二氧化碳气腹环境对人卵巢癌细胞系SKOV3侵袭能力的影响

目的 研究腹腔镜手术中二氧化碳(CO2)气腹环境对恶性卵巢肿瘤细胞黏附、侵袭能力的影响,探讨恶性肿瘤行腹腔镜手术的安全性.方法 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,模拟腹腔镜CO2气腹环境处理肿瘤细胞,噻唑蓝比色(MTT)法和Boyden小室侵袭运动实验检测SKOV3细胞的黏附、运动和侵袭能力;免疫组化和半定量RT-PCR方法检测SKOV3细胞黏附分子CD44及促血管生成因子bFGF的蛋白和mRNA表达.结果 与对照组比较,CO2处理组细胞对人工基底膜的黏附力明显增加(P＜0.01);处理组细胞运动和侵袭能力明显增强(P＜0.01);其CD44和bFGF蛋白分泌和mRNA表达量显著增加(P＜0.05).结论 CO2气腹环境能促进体外培养的恶性卵巢肿瘤细胞的侵袭转移,其作用机制可能与其促进卵巢癌细胞异质黏附和运动能力;增加细胞黏附分子和促血管生成因子的表达有关.     

大蒜素抗人结肠癌LoVo细胞侵袭转移作用及其机制

目的 探讨大蒜素对结肠癌LoVo细胞增殖、侵袭和转移能力的影响,及其抗结肠癌侵袭转移作用的机制.方法 采用MTT法检测大蒜素对LoVo细胞增殖抑制能力;肿瘤细胞体外运动实验、黏附实验、迁移实验和Transwell体外侵袭实验检测大蒜素对LoVo细胞运动、黏附、侵袭转移的抑制作用;实时荧光定量RT-PCR法检测大蒜素对LoVo细胞侵袭转移相关基因基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)、 CD147、血管内皮生长因子(VEGF)、转移抑制基因(nm23-H1)、乙酰肝素酶(HPA)、尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂受体(uPAR)mRNA表达的影响.结果 大蒜素明显抑制人结肠癌LoVo细胞增殖,具有时间剂量依赖性;"无毒"浓度(3和6 μg/ml)大蒜素能够抑制LoVo细胞的体外运动、黏附、侵袭转移能力,作用24 h后对LoVo细胞趋化运动抑制率分别为24%、50%(t=4.543、12.348, P=0.010、0.001),黏附抑制率分别为19%、28% ( t=6.145、 6.355, P=0.004、0.003),迁徙抑制率分别为28%、46%(t=8.065、28.435,均P<0.01),侵袭抑制率分别为44%、65% ( t=21.274、26.288, 均P<0.01);3和6 μg/ml浓度大蒜素能够下调VEGF、uPAR及HPA mRNA的表达(t=7.129、6.764、8.497, P=0.002、0.002、0.001),对TIMP-2, CD147, nm23-H1 mRNA表达无明显影响(t=0.341、1.889、0.914, P=0.059、 0.132、 0.412);LoVo细胞不表达MMP-2 mRNA.结论 "无毒"浓度(3和6 μg/ml)大蒜素对LoVo细胞的迁移运动、黏附、侵袭转移能力有明显抑制作用,该作用可能与抑制VEGF、uPAR及HPA mRNA的表达有关.     

Genistein对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3体内和体外侵袭的抑制作用

目的研究genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3 体内外侵袭能力的抑制作用.方法建立Borden小室体外侵袭模型以及瘤细胞体内皮下移植瘤侵袭模型,观察genistein对SKOV3的影响.结果 20 μmol/L genistein处理SKOV3细胞3 d后,细胞侵袭重建基底膜明显受到抑制,其抑制率呈剂量效应曲线.40 μmol/L genistein作用细胞后侵袭至滤膜下表面的细胞数最低.体内实验半定量分析结果表明,对照组SKOV3细胞的体内侵袭程度随时间延长而呈进行性,genistein处理组可明显阻止侵袭的进程,使肿瘤局限于0级或Ⅰ级,并明显降低Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的侵袭百分比.结论 Genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3 体内和体外的侵袭均有抑制作用.     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂和CD44v6在子宫内膜癌中的表达及意义

