基于实心核颗粒色谱技术结合HPLC法快速测定保健食品中非法添加13种降糖化学成分

目的建立保健食品中非法添加13种降糖性化学成分(甲苯磺丁脲、格列本脲、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲、马来酸罗格列酮、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、盐酸丁二胍、格列波脲)的HPLC快速检测方法。方法以高色谱性能的实心核颗粒色谱柱CORTECS-C18(100 mm×4.6 mm,2.7μm)快速分离,二极管阵列检测器(PDA)检测,进行定性定量检测分析,样品以甲醇为溶剂超声提取,在10 min内同时检测添加在保健食品中的甲苯磺丁脲、格列本脲、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲、马来酸罗格列酮、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、盐酸丁二胍、格列波脲13种化学成分。结果 13种降糖化学成分色谱检测的分离度好,线性范围宽,相关性好,r2≥0.998 7;方法精密度以6次测定值的RSD表示,为0.6%~1.5%;方法回收率用3个质量浓度进行添加实验,回收率为95.9%~104.7%;定量限为1.1~3.3μg/m L;日间精密度的RSD为0.5%~1.6%(n=9)。86批降糖类保健食品中检出17批添加化学药,检出率为20%;样品中检出了格列本脲、盐酸苯乙双胍、马来酸罗格列酮、格列美脲、盐酸二甲双胍、盐酸吡格列酮。结论本方法通用性强,操作简单、快捷,可作为保健食品中非法添加13种降糖化学成分的有效检测方法。     

消糖灵胶囊中格列本脲的含量测定

目的:建立高效液相色谱法测定消糖灵胶囊中格列本脲的含量。方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-磷酸二氢铵溶液(取磷酸二氢铵1.725g,加水300mL溶解,用磷酸调节pH值至3.5±0.05)(65∶35)为流动相;检测波长为230nm。进样量:20μL;理论板数按格列本脲峰计算应不低于5000。结果格列本脲质量浓度线性范围是7.8~62.4μg/mL,R=0.9999;平均加样回收率为99.85%,RSD为1.73%(n=9)。结论:HPLC法可控制消糖灵胶囊中格列本脲的含量,准确度高,重现性好,方法简便。     

液-质联用选择离子质谱法测定降糖中成药中添加格列本脲的含量

目的 建立液-质联用(LC-MS)选择离子(S[M])法对平糖宝胶囊中格列本脲的含量进行了测定.方法 采用岛津VP-ODS (150 L×2.0,6012554) 色谱柱,流动相为0.2%冰乙酸水溶液-乙腈(30∶70),流速为0.2 ml / min;柱温为室温.结果 格列本脲线性范围为0.868～8.68 ng,回归方程为Y=392 433X-101 195 ,r=0.999 7;平均回收率为97.74%.同时测定了4种降糖中成药中格列本脲的含量.结论 该法准确度高,重复性好,可作为本制剂的质控方法.     

高效液相色谱法测定消糖灵胶囊中格列本脲的含量

目的探讨用高效液相色谱(HPLC)法测定消糖灵胶囊中格列本脲的含量。方法采用HP ODS-Hypersil色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),柱温:20℃,流动相为甲醇-0.005 mol/L磷酸二氢胺(pH3.5,70∶30),流速0.8 ml/min,检测波长300 nm。结果格列本脲在0.141~2.25μg范围内呈较好的线性关系(r=0.999 9,n=5),平均回收率为99.18%,RSD为1.72%(n=3)。结论高效液相色谱法测定格列本脲简便、快捷、灵敏,可以作为消糖灵胶囊含量的测定方法。     

