蒙药珍宝丸对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的:观察蒙药珍宝丸对高眼压引起视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜形态学改变及神经节细胞凋亡的影响,为防治视网膜缺血再灌注损伤性疾病提供理论依据。方法:将12只SD大鼠随机分为正常组、模型组、蒙药珍宝丸组和中药原花青素组,共4组,每组3只。蒙药珍宝丸组和中药原花青素组1次/d,连续灌胃7d后,末次给药6h后开始双眼造模,缺血再灌注24h后处死大鼠,摘取眼球进行病理改变和细胞凋亡的观察。结果:正常组大鼠视网膜结构清晰,各层细胞排列紧密,未见凋亡细胞。模型组大鼠缺血再灌注24h后视网膜细胞形态不规则,视网膜全层水肿,细胞排列明显疏松、紊乱,视网膜神经节细胞凋亡明显,与正常组相比,模型组凋亡细胞阳性率升高,差异有统计学意义(P0.05)。蒙药珍宝丸组和中药原花青素组缺血再灌注24h后,视网膜各层细胞形态较规则,视网膜全层水肿,程度较模型组减轻,与模型组比较凋亡细胞阳性率均降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:蒙药珍宝丸能够减轻视网膜组织病理改变,抑制细胞凋亡,为防治视网膜损伤性疾病提供实验依据。     

蒙药珍宝丸对视网膜缺血再灌注损伤Fas\Fasl、P53蛋白表达的影响及意义

目的:研究蒙药珍宝丸对Fas、FasL及p53蛋白在家兔视网膜缺血再灌注损伤中的表达影响,探讨珍宝丸对家兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制。方法:通过升高眼内压法造成视网膜缺血再灌注损伤模型,采用免疫组织化学链酶卵白素一生物素复合体法和计算机图像分析系统对95只家兔视网膜中Fas、Fasl和P53蛋白表达进行测定。结果:1.组织病理学改变:6~48 h水肿逐渐加重,神经节细胞和内核层细胞数量减少,内外核层密度降低、排列紊乱。72 h视网膜明显变薄,水肿减轻,神经节细胞数量稀少,内核层明显变薄。2.相关因子表达情况:Fas在正常视网膜组织中几乎不表达,在缺血再灌注6 h开始表达,24 h达到高峰,48 h开始下降,延续至缺血再灌注后72 h仍有表达;FasL在正常视网膜组织中低表达,于缺血再灌注12 h表达升高,24 h达到高峰,48 h开始下降;再灌注72 h表达较24 h降低,但仍维持高表达。P53在正常视网膜组织中无表达,缺血再灌注后6 h开始表达,24 h达高峰,48 h仍持续强表达,72 h已明显下降。珍宝丸治疗组各观察指标表达变化规律与缺血再灌注组基本一致,但均较缺血再灌注组明显下降。其中Fas表达在6 h、12 h、24 h、48 h组较缺血再灌注组显著下降(P<0.05);FasL表达在12 h、24 h、48 h组较缺血再灌注组明显下降(P<0.05);P53在6 h、12 h、24 h、48 h组表达明显低于缺血再灌注组(P<0.05)。结论:视网膜缺血再灌注损伤导致视网膜组织中Fas/Fasl和P53蛋白表达的增高。珍宝丸可以抑制其增高,可用于临床上视网膜缺血再灌注损伤的治疗。     

观察蒙药额尔敦乌日勒对兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的：通过观察兔视网膜缺血再灌注（RIR）损伤后,视网膜中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和形态学的变化来探讨蒙药额尔敦乌日勒对RIR损伤的保护作用。方法：将60只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、蒙药组及维生素E组。采用升高兔眼压到110mmHg持续60分钟的方法制作视网膜缺血再灌注模型。分别在缺血再灌注24、72、168h后测定视网膜中MDA含量和SOD活性,并作光镜切片进行形态学观察。结果：模型组视网膜的内核层变薄、细胞排列紊乱,神经节细胞明显减少、有大量空泡形成,伴随MDA含量升高和SOD活性下降。上述变化随时间延长而加重。而蒙药组内核层和神经节细胞层分别比模型组、维生素E组增厚,细胞排列整齐。MDA含量比模型组、维生素E组均明显降低,SOD活性明显升高。结论：蒙药额尔敦乌日勒能降低视网膜中MDA含量、升高SOD活性。能够清除自由基,减轻视网膜组织损伤,对视网膜缺血再灌注损伤具有保护作用。     

