SIRT1/PGC-1α途径在帕金森病中的抗氧化应激作用

氧化应激在帕金森病(PD)发病过程中发挥着重要作用。过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)是新出现的在抗氧化应激系统中起关键作用的转录调节因子,氧化应激激活的PGC-1α能够诱导抗氧化酶表达,提高组织抗氧化能力。沉默信息调节因子2相关酶类1(SIRT1)是最近发现的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的蛋白去乙酰化酶类,SIRT1去乙酰化PGC-1α后阻止了蛋白酶体降解PGC-1α,而产生靶基因持续激活。SIRT1/PGC-1α在氧化应激时能够调节许多抗氧化程序表达,在预防和治疗PD中发挥重要作用。现就SIRT1/PGC-1α抗氧化应激在PD保护中的作用予以综述。     

PGC-1α和能量代谢的关系

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxlsome proliferator-activated receptor-γ coactlvator-1α,PGC-1α),是近几年来发现的一种核转录辅激活因子,它能与转录因子或其它辅激活因子相互作用通过不同机制增加靶基因转录效率,从而在机体的适应性产热、线粒体生物合成、肝糖原异生及脂肪酸β氧化等一系列能量代谢过程中发挥作用。因此,PGC-1α成为肥胖、糖尿病等代谢性疾病的发生及治疗的新热点。     

淫羊藿苷上调PPARα和PGC-1α蛋白的表达改善慢性脑低灌注大鼠模型的空间学习记忆

目的观察淫羊藿苷（ICA）抗慢性脑低灌注大鼠模型学习记忆减退的可能机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、低、高剂量ICA治疗组（n=15）。双侧颈总动脉结扎（BCCAO）建立慢性脑低灌注模型,低、高剂量ICA治疗组造模后第10天分别每日灌胃ICA10、40 mg/kg,连续灌胃23d。制模后第28天后Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆功能,处死大鼠,Western blot法分别检测海马过氧化物酶体增殖物激活型受体α（PPARα）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α（PGC-1α）的蛋白表达。结果定位航行实验中,模型组大鼠运动距离较假手术组明显增加,而给予ICA低、高剂量组大鼠运动距离较模型组减少（P〈0.01,P〈0.05）。空间探索实验中,模型组大鼠目标象限停留时间较假手术组明显减少,而给予ICA低、高剂量组大鼠在目标象限停留时间较模型组明显延长（P均〈0.05）。而且,模型组大鼠海马PPARα和PGC-1α蛋白表达均明显下降,而ICA低、高剂量能明显增加其表达（P〈0.01,P〈0.05）。结论 ICA可改善慢性脑低灌注大鼠模型的空间学习记忆减退,其机制至少与其上调大鼠海马PPARα和PGC-1α蛋白表达有关。     

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ辅激活因子-lα对氧-糖剥夺神经元存活率及活性氧水平影响

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ辅激活因子-lα(PGC-1α)对氧糖剥夺神经元的保护作用及机制?方法:原代培养胚胎小鼠大脑皮层神经元7 d,细胞随机分为4组:正常组?氧糖剥夺组(OGD组)?OGD+PGC-1α过表达质粒组(过表达组)?OGD+空载质粒组(空载组)?过表达组与空载组分别于OGD处理前予以PGC-1α过表达质粒和空载质粒预处理?采用蛋白印迹技术检测PGC-1α表达,噻唑蓝比色分析(MTT)法 检测神经细胞存活率,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量?结果:OGD组较正常组神经元存活率明显下降(P < 0.01);予以PGC-1α过表达质粒预处理后,PGC-1α蛋白水平明显上调,其神经元存活率升高,与OGD组及空载组比较具有显著差异性(P < 0.01)?OGD组神经元ROS含量明显高于正常组(P < 0.01);过表达组ROS水平降低,与OGD组及空载组ROS含量比较其差异具有统计学意义(P < 0.01)?结论:PGC-1α明显降低氧糖剥夺损伤神经元ROS含量,提高其生存率,发挥其神经保护作用?     

白藜芦醇调控SIRT1/PGC-1α通路减轻IgA肾损伤

目的：探讨白藜芦醇（RSV）对免疫球蛋白A(IgA)肾损伤的影响及其作用机制。方法：将60只SD大鼠随机分为对照组（Control组）、模型组（Model组）、白藜芦醇组[RSV组,100 mg/（kg·d）]、沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂组（EX-527组,10 mg/kg）、RSV+EX-527组[100 mg/(kg·d) RSV和10 mg/kg EX-527],每组12只。除Control组外,其他组均按照BSA+LPS+CCl4方法构建IgA肾病模型,造模成功后,进行药物处理,Control组和Model组灌胃等量的生理盐水,每天1次,持续8周。收集24 h尿,通过邻苯三酚红钼法检测尿蛋白（Upr）含量;自动生化分析仪测量血清中血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）的含量;HE染色检测大鼠肾组织病理变化;超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）检测试剂盒检测大鼠肾组织中SOD、MDA水平;ELISA法检测大鼠肾组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;TUNEL染色检测大鼠肾组织细胞凋亡;Western Blot检测SIRT1、过氧化...     