UPLC-MS定性定量检测稳糖安胶囊中降糖类化学药品

目的:建立UPLC-MS方法,快速定性定量检测稳糖安胶囊中非法添加的降糖类化学药品.方法:采用超高效液相色谱串联四极杆质谱仪,色谱条件:Agela Venusil-C18(2.1 mm×50 mm,3μm)色谱柱,柱温35℃,流动相乙腈-0.01 mol·L-1乙酸铵(50∶50),流速0.2 mL· min-1.质谱条件:ESI源,多反应检测(MRM),监测离子对(m/z):瑞格列奈(453.4→86.0,453.4→230.3)、格列美脲(491.4→ 126.2,491.4→352.3)、格列本脲(494.2→168.5,494.2→368.9)、吡格列酮(357.2→119.0,357.2→134.1)、格列齐特(342.2→90.9,324.2→109.9)、格列吡嗪(446.2→92.6,446.2→102.6)、苯乙双胍(206.2→59.7,206.2→104.6)、二甲双胍(130.1→60.0,130.1→71.0).以保留时间和定性离子对之间的相对丰度定性,以定量离子对峰面积定量.结果:8种降糖化学药品瑞格列奈、格列美脲、格列本脲、盐酸吡格列酮、格列齐特、格列吡嗪、盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍分别在4.056 ～ 129.792,13.912 ～ 125.184,3.92 ～ 125.44,3.944 ～ 126.208,4.056 ～ 129.792,4.232 ～ 135.424,4.072 ～130.304,4.264 ～136.448 ng·L-1均呈现良好的线性关系(r＞0.999);平均加样回收率均在98.18 ～100.95％;8种降糖化学药品含量重复性试验RSD ＜2.95％.结论:方法定性可靠、定量准确,且快速简便,可用于稳糖安胶囊中非法添加的降糖类化学药品检测.     

HPLC法测定消糖灵胶囊含量研究

目的 :建立消糖灵胶囊的含量测定方法。方法 :采用高效液相色谱法。测定盐酸小檗碱 :用DiamonsilC18(2 5 0×4 .6mm ,5 μm)色谱术 ,乙腈—四氢呋喃—冰醋酸—水 (1 4 1 94 )为流动相 ,流速 1ml/min ,检测波长 345nm ,柱温 4 0℃。测定格列本脲 :参照《中华人民共和国药典》(二部 ) (2 0 0 0年版 )格列本脲项下有关方法。结果 :盐酸小檗碱线性范围为 0 .184～1.6 5 6 μg (r=0 .9995 ) ,平均回收率 10 0 .4 7% ,RSD =1.88% ;格列本脲线性范围为 2～ 12 μg (r =0 .9999) ,平均回收率 98.5 1% ,RSD =1.6 3%。结论 :该方法可用于消糖灵胶囊的质量控制。     

RP-HPLC法同时测定醋延胡索配方颗粒中7种生物碱

目的建立RP-HPLC法同时测定醋延胡索配方颗粒中原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、脱氢紫堇碱、延胡索乙素、四氢小檗碱和延胡索甲素的方法。方法采用Ultimate AQ-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-0.1%磷酸水溶液(三乙胺调p H值至6.0)(10∶90)为流动相,梯度洗脱,体积流量为1.0 m L/min,检测波长为280 nm。结果原阿片碱线性范围为6.8~119.0 ng,r=0.999 9,平均回收率为98.2%,RSD为2.0%;盐酸巴马汀线性范围为24.38~426.65 ng,r=0.999 9,平均回收率为99.6%,RSD为2.8%;盐酸小檗碱线性范围为8.88~155.40 ng,r=0.999 9,平均回收率为100.2%,RSD为1.3%;脱氢紫堇碱线性范围为77.66~1 359.05 ng,r=0.999 9,平均回收率为99.0%,RSD为2.2%;延胡索乙素线性范围为41.4~724.5 ng,r=0.999 9,平均回收率为100.8%,RSD为2.6%;四氢小檗碱线性范围为6.70~117.25 ng,r=0.999 7,平均回收率为98.7%,RSD为2.5%;延胡索甲素线性范围为25.50~446.25 ng,r=0.999 9,平均回收率为97.7%,RSD为2.2%。结论该法分离度好,快速简便,重现性好,可用于醋延胡索配方颗粒的质量控制。     

一阶导数紫外光谱法测定滋阴降糖胶囊中格列苯脲的含量

目的：建立滋阴降糖胶囊中格列笨脲含量的测定方法。方法：用一阶导数光谱法直接测定滋阴降糖胶囊中格列苯脲含量，239.1nm波长处测定振幅D值。结果：格列苯脲在5.10-25.50μg／ml范围呈良好线性关系；其回归方程为D=3.257×10^-3C＋2.750×10^-3（r=0.9995）；平均回收率99.95％，RSD=1.88％（n=5）。结论：本方法搡作简单、准确，可用于测定滋阴降糖胶囊中格列苯脲含量。     

