RAS基因突变型转移性结直肠癌的治疗研究进展

结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一,部分结直肠癌患者确诊时已发生转移,以化疗为主的综合治疗是转移性结直肠癌(mCRC)患者的主要治疗策略。近10余年来,靶向治疗的出现改善了mCRC患者的预后。目前临床用于m CRC的靶向治疗药物主要包括以表皮生长因子受体(EGFR)和血管内皮生长因子(VEGF)为靶点的药物。而前期诸多研究已经证实了有大鼠肉瘤病毒(RAS)基因突变的mCRC患者对抗EGFR治疗无效。因此,RAS基因突变型mCRC的治疗存在局限性。本文针对RAS基因突变型mCRC的治疗进展进行综述。     

结直肠癌患者血清外泌体代替肿瘤组织检测K-Ras基因突变的研究*

目的 探讨结直肠癌患者血清外泌体代替肿瘤组织进行DNA中K-Ras基因12密码子突变检测的价值。方法 收集2014年5月至2015年9月于我院病理组织学诊断为局部晚期或转移性结直肠癌患者的外周血标本90例,使用ExoQuick试剂提取血清外泌体,盐析法提取外泌体及血细胞DNA,采用PCR方法扩增K-Ras基因12密码子并通过高通量测序法检测突变,比较血清外泌体DNA与血细胞DNA突变的特异性,比较外泌体与组织学检测的K-Ras基因12密码子突变情况。结果 90例结直肠癌患者中检测出外泌体K-Ras基因12密码子突变43例,突变率为47.8％。全组共检出4种突变类型,以G12D突变率为最高。与组织学检测比较,灵敏度为90.6％,一致性为81.1％（Kappa值=0.62,P＜0.05）。结论 血清外泌体DNA用于检测肿瘤相关突变,与肿瘤组织相比一致性较高,可作为液体活检的来源指导肿瘤的个体化治疗。     

非转移性结直肠癌预后预测体系的研究进展与挑战

结直肠癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,其中无远处转移的患者预后较好。然而,这类患者中仍存在具有复发风险的高危患者。因此,准确地对患者进行预后预测并提供进一步治疗方案,是提升结直肠癌临床治愈率的关键。TNM分期作为临床广泛应用的预后预测体系存在一定局限性:该系统仅纳入三个指标,并采用简单的线性方法对患者进行分类,忽视了患者预后作为复杂非线性现象存在的客观性;同时,该体系也从未对新近发现的预后预测指标,如患者的临床信息、病理信息、分子标志物和免疫状态标志物进行整合改良。我们推测,以上信息可能作为补充因素与传统的预后预测系统结合,从而提高预后评估的准确度。本文系统回顾了这一领域的研究进展,并提出了建立新一代非转移性结直肠癌预后预测系统的可能途径。     

结直肠癌K-Ras突变的影响因素分析

目的 探讨结直肠癌K-Ras突变的影响因素.方法 以150例结直肠癌患者为研究对象,同时选取200例健康成年人为对照组.观察两组K-Ras突变率的差异,以及不同临床病理特征的结直肠癌患者K-Ras突变率,分析结直肠癌患者K-Ras突变率的影响因素.结果 结直肠癌患者的K-Ras突变率为76.67%,明显高于对照组(6.50%),差异有统计学意义(P<0.01);单因素分析显示,有淋巴结转移、组织学分型为管腺癌、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤直径≥5 cm的结直肠癌患者其K-Ras突变率较高(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,有淋巴结转移、组织学分型为管腺癌和TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期是影响结直肠癌患者K-Ras突变的危险因素,其OR值分别为4.235、4.857和5.023,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 K-Ras突变率在结直肠癌患者中较高,且与患者的组织学分型、TNM分期和有无淋巴结转移有关.     

西妥昔单抗在转移性结直肠癌治疗中的地位转变

靶向药物在转移性结直肠癌的应用中取得令人鼓舞的疗效,并成为标准内科治疗。通过对临床研究的回顾,我们归纳了表皮生长因子单抗———西妥昔单抗在治疗中的地位变迁,其与化疗的联合应用目前已成为转移性结直肠癌的一线治疗方案。Ｋ-Ｒａｓ基因类型、治疗相关的皮疹等为患者的个体化治疗提供了疗效预测指标。     

BRAF基因突变转移性结直肠癌治疗进展

BRAF基因突变结直肠癌是一种具有独特临床病理特征的亚型,BRAF突变以BRAFV600E突变最为常见。BRAFV600E突变结直肠癌的疗效和预后较差,晚期一线可选择化疗联合抗血管生成药物的治疗策略,后线治疗采用BRAF抑制剂联合表皮生长因子受体抑制剂方案可为患者带来生存获益。目前BRAFV600E突变转移性结直肠癌的治疗探索包括阻断各种细胞信号传导通路的靶向药物联合以及靶向治疗与免疫治疗联合等治疗策略。文章就BRAF突变转移性结直肠癌的分子生物学特点、临床病理特征以及BRAFV600E突变转移性结直肠癌的治疗进展进行综述。     