PGC-1α基因Gly482Ser多态性与2型糖尿病发病的相关性研究

[目的]研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ共活化物-1α（PGC-1α）G1y482Ser基因多态性与2型糖尿病发病的相关性。[方法]选取大连居住的汉族人2型糖尿病病人（DM）140例和非糖尿病对照（NC）88人;用聚合酶链反应（PCR）-限制性内切酶技术检测PGC—1α G1y482Ser基因型。[结果]DM组Ser／Ser基因型分与NC组比较差异有显著性意义（χ^2=10．969,P=0．004）,按性别分层后男性DM组与NC组比较差异无显著性意义（χ^2=3．601,P=0．165）,而女性DM组与NC组比较差异有显著性意义（χ^2=11．02,P=0．004）。在NC组和DM组,随Ser等危基因增加,空腹C肽和2h C肽呈逐渐降低趋势,但只有Ser／Ser与Gly／Gly两基因型之间相比差异有显著性意义（P〈0．05）。在NC组,各基因型之间的胰岛素抵抗之间比较差异无没有显著性意义（P〉0．05）。[结论]PGC-1 Gly482Ser多态性可能与女性2型糖尿病的发病相关,Ser／Ser型携带者c肽水平更低。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ对TNFα诱导的肾脏内髓集合管上皮细胞损伤的保护作用

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ高表达对小鼠肾脏内髓集合管上皮细胞(IMCD)炎性刺激的反应.方法:实验分为4组:IMCD空白对照组,IMCD TNFα刺激组,转染PPARγ野生型质粒的转染空白组(PPARγ-IMCD组)和PPARγ-IMCD TNFα刺激组.TNFα刺激:采用TNFα 50 ng/ml作用24 h;质粒转染:将小鼠野生型PPARγ1质粒转染于IMCD细胞使PPARγ高表达.ELISA方法检测细胞上清液MCP-1、TGFβ1分泌量.结果:转染PPARγ野生型质粒的IMCD细胞PPARγ mRNA和蛋白高表达.1MCD空白对照组和PPARγ-IMCD转染空白组相比,细胞上清液MCP-1和TGFβ1含量无显著性差异;IMCD TNFα刺激组培养上清液中MCP-1和TGF-β1表达明显增加(与IMCD空白对照组相比,P＜0.005),PPARγ-IMCD TNFα刺激组培养上清液中MCP-1和TGFβ1的分泌与IMCD TNFα刺激组相比显著减少(P＜0.05和P＜0.005).结论:IMCD细胞转染PPARγ野生型质粒使得PPARγ高表达后具有抗炎和抗纤维化作用.     

过氧化物酶体增殖物PGC-1α对肝缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)对肝缺血再灌注损伤的保护作用.方法 构建大鼠肝缺血再灌注损伤模型,恢复灌注后12 h,以蛋白免疫印迹(Western blot)检测PGC-1α表达情况,并检测肝脏活性氧、三磷酸腺苷(ATP)水平及血丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性变化,评估肝功能情况.另一方面,构建PGC-1α慢病毒过表达载体,并在大鼠缺血再灌注前转染,于缺血再灌注后,再以Western blot检测PGC-1α表达,肝脏活性氧、ATP水平和血肝酶活性变化,评估PGC-1α表达对肝缺血再灌注损伤的保护作用.结果 缺血再灌注肝脏PGC-1α表达较假手术组及对照组(未手术)明显降低(均P<0.05),同时肝脏活性氧族水平及ALT活性显著升高,而肝ATP产生减少(均P<0.05).PGC-1α慢病毒过表达载体转染显著上调缺血再灌注肝脏PGC-1α表达,同时肝脏活性氧族水平及ALT活性较未转染组显著降低,而肝ATP产生增加(均P<0.05).结论 PGC-1α表达有利于保护肝缺血再灌注损伤.     