HPLC-MS/MS检测中药保健品中非法添加成分的研究

目的 采用高效液相色谱-串联质谱技术（HPLC-MS/MS）,建立同时测定某“中药保健品”中非法添加的4种降糖药二甲双胍、苯乙双胍、罗格列酮、格列苯脲的方法。方法 采用Thermo BDS Hypersil C8（2.1 mm × 100 mm,2.4 μm）色谱柱,0.2 %甲酸水溶液（A）和乙腈-甲醇（6∶4,v/v）（B）为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,在电喷雾正离子模式下,以多反应监测（MRM）模式测定,定量离子对为m/z 129.9 → 70.9（二甲双胍）、m/z 205.9→59.9（苯乙双胍）、m/z 357.9→134.9（罗格列酮）、m/z 494.0→169.0（格列苯脲）。结果 同时检出了4种降血糖化学药物。检出限为0.06～0.5 ng·mL-1,定量限为0.21～1.62 ng·mL-1,在3个不同浓度的添加水平下,4种化学药物的平均回收率为66.3 %～110.2 %,相对标准偏差（RSD）为2.3 %～12.2 %。结论 该方法可快速、准确地检测保健食品中非法添加二甲双胍、苯乙双胍、罗格列酮、格列苯脲4种降血糖化学药,具有专属性强、灵敏度高的特点。     

LC-MS/MS测定人血浆中格列本脲的浓度

 目的建立LC-MS/MS测定人血浆中格列本脲浓度的方法。方法以格列齐特为内标,采用0.1%甲酸-乙腈(35∶65)为流动相,以ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈色谱柱为分析柱,通过电喷雾电离源(ESI),以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 494.2→368.9(格列本脲)和m/z 324.0→126.9(格列齐特)。结果格列本脲线性范围6.67～500μg·L^-1,定量下限为(6.67±0.3)μg·L^-1(n=5)。日内、日间精密度(RSD)小于8%,平均回收率大于90%。结论本法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于格列本脲临床药动学研究。     

双指标控制半夏曲质量及其含量检测方法研究

目的:通过测定琥珀酸和盐酸麻黄碱的含量来控制半夏曲的质量。方法:采用电位滴定法建立琥珀酸成分的含量测定方法,通过紫外分光光度法建立其中盐酸麻黄碱的含量测定方法。结果:琥珀酸含量测定线性范围为1.8~7.8 mg/m L(r=0.999 2),平均回收率(n=6)为100.19%(RSD=2.26%);盐酸麻黄碱含量测定线性范围是0.008 2~0.041 0 mg/m L(r=0.999 1),平均回收率(n=6)为99.71%(RSD=2.38%)。结论:本方法灵敏、准确、重复性好,可作为半夏曲的质量控制方法。     

北苍术苍术素、苍术酮、β-桉叶醇测定及特征图谱研究

目的研究北苍术药材中苍术素、苍术酮和β-桉叶醇的GC测定及特征图谱研究方法,为科学评价其质量提供依据。方法采用GC色谱法,以Agilent HP-5毛细管色谱柱,载气为氮气,FID检测器,程序升温,分流进样,进样口温度250℃,检测器温度250℃,柱温130℃;外标法,测定承德与其他市场采购的25批北苍术样品中苍术素、苍术酮和β-桉叶醇的量;建立特征图谱并利用中药色谱指纹图谱评价系统进行相似度分析。结果建立了北苍术药材苍术素、苍术酮和β-桉叶醇量测定和GC特征图谱研究方法,指认了9个特征峰;β-桉叶醇线性范围20.00~406.10μg/m L(r=0.999 9),平均加样回收率为100.75%,RSD为1.17%,最低检测限0.12 ng;苍术酮线性范围35.00~348.70μg/m L(r=0.999 5),平均加样回收率为99.84%,RSD为1.29%,最低检测限0.04 ng;苍术素线性范围在16.46~329.30μg/m L(r=0.999 6),平均加样回收率为100.12%,RSD为0.88%,最低检测限0.06 ng。结论建立的苍术素、苍术酮、β-桉叶醇定量测定和特征图谱方法简便、灵敏、稳定性和重复性良好,测定结果准确可靠。     