150例转移性结直肠癌预后因素分析

摘 要：［目的］ 回顾性分析转移性结直肠癌（mCRC）的临床特征和治疗方法对mCRC患者预后的影响,为临床治疗决策提供循证依据。［方法］ 对黄山市人民医院肿瘤科2014年9月至2019年12月期间收治的150例mCRC患者的临床特征、治疗方法与患者总生存之间的关系进行单因素和多因素回归分析。［结果］ 150例mCRC患者中位总生存期(MST)为24.8个月。单因素分析显示,M分期、CA199、局部治疗、西妥昔单抗或贝伐珠单抗、免疫治疗为mCRC生存影响因素(P<0.05)。根治性局部治疗组（24例）、姑息性局部治疗组（66例）、无局部治疗组（60例）的MST分别为未达到、24.4个月和14.5个月（P=0.00）;西妥昔单抗或贝伐珠单抗使用组（83例）、未使用组（67例）的MST分别为34.8个月和23.3个月（P=0.03）。多因素分析显示,M分期、CA199、局部治疗、西妥昔单抗或贝伐珠单抗是影响mCRC生存的独立影响因素。［结论］ 影响mCRC生存的主要治疗因素是局部治疗和大分子靶向药物,多学科综合诊治和优化的全程管理是改善预后的关键。     

结直肠癌组织中KRAS和BRAF基因突变与临床病理特征及预后的关系

目的:探讨结直肠癌组织中KRAS和BRAF基因突变与临床病理和预后的关系.方法:采用扩增阻滞突变系统(ARMS)方法对134例结直肠癌组织进行回顾性分析.结果:134例CRC组织中KRAS基因突变率49.3％(66/134),第2外显子突变率42.5％(57/134),其中12及13密码子突变率分别为35.1％(47/...     

转移性结直肠癌患者ctDNA基因突变检测方法的比较及影响因素分析

背景与目的：结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一,中国的结直肠癌发病率和死亡率都位居前列。循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA,ctDNA）作为一种非侵入性检测标志物在结直肠癌患者全病程管理中具有一定价值。通过对转移性结直肠癌（metastatic colorectal cancer,mCRC）患者血浆ctDNA中相关基因突变状态进行检测和分析,可协助制定患者个性化治疗方案。方法：本研究纳入2016年6月—2017年1月复旦大学附属中山医院收治的30例mCRC患者,利用二代测序（next generation sequencing,NGS）和MALDI-TOF检测患者血浆ctDNA中KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA基因的常见突变。将两个平台数据相互比较,同时结合病史、组织活检结果和微滴式数字聚合酶链反应（droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR）得到的结果进行比较,评估本实验中NGS和MALDI-TOF检测的结果与综合获得的结果的符合率以及各自的阳性预测值和阴性预测值。结果：MALDI-TOF的符合率为76.67%,阳性预测值为86.67%,阴性预测值为66.67%。NGS的符合率为86.67%,阳性预测值为83.33%,阴性预测值为91.67%。结论：两个平台均可用于检测ctDNA中的常见突变,但NGS的阴性预测值要优于MALDI-TOF,同时突变位点丰度与原发灶是否手术切除以及患者是否接受过治疗有关。     

