83,同时,PPS2还能够增加NK细胞活性、明显提高IL-2水平.结论:PPS2具有较理想的抗肿瘤作用,其抑瘤机制可能与免疫调节作用有关.     

栓钱菌质多糖的制备、纯化及性质研究

目的制备、纯化栓钱菌质中的多糖成分,研究其单糖组成及性质。方法通过红栓菌固体发酵马钱子药材,培养30 d后,将发酵产物栓钱菌质烘干,粉碎,经水煮、浓缩、脱色、脱蛋白、醇沉处理后得到粗多糖,苯酚-硫酸法测定其多糖含量。采用透析、Sephadex G-150凝胶柱色谱法进一步纯化,酸水解后薄层色谱分析其单糖组成。结果栓钱菌质粗多糖含量为47.68%,得率为10.52%,经纯化后的多糖不含核酸和蛋白质,由葡萄糖和半乳糖2种单糖组成。结论栓钱菌质多糖是由葡萄糖和半乳糖组成的灰白色粉末状杂多糖。     

白参菌胞外多糖的研究

白参菌经深层发酵培养的滤液用乙醇沉淀获胞外粗多糖，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析分离纯化得胞外纯多糖。纯度经纸层析，柱层析，高效液相色谱分析证明为均一性多糖。胞外纯多糖酸水解物经纸层析，薄层层析表明它是由葡萄糖组成的一种葡聚糖。胞外纯多糖的紫外光谱分析２６０ｎｍ，２８０ｎｍ处均无吸收峰，表明不含核酸，蛋白质。经红外光谱、核磁共振氢谱分析提示具β－糖苷键。     

香菇多糖提取方法探讨

报道了香菇子实体，筛选出较为理想的香菇多糖提取方法：香菇子实体加蒸馏水在90℃－100℃加热回流，提取，用氯仿-正丁醇去蛋白，经水流动透析，用72％乙醇沉淀多糖，得水提香菇多糖。收得率为3．32％。其子实体残渣用1mol／LNaOH提取，充氮防氧化，调pH至中性，经透析，沉淀为碱提非水溶性多糖，收得率为0．36％。上清液为碱提水溶性多糖，收得率1．94％。     

红石耳多糖的研究

红石耳用热水提取、乙醇沉淀，精制得UMH多糖，经SephadexG－150柱层析证明为均一性多糖。糖的含量为90．4％，气相色谱检测由葡萄糖（Glc）、甘露糖（Man）。葡萄糖醛酸（GlcA）组成，克分子比为45：1：9，平均分子最为40×104。经高碘酸氧化，Smith降解，红外光谱分析，UMH多糖主要由α（1→6），（1→4）甙键聚合而成的酸性杂多糖。     

蜜环菌不同发育阶段多糖成分的研究

目的 :对蜜环菌不同发育阶段体内多糖的性质和含量进行研究。方法 :提取、分离、纯化蜜环菌菌丝体、发酵液、菌索和子实体多糖 ,应用红外光谱分析法、高效液相色谱法、凝胶渗透色谱法和凝胶色谱法等方法测定蜜环菌 4种多糖的性质、多糖组成、多糖含量和多糖分子量。结果 :蜜环菌菌丝体和发酵液多糖为单一葡萄糖组成的葡聚糖 ;菌索和子实体多糖由葡萄糖、木糖组成 ,这两种单糖在菌索多糖中的摩尔比为 1∶14,在子实体多糖中的摩尔比为 1∶10。蜜环菌多糖的分子量为 1万～7万。蜜环菌不同发育阶段多糖含量分别为菌丝体含 9.00% ;发酵液含 0.87g·(100ml)^-1;菌索含 1.12% ;子实体含 2.27%。结论 :蜜环菌不同发育阶段多糖成分的研究 ,为综合开发利用蜜环菌提供了科学依据。     

椭圆叶花锚水溶性多糖的分离纯化及组成分析

目的:为合理利用椭圆叶花锚提供一定依据,对椭圆叶花锚多糖进行提取分离纯化。方法:椭圆叶花锚经热水浸提,乙醇沉淀得粗多糖。粗多糖经Sevage法和酶法联合脱蛋白,酸性乙醇分级,得初步纯化的多糖HM1、HM2、HM3、HM4。结果:其中HM4经DEAE-Sephadex A-25分离纯化得纯化多糖HM41。HM41经检测为纯多糖。气相色谱分析表明椭圆叶花锚多糖HM1、HM2、HM3、HM4和HM41均为Rha、Ara、Xyl、Man、Gal、Glc六种单糖组成的杂多糖,但单糖的摩尔比不同。结论:多糖HM41为首次从椭圆叶花锚中分离得到的均一多糖。     