目的：研究基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-2、MMP-9及其组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP）-1、TIMP-2和细胞黏附分子CD44v6在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学方法分别检测73例子宫内膜癌组织和27例正常增生期子宫内膜组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和CD44v6蛋白的表达情况。根据子宫内膜癌的病理分级、组织学类型、淋巴结转移和肌层浸润程度不同对内膜癌进行组内分组比较。结果：内膜癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和CD44v6的表达率分别为75.3%、83.6%、75.3%、72.6%和74.0%,均高于对照组的22.2%、28.6%、57.1%、18.5%和45.0%（P〈0.05）。其中,MMP-2、TIMP-2和CD44v6随肌层浸润程度的加深而表达增强;MMP-9蛋白在组织分级低、有肌层浸润和淋巴结转移的子宫内膜癌组织中表达增强。相关分析显示,MMP-2和TIMP-2、MMP-2和CD44v6有明显的正相关性。结论：MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和CD44v6在子宫内膜癌的发生、发展、浸润和转移中起到一定的作用;联合测定这些指标可为子宫内膜癌的早期临床诊断、预后判断和治疗随访提供指导作用。     

米非司酮对卵巢癌细胞系SKOV3增殖和CEACAM6表达的影响

目的  观察米非司酮对卵巢癌细胞系SKOV3增殖和癌胚抗原相关黏附分子6（CEACAM6）表达的影响。方法  不同浓度米非司酮（空白对照、1×10-7、1×10-6、1×10-5、5×10-5mol/L）干预卵巢癌细胞系SKOV3 24、48、72h;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测米非司酮对SKOV3的抑制作用;逆转录聚合酶链反应（RT PCR）和蛋白印记（Western blot）检测不同浓度米非司酮干预下CEACAM6 mRNA和蛋白表达水平的差异,并进行半定量分析。结果  与空白对照组比较,1×10-7和1×10-6mol/L米非司酮对SKOV3的生长没有明显的抑制作用（P＞0.05）;5×10-5mol/L米非司酮显著抑制SKOV3的生长（P＜0.01）,并降调SKOV3细胞中CEACAM6 mRNA和蛋白的表达水平（P＜0.05）。结论  米非司酮可明显抑制SKOV3的体外增殖,其作用机制可能与抑制CEACAM6的表达有关。     

As2O3抑制人肾癌786-0细胞血管生成及浸润转移机制的初步研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)抑制人肾癌细胞系786-0细胞血管生成及浸润转移的机制.方法:采用免疫细胞化学方法检测As2O3处理前后786-0细胞VEGF、nm23、MMP-9、TIMP-1蛋白表达的改变;RT-PCR分析TGF-β1、Tβ R-Ⅰ和Tβ R-ⅡmRNA表达的改变.结果:2μmol/L As2O3处理肾癌786-0细胞72h后可显著抑制VEGF、MMP-9的蛋白表达(P＜0.01),而促进786-0细胞中TIMP-1和nm23蛋白的表达(P＜0.05).786-0细胞中缺乏TβR-Ⅰ mRNA,As2O3处理后,786-0细胞中TGF-β 1和Tβ R-Ⅱ mRNA表达无改变(P＞0.05).结论:As2O3通过抑制VEGF和MMP-9的蛋白表达,增加TIMP-1和nm-23蛋白的表达,抑制786-0细胞的血管生成和转移.     

EGFR信号通路调控结肠癌Caco-2细胞侵袭转移的分子机制

目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制。方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用W estern b lot法检测P-EGFR和P-ERK蛋白表达。结果外源性EGF(10μg/L)增加P-EGFR和P-ERK蛋白表达同时使24 h细胞生长率提高了23.35%(P<0.01),使过膜细胞数由(208±3)上升到(241±5)(P<0.01)。当用AG1478(20μmol/L)和PD98059(40μmol/L)分别阻断EGFR和ERK/MAPK后,EGF作用消失,Caco-2细胞生长明显抑制(P<0.01),但无时间效应关系;Caco-2细胞体外侵袭力明显减弱(P<0.01)。RT-PCR测定显示,EGF能增加Caco-2细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达和减少TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达;而AG1478能逆转EGF的作用,使MMP-2、MMP-9 mRNA的表达下降,TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达上升,结果MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.01)。结论EGFR-ERK/MAPK信号通路通过改变基质金属蛋白酶和其抑制剂mRNA比值调控人结肠癌细胞侵袭转移能力。     

