肝细胞生长因子在心血管疾病中的研究

肝细胞生长因子是一种多功能的细胞因子,具有多种生物学活性,包括促有丝分裂、细胞移动、形态学发生和血管形成、抗细胞凋亡、抗纤维化等,对心血管具有重要的保护作用.本文就近年肝细胞生长因子在心血管疾病中的应用做一综述.     

肝细胞生长因子与肝纤维化的研究进展

肝细胞生长因子是一种具有多种生物活性的细胞因子,其在促进肝细胞增殖、抑制肝星状细胞活化等方面有重要作用.肝纤维化进展过程中,各种因素引起肝细胞持续损伤,使损伤部位肝细胞再生,肝星状细胞激活,细胞外基质大量沉积,从而导致肝纤维化形成.此文就肝细胞生长因子的生物学特性及其在肝纤维化中发挥的作用作一综述.     

肝细胞生长因子对糖基化终产物诱导内皮细胞凋亡的影响

目的探讨糖基化终产物对内皮细胞的凋亡作用,以及肝细胞生长因子对内皮细胞凋亡的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,予不同浓度糖基化终产物及肝细胞生长因子干预,分为实验对照组及100 mg/L、200mg/L4、00 mg/L糖基化终产物组和400 mg/L糖基化终产物 100μg/L肝细胞生长因子组,采用四甲基偶氮唑蓝比色法测定各组内皮细胞生长抑制率,通过吖啶橙荧光染色观察细胞形态学变化,流式细胞术测定Annexin V-FITC/PI双染标记的细胞凋亡率,检测肝细胞生长因子对糖基化终产物诱导内皮细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法分析各组凋亡基因Bax、Bcl-2蛋白的表达及酶联反应法测定细胞凋亡蛋白酶3的活性。结果肝细胞生长因子能明显降低糖基化终产物对内皮细胞生长的抑制作用(P<0.01);糖基化终产物诱导培养的内皮细胞出现明显的凋亡形态学改变,在一定浓度范围内,内皮细胞凋亡率与糖基化终产物的浓度和作用时间呈依赖关系,肝细胞生长因子干预后可显著降低不同时间的内皮细胞凋亡率(P<0.05);肝细胞生长因子作用内皮细胞抗凋亡基因Bcl-2表达明显升高(P<0.01),而促凋亡基因Bax表达无明显变化(P>0.05);细胞凋亡蛋白酶3活性显著降低(P<0.05)。结论糖基化终产物诱导人内皮细胞凋亡,而肝细胞生长因子抑制糖基化终产物诱导的内皮细胞凋亡,其作用机制可能是上调抗凋亡基因Bcl-2水平、抑制细胞凋亡蛋白酶3的激活。     

肝细胞条件培养液对人脂肪问充质干细胞向肝细胞分化和增殖的作用

目的 探讨人脂肪间充质干细胞在改良的诱导体系下向肝细胞的分化和增殖情况,为肝组织工程提供新的种子细胞来源.方法 从人脂肪组织分离出脂肪间充质干细胞,用含有碱性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子-4的肝细胞诱导液进行诱导,并于诱导7 d后加入抑瘤素M.用细胞计数试剂盒-8法检测整个诱导过程细胞的增殖情况;通过光学显微镜观察诱导细胞的形态变化;用RT-PCR法和免疫荧光法分别检测肝细胞特异性基因和蛋白的表达;并对多种肝细胞特异性功能进行检测.组间比较采用t-test检验.结果 用改良肝细胞诱导液培养的人脂肪间充质干细胞在培养第5、7、14、21天时,细胞数均明显多于用对照培养液培养的细胞(f值分别为6.59、8.69、15.94和24.64,P值均＜0.05).诱导细胞表现出上皮样肝细胞形态,表达肝细胞特异性基因和蛋白;具有多种肝细胞特异性功能,如靛青绿摄取/排泌、糖原合成以及白蛋白分泌功能.结论 人脂肪间充质干细胞在含碱性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子-4和抑瘤索M的诱导体系中能够分化为更加成熟的具有多种肝细胞特异性功能的细胞,且此诱导体系同时具有促进细胞增殖的作用.     