观察蒙药额尔敦乌日勒对兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的：通过观察兔视网膜缺血再灌注（RIR）损伤后,视网膜中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和形态学的变化来探讨蒙药额尔敦乌日勒对RIR损伤的保护作用。方法：将60只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、蒙药组及维生素E组。采用升高兔眼压到110mmHg持续60分钟的方法制作视网膜缺血再灌注模型。分别在缺血再灌注24、72、168h后测定视网膜中MDA含量和SOD活性,并作光镜切片进行形态学观察。结果：模型组视网膜的内核层变薄、细胞排列紊乱,神经节细胞明显减少、有大量空泡形成,伴随MDA含量升高和SOD活性下降。上述变化随时间延长而加重。而蒙药组内核层和神经节细胞层分别比模型组、维生素E组增厚,细胞排列整齐。MDA含量比模型组、维生素E组均明显降低,SOD活性明显升高。结论：蒙药额尔敦乌日勒能降低视网膜中MDA含量、升高SOD活性。能够清除自由基,减轻视网膜组织损伤,对视网膜缺血再灌注损伤具有保护作用。     

珍珠丸对兔视网膜缺血再灌注的神经保护作用及Bcl-2基因的表达

目的:观察珍珠丸对兔视网膜缺血再灌注损伤Bcl-2基因表达的影响,探讨珍珠丸对视神经的保护作用。方法:采用升高兔眼压到14.63Kpa持续1小时的方法制作视网膜缺血再灌注模型。将35只日本大耳白兔随机分为正常组、缺血再灌注组及治疗组。采用光镜观察再灌注后不同时间段视网膜组织学变化,运用免疫组化SABC法观测不同时间段治疗组与对照组视网膜组织中Bcl-2基因的表达,进行图像分析。结果:光镜下,缺血再灌注组神经节细胞比正常组明显减少,空泡形成和核固缩现象多见,内网状层、内核层轻度变薄,内核层细胞排列紊乱,外核层变化不明显。Bcl-2基因表达有所增高。而珍珠丸组内核层、神经节细胞层厚度及神经节细胞数目与正常组比较无明显差异,内核层和节细胞层细胞排列比较规整。Bcl-2基因表达量比缺血再灌注组明显增加(P<0.05),与维生素E组比较有显著性差异(P<0.05),但168小时后缺血再灌注组与正常组比较无显著性差异,各组两个时间段Bcl-2基因的表达均有显著性差异。结论:珍珠丸能减少神经元细胞凋亡的数目,并能促成Bcl-2基因的表达,有保护神经元细胞的作用。对于视网膜缺血再灌注损伤具有保护作用,提示珍珠丸可能用于临床上视网膜缺血再灌注损伤的治疗。     

原花青素对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜结构及核转录因子-κB 表达的影响

目的 观察原花青素(PC)对大鼠视网膜缺血再灌注(RIR)损伤后视网膜结构及核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其作用机制.方法 所有大鼠随机分为5 组.于造模前2 周PC 低、高剂量组分别给予100、300 mg/kg剂量灌胃PC 混悬液,丹参组予丹参颗粒溶液0.09 g/kg 剂量灌胃,正常组及模型组给予等量生理盐水灌胃,均每日1 次.造模后各组仍继续按原方案给药,除正常组外,其余各组按再灌注时间的不同分为缺血再灌注6、24、48、72 h 组.以免疫组织化学方法检测各时点视网膜中NF-κB 的表达,通过透射电镜观察各时点视网膜的超微结构.结果 NF-κB在缺血再灌注6 h 后开始表达,24 h 表达最强,然后逐渐下降.PC 低、高剂量组及丹参组明显低于缺血再灌注模型组同期NF-κB 的表达(P ＜0.01).PC 高剂量组NF-κB 的表达明显受到抑制(P ＜0.01).电镜下可见48 h 模型组视网膜各层细胞超微结构异常程度明显重于6、24 h.模型组神经节细胞层见部分神经节细胞胞质内细胞器溶解、消失,细胞核固缩,异染色质增多,染色质边集;丹参组及PC 低剂量组神经节细胞胞质内细胞器肿胀;PC 高剂量组神经节细胞层结构基本正常.结论 PC 对大鼠RIR 损伤中NF-κB 的表达具有抑制作用,从而对RIR 损伤有保护作用.     