来曲唑通过cAMP-PKA信号通路影响子宫肌瘤细胞中MMP-2和TIMP-2的表达

目的 探讨cAMP-PKA信号通路在来曲唑影响子宫肌瘤细胞中MMP-2和TIMP-2表达中的作用.方法 cAMP-PKA信号通路抑制剂H-89（10 μmol/L）处理原代培养的人子宫肌瘤细胞30 min后,来曲唑（10-8、10-7、10-6和10-5 mol/L）处理24、48和72 h.采用实时定量PCR和Western blot分别检测MMP-2和TIMP-2 mRNA和蛋白的表达.结果 来曲唑以浓度和时间依赖的方式下调了人子宫肌瘤细胞中MMP-2 mRNA和蛋白的表达,上调了TIMP-2 mRNA和蛋白的表达（P均＜ 0.05）.H-89部分取消了来曲唑诱导的人子宫肌瘤细胞中MMP-2表达的下调和TIMP-2表达的上调（P均＜ 0.05）.结论 来曲唑通过cAMP-PKA信号通路影响子宫肌瘤细胞中MMP-2和TIMP-2的表达.     

7-二氟甲氧基-5,4’-二正辛烷氧基金雀异黄素对卵巢癌干细胞样细胞自我更新和FoxM1表达的影响

目的:研究7-二氟甲氧基-5,4’-二正辛烷氧基金雀异黄素(DFOG)抑制人卵巢癌SKOV3细胞系球形成细胞自我更新作用。方法:体外培养SKOV3细胞,干细胞条件培养基悬浮培养扩增球形成细胞(SFCs)。Western blot分析SFCs的CD133及CD44蛋白及FoxM1表达水平;MTT法测定SFCs增殖活性;肿瘤球形成试验检测SFCs自我更新能力。结果:在干细胞条件培养基中,SKOV3细胞生长为非粘附三维克隆性球体。与亲本细胞相比,SKOV3细胞系SFCs高表达CD133及CD44与FoxM1蛋白。DFOG(0.1,1.0,10.0μmol/L)作用72 h,优先抑制源自SKOV3细胞SFCs增殖与自我更新,并以浓度依赖的方式下调SFCs中FoxM1表达。结论:DFOG抑制卵巢癌干细胞样细胞自我更新与其抑制FoxM1蛋白表达相关。     

Nek2基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞侵袭能力的影响

目的研究RNA干扰Nek2表达对卵巢癌SKOV3细胞侵袭能力的影响以及相关的分子机制。方法设计合成3条针对Nek2基因的siRNA,转染至SKOV3细胞中,采用Real-time RT-PCR和Western blot技术筛选出抑制效率最高的Nek2-siRNA序列,用Transwell方法检测转染该序列的SKOV3细胞侵袭能力的改变,并用Western blot方法检测Nek2-siRNA转染后SKOV3细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达的变化。结果①RNA干扰序列2对SKOV3细胞中Nek2的抑制效果最明显;②与未转染组和阴性对照组相比,转染了Nek2-siRNA的SKOV3细胞侵袭能力明显下降(P<0.01);③Western blot检测表明,与未转染组和阴性对照组相比,Nek2-siRNA转染48 h后SKOV3细胞中MMP-2、MMP-9的表达明显下调,而TIMP-1的表达明显上调(P<0.01)。结论 Nek2-siRNA能有效得沉默SKOV3细胞中Nek2的表达,通过下调MMP-2、MMP-9的表达,上调TIMP-1的表达,从而抑制SKOV3细胞的侵袭转移。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点,诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据,做出准确诊断,给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂,腹腔内疾病占64．63％,共17种病因;腹腔外疾病占35．37％,共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查,在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。