人肝细胞生长因子基因腺病毒重组体的构建及转染血管平滑肌细胞的表达

为探讨构建能表达肝细胞生长因子基因的腺病毒重组体的方法，以及这种腺病毒重组体能否在血管平滑肌细胞表达。将含有肝细胞生长因子基因片段的质粒用限制内切酶酶切，以琼脂糖凝胶电泳回收得到目的基因片段：将它用DNA连接酶插入至腺病毒穿梭质粒中，并用限制内切酶鉴别插入方向，得到插入方向正确的重组腺病毒穿梭质粒。用限制内切酶酶切重组腺病毒穿梭质粒和表达载体，使它们线性化；以电转化方法使它们共转化至BJ5183细胞中进行同源重组，构成肝细胞生长因子基因腺病毒重组体。以脂质体为转染介质，将肝细胞生长因子基因腺病毒重组体转染到人胚肾细胞中进行包装，使病毒复性具有感染能力。用包装后的肝细胞生长因子基因腺病毒重组体感染体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞；经逆转录一聚合酶链反应和蛋白印迹检测发现肝细胞生长因子呈现过表达。此外，酶切及测序发现重组腺病毒穿梭质粒和肝细胞生长因子基因腺病毒重组体是正确的；绿色荧光蛋白标记对重组体在人胚肾细胞中的包装及包装后感染大鼠主动脉平滑肌细胞进行了荧光示踪。结果提示，肝细胞生长因子基因腺病毒重组体构建成功，为血管疾病转基因治疗奠定了基础，具有一定临床价值，     

体外诱导人脐血间充质干细胞向肝细胞样细胞分化的研究

目的 探讨人脐血间充质干细胞能否在体外诱导分化为肝细胞样细胞,并探索其定向诱导分化为肝细胞样细胞的分化机制。方法 无菌条件下采集正常产妇脐血,用相对密度为1.077的淋巴细胞分离液分离脐血MNC,进而采用贴壁培养法获得MSC,流式细胞仪检测其表面际志。分别用HGF、FGF4、俩者联合、无生长因子四种处理因素,及含2％FBS的DMEM,1×ITS讲行诱导培养,并于诱导前及诱导后的第7、14、21、28天留取细胞,RT～PCR法检测AFP、白蛋白及C-met FGFR2mRNA的表达,免疫细胞化学法检测AFP、白蛋白、抗肝细胞抗体和CK18的表达,PAS法进行糖原染色,分析是否诱导出肝细胞样细胞。结果 MSC强表达CD29、CD44,不表达CD34。诱导后7,21天分别检测出AFP,白蛋白mRNA及蛋白的表达,28天检测出CK18、抗肝细胞抗体的表达,21天、28天均可检测到糖原染色阳性细胞,随诱导时间的延长C-met,FGFR2 mRNA表达增高,HGF FGF4诱导组肝系细胞标志阳性率均高于单独生长因子诱导组(P<0.05);单独生长因子诱导组间无明显差异(P>0.05)。无生长因子诱导组在以上时间点均未检测到上述指标。结论HGF、FGF4均能诱导人脐血MSC分化为具有肝系细胞表型和功能的细胞,且二者在一定程度上有联合作用。生长因子与其相幢受体之间,可能存在正反馈调节机制。     

用流式细胞计检测表皮生长因子对肝细胞DNA合成的刺激作用

用流式细胞术和单克隆抗溴脱氧脲嘧啶抗体标记 DNA 技术检测了表皮生长因子、胰高血糖素和胰岛素对大鼠初代培养肝细胞 DNA 合成的刺激作用。结果表明表皮生长因子对肝细胞DNA 合成具有明显的增强作用,并且这种作用可以被胰岛素进一步加强。当表皮生长因子、胰岛素和胰高血糖素三者联合使用时,肝细胞 DNA 合成显著增强。提示表皮生长因子,特别是它与胰岛素和胰高血糖素联合使用可以明显刺激肝细胞的再生。     

不同诱导条件对体外培养视网膜色素上皮细胞表达肝细胞生长因子的影响

目的 验证视网膜色素上皮细胞是肝细胞生长因子的分泌细胞,在蛋白水平检测不同诱导条件对人视网膜色素上皮细胞表达肝细胞生长因子的影响.方法 分别应用体积分数为0.1的胎牛血清、50%巨噬细胞调理液、与单核细胞共培养的方法 诱导视网膜色素上皮细胞,24 h后撤掉各刺激因素继续培养.通过细胞免疫化学方法 检测各种培养条件下肝细胞生长因子在视网膜色素上皮细胞中的表达情况.结果 细胞免疫化学结果 显示,有无诱导因素情况下,视网膜色素上皮细胞中肝细胞生长因子的表达均呈阳性.结论 视网膜色素上皮细胞是肝细胞生长因子的分泌细胞,有无诱导因素情况下,均分泌肝细胞生长因子.     