缺 氧 /PGC-1α/CXCR4 信号通路在肝癌侵袭转移中的作用研究

目的 探讨肝癌细胞系 HepG2 细胞缺氧状态下过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 辅激活因子 -1α（PGC-1α）、趋 化因子受体 4（CXCR4）及 E- 钙黏蛋白的表达情况,及其在肝癌侵袭转移中的作用。 方法 将 PGC-1α 小干扰 RNA(siPGC-1α) 转染 HepG2 细胞,应用 RT-PCR 及 Western blot 法检测 PGC-1α、CXCR4 及 E- 钙黏蛋白的 mRNA 及蛋白表达水平,Transwell 试 验分析 HepG2 细胞迁移情况。 结果 与常氧状态下比较,缺氧状态下 HepG2 细胞的 PGC-1α、CXCR4 表达水平均增高（均 P＜0.05）,E- 钙黏蛋白表达水平降低（P＜0.05）,且迁移细胞数目增多。在 HepG2 细胞转染 siPGC-1α 后,CXCR4 及 E- 钙黏蛋白表达 水平均逆转,同时迁移细胞数目减少（均 P＜0.05）,而加入 CXCR4 拮抗剂（AMD3100）后,E- 钙黏蛋白表达水平增高,迁移细胞数目 减少（均 P＜0.05）。 结论 缺氧 /PGC-1α/CXCR4 信号通路在调控 E- 钙黏蛋白表达以及肝癌细胞迁移中起着重要作用,是肝癌侵 袭转移的新治疗靶点。     

PGC-1α与Nrf2协同调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶对大鼠COPD的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（PGC-1α）和红系衍生的核因子相关因子2（Nrf2）对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）表达的调控及其在COPD中的作用和意义。方法24只大鼠随机分为COPD组和对照组。COPD组用每日熏香烟和两次气管内滴入脂多糖（LPS）的方法制作COPD模型。观察大鼠的肺组织病理学改变,检测肺功能指标;应用免疫组化、Westernblot、原位杂交和逆转录-聚合酶链反应检测肺组织中PGC-1α、Nrf2和γ-GCS的蛋白及mRNA表达情况。结果COPD组的肺功能指标（FEV0.3、FEV0.3／FVC、PEF）和光镜下COPD组肺组织病理变化符合COPD的特征性改变。PGC-1α、Nrf2mRNA在两组大鼠肺组织中均有表达,且与γ-GCSmRNA的表达部位基本一致;PGC-1α、γ-GCS蛋白及mRNA表达在COPD组均显著高于对照组（P均〈0．05）;Nrf2蛋白表达在COPD组较对照组显著增高（P〈0．01）,而Nrf2mRNA在两组表达无明显差异（P〈0．05）。相关性分析显示PGC-1α蛋白与Nrf2蛋白及mRNA表达均呈正相关（r值分别为0．775和0．515,P均〈0．01）,PGC-1α、Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白（r值分别为0．531和0．575,P均〈0．01）及mRNA表达（r值分别为0．616和0．634,P〈均0．01）均呈正相关。结论PGC-1α可能作为Nrf2的辅激活因子,通过辅助激活Nrf2,上调γ-GCS的基因表达;PGC-1α和Nrf2可能通过一个共同通路协同上调γ-GCS的基因表达,从而改善COPD的氧化／抗氧化失衡。     

缺氧/复氧损伤对大鼠海马神经元过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）在神经元缺氧/复氧损伤不同时间的表达,以探讨PPARγ在神经元缺血再灌注损伤过程中的作用。方法：以新生1d的SD大鼠为研究对象,采用海马神经元原代培养技术,给原代培养的神经元缺氧、缺糖15min后再恢复氧和葡萄糖供应,建立体外神经元类缺血再灌注模型,JEM-200EX透射电子显微镜观察缺氧/复氧后不同时间神经元结构变化,采用RT-PCR检测PPARγmRNA表达,Western印迹方法检测PPARγ蛋白表达。结果：神经元缺氧/复氧处理后不同时间,神经元正常结构出现损害。复氧0h,PPARγ表达与对照组相比无明显变化（P〉0.05）;复氧6h,PPARγ表达在mRNA和蛋白水平出现降低,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）,而且随着时间的延长表达逐渐降低,到48h达到最低,不同时间点之间及与对照组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：PPARγ参与神经元缺血再灌注损伤的病理过程,有望成为缺血性脑血管病治疗的干预靶点。     

过氧化物酶增殖物激活受体-γ在大鼠肾脏组织衰老过程中的表达变化及其与氧化应激的关系

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在不同年龄大鼠肾组织中的表达与分布,并进一步探讨其与衰老过程中氧化应激的关系.方法:选用3个月龄、12个月龄、24个月龄自然衰老SD大鼠为模型,Western印迹分析PPARγ在不同年龄大鼠肾组织中的表达,通过测定超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性反映肾组织细胞抗氧化能力.结果:应用Western印迹检测肾脏PPAR7的蛋白表达,发现PPARγ蛋白在大鼠肾组织中表达随月龄下降,3月龄肾组织中PPARγ表达明显高于24个月龄大鼠(P<0.01);SOD、GSH-PX活性均随月龄增加明显下降(P<0.01),两者的活性均与PPARγ蛋白的表达呈明显正相关(r=0.900,r=0.890,P均<0.01),结论:PPARγ在大鼠肾组织衰老过程中呈下降趋势,这种变化与肾脏组织抗氧化应激能力下降有关.     