西妥昔单抗联合化疗治疗K-Ras野生型转移性结直肠癌的疗效分析

目的 观察西妥昔单抗联合化疗治疗K-Ras野生型转移性结直肠癌的疗效及安全性,探讨可能影响疗效及预后的因素。方法 收集2007年5月至2012年5月解放军总医院收治的K Ras野生型转移性结直肠癌患者共90例,采用西妥昔单抗（400mg／m2,静滴,第1周,维持剂量每周250mg／m2或每2周500mg／m2）联合化疗方案,主要为含伊立替康为基础方案（FOLFIRI或XELIRI或单药CPT-11）、含奥沙利铂为基础方案（FOLFOX或XELOX）、5 FU／LV方案或单药卡培他滨。回顾性评估西妥昔单抗联合化疗在治疗中的疗效和安全性,分析患者临床病理特征,并探讨影响疗效的因素以及此类患者预后相关的因素。结果 西妥昔单抗中位治疗时间为16周（6～44周）,客观缓解率（ORR）为45.6％,疾病控制率（DCR）为87.8％。其中一线治疗ORR为51.6％,二线治疗ORR为40.0％,三线治疗ORR为18.2％。单因素分析显示,年龄、原发灶部位、西妥昔单抗治疗时间与疗效有关,差异具有统计学意义（P＜0.05）。90例患者中位随访时间为20.2个月,82例（91.1％）复发转移,60例（66.7％）死亡。患者中位无疾病进展时间（PFS）为7.8个月,中位总生存时间（OS）为22.5个月。其中一线中位PFS为9.1个月,中位OS为27.6个月;二线中位PFS为7.7个月,中位OS为14.5个月;三线中位PFS为2.9个月,中位OS为6.7个月。单因素分析显示：原发灶部位、早期肿瘤缓解者以及西妥昔单抗治疗时间与PFS有关;原发灶部位、早期肿瘤缓解者、西妥昔单抗治疗时间以及转移侵及范围与OS有关。Cox多因素生存分析显示：原发肿瘤病灶部位、早期肿瘤缓解是PFS的独立预后因素,转移侵及范围是OS的独立预后因素。西妥昔单抗相关治疗最常见的不良反应是痤疮样皮疹（78.0％）,化疗相关的不良反应主要为腹泻、恶心呕吐、骨髓抑制,经对症处理后,患者均可耐受。结论 西妥昔单抗联合多种方案化疗治疗晚期转移性结直肠癌患者,各线治疗均能取得较好的疗效,不良反应可耐受;原发灶部位可能是西妥昔单抗联合化疗的疗效预测因素,其与患者预后生存可能相关;早期肿瘤缓解可作为判断患者预后相关指标。     

复发转移大肠癌中K-Ras基因表达及其临床意义

目的 探讨K-Ras基因在复发转移大肠癌中的表达、临床意义及其对预后的预测价值。方法 收集2005年1月至2010年12月解放军总医院收治的复发转移大肠癌病例资料,回顾性分析所有患者临床病理特征、分子特征与预后的关系。结果 入选96例病例,K-Ras基因突变率为25％（24／96）,性别、年龄、病灶部位、病理类型、转移器官个数、转移部位与K-Ras基因突变无相关性。截至2010年12月31日,70例（72.9％）患者病情进展,29例（30.2％）死亡,中位总生存期（OS）为37.39个月,中位无进展生存期（PFS）为9.63个月,1、2、3年生存率分别为79％、57％和52％。单因素分析显示K-Ras基因状态（P=0.004）、肝转移（P=0.002）及辅助化疗（P=0.012）是影响PFS的预后因素,其他临床病理特征及一线治疗应用靶向药对PFS无明显影响;年龄（P=0.026）、肝转移（P=0.050）、腹腔转移（P=0.001）及全程用靶向药物（P=0.009）是影响OS的预后因素,其他临床病理特征、K-Ras基因状态以及辅助化疗对OS无影响。分层分析显示,K-Ras野生组中使用西妥昔单抗者较未使用者OS明显延长（P=0.019）。Cox多因素分析显示肝转移（P=0.002）和K-Ras基因状态（P=0.004）是PFS的独立预后因素;肝转移（P=0.003）、腹腔转移（P=0.000）和全程用靶向药物（P=0.007）是OS的独立预后因素。结论 复发转移大肠癌 K-Ras野生型患者能从西妥昔单抗治疗中获益,K-Ras基因检测是西妥昔单抗疗效的预测指标;K-Ras野生型患者对化疗的受益程度高于突变型患者,K-Ras基因状态可以预测化疗疗效。     

肽核酸钳制PCR技术在结肠癌K-Ras基因突变检测中的优化

目的优化建立一种敏感、简便、稳定地检测结肠癌患者K-Ras基因突变的方法。方法构建K-Ras基因第二外显子12、13密码子的野生型及突变型质粒,通过优化PCR及肽核酸与特异性引物的浓度关系,达到有效模板浓度低的样品K-Ras基因突变的检测。结果成功构建K-Ras基因第二外显子12、13密码子的野生型和突变型质粒。肽核酸钳制PCR条件优化包括：（1） 最佳复性温度为58℃和60℃;（2） 有效模板浓度为10-6pg／μl;（3） 引物浓度与肽核酸浓度的最佳比例为20∶1。在K-Ras突变型质粒与野生型质粒浓度比为1∶100时即可检测到突变。结论肽核酸钳制PCR技术较传统的测序方法更为敏感,可以应用于有效模板浓度低的样品,为结肠癌个体化治疗前相关基因检测的有效方法。     

Contemporary treatment approaches for metastatic colorectal cancer driven by BRAF V600 mutations