骨髓单个核细胞心肌移植增加肝细胞生长因子受体的表达

目的　研究肝细胞生长因子及其受体在骨髓干细胞移植治疗中的表达情况 ,评价其作用。方法　大鼠 30只 ,其中 15只接受了冠状动脉前降支结扎以引起前壁心肌梗死 ,另外 15只同时还进行了骨髓单个核细胞心肌移植。术后不同时间点心脏取材检测肝细胞生长因子及其受体的表达。结果　心肌梗死之后心肌组织肝细胞生长因子及其受体表达水平增加 ;同时接受骨髓单个核细胞心肌移植治疗没有进一步增加肝细胞生长因子的表达 ,但其受体的表达水平进一步显著增加 (P <0 0 1)。结论　骨髓单个核细胞心肌移植治疗能够增加肝细胞生长因子受体的表达水平。     

肝细胞生长因子与神经系统疾病

肝细胞生长因子是一种对神经系统有较强营养作用的细胞因子，对中枢和周围神经元的生长、分化、修复和再生起重要作用。近年来的研究表明，肝细胞生长因子与多种神经系统疾病，如脑缺血、运动神经元病、神经胶质瘤、Alzheimer病等的发生发展密切相关。文章综述了肝细胞生长因子在神经系统疾病中的表达和作用。     

HGF基因修饰骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化的研究进展

肝纤维化是肝脏慢性损伤导致肝细胞炎症、坏死,肝脏内结缔组织异常增生的一种可逆性的病理变化.越来越多的研究表明,肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因修饰骨髓间充质干细胞可减轻或抑制肝纤维化,其效果要好于单纯的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stromal cells)移植,被认为是一种非常有前景的抗肝纤维化的细胞疗法.     

肝苏对人肝细胞和肝星状细胞增殖、氧应激以及细胞外基质表达的影响

背景：有研究显示肝苏对肝细胞具有保护、抗炎、抗氧化和抗肝纤维化的作用,但其作用机制未明。目的：探讨肝苏对人肝细胞和肝星状细胞（HSC）增殖、氧应激以及细胞外基质表达的影响。方法：分别用0．01～1．0mg／ml肝苏培养肝细胞和HSC,以M1丫r法检测肝苏对肝细胞和HSC增殖的影响：用次氮基三乙酸铁（Fe-NTa）和0．05—1．0mg／ml肝苏共同培养肝细胞和HSC,检测超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;用1．5mg／ml和2．5mg／ml肝苏培养HSC,以酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞外基质透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、I型胶原、Ⅲ型胶原和细胞因子转化生长因子（TGF）-β1含量。结果：在0．05。1．0mg／ml浓度范围内,肝苏可促进肝细胞增殖,但各浓度肝苏对HSC增殖无明显影响。肝苏可增高肝细胞SOD活性,降低肝细胞和HSCMDA含量,但对HSCSOD活性无明显影响。同时肝苏可抑制HSC细胞外基质HA、LN和细胞因子TGF-β1的表达,而I型胶原、Ⅲ型胶原无明显差异。结论：肝苏可促进肝细胞增殖,保护肝细胞和HSC免受氧应激损伤,抑制HSC分泌HA、LN和TGF-β1,提示其具有肝细胞保护、抗氧化和抗肝纤维化作用。     

肝细胞生长因子基因修饰骨髓间充质干细胞对四氯化碳所致慢性肝损伤的治疗作用

本研究基于肝细胞生长因子（HGF）能够促进肝脏细胞再生，抗纤维化及促进干细胞向肝脏细胞分化；骨髓干细胞具有向肝脏细胞分化或与肝脏细胞融合的特性，在肝脏细胞再生和修复中具有重要的作用。将肝细胞生长因子和骨髓间充质干细胞结合起来，即对间充质干细胞进行肝细胞生长因子的基因修饰，然后观察基因修饰后的间充质干细胞对四氯化碳（CCl4）慢性肝损伤的治疗作用，希望能为慢性肝病的治疗提供新的方法和途径。     

