重组hIL-10联合MTX对AA大鼠IL-1β、TNF-α含量变化和影像学变化研究

目的:以重组人白细胞介素-10(human interleukin-10,h IL-10)及其联合甲氨碟呤(MTX)作用佐剂性关节炎大鼠模型,检测血清IL-1β、TNF-α含量的变化情况,研究重组h IL-10联合MTX治疗佐剂性关节炎大鼠的效果。方法:AA大鼠造模后,用测量体重、足肿胀度、关节炎指数及组织病理学来评价造模是否成功,各药物处理AA大鼠模型后,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清IL-1β、TNF-α的含量。用放射学检查来评估AA大鼠后足关节损伤的程度。结果:各治疗组IL-1β、TNF-α含量比模型组水平明显下降,各治疗组与模型组比较有显著性差异(P0.05),联合用药组对AA大鼠血清IL-1β、TNF-α有明显的抑制作用,影像学检查提示IL-1β、TNF-α水平与大鼠足骨关节的损伤程度成正相关,联合用药组治疗后骨侵蚀评分最低。结论:各治疗组对佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α有抑制作用,这种抑制作用与骨关节影像学改变显著相关。联合用药组能有效降低AA大鼠的IL-1β、TNF-α水平,改善AA大鼠足关节损伤的治疗作用。     

程氏蠲痹汤加减方降低佐剂性关节炎大鼠外周血T细胞cAMP水平和CD4~+/CD8~+T细胞比值

目的探讨程氏蠲痹汤加减方(CJBD)对佐剂性关节炎(AA)大鼠T淋巴细胞中的环腺苷酸(c AMP)水平和CD4~+/CD8~+T细胞比值的影响。方法将成年雄性SD大鼠分为正常对照组、AA组、CJBD组和雷公藤多苷片(TGT)组。用吹风冷水和Freund完全佐剂制备大鼠风寒湿痹AA模型,对照组给予生理盐水灌胃,其他组分别给予对应药品,持续7 d。各组大鼠经眼眶取血,分离外周血单个核细胞(PBMC),利用免疫磁珠分选技术分选T淋巴细胞,应用c AMP检测试剂盒检测各组T淋巴细胞的c AMP水平,用流式细胞术检测各组大鼠外周血T细胞中的CD4~+和CD8~+T细胞数,计算CD4~+/CD8~+T细胞比值。结果与正常对照组比较,CJBD组大鼠T淋巴细胞的c AMP表达水平显著降低,TGT组的c AMP含量与正常对照组无显著性差异;CJBD组的CD4~+/CD8~+T细胞比值显著降低。结论 CJBD可降低AA大鼠T淋巴细胞c AMP的水平和CD4~+/CD8~+T细胞比值。     

索拉非尼对大鼠佐剂性关节炎的抑制作用

目的探讨索拉非尼对大鼠佐剂性关节炎(AA)的抑制作用。方法 36只雄性SD大鼠均分为6组,除正常组外,其余各组大鼠均制备AA模型。足容积法检测AA大鼠继发侧足爪容积;流式细胞术检测外周血CD4~+及CD8~+T细胞亚群的变化;免疫组织化学链霉卵白素-过氧化物酶法(SP)检测滑膜组织微血管密度(MVD)的改变。结果与模型组相比,索拉非尼组大鼠足爪容积下降,滑膜组织MVD减小,其中索拉非尼(20、40mg/kg)组可使外周血CD4~+T细胞比例降低,CD8~+T细胞比例增加,差异均有统计学意义(P0.05)。结论索拉非尼具有抑制大鼠AA效应,该作用可能与索拉非尼引起AA大鼠外周血CD4~+,CD8~+T细胞亚群的偏移以及降低滑膜组织MVD有关。     

