磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学法检测2011年6月～2015年3月期间的54例HCC组织、46例癌旁组织、22例肝硬化组织、12例正常肝组织中的GPC3表达情况,分析GPC3表达与临床和病理因素的相关性。结果 正常肝组织中不表达GPC3蛋白,肝癌组织GPC3评分(7.39±3.64)和阳性率(81.48%)均显著高于癌旁组织(1.15±0.99,13.04%)、肝硬化组织(0.32±0.56,4.54%),差异有统计学意义(P<0.05); 随着肝癌临床分期的增高,GPC3评分逐步升高,Ⅲ/Ⅳ期(10.05±3.59)与Ⅰ期(4.31±3.41)、Ⅱ期(7.14±3.63)比较,差异有统计学意义(P<0.05),GPC3阳性率也升高(Ⅰ期69.23%,Ⅱ期81.81%,Ⅲ/Ⅳ期89.47%),但差异无统计学意义(P>0.05); 肝癌组织GPC3阳性率与性别、年龄、血清HBsAg、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、肿瘤直径、转移情况、临床分期无关(P>0.05),与是否并发肝硬化相关(P<0.05),GPC3高表达率与血清AFP、肿瘤直径、是否并发肝硬化、转移情况、临床分期均相关(P<0.05)。结论 GPC3在HCC的诊断方面具有重要的临床意义,其表达水平与HCC的病情进展相关。     

磷脂酰肌醇3-激酶和磷酸化蛋白激酶B在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)在人膀胱尿路上皮癌组织中的表达特征及临床意义。方法 2005年6月-2010年7月,采用免疫组织化学法检测40例膀胱尿路上皮癌组织及10例正常膀胱组织PI3K与p-Akt的表达,并对结果进行统计学分析。结果 PI3K和p-Akt在正常膀胱黏膜组织阳性表达率均低于膀胱尿路上皮癌组织中,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一标本中PI3K和p-Akt的表达不具有相关性(r=0.051,P=0.747)。结论 PI3K、p-Akt在膀胱尿路上皮癌中高表达,两者在膀胱尿路上皮癌中共同促其发展,但其在膀胱尿路上皮癌的预后和进展中的作用尚不明确。     

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3和磷脂酰肌醇蛋白多糖-5在人肝癌组织中的表达及意义

目的分析磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和磷脂酰肌醇蛋白多糖-5(GPC-5)在肝细胞癌(HCC)组织中及癌旁正常肝组织中的表达规律,探讨其在HCC发生发展过程中的意义。方法以自身配对法收集30例HCC患者经手术切除后的癌灶及癌旁正常肝组织,以HE染色观察肝组织的临床病理学特征,免疫组织化学法检测GPC-3和GPC-5的表达及分布。结果 (1)癌细胞排列呈球团状和条索状,向周围肝组织浸润,部分区域有出血、坏死,并伴有肝细胞增生灶、增生结节及非典型增生结节。(2)在原发性肝癌组织中可见GPC-3阳性表达,其阳性率为70%,高于癌旁正常组织(10%)(P<0.01)。GPC-5在原发性肝癌组织中阳性表达,其阳性率为86.7%,高于癌旁正常组织(7%)(P<0.01)。结论在HCC组织中,GPC-3与GPC-5同时高表达,提示GPC-3和GPC-5均在HCC进展过程中发挥了重要的作用。     

磷脂酰肌醇-3激酶在间充质干细胞成肌分化中的表达及肌损伤修复中的作用

目的：以5-氮杂胞苷(5-azacytidine，5-Aza-CR)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)成肌分化，探讨生肌调控因子Myf5的表达情况及磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide-3 kinases，P13K)在此分化全过程中的作用。方法：分离、纯化及扩增MSCs，以5-Aza诱导其成肌分化，RT-PCR测定Myf5的表达，免疫组化检测α-sarcomeric表达；Western-blot检测LY294002抑制前后磷酸化Akt蛋白水平的变化。结果：LY294002作用后，Myf5表达延迟至诱导后12h；诱导后10d，部分MSCs表达α-sarcomeric；磷酸化Akt在5-Aza诱导后蛋白水平逐渐增强，LY294002抑制明显下降。 结论：MSCs成肌分化过程中，PI3K是重要的正向信号转导通路。     

磷脂酰肌醇-3-激酶信号途径和儿童急性淋巴细胞白血病

磷脂酰肌醇-3-激酶以其广泛的分布,参与并产生酯类第二信使,激活细胞内酶联级反应,调节细胞增殖、分化和凋亡而成为研究细胞信号转导机制的热点.本文重点介绍磷脂酰肌醇-3-激酶结构与功能,该途径激活后抗凋亡作用以及其参与儿童急性淋巴细胞白血病发病的可能机制.     