明党参多糖提取工艺研究

目的筛选明党参多糖提取优化的最佳工艺。方法以明党参多糖为工艺筛选指标,采用正交实验设计方法筛选最佳提取工艺及其条件。结果明党参多糖最佳提取工艺为石油醚回流2h;滤渣用95%乙醇回流2h;滤渣再用10倍体积水回流浸提多糖。用sevage法除蛋白,加入乙醇使含醇量为80%,于冰箱静置12h,得多糖沉淀。采用优化后的工艺提取明党参多糖粗品的得率约为10%。结论采用该提取工艺,明党参多糖的提取率较高。     

假单胞杆菌、灵芝等几种菌的发酵液对猪苓菌生长的影响

 目的：证明在猪苓菌发酵过程中加入假单胞杆菌、灵芝、金针菇等几种菌的发酵液对猪苓多糖产生是否具有促进作用。方法：采用平板培养法、发酵培养法。平板培养法直接测定生长量；发酵培养所得的发酵液采用3，5-二硝基水杨酸法测定多糖含量。结果：在猪苓菌发酵培养过程中加入假单胞杆菌、灵芝、金针菇等几种菌的发酵液可使猪苓菌球数量增多、重量大、多糖含量高。以假单胞杆菌发酵液的处理效果最佳；在平板培养时，培养25d菌落直径达72．25mm，在发酵培养过程中，在最佳产糖期发酵液中粗多糖含量达7．800mg·ml^－1，而对照分别为48．63mm和5．200mg·ml^－1。结论：在猪苓菌丝体培养过程中加入假单胞杆菌、灵芝、金针菇等几种菌的发酵液均对其菌丝的生长及发酵过程中多糖的产生具有促进作用。     

党参果聚糖的化学结构

目的:对中药党参中多糖进行研究。方法:DE-52纤维素和Sephadex G-200凝胶柱色谱分离纯化一多糖CPP-1。凝胶色谱法测定其纯度和分子质量。酸全水解,甲基化反应,高碘酸盐氧化及降解,IR,¹H-NMR和¹³C-NMR分析其结构。结果:CPP-1分子质量约为7.5×10⁴,化学结构为呋喃果糖以-β(2→1)连接而成的果聚糖。结论:该多糖为一中性的均一多糖。     

白花蛇舌草中一葡聚糖的结构鉴定

通过乙醇沉淀、透析、离子交换和凝胶色谱等分离方法,我们从白花蛇舌草中分离得到一种葡聚糖HD-27,ESI-MS检测其分子量为1800。利用化学及光谱分析方法进行结构研究,确定HD-27是由11个葡萄糖残基组成,其结构为α-D-G lc-(1→4)-[-αD-G lc-(1→4)]9-β-D-G lc。     

淮山药多糖的研究

目的:从淮山药中提取粗多糖RDP,进行纯化分离,得到均一的多糖RP,并初步研究其组成和结构。方法:依次经水浸提、乙醇沉淀、十六烷基三甲基溴胺盐脱蛋白、微晶纤维素柱色谱、Sephadex G-100色谱分离纯化得白色粉末状多糖RP。Sephadex G-200柱层析进行纯度鉴定。纸层析分析多糖酸水解产物;凝胶色谱法测定其相对分子质量;用红外光谱分析鉴定RP。结果:纯度鉴定证明其为均一组分;红外光谱分析其具有β-糖苷键;PC分析其单糖组成为葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖。结论:本实验对为该多糖的进一步开发利用提供一定的理论依据。     

小刺猴头多糖Ⅰ的分离纯化及组成分析

 目的从小刺猴头菌子实体中提出水溶性粗多糖(HP),从粗多糖中分离出均一多糖并研究其单糖组成。方法DEAE-SepharoseCL-6B及SephadexG-100柱色谱进一步纯化得HPⅠ,柱色谱,醋酸纤维素薄膜电泳等方法检验纯度,GC和PC测其单糖组成。结果HPⅠ为均一多糖,相对分子质量约为65000,单糖组成为:Fuc,Glc,Gal,摩尔比依次为0.423:1:2.110。结论HPⅠ为中性杂多糖,首次从小刺猴头菌子实体中提取获得。     

刺糖多糖的分离纯化与结构分析

 目的 分离纯化刺糖多糖,并对刺糖多糖的结构进行分析。方法 采用水提醇沉法提取刺糖多糖,联合使用大孔吸附树脂、纤维素和葡聚糖凝胶柱色谱对刺糖多糖进行分离纯化,采用凝胶过滤法测定其纯度和相对分子质量,气相色谱法分析其单糖组成,再通过部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解和核磁共振分析其结构。结果 经分离纯化得到多糖组分AP1-1;纯度测定表明其为均一多糖,相对分子质量约为99.7×10³;其单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,物质的量比为1.10∶2.19 ∶4.32;主链由→4)-β-D-GalpA-(1→,→4)-β-D-Galp-(1→和→4,6)-α-D-Glcp-(1→组成,支链由→6)-α-D-Glcp和2- OCH³-α-D-Man组成。结论 多糖AP1-1是一个有分枝的杂多糖。     