乌梢蛇Ⅱ型胶原提取及其诱导大鼠关节炎特性的研究

提取和纯化乌梢蛇Ⅱ型胶原,观察乌梢蛇Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎的特性,为研究乌梢蛇治疗类风湿关节炎的机制提供研究方向。离心提取乌梢蛇Ⅱ型胶原,经DEAE-52纤维素交换柱纯化,斑点免疫渗滤试验和免疫印迹试验进行成分鉴定。乌梢蛇Ⅱ型胶原不完全佐剂免疫大鼠,观察大鼠关节炎发生情况、抗Ⅱ型胶原抗体、CD 4/CD8亚群、血清中TNF-α、IL-10、IL-1β、IL-4的变化。乌梢蛇Ⅱ型胶原提纯品在SDS-PAGE凝胶电泳上呈一条区带,斑点免疫渗滤试验和免疫印迹试验为阳性反应。诱导大鼠关节炎发生率为86.67%,关节炎大鼠血清中抗Ⅱ型胶原抗体明显增高(P<0.01),CD4 T细胞亚群和CD4~+/CD8~+增高(P<0.05),TNF-α含量增加(P<0.01),IL-10含量降低(P<0.01),血清中IL-1β和IL-4含量无变化。结果显示,乌梢蛇Ⅱ型胶原能通过免疫方法可以诱导大鼠产生多关节炎,并且体内有自身免疫反应的表现。     

酸枣仁提取物对睡眠剥夺大鼠免疫功能的影响

目的:探讨酸枣仁提取物对睡眠剥夺大鼠免疫功能的影响。方法:30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、实验组,每组各10只。除对照组外,其余两组采用多平台水环境法建立睡眠剥夺动物模型,建模同时实验组给予酸枣仁提取物,模型组与对照组给予等量生理盐水。计算大鼠脾脏指数、胸腺指数,采用MMT法评价脾淋巴细胞活性和NK细胞活性。通过旷场实验测定大鼠行为学。测定外周血CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞比例、CD4~+/CD8~+。采用ELISA测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-2、IL-6水平。结果:与模型组相比,实验组大鼠旷场实验水平和垂直得分、脾脏指数、胸腺指数、T淋巴细胞活性显著升高;CD4~+T淋巴细胞比例和CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比值显著升高,CD8~+T淋巴细胞比例显著降低,TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6水平均显著下降(P0.05)。结论:酸枣仁提取物能够缓解睡眠剥夺引起的焦虑行为,通过调节T淋巴细胞亚群平衡,抑制血清TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6炎症因子释放,改善免疫功能。     

两种麻醉方法对原发性肝癌围手术期免疫学指标的影响

目的:探讨两种麻醉方法对原发性肝癌患者围手术期免疫学相关指标的影响。方法:选择原发性肝癌患者60例,肝功能Child-Pugh分级为A~B级,随机分为两组,异丙酚全凭静脉麻醉组30例(A组),七氟醚静吸复合麻醉组30例(B组),分别记录麻醉前30 min(T0)、术毕(T1)、术后24 h(T2)静脉血中CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+及TNF-α、IL-2、IL-6的水平。结果:A、B两组患者围手术期生理指标MAP、HR、SpO_2、RR各时点均无明显差异(P0.05);麻醉前A、B两组CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+均无显著性变化(P0.05),两组CD3~+、CD8~+在各时点均未发生显著性变化(P0.05)。与T0相比,T1时点A、B两组CD4~+、CD4~+/CD8~+均降低(P0.05),但B组T2时点与T0时点比较无显著性差异。在T1、T2时点B组CD4~+、CD4~+/CD8~+均比A组明显升高(P0.05)。与T0时点相比,A组和B组患者在T1、T2时点IL-6水平明显升高(P0.05),各时点A组和B组间差异无统计学意义(P0.05)。与T0时点相比,A组TNF-α水平无显著变化(P0.05),B组术后一天明显升高(P0.05)。IL-2在各时点两组间均无显著性变化(P0.05)。结论:异丙酚全凭静脉麻醉和七氟醚静吸复合麻醉均会对肝癌患者的免疫功能产生抑制作用,使用七氟醚静吸复合麻醉组对患者免疫功能影响较小。     