The treatment of metastatic colorectal cancer (mCRC) harboring BRAF V600 mutations is challenging. These tumors are often refractory to standard treatment. Therefore, the patients may exhibit rapid clinical deterioration, depriving them of the chance to receive salvage therapy. In newly diagnosed patients with good performance status, the administration of an intensive chemotherapy regimen like FOLFOXIRI (5-fluorouracil, leucovorin, oxaliplatin, and irinotecan) along with the antiangiogenic agent bevacizumab can modify this aggressive behavior of the disease and improve patient clinical outcomes. The recently published results of the BEACON (Binimetinib, Encorafenib, and Cetuximab Combined to Treat BRAF-Mutant Colorectal Cancer) study demonstrated that a combination therapy consisting of BRAF, epidermal growth factor receptor, and mitogen-activated protein kinase kinase inhibitors could be a useful second-or third-line alternative. This review summarizes the current treatment strategies for BRAF-mutant mCRC.     

miRNA-126和K-Ras及MMP-7在胃癌中的表达及其相关性分析

目的 通过检测miRNA-126和预测靶基因K-Ras及MMP-7在胃癌组织中的表达情况,探索miRNA-126在胃癌发生中的作用.为miRNA-126/K-Ras、MMP-7通路研究提供新的理论依据.方法 收集2015年3月—2015年12月内蒙古医科大学附属医院收治并确诊的胃癌患者的癌组织和正常组织,共50例.利用...     

Comprehensive screening for mutations associated with colorectal cancer in unselected cases reveals penetrant and nonpenetrant mutations

Germline mutation testing in patients with colorectal cancer (CRC) is offered only to a subset of patients with a clinical presentation or tumor histology suggestive of familial CRC syndromes, probably underestimating familial CRC predisposition. The aim of our study was to determine whether unbiased screening of newly diagnosed CRC cases with next generation sequencing (NGS) increases the overall detection rate of germline mutations. We analyzed 152 consecutive CRC patients for germline mutations in 18 CRC‐associated genes using NGS. All patients were also evaluated for Bethesda criteria and all tumors were investigated for microsatellite instability, immunohistochemistry for mismatch repair proteins and the BRAF*V600E somatic mutation. NGS based sequencing identified 27 variants in 9 genes in 23 out of 152 patients studied (18%). Three of them were already reported as pathogenic and 12 were class 3 germline variants with an uncertain prediction of pathogenicity. Only 1 of these patients fulfilled Bethesda criteria and had a microsatellite instable tumor and an MLH1 germline mutation. The others would have been missed with current approaches: 2 with a MSH6 premature termination mutation and 12 uncertain, potentially pathogenic class 3 variants in APC, MLH1, MSH2, MSH6, MSH3 and MLH3. The higher NGS mutation detection rate compared with current testing strategies based on clinicopathological criteria is probably due to the large genetic heterogeneity and overlapping clinical presentation of the various CRC syndromes. It can also identify apparently nonpenetrant germline mutations complicating the clinical management of the patients and their families.     

Clinical significance of BRAF mutations in colorectal cancer

BRAF mutations, present in 5 to 10% of colorectal cancers, have a proved oncogenic effect which is linked to their implication in the RAS/MAPK intracellular signalling pathway and they occurred at early stage of colorectal carcinogenesis. Many studies have therefore assessed their clinical significance as diagnostic and prognostic marker in colorectal cancers. More recently, their location downstream to EGFR and KRAS in the RAS/MAPK pathway have led to their evaluation as predictive marker of resistance to anti-EGFR monoclonal antibodies. This article aims to review the role of BRAF mutations in the diagnostic strategy of Lynch syndrome, their prognostic value in colorectal cancers and their potential value as predictive marker of resistance to anti-EGFR antibodies.     

miR－320a表达与结直肠癌患者预后的关系

目的：探讨miR－320a与结直肠癌患者的临床病理特征及预后的相关性。方法选取2010年1月至2013年3月在本科室收治的65例已经配对的癌旁正常组织和结直肠癌组织,采用实时定量PCR的方法检测癌旁正常组织和癌组织中miR－320a的表达情况,分析miR－320a表达情况与结直肠癌患者的临床病理特点及生存预后的关系。结果结直肠癌组织中miR－320a表达量明显低于癌旁正常组织（P＜0．001）。结直肠癌患者组织中miR－320a的表达与肿瘤分化程度、TNM分期和CEA水平有关（均P＜0．05）,而与年龄、性别、肿瘤部位无关（均P＞0．05）。生存分析结果显示miR－320a高表达的结直肠癌患者术后总体预后明显优于miR－320a低表达者,两组患者的5年生存率分别为54．7％和31．4％（P＝0．022）。结论 miR－320a 可能作为结直肠癌患者预后的预测指标。miR－320a过表达可能提示结直肠癌患者肿瘤生物学行为较佳。