补阳还五汤对大鼠缺血再灌注视网膜损伤的保护作用

目的 观察补阳还五汤[buyang huanwu（补阳还五）decoction，BYHWD]对大鼠缺血再灌注视网膜是否具有保护作用。方法 用升高眼内压的方法制作大鼠实验性视网膜缺血再灌注损伤模型。将30只大鼠随机分成对照组、缺血再灌注组和BYHWD治疗组。再灌注3天后，用体视学方法测量视网膜形态学改变，用末端脱氧核苷酸缺口标记和免疫组化方法观察视网膜细胞凋亡及bcl-2表达，比较观察BYHWD对大鼠缺血再灌注视网膜的影响。结果 BYHWD组视网膜损伤明显轻于缺血再灌注组，视网膜厚度改变不明显，内核层细胞稠密，视网膜节细胞排列较规整。BYHWD组大鼠视网膜节细胞层未见明显的凋亡细胞，bel-2表达明显增强，阳性反应集中在内界膜处和视网膜神经节细胞周围。结论 补阳还五汤复方可通过调节凋亡基因bcl-2的表达，阻断损伤后视网膜节细胞的凋亡；补阳还五汤对大鼠缺血再灌注视网膜损伤具有保护作用。     

丹参注射液对兔视网膜缺血再灌注损伤后视网膜节细胞凋亡和caspase-3表达的影响

目的探讨丹参注射液对兔视网膜缺血再灌注损伤视网膜节细胞凋亡和caspase-3表达的影响。方法在建立兔视网膜缺血再灌注损伤模型前30 min,首先进行左眼球后注射平衡盐溶液(对照组),右眼球后注射丹参注射液(治疗组)。30 min后通过升高眼内压造成视网膜缺血后,再恢复正常眼内压而制作成兔视网膜缺血再灌注损伤动物模型,分别于1、6、24 h和72 h处死动物,取视网膜,部分视网膜切片行Tunel染色,部分视网膜采用免疫组化法检测视网膜节细胞相关基因caspase-3蛋白的表达。结果除1 h组外,同一时间点对照组视网膜节细胞凋亡计数和治疗组比较,差异具有统计学意义。除1 h组外,同一时间点对照组cas-pase-3蛋白表达与治疗组比较差异均有统计学意义。结论球后注射丹参注射液能够减少视网膜缺血再灌注后视网膜节细胞的凋亡,降低caspase-3蛋白表达。     

冰片对大鼠缺血再灌注模型视网膜单链糖蛋白ICAM-1表达的影响

目的 观察灌胃及外用冰片对眼部缺血再灌注损伤大鼠视网膜ICAM-1表达的影响.方法 制作大鼠眼部缺血再灌注模型,应用激光显微镜及生物系统分析软件观察大鼠灌胃及外用冰片对缺血再灌注损伤中视网膜ICAM-1表达的影响.结果 冰片灌胃和冰片外用均可降低ICAM-1的表达,造模后24 h,与模型组比较均有显著性差异(P<0.01).结论 冰片可降低缺血再灌注时ICAM-1的表达,抑制缺血再灌注引起的视网膜损伤.     

银杏叶制剂对大鼠视网膜缺血再灌注ICAM-1表达的影响

目的:观察大鼠视网膜缺血再灌注模型用银杏叶制剂干预后细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的变化,探讨银杏叶制剂在视网膜缺血再灌注中的作用机制。方法:48只W istar大鼠,随机分为两组:缺血再灌注+生理盐水组(不加压眼为自身对照,列为A组,加压眼列为B组)和缺血再灌注+银杏叶制剂治疗组(加压眼列为C组)。前房灌注加压左眼建立大鼠视网膜缺血再灌注模型。按不同再灌注时间又分为2h、6h、8h、12h、24h、48h组,各组随机分配4只大鼠,分别于相应时间点将大鼠处死快速取视网膜。用流式细胞仪测定视网膜组织ICAM-1阳性细胞数。结果:ICAM-1阳性细胞在A组可见一定的表达数量;B组ICAM-1阳性细胞数明显增多,至再灌注48h达高峰,自6h开始同A组比较,有显著性差异(P<0.05);C组增量不明显,与A组比较均无显著性差异(P>0.05),比B组增量少,自6h开始有显著性差异(P<0.05)。结论:银杏叶制剂可能通过下调ICAM-1的表达对缺血再灌注损伤视网膜具有保护作用。     

蒙药额尔顿乌日勒对兔视网膜缺血再灌注损伤的血液流变学影响

目的:观察兔视网膜缺血再灌注损伤血液流变学变化及额尔顿乌日勒的保护作用。方法:将95只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、额尔顿·乌日勒(又名珍宝丸)组和原花青素组(PC组),采用升高兔眼压到50mm Hg持续2h的方法制作视网膜缺血再灌注模型。除正常组外,每组分别在缺血再灌注1、6、12、24、48、72h后检测视网膜组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性及血液流变学指标。结果:除血浆黏度外,模型组与正常组比较,血液流变学差异有统计学意义(P0.05);珍宝丸组及PC组与模型组比较,血液流变学差异有统计学意义(P0.05),珍宝丸组与PC组比较差异有统计学意义(P0.05)。SOD:模型组的24h、48h、72h与正常组比较视网膜组织中SOD活力均明显下降,珍宝丸组及PC组的24 h、48h、72h视网膜组织中SOD活力均相应的有所提高,且明显高于同时间点模型组,差异有统计学意义(P0.05)。组内24 h、48h、72h与1h、6h、12h比较,SOD活力均有降低,差异有统计学意义(P0.05)。MDA:模型组24 h、48h、72h与1h、6h、12h比较,珍宝丸组及PC组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:额尔顿乌日勒可改善视网膜的血流,防治视网膜缺血再灌注损伤。     