食管鳞癌组织和淋巴结中血管内皮生长因子C的表达及其意义

目的研究血管内皮生长因子c（VEGF-c）在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌细胞侵袭与转移的关系。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶链接法（sP）检测24例正常食管黏膜、94例食管鳞癌和83例淋巴结中VEGF-C的表达情况。结果食管鳞癌组织中VEGF-C的表达率高于正常食管黏膜（78．7％vs4．2％,P〈O．01）;食管癌临床分期0～Ⅱ期中VEGF-C表达率低于Ⅲ～Ⅳ期（68．0％vs90．9％,P〈0．05）;转移淋巴结组织中VEGF—C表达率高于无转移淋巴结组织（80．0％ VS 25．6％,P〈0．01）。结论VEGF-C在食管癌组织和转移淋巴结中高表达,在食管癌的发生、发展过程中具有重要作用,可作为评价食管癌生物学行为的指标。     

体外神经干细胞培养过程中蛋白激酶磷脂酰肌醇-3激酶/AKT信号途径的作用

目的:探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3kinase,PI3K)/AKT信号途径在体外培养神经干细胞存活、分化中的作用。方法:实验于2001-11/2004-04在重庆医科大学神经病学研究所完成。分为对照组、PI3K特异性抑制剂wortmannin组和LY294002组;采用间接免疫荧光法检测nestin,NF-200和GFAP的表达;TUNEL评价细胞凋亡率;WesternBlot法检测磷酸化的AKT,caspase-9和bad的表达。结果:随着wortmannin和LY294002浓度增大,神经干细胞的形态变化逐渐明显,而且细胞凋亡率也逐渐增加。低浓度时(wortmannin浓度为5nmol/L,LY294002浓度为2μmol/L),神经干细胞凋亡率与对照组无显著性意义(P>0.05);高浓度时(wortmannin浓度为50,100nmol/L,LY294002浓度为50,100μmol/L),神经干细胞凋亡率与对照组、低浓度组有非常显著性意义(P<0.01)。WesternBlot结果提示,随着PI3K特异性抑制剂浓度增大,磷酸化AKT的表达逐渐减弱。当高浓度wort-mannin(20nmol/L)和LY294002(10μmol/L)抑制了AKT磷酸化后,磷酸化的caspase-9,Bad表达减弱。此外,将wortmannin组和LY294002组存活的细胞接种后,分化后细胞的NF-200,GFAP表达无显著性意义。结论:神经干细胞存活依赖于PI3K/AKT途径的活化,其机制可能是PI3K/AKT活化后,促进了Bad和caspase-9等蛋     

磷脂酰肌醇3激酶通过mDial参与调控凝血酶诱导的血小板聚集

目的 探讨mDial(mammalian diaphanous 1)在人血小板中的表达和血小板聚集过程中的作用以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)对该过程的调控作用.方法 采用血小板聚集仪检测PI3K抑制剂和抗mDial抗体导入后对人血小板聚集率的影响;Western blot法检测mDial在血小板静止及活化过程中的表达及其与肌动蛋白细胞骨架的关系.结果 mDial在血小板静止、凝血酶诱导的铺展或聚集血小板内表达水平没有明显差异;凝血酶诱导血小板聚集过程中,mDial从Triton-X100可溶性(胞质)部分向Triton-X100不可溶性(细胞骨架)部分转位;抗mDial抗体导入血小板后能够抑制凝血酶诱导的血小板聚集;PI3K抑制剂渥曼青霉素及Ly294002能够抑制血小板聚集,抑制mDial从Triton-X100可溶性部分向Triton-X100不可溶性部分的转位.结论 PI3K通过mDial参与调控凝血酶诱导的血小板聚集过程中肌动蛋白细胞骨架的重构.     