骨髓干细胞治疗肝病的研究进展

骨髓干细胞是一类具有自我增殖和分化潜能的细胞,主要包括造血干细胞和间充质干细胞。体外通过生长因子,体内利用特定的微环境均可诱导骨髓干细胞分化为肝前体细胞和成熟肝细胞,并明显改善肝功能。其有望成为肝细胞移植或生物人工肝支持系统的新型种子细胞。此文就骨髓干细胞分化为肝样细胞及其临床治疗肝病的研究进展作一综述。     

肝细胞生长因子与缺血性脑血管病

肝细胞生长因子是一种对神经系统有较强营养作用的细胞因子，对中枢和周围神经元的发育、生长、分化、修复和再生中起重要作用，现已成为神经科学领域的研究热点。文章综述了肝细胞生长因子及其受体在脑缺血后的表达和作用。     

表皮生长因子对大鼠肝细胞DNA合成的刺激作用——单克隆抗Brdu染色法及流体细胞学测定

本文应用单克隆抗溴脱氧脲嘧啶抗体染色法(抗Brdu)及流体细胞学测定等技术,对于表皮生长因子(EGF)、胰高血糖素和胰岛素对大鼠正常培养肝细胞及CCl_4诱导损伤的肝细胞DNA合成的刺激作用,进行了体外与体内研究。体外试验表明,当加入EGF后,DNA合成细胞的标记指数由对照组的0.075%提高到1.34%,当EGF与胰高血糖素及胰岛     

胆汁化血清对骨髓间充质干细胞向肝细胞样细胞定向分化的诱导

目的:寻找生物人工肝和肝细胞移植需要合适的肝细胞来源,研究不同诱导方法对骨髓间充质干细胞(MSC)在体外分化为肝细胞样细胞的影响。方法:本研究应用贴壁法对MSC进行分离和培养后,应用胆汁化血清及肝细胞生长因子不同诱导方式对之进行诱导分化,研究MSC转化为肝细胞样细胞的可能性,并进行转化的鉴定。结果:经贴壁分离和培养的MSC在5%胆汁化血清诱导作用下,21 d后可分化为形态似肝细胞样的细胞,经免疫组织化学显示,该细胞可表达细胞角蛋白18(CK18)和甲胎蛋白(AFP),且原位杂交显示,在培养的第35天,部分细胞还可合成清蛋白,与肝细胞生长因子(HGF)有着相似的诱导效果。结论:在合适的条件下,MSC可向肝细胞方向转化,且本方法操作简捷,胆汁化血清易于获得,具有潜在的应用价值。     

正常肝组织和肝癌组织中Pim-2基因的表达

肝癌(HCC)的发生、发展与细胞凋亡有着密切的关系,肝细胞的凋亡受到多种基因、转录因子,生长因子、细胞因子和激素的调节[1].Pim-2基因是丝氨酸苏氨酸激酶Pim家族成员之一,属于一种钙/钙调蛋白调节激酶,在多种细胞组织的进化过程中高度保守,可通过磷酸化底物发挥抗凋亡,促进细胞维持自我生存作用[2].     

肝细胞生长因子的生理活性

肝细胞生长因子（ＨＧ）具有刺激肝细胞ＤＮＡ台成,促进肝细胞再生的作用,近年对此研究又有新的进展。一、ＨＧＦ的活性（一）ＨＧＦ活性种类１．促进细胞增殖：对多种脏器的多种类型细胞具有促进增殖的作用。对肝脏而言,能促进肝细胞、胆管上皮细胞及贮脂细胞的增殖。２．促进细胞游走和分散：推测这与肿瘤细胞的转移及非肿瘤细胞的器官形成有关。３．器官形成：这种作用是通过Ｆ肌动蛋白丝、微管而起作用的。４．细胞浸润：在体外能促进肿瘤细胞向胶原凝胶浸润。５．血管新生：能促进小鼠皮下组织和大鼠角膜血管新生。６．促进细胞分化…     

肝细胞生长因子在心力衰竭中的研究进展

肝细胞生长因子具有潜在的多种生物学活性,包括致有丝分裂作用、形态形成作用、造血作用、心肌肥大、血管生成、抗凋亡、抗纤维化及组织再生作用。这将对心力衰竭产生保护作用。现就其在心力衰竭中作用及其机制进行探讨。