RIR损伤后神经节细胞损伤及治疗机制的研究进展

视网膜缺血-再灌注(retinal ischemia reperfusion,RIR)损伤是在缺血性损伤的基础上发展而来的。视网膜血管阻塞所引起的缺血性眼病在血液再通后,通过一系列链式反应,造成视网膜神经节细胞凋亡的发生。如何减轻或防止缺血-再灌注引起的视神经节细胞损伤和凋亡,在视网膜缺血性疾病防治中具有重大意义。     

舒冠滴丸对高脂血症大鼠缺血再灌注损伤心肌ICAM-1表达的影响

目的观察舒冠滴丸对高脂血症大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响及其作用机制探讨。方法建立大鼠高脂血症模型,随机分为对照组、假手术组、模型组、辛伐他汀组及舒冠滴丸高剂量、中剂量和低剂量组。再灌注后,测定心肌组织ICAM-1表达、血脂,观察心肌病理形态学变化。结果与模型组比较,舒冠滴丸各剂量组心肌组织ICAM-1蛋白表达均降低（P〈0.05）,而辛伐他汀组与舒冠滴丸高剂量组相近;与模型组比较,舒冠滴丸高剂量和中剂量组可明显降低血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平（P〈0.05）,升高血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平（P〈0.05）,而辛伐他汀组血脂与舒冠滴丸高剂量组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;舒冠滴丸高剂量组和辛伐他汀组缺血区心肌细胞排列基本整齐,心肌纤维断裂及坏死减少,空泡变性减轻,心肌间质水肿不明显,灶性出血及炎性细胞浸润减轻。结论舒冠滴丸可降低高脂血症大鼠缺血再灌注损伤心肌组织ICAM-1表达,减轻PMN浸润,调节血脂代谢紊乱。     

复方丹参对缺血再灌注损伤鼠视网膜的保护作用

目的　探讨复方丹参注射液球后注射对视网膜缺血再灌注 (retinalischemiareper fusion ,RIR)损伤的防护作用及机制。方法　采用前房灌注液体形成 14 .3kPa高眼压而建立RIR模型。在损伤前 30min给予防护组大鼠球后注射复方丹参注射液 0 .0 5mL ,对照组大鼠球后注射生理盐水 0 .0 5mL ,缺血 6 0min后恢复血流 ,分别于再灌注 30min ,2 4h和 72h检测视网膜组织中丙二醛 (MDA)含量及视网膜电图 (ERG)中b波变化 ,并进行视网膜透射电子显微镜和光学显微镜的组织学观察。结果　再灌注 30min ,2 4h和 72h后防护组视网膜中MDA含量均明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,而ERG中被标化的b波振幅均高于对照组 (P <0 .0 1) ,且防护组病理组织学损害较对照组明显减轻。结论　复方丹参注射液球后注射是防护RIR损伤的有效方法。     

针刺对大鼠脑缺血再灌注损伤后ICAM-1表达的影响

目的 观察针刺对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织中细胞间粘附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）表达的影响，探讨针刺在脑缺血再灌注损伤中的保护作用机制。方法 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，应用免疫组化方法观察假手术组、模型组（再灌注6h、24h、72h）、针刺组（再灌注6h、24h、72h）ICAM-1表达的变化。结果 缺血再灌注后6h，脑组织微血管内皮细胞表达ICAM-1出现增高趋势，并于24h达到高峰，模型组与针刺组及模型组与假手术组间均有显著差异（P〈0．01或P〈0．05）。结论 脑缺血后1CAM—l表达增加，针刺可降低1CAM．1的表达，从而减轻缺血后ICAM—l导致的缺缺血性脑损伤。说明针刺对缺血性腑损伤的保护作用机制可能与其抑制脑内ICAM-1的表达有关。     