HPLC-ELSD法同时测定九香虫中的亚油酸、油酸及软脂酸

目的建立一种同时定量测定九香虫中未甲酯化的亚油酸、油酸及软脂酸方法。方法九香虫石油醚提取物以高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)分析,采用Prevail C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-甲醇(95∶5)为流动相进行洗脱,洗脱时间为15 min。结果亚油酸、油酸及软脂酸峰面积的自然对数与相应质量浓度的自然对数呈良好的线性关系。其中,亚油酸的线性方程为Y=1.211 7X-2.965 6,r=0.999 0,线性范围为0.135~0.450 mg/m L,平均加样回收率为98.1%,RSD为2.5%;油酸的线性方程为Y=1.149 2X-2.757 0,r=0.999 0,线性范围为0.268~0.893 mg/m L,平均加样回收率为99.6%,RSD为2.3%;软脂酸的线性方程为Y=1.104 7X-2.327 6,r=0.999 1,线性范围为0.150~0.500 mg/m L,平均加样回收率为100.1%,RSD为2.8%。结论该方法中的样品不需要甲酯化,而且测定快速、简便、准确,可作为九香虫饮片的质量控制方法。     

RP-HPLC检查中药保健品中的西药降糖成分

格列吡嗪、格列齐特、格列本脲、格列美脲、格列喹酮、盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍是临床上应用广泛的降糖类药物,由于这些原料的成本相对偏低,且见效快,一些不法分子经常在降糖类保健品和中药中擅自加入某种西药成分用来治疗糖尿病,为了快速鉴定出药物中是否含有这几种降糖药,本实验建立了两种HPLC,分别用于测定格列类降糖药和双胍类降糖药.两种HPLC检测均能在30 min内完成,由于中药的成分较多,相对于薄层色谱,本方法有较好的专属性.     

中成药中格列本脲人体血浆浓度测定方法及药代动力学特性

目的建立简便、快捷的测定人体血浆中格列本脲方法.了解中成药中格列本脲与单纯格列本脲片的药代动力学特性是否存在差别.方法采用高效液相色谱仪 LC-3A,SPD 紫外检测器,Zorbax C18 柱[4.6 mm×15 cm,5μm],流动相为改性乙腈-水(49∶51,V/V),流速 1.0 mL/min.柱温60 ℃,检测波长UV 214 nm.20 名健康志愿者采用自身对照、随机交叉方法,分别口服中成药丸(含格列本脲)或对照药格列本脲片,测定不同时间的血药浓度,用 3P97 程序计算药代动力学参数.结果格列本脲的最低检出浓度为 5 μg/L.格列本脲血药浓度标准曲线范围在 5～250 μg/L.日内、日间误差 均＜15%.方法学符合药代动力学研究要求.两种制剂中的格列本脲吸收半衰期 t(1)/(2)Ka 分别为 1.21±0.42 h(格列本脲片)和1.30±0.46 h(中成药丸,含格列本脲),消除半衰期 t(1)/(2)Ke分别为 2.99±0.85 h 和 2.87±0.65 h.两药的达峰时间(Tmax)实测值分别为 2.225±0.413 h 和 2.325±0.438 h,达峰浓度(Cmax)实测值分别为 131.7±50.8 μg/L 和 138.1 ±50.0 μg/L.结论两种制剂的药代动力学特性基本一致.     

HPLC-ESI-MS/MS同时测定四神丸中9种有效成分

目的建立了HPLC-ESI-MS/MS法同时测定四神丸中五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、补骨脂素、异补骨脂素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱9种有效成分的分析方法。方法 HPLC采用色谱柱Agilent Zorbax Eclipse Plus C18柱(100 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量0.4 m L/min,进样量20μL;质谱采用电喷雾离子源、正离子模式(ESI+),通过多反应监测(MRM)同时对四神丸中的9种有效成分进行定量分析。结果四神丸中9种有效成分五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、补骨脂素、异补骨脂素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的线性范围分别为8.50~850.00 ng/m L(r=0.999 7)、1.32~132.00 ng/m L(r=0.997 4)、9.60~960.00 ng/m L(r=0.999 8)、12.00~1200.00 ng/m L(r=0.999 3)、11.50~1 150.00 ng/m L(r=0.997 9)、21.70~2 170.00 ng/m L(r=0.999 7)、23.80~2 380.00 ng/m L(r=0.999 6)、10.70~1 070.00 ng/m L(r=0.999 5)、8.54~854.00 ng/m L(r=0.998 0),平均加样回收率分别为98.3%、100.3%、99.2%、100.4%、99.1%、97.7%、99.0%、98.9%、100.3%,RSD值分别为2.21%、1.78%、2.19%、2.23%、2.18%、3.03%、2.51%、2.72%、2.10%。8批四神丸样品中9种有效成分的质量分数分别为67.6~425.6、0~131.5、2.1~258.0、0~71.2、23.2~678.8、806.4~1 310.8、718.5~1293.7、11.5~123.2、10.9~62.4μg/g。结论所建立的分析方法简单、灵敏度高、专属性好,可应用于不同厂家不同生产批次的四神丸中有效成分的测定及质量控制。     