电针对APP/PS1小鼠皮质区磷脂酰肌醇-3激酶/糖原合成酶激酶-3α通路相关蛋白表达和老年斑沉积的影响

目的 观察电针对APP/PS1双转基因小鼠皮质区磷脂酰肌醇-3激酶/糖原合成酶激酶-3α (PI3K/GSK3α)信号通路上相关蛋白的分布表达,以及老年斑沉积的影响。 方法 基因鉴定后,3月龄雄性转基因小鼠随机分为模型组和电针组,野生型C57小鼠为对照组,每组6只。电针组电针百会(GV20)和双侧肾俞(BL23)14 d。治疗后,Western blotting和免疫组化法检测各组小鼠皮质区老年斑数量,PI3K亚单位P85α和P110α,以及GSK3α和pS^21-GSK3α等蛋白的分布和表达。 结果 模型组皮质区老年斑数较对照组显著升高(P < 0.001);电针组老年斑数较模型组显著降低( P < 0.001)。各相关蛋白主要表达于皮质神经元胞质。与对照组相比,模型组pS ^21-GSK3α、P110α和P85α蛋白表达明显降低(P < 0.01),GSK3α蛋白表达升高( P < 0.05);与模型组相比,电针组pS ^21-GSK3α、P110α和P85α的蛋白表达明显升高(P < 0.01),GSK3α蛋白表达降低( P < 0.05)。 结论 电针能调节APP/PS1双转基因小鼠皮质区PI3K/GSK3α通路相关蛋白表达,减少老年斑沉积。     

体外神经干细胞培养过程中蛋白激酶磷脂酰肌醇-3激酶／AKT信号途径的作用

目的：探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase，P13K)／AKT信号途径在体外培养神经干细胞存活、分化中的作用。方法：实验于2001-11／2004-04在重庆医科大学神经病学研究所完成。分为对照组、P13K特异性抑制剂wortmannin组和LY294002组；采用间接免疫荧光法检测nestin，NF-200和GFAP的表达；TUNEL评价细胞凋亡率；Western Blot法检测磷酸化的AKT，caspase-9和bad的表达。结果：随着wortmannin和LY294002浓度增大，神经干细胞的形态变化逐渐明显，而且细胞凋亡率也逐渐增加。低浓度时(wortmannin浓度为5nmol／L，LY294002浓度为2μmol／L)，神经干细胞凋亡率与对照组无显著性意义(P&;gt;0．05)；高浓度时(wonmannin浓度为50，100nmol／L，LY294002浓度为50，100μmol／L)，神经干细胞凋亡率与对照组、低浓度组有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。Western Blot结果提示，随着PI3K特异性抑制剂浓度增大，磷酸化AKT的表达逐渐减弱。当高浓度woftmannin(20nmol／L)和LY294002(10μmol／L)抑制了AKT磷酸化后，磷酸化的caspase-9，Bad表达减弱。此外，将wortmannin组和LY294002组存活的细胞接种后，分化后细胞的NF-200，GFAP表达无显著性意义。结论：神经干细胞存活依赖于PI3K／AKT途径的活化，其机制可能是PI3K／AKT活化后，促进了Bad和caspase-9等蛋白的磷酸化，抑制了细胞凋亡事件的发生。但是PI3K／AKT途径可能在神经干细胞的分化中的作用甚微。     

血管内皮生长因子在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

摘 要 目的：在肿瘤成功生长、浸润和转移的过程中，血管形成是一个关键步骤。在肿瘤血管形成中，血管内皮生长因子(VEGF)是最强的血管生成因子这一观点已被普遍接受。本研究将调查口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的VEGF的表达及临床意义。方法：通过免疫组织化学方法，评价了来自48例OSCC的经福尔马林固定、石蜡包埋预处理标本的VEGF表达水平，并且以阳性细胞百分比来表示标记指数(LI)。结果：OSCC内的VEGF表达显著强于邻近正常口腔粘膜。在仅接受手术治疗的病人中，在VEGF表达与淋巴结转移之间存在一个显著性关系(P＜0.05)。在所有病例，低LI均显著地与良好预后有关(P＜0.05)。结论：尽管关于VEGF的预后关联有争议，我们的结果仍建议这一因子适于评定口腔癌的预后。     

缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子在胃癌中的表达及意义

目的：研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白在胃癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学EnvisionTM二步法检测172例胃癌和30例癌旁正常胃组织（距癌灶5 cm以上）中HIF-1α和VEGF蛋白的表达,应用卡方趋势检验对HIF-1α及VEGF蛋白表达与胃癌临床病理参数进行相关性检验;应用Spearman秩相关检验对HIF-1α和VEGF表达之间相关性进行分析。结果在172例胃癌中,HIF-1α和VEGF蛋白的阳性表达率分别为55.81％（96/172）和63.37％（109/172）,30例癌旁中HIF-1α和VEGF表达均阴性,两组比较,差异均有统计学意义（χ2分别=11.16、13.76,P均＜0.0,5）;卡方趋势检验显示,胃癌组织中HIF-1α表达和VEGF表达与胃癌的临床分期、组织学分级、淋巴结转移和肿瘤坏死呈正相关（χ2分别=25.53、24.99、11.20、30.35;25.43、13.13、11.31、23.29, P均＜0.05）,与患者年龄和术后5年生存率均无关（χ2分别=3.92、4.63、4.79、4.65,P均＞0.05）。Spearman结果显示,胃癌组织中HIF-1与VEGF蛋白表达之间的关系呈正相关（r=0.65,P＜0.05）。结论胃癌组织中HIF-1α及VEGF的蛋白表达水平明显增高,并与胃癌的侵袭性生物学行为有关。     