复方丹参注射液对缺血再灌注大鼠视网膜的影响

目的：观察复方丹参注射液球后注射对缺血再灌注鼠视网膜的影响。方法：应用前房灌注液体升高眼压的方法建立大鼠RIR模型，并随机分为防护组和对照组，防护组大鼠损伤前30min球后注射复方丹参0．05ml，对照组球后注射生理盐水0．05ml，两组均缺血60min后，分别在恢复灌注30min、24h和72h后进行透射电镜（TEM）和热休克蛋白70（HSP70）表达的检测。结果：再灌注30min、24h、72h后防护组与对照组相比，病理组织学损害明显减轻，HSP70表达阴性。结论：复方丹参对大鼠视网膜缺血再灌注损伤有防护作用。     

丹酚酸A对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠ICAM-1表达的影响

目的:通过对观察丹酚酸A预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠ICAM-1表达的影响,探讨丹酚酸A预处理对缺血再灌注急性期脑损伤的保护作用机制。方法:丹酚酸A预处理3天后采用线拴法建立大鼠脑缺血再灌注模型,不同时间点(0,1,4,12,24h)取脑组织,冰冻切片,荧光免疫组化法检测缺血区脑微血管内皮ICAM-1的表达。以尼莫地平作为阳性对照药。结果:模型组与空白对照组相比ICAM-1表达明显升高(P<0.05)。丹酚酸A各组ICAM-1表达均低于相应时间点模型组(P<0.05)。结论:丹酚酸A预处理可降低局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠ICAM-1表达的影响,提示阻抑粒细胞粘附作用是其脑保护作用机制之一。     

芎芪合剂对大鼠脑缺血再灌注后病理形态及免疫炎症损伤的影响

目的:探讨芎芪合剂对局灶性脑缺血—再灌注损伤的保护作用及机制。方法:30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、芎芪合剂组,除假手术组外建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,对各组大鼠脑组织进行HE染色,并测定脑组织中细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达的情况。结果:HE染色显示芎芪合剂组缺血侧脑组织白细胞黏附及浸润的程度较模型组明显减轻。大鼠脑组织中细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达的情况,模型组明显高于假手术组,芎芪合剂组明显低于模型组。结论:芎芪合剂能减轻大鼠脑缺血再灌注引起的白细胞黏附及浸润的程度,抑制ICAM-1蛋白表达的增高,提示芎芪合剂能够通过减轻免疫炎症损伤的程度达到抗脑缺血—再灌注损伤的作用,从而对缺血—再灌注脑组织产生一定的保护作用。     

益气明目口服液对缺血再灌注损伤大鼠视网膜的保护作用

目的观察益气明目口服液灌胃对大鼠实验性高眼压所致视网膜缺血再灌注(RIR)诱发视网膜损害的防护作用.方法SD大鼠随机分为正常组、模型组、低剂量组、高剂量组.应用前房恒压灌注液体升高眼内压的方法建立大鼠RIR模型.低、高剂量组于造模前7 d分别给予不同剂量的益气明目口服液灌胃给药,正常组及模型组给予等量生理盐水灌胃.分别于缺血再灌注损伤后1、3、7、15 d检测视网膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量,并进行视网膜透视电子显微镜和光学显微镜的组织学观察.结果缺血再灌注损伤后3 、7 、15 d,益气明目口服液低、高剂量组视网膜中SOD的活性均高于模型组,益气明目口服液高剂量组MDA的含量低于模型组;通过视网膜透视电子显微镜和光学显微镜的组织学观察,益气明目口服液低、高剂量组的病理组织学损害较模型组明显减轻.结论益气明目口服液对视网膜缺血再灌注损伤有保护作用,是治疗视网膜缺血性疾病的有效中药复方制剂.     

针刺对超早期脑缺血再灌注大鼠细胞黏附分子-1的影响

目的：观察针刺对超早期脑缺血再灌注大鼠细胞黏附分子-1（ICAM-1）的影响,探讨针刺治疗脑缺血的可能作用机制。方法：健康Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、假手术组、再灌注3h组、再灌注6h组、再灌注12h组、再灌注24h组、再灌注3h针刺组、再灌注6h针刺组、再灌注12h针刺组、再灌注24h针刺组共11组,每组20只。检测各组大鼠脑组织ICAM-1表达。结果：空白对照组与假手术组的双侧大脑半球均未见有明显的ICAM-1阳性染色血管;缺血再灌注不同时间点大鼠缺血区均有不同程度ICAM-1阳性反应血管,与空白对照组和假手术组比较有显著性差异（P均〈0．01）。缺血再灌注后电针各时间点组的ICAM-1阳性染色血管,与再灌注同时间点比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：针刺对超早期脑缺血再灌注大鼠ICAM-1影响显著,降低脑组织中ICAM—I的表达可能是针刺作用机制之一。