核受体PPARγ在醛固酮诱导大鼠急性肾损伤中的作用研究

目的 探讨核受体过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）在醛固酮诱导急性肾脏损伤过程中的作用，以及其激活剂罗格列酮治疗肾损伤的可行性。方法 将27只5周龄雄性SD大鼠切除右肾，手术2周后予1%氯化钠溶液饮水。按随机数字表法分为3组，每组9只：对照组予2%乙醇2ml皮下泵入，醛固酮组予2%乙醇2ml+醛固酮0.75滋g/h皮下泵入，醛固酮+罗格列酮组予2%乙醇2ml+醛固酮0.75滋g/h皮下泵入+罗格列酮0.1mg/（kg·d）皮下注射，给药时间5周。检测大鼠收缩压变化、尿蛋白水平、肾功能、肾组织学的改变以及核受体PPARγ表达水平的变化。结果与对照组比较，醛固酮组、醛固酮+罗格列酮组大鼠体重明显减轻，肾重、肾重/体重比明显增加，肌酐清除率明显下降（均P＜0.05）。醛固酮组大鼠的SBP随着灌流时间的延长而不断增高，尿蛋白水平也明显增高，均高于对照组（均P＜0.05）；而罗格列酮对醛固酮引起的大鼠SBP升高没有明显影响，但对醛固酮造成尿蛋白的升高有明显的抑制作用。醛固酮组大鼠肾组织病理检查表现为严重的肾小球内细胞增生和硬化，肾小球出现纤维素样坏死，肾小管有明显扩张现象；而醛固酮+罗格列酮组大鼠肾损伤明显改善，主要表现在肾小球内细胞增生和硬化水平减少，纤维样坏死程度减轻，肾小管间质纤维化减轻。在醛固酮诱导的肾损伤中，核受体PPARγ及其在mRNA水平表达量较对照组均有明显的增高。结论核受体PPARγ在醛固酮诱导大鼠肾损伤中表达量明显升高，核受体PPARγ激活剂罗格列酮可以改善醛固酮诱导的大鼠肾损伤。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活剂-1αrs2946385基因多态性与帕金森病的相关性

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活剂-1α(PGC-1α)rs2946385基因多态性与帕金森病(PD)发病风险及患者焦虑、认知的关系.方法 选择2018年3月至2019年12月就诊于新乡医学院第一附属医院的86例PD患者(PD组)及86例健康体检人员(对照组)为研究对象.PD组患者根据运动症状分为强直少动型...     

介导油酸对小鼠c2c12细胞PGC-1α表达的影响

目的 研究油酸(OA)对小鼠c2c12细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)表达的影响,探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在其中的作用.方法以不同浓度油酸及p38抑制剂SB203580(SB)分别处理c2c12细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PGC-1α mRNA表达,Western Blot检测PGC-1α蛋白表达.结果油酸处理组PGC-1α mRNA及蛋白表达明显高于对照组(P＜0.05); OA+SB组PGC-1α表达减低(P＜0.05).结论油酸能促进c2c12细胞PGC-1α mRNA转录和蛋白的表达,该作用可能与p38 MAPK信号通路有关.     

非酒精性脂肪肝大鼠PPARα基因表达及脂代谢和胰岛素水平的变化

目的 观察非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝组织中PPARα基因的表达,并用PPARα激动剂进行干预,探讨其与胰岛素抵抗、脂代谢紊乱的关系.方法 大鼠随机分为①正常对照组、②高脂模型组、③PPARα激动剂干预组,利用高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪肝模型.12周后,检测大鼠血脂、肝功能、血糖、胰岛素水平及胰岛素抵抗指数;RT-PCR法分析PPARα基因的表达;观察肝脏的形态学改变.结果 PPARα激动剂可降低NAFLD大鼠转氨酶、血脂水平及胰岛素抵抗指数,可促进NAFLD大鼠中PPARα基因的表达;肝脏形态学明显改善.结论 PPARα激动剂能改善NAFLD大鼠脂质代谢紊乱, 有明显的保肝降酶作用, 具有适度的胰岛素增敏作用.PPARα及其配体在NAFLD发病机制及治疗中的进一步深入研究,将为临床防治NAFLD提供新的思路.