食管鳞癌组织中3-磷酸肌醇激酶和CD44v6的表达及其临床意义

目的 研究3-磷酸肌醇激酶(P13K)和CD44v6在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌细胞发生、发展与转移的关系以及P13K和CD44v6两者之间的相关性.方法 应用免疫组织化学链霉卵白素-过氧化物酶法检测24例正常食管黏膜、94例食管鳞癌组织中P13K和CD44v6的表达情况.结果 食管癌组织中P13K和CD44v6的阳性表达率与正常食管黏膜组织相比差异均有统计学意义(4.2%vs 71.3%、4.2% vs 76.6%,均P<0.01).随着浸润深度和临床分期的增加,P13K和CD44v6表达增多,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01),P13K、CD44v6在淋巴结转换阳性的癌组织中表达高于无淋巴结转移组(92.0%vs 47.7%,90.0%vs 61.4,均P<0.01),P13K与CD44v6表达呈显著正相关(r=0.230,P<0.05).结论 P13K和CD44v6表达均与食管癌发生、发展及侵袭转移有关,可作为评价食管鳞癌生物学行为的指标.在食管癌的发生发展中P13K和CD44v6协同促进肿瘤的恶性进展.     

Expression of vascular endothelial growth factor in renal cell carcinoma is correlated with cancer advancement

Vascular endothelial growth factor (VEGF) functions as a regulator of neovascularization in malignant cells. VEGF as a mitogen is thought to alter renal cell carcinoma formation and tumor progression. We investigated the expression of the VEGF gene in order to evaluate its clinical significance in renal cell carcinoma. Tissue samples from 198 patients with renal cell carcinoma were examined with an immunohistochemical stain for the expression of the VEGF gene. The expression rate was compared to 34 normal renal cortical samples obtained from renal surgery from noncancer patients. There were significant differences between normal renal cortex (0%) and cancer tissue (54.5%) in positive staining of VEGF protein (P<0.001). With the progression of tumor grade, the positive rate of VEGF gene expression significantly increased. The expression rate of the VEGF gene in the advanced group, such as with lymph node involvement or vein invasion, was greater than that in the locally confined group (P<0.001). The results revealed that expression of the VEGF gene is proportional to the formation and progression of renal cell carcinoma, which may allow VEGF to be used as a prognostic marker for renal cell carcinoma.     

血清VEGF-C及VEGFR-3水平对食管鳞癌放疗敏感性的预测价值

目的探讨血清血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)水平对食管鳞癌放疗敏感性的预测价值。方法选取2017年6月至2019年11月在本院行放疗治疗的96例食管鳞癌患者作为癌症组,另选同期本院85名体检健康者作为健康组,均行血清VEGF-C、VEGFR-3水平检测。根据放疗效果将癌症组进一步分为有效组与无效组,比较两组的血清VEGF-C、VEGFR-3水平,同时,采用ROC曲线分析血清VEGF-C、VEGFR-3水平对食管鳞癌放疗敏感性的预测价值。结果癌症组的VEGF-C、VEGFR-3水平明显高于健康组(P<0.05)。有效组的血清VEGF-C、VEGFR-3水平明显低于无效组(P<0.05)。血清VEGF-C、VEGFR-3水平单一及联合检测预测食管鳞癌放疗敏感性的灵敏度分别为77.42%、74.19%、96.77%,特异度分别为83.08%、84.62%、80.00%,曲线下面积(AUC)分别为0.782、0.717、0.955。结论血清VEGF-C、VEGFR-3水平在食管鳞癌患者中异常升高,二者均对食管鳞癌放疗敏感性具有一定的预测价值,但联合检测的预测价值更高。     