绞股蓝多糖的分离纯化及红外光谱、气相色谱分析

目的:绞股蓝多糖的分离纯化及单糖组成的研究。方法:采用水提醇沉和DEAE52纤维素柱层析等方法,得精制绞股蓝多糖(GPM2)。利用红外光谱(IR)和气相色谱(GC)分析多糖的糖键结构和单糖的组成及摩尔比值。结果:DEAE52纤维素柱层析分离纯化多糖效果显著,得精制多糖(GPM2)。IR分析显示GPM2具有典型的多糖吸收峰。GC分析得出该单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为3.23:7.71:1.00:2.29:2.88:14.84,其中半乳糖的含量最高。结论:分析绞股蓝多糖的结构和组成,对绞股蓝产品的功能和生产有着重大指导意义。     

猪苓多糖通过HuR调节Cyclin D1表达抑制A549细胞增殖

目的研究猪苓多糖(polyporus polysaccharide,PPS)抑制肺癌A549细胞增殖的作用及其机制。方法设对照组和PPS低、中、高剂量组,用MTT实验、流式细胞术检测PPS对细胞增殖的影响,用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测PPS对A549细胞Cyclin D1 m RNA表达水平及其稳定性的影响,用Western blotting检测PPS对A549细胞Cyclin D1蛋白、人抗原R(human antigen R,Hu R)蛋白表达及对Hu R蛋白胞浆及胞核内分布的影响。结果与对照组比较,中、高剂量的PPS作用后,A549细胞增殖明显受到抑制(P0.05),Cyclin D1 m RNA稳定性降低(P0.05),Cyclin D1 m RNA及蛋白表达减少(P0.05),Hu R总蛋白没有明显变化,但胞浆Hu R蛋白表达下降(P0.05),胞核Hu R蛋白表达升高(P0.05)。结论 PPS可抑制A549细胞增殖,其作用机制可能与改变Hu R在细胞内定位,从而降低Cyclin D1 m RNA稳定性及Cyclin D1蛋白表达有关。     

仙茅多糖的分离纯化及结构分析

目的:对仙茅多糖进行分离纯化,并对其结构进行分析,为仙茅多糖的进一步应用提供理论基础。方法:仙茅根茎经水提、醇沉、冷冻干燥得仙茅粗多糖(XMP),经DEAE-纤维素柱和Sepharose CL-6B凝胶柱色谱纯化得纯多糖XMP-1,采用凝胶渗透色谱、紫外光谱、红外光谱、气质联用等技术对XMP-1的结构进行分析。结果:仙茅多糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖3种单糖组成,其摩尔比为81.2∶5.7∶1,多糖质量分数为91.8%,相对分子质量为3 031 Da,不含核酸、蛋白质和色素。具有吡喃特征吸收峰,在水溶液分子中的分子构象可能为自然卷曲结构。结论:仙茅纯多糖是一种分子量较小的中性杂多糖。     

西洋参多糖5-2的分离、性质和活性研究

 目的：研究西洋参多糖(PPQ)中均一组分PPQ5 2的分离、糖组成、相对分子量及生物活性。方法：Sephadex DEAE A50和Sephadex G100分离，气相色谱法测定糖组成，基底辅助激光解吸/电离质谱测定相对分子量。用小鼠脾淋巴细胞进行淋巴细胞转化实验和白介素 2促诱生实验。结果：PPQ5-2由D阿拉伯糖和D半乳糖以1∶1.1摩尔比组成，含糖醛酸，相对分子量21 000 D，具有刺激淋巴细胞转化及白介素2促诱生功能。结论：由西洋参中可得到具有免疫刺激活性的含糖醛酸多糖。     

刺梨多糖RRTP-1的理化性质及抗缺氧活性

 目的研究刺梨多糖RRTP-1的理化性质及抗缺氧活性。方法刺梨汁浓缩,乙醇沉淀,得粗多糖。粗多糖脱游离蛋白 质,脱色,DEAE-纤维素柱及Sepharose CL-6B凝胶柱色谱分离纯化得到刺梨多糖RRTP-1。应用凝胶渗透色谱法、气相色谱法 和红外光谱法分别测定其理化性质,并通过观察硫代硫酸钠损伤后各组神经干细胞死亡率和乳酸脱氢酶漏出率,研究其对神 经干细胞硫代硫酸钠损伤的保护作用。结果RRTP-1经凝胶柱色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳证明为相对分子质量分布均一的 多糖,由鼠李糖、阿拉伯糖、未知糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸组成,相对分子质量为3 200。抗缺氧活性实验 表明,加入RRTP-1的实验组神经干细胞损伤有所减轻,高浓度实验组细胞死亡率和乳酸脱氢酶漏出率较低。结论 RRTP-1 对神经干细胞硫代硫酸钠损伤有明显的保护作用。