NF-κB寡核苷酸对CIA大鼠Th17/Treg平衡及细胞因子表达影响的研究

为探讨NF-κB寡核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)对CIA大鼠Th17/Treg平衡及细胞因子表达的影响,建立Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型,将NF-κB ODN注射到大鼠右后踝关节腔内,并设对照组、模型组和实验组。42d后用流式细胞仪检测各组大鼠脾脏Th17、Treg百分率、凋亡率;qRT-PCR检测IL-17、TGF-β和IL-6mRNA表达;用ELISA检测血清和关节液IL-17、TGF-β、IL-6含量。结果显示实验组大鼠脾脏Th17占CD4~+T细胞比例及IL-17和IL-6mRNA表达、血清和关节液中IL-17和IL-6的水平均低于模型组,差别有统计学意义(P0.05);实验组大鼠脾脏Th17凋亡百分率低于模型组,差别有统计学意义(P0.05);实验组大鼠脾脏Treg占CD4~+T细胞比例及TGF-βmRNA表达、血清和关节液中TGF-β的水平均高于模型组,差别有统计学意义(P0.05);实验组大鼠脾脏Treg凋亡百分率与模型组相比明显降低,差别有统计学意义(P0.05)。由此可知,NF-κB ODN调节CD4~+T细胞Th17、Treg之间细胞平衡及相关细胞因子的分泌,对CIA有较好的治疗作用。     

替米沙坦对糖尿病大鼠血脂代谢及细胞免疫功能影响的机制研究

目的探讨替米沙坦对糖尿病大鼠血脂代谢及免疫功能的影响机制。方法建立糖尿病大鼠模型;将50大鼠分为对照组、模型组、替米沙坦组、TGF-β1抑制剂组、TGF-β1激活剂组,每组10只,喂养至第12周,统一处理大鼠;血糖分析仪检测各组大鼠的血糖水平;全自动生化仪检测各组大鼠的血脂水平;流式细胞中检测各组大鼠血清中CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+的水平;ELISA实验检测血清中IL-6、IL-2的表达水平;Western blot检测各组大鼠肾脏组织中TGF-β1、p-Smad2/3蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠血糖含量、TG、TC、CD8~+、IL-6均显著升高,HDL-C、CD4~+、CD4~+/CD8~+、IL-2均显著降低(P0.05);替米沙坦、TGF-β1抑制剂均可改善糖尿病大鼠的血糖血脂及T淋巴细胞免疫水平;TGF-β1激活剂可逆转替米沙坦对糖尿病模型大鼠血脂代谢及T淋巴细胞免疫功能的作用。结论替米沙坦对糖尿病大鼠血脂代谢及免疫功能具有改善作用,其机制与失活TGF-β1/Smad2/3信号通路有关,为替米沙坦用于糖尿病的治疗提供理论依据。     

自发性高血压大鼠外周血CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比率增加且连接子蛋白40(Cx40)和炎症因子水平升高

目的探讨连接子蛋白40(Cx40)与自发性高血压大鼠(SHR)外周血CD4~+T细胞和CD8~+T淋巴细胞亚群及炎症因子之间的关系。方法采用流式细胞术检测Wistar京都(WKy)大鼠和SHR外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞及其表面Cx40的表达;采用ELISA检测炎症因子白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-6表达。结果 SHR收缩压显著高于WKy大鼠,SHR外周血CD4~+T细胞百分率、CD4~+/CD8~+T细胞比率显著高于WKy大鼠,而CD8~+T细胞百分率显著低于WKy大鼠;SHR血清IL-2、IL-4、IL-6水平均显著高于WKy大鼠,IFN-γ无明显差异;SHR外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞中Cx40表达均显著高于WKy大鼠。结论 SHR外周血CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比率增加,且Cx40和IL-2、IL-4、IL-6水平明显升高。     