HPLC法同时测定麝香保心丸中4种成分

目的建立HPLC法同时测定麝香保心丸(人工麝香、人参提取物、苏合香等)中苯甲酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和肉桂酸苯乙酯的含有量。方法分析采用Waters XBridge BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.5μm);流动相为乙腈-0.03%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量0.2 m L/min;检测波长254 nm;柱温25℃。结果苯甲酸、苯甲酸苄酯、肉桂酸苄酯和肉桂酸苯乙酯分别在0.018 33~1.833 mg/m L(r=0.999 9)、0.050 08~5.008 mg/m L(r=0.999 9)、0.018 17~1.817 mg/m L(r=0.999 8)和0.001 148~0.114 8 mg/m L(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.51%(RSD=1.99%)、99.94%(RSD=1.55%)、98.52%(RSD=2.00%)和98.98%(RSD=1.86%)。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于麝香保心丸中这4种成分的测定。     

高效液相色谱法测定藤黄药材中藤黄酸与新藤黄酸的含量

目的建立藤黄药材中藤黄酸与新藤黄酸的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Purospher RP-18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈A-0.1%乙酸水溶液B(0-30min80%-90%A,30-32min90%-80%A);流速:1ml/min;检测波长为360nm,外标法定量。结果藤黄酸的线性范围为0.0408~0.4080mg/m L,回归方程Y=16023031X-54083(r=0.9991,n=5),平均回收率为99.7%,RSD=1.39%(n=9);新藤黄酸的线性范围为0.0372~0.3720mg/m L,回归方程Y=11893364X-34797(r=0.9999,n=5),平均回收率为100.1%,RSD=1.00%(n=9)。结论本方法精密度高,重复性好,简便、可靠,可作为藤黄中藤黄酸和新藤黄酸的含量检测方法。     

HPLC法测定妇乐胶囊中大黄素和大黄酚的含量

目的:建立妇乐胶囊中大黄素,大黄酚的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,Shim-pack VP-ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(80:20),流速1.0 m L·min~(-1),检测波长254 nm,进样量10μL。结果:在上述色谱条件下,大黄素、大黄酚之间有良好的分离度,大黄素线性范围6.2784~125.5668 ng(r=0.9997),大黄酚线性范围10.76~215.28 ng(r=0.9999),精密度、重复性、稳定性的RSD均2%,平均加样回收率分别为100.9%,99.6%,RSD分别为1.00%,0.71%。结论:所建方法操作简便、准确,重复性好,可作为妇乐胶囊的质量控制方法。     

HPLC法同时测定四磨汤滴丸中辛弗林、槟榔碱和去甲异波尔定的含量

目的:建立同时测定四磨汤滴丸中辛弗林、槟榔碱和去甲异波尔定含量的方法。方法:采用HPLC,色谱柱:Agilent SCX(250×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇:0.2%磷酸(2→1000 m L水,氨水调pH值=3.8)=65:35;检测波长:215 nm;流速:1 mL·min~(-1);柱温:35℃。结果:辛弗林在10.26~513 ng范围线性良好,r=0.9999;去甲异波尔定在22.78~455.6 ng范围线性良好,r=1;槟榔碱在20.52~410.4 ng范围线性良好,r=0.9999。辛弗林、去甲异波尔定和槟榔碱平均加样回收率分别为100.1%、100.8%和100.3%。结论:本方法简便、准确、可靠,对四磨汤滴丸质量标准研究具有一定价值。