重度子痫前期患者血管内皮生长因子及其受体-1水平变化及意义

目的检测早发型和晚发型重度子痫前期患者血清和胎盘中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及血管内皮生长因子受体-1（soluble vascular endothelial growth factor receptors-1,sFlt-1）水平,探讨其在重度子痫前期发病中的作用机制。方法 20例早发型重度子痫前期患者为早发重度组,20例晚发型重度子痫前期患者为晚发重度组,20例正常晚期妊娠者为正常妊娠组,采用ELISA法检测3组血清VEGF及sFlt-1水平,同时应用免疫组织化学SP法检测胎盘组织中VEGF及sFlt-1的阳性表达率。结果血清VEGF水平及胎盘VEGF阳性表达率早发重度组（（27.5±3.6）ng/L和15%）、晚发重度组（（36.2±3.2）ng/L和30%）均低于正常妊娠组（（45.5±3.7）ng/L和45%）（P〈0.05）,早发重度组低于晚发重度组（P〈0.05）;血清sFlt-1水平及胎盘sFlt-1阳性表达率早发重度组（（42.2±3.2）ng/L和60%）、晚发重度组（（30.2±2.5）ng/L和45%）均高于正常妊娠组（（14.7±2.7）ng/L和10%）（P〈0.05）,早发重度组高于晚发重度组（P〈0.05）。结论 VEGF水平低表达及sFlt-1水平高表达可能与重度子痫前期的严重程度相关,在重度子痫前期发生、发展中起重要作用。     

VEGF和PCNA在前列腺癌组织中表达及临床意义

目的探讨血管内皮细胞生长因子和增殖细胞核抗原（PCNA）在同一前列腺癌（Pca）组织中的表达，及与肿瘤血管形成和肿瘤细胞增殖的关系。方法应用免疫组织化学LDP法检测40例Pca，20例良性前列腺增生症（BPE）组织中VEGF及PCNA的表达情况。结果Pca组织中VEGF和PCNA的表达均明显高于BPE；VEGF和PCNA在Pea中的表达水平与其病理分级和临床分期均有关；Pca的VEGF表达水平和PCNA的表达也有关（P〈0．01）；在VEGF阳性表达病例中PCNA的表达随VEGF表达强度的升高而升高（P〈0．05）。结论VEGF和PCNA与Pea组织学分级、恶性程度和预后密切相关，是检测Pca的较好分子标志物。     

MMP-11在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平及临床意义分析

目的：探讨基质金属蛋白酶-11（MMP-11）表达水平,及其与食管鳞状细胞癌（ESCC）的关系。方法采用免疫组织化学法检测36例ESCC 癌组织及其癌旁组织标本,以及9例正常食管组织MMP-11表达水平。结果 ESCC 癌组织、癌旁组织及正常食管组织MMP-11蛋白阳性表达率分别为69．4％（25/36）、25．0％（9/36）、22．2％（2/9）。癌旁组织和正常食管组织MMP-11蛋白阳性表达率低于癌组织（ P ＜0．05）,癌旁组织和正常食管组织 MMP-11蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义（ P ＞0．05）。就MMP-11阳性表达率而言,Ⅰ～Ⅱ期患者低于Ⅲ～Ⅳ期患者、T1～ T2期患者低于T3～ T4期患者、无淋巴转移的患者低于有淋巴转移的患者（P ＜0．05）。MMP-11表达水平与患者年龄、性别和肿瘤位置、直径、病理类型无关（P＞0．05）。结论 MMP-11蛋白可能参与了ESCC 的发生、发展,MMP-11蛋白高表达可能是促进ESCC 浸润转移的因素之一。     

PTEN在食管鳞状细胞癌中的表达和意义

目的研究人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在食管鳞状细胞癌中的表达与临床病理特点的关系。方法采用免疫组织化学及荧光定量聚合酶链反应(PCR)法分别检测60例胸外科食管鳞状细胞癌手术患者食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织和正常食管黏膜组织中PTEN的表达水平。分析PTEN在食管鳞状细胞癌浸润、分化、转移中的作用。结果 PTEN在正常食管组织(2.01±0.07)、癌旁组织(1.50±0.10)、食管鳞状细胞癌组织(0.89±0.08)中的表达逐渐降低(P0.01)。PTEN在有淋巴结转移的食管鳞状细胞癌组织中(0.87±0.08)的表达比在无淋巴结转移(0.94±0.07)的表达低;PTEN在高分化(0.91±0.06)、中分化(0.90±0.07)、低分化(0.85±0.10)的食管鳞状细胞癌组织中的表达逐渐降低,PTEN在浸润深(0.88±0.08)的食管鳞状细胞癌组织中的表达比浸润浅(0.93±0.07)的表达低(P0.05或0.01)。在60岁组与≥60岁组中的阳性表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 PTEN基因的丢失或突变均与食管鳞状细胞癌的生长、分化和浸润转移相关。