溃疡性结肠炎相关性结直肠癌大鼠Th1/Th2漂移与微血管密度的关系

为探讨溃疡性结肠炎相关性结直肠癌(ulcerative colitis-associated colorectal cancer,UC-CRC)大鼠Th1/Th2漂移与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系,建立UC-CRC大鼠模型,于第14、16、18周分批处死,观察各组结肠组织病理学变化情况,并比较血清、结肠组织中Th2细胞因子IL-4、Th1细胞因子IFN-γ水平及结肠组织中CD4~+IL-4~+占比、CD4~+IFN-γ~+占比、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+、MVD,分析MVD与IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4的相关性。结果显示,模型组大鼠建模后状态逐渐变差,持续2周后好转;模型组结肠细胞有明显的病理学变化;与对照组比较,模型组各时刻血清和组织中IL-4水平、CD4~+IL-4~+占比、MVD较高,IFN-γ水平、CD4~+IFN-γ~+占比、IFN-γ/IL-4、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+较低(P0.05);模型组血清和组织中IL-4水平、CD4~+IL-4~+占比、MVD均随时间的延长呈升高趋势(P0.05),IFN-γ水平、CD4~+IFN-γ~+占比、IFN-γ/IL-4、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+均随时间的延长呈下降趋势(P0.05),而对照组上述指标变化均不显著(P 0.05);不同时刻MVD与血清及组织中IL-4水平呈正相关(P0.05),与IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4均呈负相关(P0.05)。提示UC-CRC大鼠Th1/Th2平衡向Th2漂移,MVD与Th2细胞因子呈正相关,与Th1细胞因子呈负相关,MVD与Th1/Th2漂移关系密切。     

Foxp3~+ Treg、Th细胞迁移及ET-1与佐剂关节炎大鼠模型肺功能的关系

目的:观察佐剂关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠肺功能降低与辅助T细胞(Th)、调节T细胞(Treg)及Foxp3的关系。方法:将SD大鼠随机分为正常对照(NC)组和模型对照(MC)组,每组15只,向MC组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml致炎,复制成AA模型。致炎48 d后,采用小动物肺功能仪检测肺功能,酶联免疫吸附法检测内皮素(ET)-1、白细胞介素(IL)-10、γ干扰素(IFN-γ),免疫组化法检测肺组织IL-1β、IL-10表达,流式细胞仪测定Treg的表达,采用PCR与免疫印迹检测肺组织Foxp3表达。结果:与NC组相比,MC组大鼠IFN-γ、ET-1、IL-1β升高;肺功能参数50%肺活量的最大呼气流量(FEF50)、75%肺活量的最大呼气流量(FEF75)、最大呼气中期流量(MMF)、用力最大呼气流量(PEF)降低,IL-10、CD4+CD25+Foxp3+Treg、Foxp3表达降低(P<0.05或P<0.01);相关分析显示,AA大鼠肺功能参数FEF75、MMF分别与IFN-γ、Th1/Th2、IL-1β呈负相关,FEF50、PEF与ET-1呈负相关;PEF、FEF75分别与IL-10、Foxp3 mRNA、Foxp3蛋白呈正相关,FEF75与CD4+CD25+Foxp3+Treg呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论:AA大鼠肺功能下降可能是佐剂致炎后Th细胞分泌紊乱、细胞因子失衡、内皮细胞增多,使肺组织Foxp3表达抑制,进而CD4+CD25-T细胞转化成CD4+CD25+Treg受阻,最终导致RA肺功能降低。     

槲皮素调节T淋巴细胞效应对肺纤维化大鼠气道反应的作用及机制*

目的： 探讨槲皮素调节T 淋巴细胞效应对肺纤维化大鼠气道反应的作用机制。方法： 将大鼠分为对照组、 模型组、槲皮素组,放射免疫测定法检测大鼠肺纤维化指标羟脯氨酸（HYP）、透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN） 含量,ELISA 检测血清中白介素17（IL-17）、白介素4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）表达,流式细胞术检测T 淋巴 细胞亚群变化,观察气道反应及肺组织病理学变化。结果： 与对照组比较,模型组HYP、HA、LN均显著增加, 肺出现组织纤维化;与模型组比较,槲皮素组大鼠HYP、HA、LN含量明显下降。模型组中IL-17、IL-4 表达较 对照组升高,IFN-γ 表达较对照组降低;槲皮素组血清中IL-17、IL-4 较模型组明显下降,IFN-γ 表达较模型组明 显升高。与对照组比较,模型组大鼠CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ 水平明显降低,CD8+ 水平升高;槲皮素组CD3+、 CD4+、CD4+/CD8+ 水平较模型组升高,且CD8+ 水平较模型组明显下降。在同等剂量mACh激发的气道反应性检 测中,模型组大鼠的压力峰值- 时间指数（APTI）值显著高于对照组;与模型组比较,槲皮素组APTI 值明显降低。 模型组肺泡结构紊乱,多数肺泡出现闭锁、裂隙、萎陷,部分融合成大肺泡,肺泡腔及间质内有炎性细胞渗出, 肺泡间隔明显增宽增厚。槲皮素组较模型组肺泡腔炎症细胞浸润减轻,肺间隔略微增宽,部分肺泡融合,结构紊 乱。结论： 槲皮素可通过调节T 淋巴细胞效应改善肺纤维化大鼠的高气道反应,进而对肺纤维化气道具有很好的 治疗效果。     

佐剂性关节炎大鼠肺功能变化与Th1/Th2细胞、调节性T细胞的相关性研究

目的:探讨细胞因子、Th1/Th2细胞及调节性T细胞(Treg)、转录因子Foxp3在佐剂性关节炎(AA)大鼠肺功能损害中的作用机制。方法:将24只Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组和模型(Model)组,每组12只,向Model组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1mL致炎,复制成AA模型。致炎48d后,观察两组大鼠足跖肿胀度(E)及关节炎指数(AI),HE染色观察肺组织病理学改变,计算两组大鼠肺系数(LI)、肺泡炎积分,免疫组化染色法检测Foxp3、TGF-β1蛋白表达情况。通过小动物肺功能仪检测肺功能,ELISA法测定细胞因子的变化,流式细胞术(FCM)测定Treg的表达。结果:与NC组相比,Model组大鼠E、AI、LI、1s内平均呼气流量(FEV1/FVC%)、肺泡炎积分、血清TNF-α、Th1/Th2、肺组织TGF-β1、CD4+ CD25- T细胞的表达水平明显升高,且两者差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);用力肺活量(FVC)、25%肺活量的最大呼气流量(FEF25)、50%肺活量的最大呼气流量(FEF50)、75%肺活量的最大呼气流量(FEF75)、最大呼气中期流量(MMF)、用力最大呼气流量(PEF)、肺动态顺应性(Cldyn)、血清IL-10、CD4+ Treg、CD4+ CD25- Treg、肺组织Foxp3蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。Spearman相关分析结果显示,AA大鼠肺功能参数分别与E、AI、TNF-α、IL-10、Th1/Th2及CD4+ Treg、CD4+CD25+Treg、CD4+ CD25- T细胞、Foxp3、TGF-β1表达呈相关性,且相关有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:大鼠在致炎后对抗原刺激呈高敏反应状态,Th1/Th2状态失衡、CD4+ CD25- T细胞转化成CD4+ CD25+ Treg受阻,免疫调节功能紊乱,释放大量细胞因子和炎症介质,导致局部关节的病变和肺组织损害,从而发生AA肺功能降低。     

哮喘和免疫耐受大鼠淋巴液中Treg变化及其功能状态的实验研究

观察CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞、IL-10、TGF-β在哮喘和免疫耐受大鼠淋巴液与血液中的水平,探讨其与哮喘及免疫耐受的关系。建立大鼠哮喘和免疫耐受模型,收集激发后0 h、24 h、48 h淋巴液、血液中淋巴细胞,采用流式细胞术检测淋巴液及血液中CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞百分率;采用ELISA方法检测血浆及淋巴液中IL-10、TGF-β水平。结果显示,哮喘组淋巴液和血液的CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞百分率水平、血浆IL-10和TGF-β浓度在各时间点均低于对照组和耐受组(P0.05);哮喘组和耐受组淋巴液中CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞百分率水平、IL-10浓度在不同时间点均高于血液水平(P0.05),而TGF-β浓度则低于血液水平(P0.05);耐受组淋巴液和血液中CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞百分率水平、血浆IL-10和TGF-β浓度与对照组相比无显著性差异(P0.05)。说明哮喘大鼠淋巴液中存在CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数量以及功能失调,且淋巴液中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞水平显著高于其血液水平,而建立免疫耐受后大鼠淋巴液及血液中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数量升高,说明通过免疫耐受可以避免哮喘发病或减轻症状,推测通过建立免疫耐受可能成为一种治疗哮喘的有效途径。     

高丽参提取液对大鼠自身免疫性脑脊髓膜炎的保护作用

目的:探讨高丽参提取液(Korean red ginseng extract,KRG)对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)的治疗作用及相关免疫调节机制。方法:取SD 大鼠30 只,随机分为空白对照组、模型组(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)和实验组(高丽参提取液治疗),每组10 只,对EAE 大鼠进行神经功能评分及体重测量,通过病理学HE 染色和免疫组化观察25 d 脑和脊髓炎症浸润,流式细胞术检测大鼠脊髓和淋巴结CD4+ 、CD4+ / IFN-β+(Th1)、CD4+ / IL-17+(Th17)和CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量,实时荧光定量q-PCR 检测大鼠脊髓和淋巴结IFN-β、IL-17、IL-23 和Foxp3 mRNA 水平的表达。结果:治疗组大鼠神经功能评分明显改善,体重明显增加;与模型组比较,实验组神经症状和病理改变减轻;与模型组相比,治疗组中大鼠脊髓和淋巴结 CD4+ 、CD4+ / IFN-β+ 、CD4+ / IL-17+ T 细胞数量减少,而CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量增多(P<0.05);大鼠脊髓和淋巴结IFN-β、IL-17、IL-23 mRNA 表达下降,而Foxp3 mRNA 表达增加(P<0.05)。结论:高丽参提取液通过调节免疫系统的CD4+ 、CD4+ / IFN-β+ 、CD4+ / IL-17+和CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量和CD4+ T 细胞分泌细胞因子的水平对EAE 起保护作用。     

薄芝糖肽对肝癌大鼠的T淋巴细胞亚群和DC细胞的影响研究

目的探讨薄芝糖肽对肝癌大鼠的T淋巴细胞亚群和DC细胞的影响。方法取43只大鼠,其中3只用于制备癌性腹水,另32只注射癌性腹水建立肝癌模型后随机分为模型组及低、中、高剂量组,其余8只为健康组。3剂量组每天腹腔注射50、100、200 mg/L的薄芝糖肽溶液,健康组及模型组注射等量无菌生理盐水。15 d后检测并对比各组T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+水平及DC细胞表面协同刺激分子CD80~+、CD86~+、MHC-Ⅱ阳性表达率、IL-2、IL-10水平,对比各剂量组抑瘤率。结果 CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平及CD80~+、CD86~+、MHC-Ⅱ阳性表达率及血清IL-2含量组间比较,健康组最高、中剂量组其次、低、高剂量组稍低、模型组最低,除低、高剂量组相比差异不显著(P0.05),其他每2组间比较差异均显著(P0.05);CD8~+及血清IL-10含量组间比较,健康组最低、中剂量组其次、低、高剂量组稍高、模型组最高,除低、高剂量组相比差异不显著(P0.05),其他每2组间比较差异均显著(P0.05);抑瘤率组间比较,中剂量组显著高于低、高剂量组(P0.05),低、高剂量组抑瘤率相比差异不显著(P0.05)。结论薄芝糖肽通过调节T淋巴细胞亚群及DC细胞表面标志物表达,增强机体T细胞免疫功能,促进DC细胞成熟,从而增强机体免疫力,达到良好的辅助抗肿瘤效果,其中100 mg/L薄芝糖肽增强机体免疫力、辅助抗肿瘤效果最佳。     

HMGB1通过TLR4促进心肌缺血损伤并调节脾脏CD4~+、CD8~+T细胞和Th17细胞比例

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)通过Toll样受体4 (TLR4)调控心肌缺血损伤及对脾脏组织CD4~+T细胞、CD8~+T细胞及Th17细胞亚群的影响。方法 C57BL/6野生型小鼠(WT)和TLR4基因敲除(TLR4-/-)小鼠各30只,随机分为对照组、异丙肾上腺素诱导心肌缺血(ISO)组和ISO联合重组HMGB1(r HMGB1)组。采用心脏超声检查小鼠心功能,应用HE染色和天狼星红染色观察心肌组织病理学变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数,流式细胞术检测脾脏组织中CD4~+T细胞、CD8~+T细胞和Th17细胞亚群的比例。结果与对照组相比,ISO组小鼠诱发心脏功能损害、心肌组织坏死和纤维化、心肌细胞凋亡,脾脏组织中CD4~+T淋巴细胞比例、CD4~+/CD8~+T细胞比值和Th17细胞比例升高;与ISO组小鼠相比,ISO联合r HMGB1组心脏功能损害、心肌组织坏死和纤维化、心肌细胞凋亡状况均加重,脾脏组织中CD4~+T淋巴细胞比例、CD4~+/CD8~+T细胞比值和Th17细胞比例更高;与ISO联合r HMGB1组野生型小鼠相比,ISO联合r HMGB1组TLR4-/-小鼠心脏功能损害、心肌组织坏死和纤维化和心肌细胞凋亡减轻,脾脏组织CD4~+T淋巴细胞比例、CD4~+/CD8~+T细胞比值和Th17细胞比例显著降低。结论 HMGB1通过TLR4诱发心肌缺血时心肌组织损伤,并上调脾脏组织CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+T细胞比值和Th17细胞比例,从而可能促进心肌组织炎症损伤。     

佐剂关节炎大鼠肺功能降低与调节性T细胞减少及Foxp3表达下调相关

目的 观察佐剂关节炎(AA)大鼠肺功能、调节性T细胞(Treg)及其表面标志物-叉头状转录因子(Foxp3)变化,探讨Treg、Foxp3在RA肺病变中的作用.方法 将30只大鼠随机分为正常组和模型组,每组15只,向模型组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 mL致炎,复制成AA模型.致炎30 d后,观察大鼠足跖肿胀度、关节炎指数,采用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,流式细胞术检测大鼠外周血Treg表达,RT-PCR、免疫组化、免疫印迹法检测大鼠肺组织Foxp3 mRNA、Foxp3蛋白表达.结果 与正常组比较,AA大鼠组织肿胀度和关节炎指数升高,肺功能参数降低,外周血CD4+ CD25+ Treg、CD4+ CD25+Foxp3+ Treg表达降低,同时,肺组织Foxp3 mRNA和Foxp3蛋白表达水平亦降低(P＜0.01或P＜0.05).结论 AA大鼠在发生关节炎症的同时,其肺功能水平降低,Treg、Foxp3表达降低,免疫平衡失调.     

细胞膜异位表达钙网蛋白的CD4~+T细胞诱导EAE小鼠保护性免疫

目的:研究细胞膜表面异位表达钙网蛋白(calreticulin,CALR)对T细胞疫苗(T-cell vaccine,TCV)诱导的保护性免疫效果的影响。方法:采用小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG_(35-55))免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,分别以MOG_(35-55)特异性T细胞(CALR~+T及CALR~-T)为疫苗,通过尾静脉注射免疫小鼠。检测指标包括EAE小鼠临床评分比较、脾CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞百分比测定及血清中细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、IL-10和IL-17A含量测定。结果:射线照射可诱导活化CD4~+T细胞表面异位表达CALR;CALR~+T免疫组症状显著轻于CALR~-T免疫组(P0.01);CALR~+T免疫组小鼠脾CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞百分比及血清中IL-4和IL-10含量显著高于对照组(P0.01),而IFN-γ和IL-17A含量显著低于对照组(P0.01),结论:细胞膜表面异位表达CALR与TCV诱导的保护性免疫效果有关。     

青藤碱抑制NLRP3和下游致炎因子表达改善佐剂性关节炎大鼠关节炎症状

目的 探讨青藤碱对佐剂性关节炎(AA)大鼠的抗炎作用及含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)的变化。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、 AA模型组、(100、 200、 400)mg/kg青藤碱组和100 mg/kg雷公藤组，每组10只。除对照组外，其余均采用Freund完全佐剂建立AA模型。建模后12 d,对照组和模型组给予等量生理盐水，其余各组分别灌胃给予相应药物，每天1次，连续16 d。通过多发性关节炎和关节肿胀度评价AA大鼠关节情况，Western blot法检测滑膜组织NLRP3蛋白水平，免疫组织化学染色法检测滑膜组织NLRP3表达和分布；ELISA检测大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果 与对照组比较，模型组多发性关节炎明显，关节肿胀度增加，青藤碱各治疗组和雷公藤组大鼠多发性关节炎和关节肿胀度明显降低；青藤碱各治疗组滑膜组织NLRP3蛋白表达减弱，血清中IL-1β、 IL-6、 TNF-α水平显著下降。结论 青藤碱通过抑制NLRP3和下游致炎因子表达改善AA大鼠关节炎症。