枸杞抗肾脏衰老作用的形态学定量研究

目的　探讨枸杞抗肾脏衰老的作用。方法　建立小鼠衰老模型 ,同时以 1 0 %枸杞水煎剂灌胃连续 42 d,采用光镜 ,透射电镜 ,组织化学和 BI2 0 0 0图像分析系统对小鼠肾脏各项形态学指标进行定量分析。结果　枸杞保护组肾小球形态大小 ,肾小球硬化率 ,肾组织内微血管指标 ,肾小球平均细胞数 ,肾小球基底膜厚度均与老年对照组不同 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 ) ,而与青年对照组相近。结论　枸杞具有延缓小鼠肾脏衰老的作用。     

枸杞及其多糖对果蝇和小鼠寿命的影响

本文用平均寿命和最高寿命二个指标.观察了不同剂量的枸杞对不同月龄的小鼠寿命以及不同剂量的枸杞及其多糖对果蝇寿命的影响。结果表明,一定剂量的枸杞和或枸杞多糖能分别显著地提高小鼠和果蝇的平均寿命,但对二种动物的最高寿命均无明显影响。说明拘杞及其多糖具一定的抗(延绥)衰老作用。     

枸杞多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠皮肤的影响

目的探讨枸杞多糖的抗皮肤衰老作用。方法健康昆明种雌性小鼠50只,随机分为正常对照组、衰老模型组、枸杞多糖低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均每日颈背部皮下注射D-半乳糖连续42 d,建立衰老模型。给药组同时给予不同剂量的枸杞多糖。42 d后测定小鼠皮肤组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,以及皮肤羟脯氨酸(HYP)含量。结果枸杞多糖可增强衰老模型小鼠皮肤组织SOD、GSH-Px活力,降低MDA含量,提高HYP含量。结论枸杞多糖具有延缓D-半乳糖致小鼠皮肤衰老的作用。     

茜草多糖对衰老模型小鼠脑细胞凋亡影响的实验研究

目的 探讨茜草多糖延缓衰老作用机制及其对脑细胞凋亡的影响和作用机制.方法 采用D-半乳糖衰老模型小鼠作为研究对象,提取茜草多糖,观察茜草对脑细胞凋亡、Bel-2、线粒体细胞色素C(cytC)和ca2 含量的影响.结果 D-半乳糖衰老模型小鼠脑细胞凋亡率明显增加,而Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.01),线粒体cytC和Ca2 含量明显下降(P＜0.01),茜草多糖可明显降低凋亡细胞数(P＜0.01),增加BOl-2的表达(P＜0.05),提高线粒体cytC水平和ca2 含量(P＜0.01).结论 茜草多糖具有延缓脑细胞衰老的作用,可通过①上调Bcl-2蛋白的表达,②保护线粒体避免cytC的释出,③提高线粒体Ca2 缓冲含量,从而发挥抑制脑细胞凋亡的作用.     

枸杞多糖对衰老大鼠蛋白质氧化损伤影响的实验研究

目的探讨枸杞多糖(LBP)对衰老大鼠蛋白质氧化损伤的影响。方法Wistar大鼠40只,随机分为衰老模型组、枸杞多糖大剂量组(100 mg/kg)、中剂量组(50 mg/kg)、小剂量组(10 mg/kg),每组10只。测定各组大鼠肝组织谷胱甘肽(GSH)、羰基蛋白的含量和谷胱甘肽转移酶(GST)活性。结果LBP可明显降低羰基蛋白含量(P<0.01,P<0.05),增加GSH含量和增强GST活性(P<0.01)。结论LBP通过降低蛋白质氧化损伤而发挥抗衰老的作用。     

枸杞多糖对MIN6细胞增殖活性和凋亡的影响

目的 研究不同浓度枸杞多糖对小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞增殖活性和凋亡的影响.方法 培养MIN6细胞,分为对照组、不同浓度枸杞多糖干预组,分别给予0,100,200,400 mg/L枸杞多糖干预24 h.噻唑蓝(MTT)法检测MIN6细胞增殖活性,流式细胞术检测MIN6细胞凋亡率,Western印迹分析磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达.结果 与对照组相比,100、200 mg/L枸杞多糖干预组MIN6细胞增殖显著增加(P均＜0.01),MIN6细胞凋亡显著受抑制(P均＜0.01),而400 mg/L枸杞多糖干预组细胞增殖活性降低(P＜0.05),MIN6细胞凋亡增加(P＜0.01).Western印迹显示,与对照组相比,100,200,400 mg/L枸杞多糖干预组Bcl-2表达(F=65.26,P＜0.01)及磷酸化ERK水平(F=14.85,P＜0.01)均增加,而400 mg/L枸杞多糖干预组Bcl-2与磷酸化ERK表达下降(P均＜0.05),200 mg/L枸杞多糖干预组与400 mg/L枸杞多糖干预组相比,Bcl-2与磷酸化ERK水平差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 低浓度枸杞多糖可促进MIN6细胞增殖,减少MIN6细胞凋亡,而高浓度枸杞多糖作用相反,其机制可能与ERK信号通路有关.     

枸杞和枸杞多糖与抗衰延寿

对喂饲和服用枸杞及其多糖的实验动物(小鼠和果蝇)和老年人测定了平均寿命、最高寿命和能反映免疫学、生理生化学和遗传学机能状态的指标19项。结果表明,枸杞和枸杞多糖能显著地延长果蝇平均寿命,提高或显著提高和改善老年人上述诸领域中的绝大部分指标(溶菌酶活力,IgG含量,T细胞转化率,IFN和IL-2含量,T_3含量,cAMP和cGMP含量,SOD和LPO含量),使这些指标向年轻化方向逆转,对实验动物的最高寿命无影响。说明单味枸杞或枸杞多糖具有延缓衰老和延长动物平均寿命的作用。     

枸杞多糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨枸杞多糖(LBP)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 选择SD大鼠60只,随机分为对照组、模型组、LBP处理组各20只.模型组、LBP处理组建立大鼠心肌缺血再灌注损伤动物模型后,LBP处理组给予LBP 1 mg/kg,模型组、对照组给予等量生理盐水.2h后检测各组血清超氧化物歧化酶(SOD)含量,并观察心肌组织中Fas、bcl-2蛋白的表达.结果 心肌组织学观察发现,模型组心肌组织损伤严重,而LBP处理组损伤减轻.LBP处理组SOD含量及Fas的表达明显低于模型组(P均＜0.05),而bcl-2的表达高于模型组(P＜0.05).结论 LBP对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用可能与提高心肌抗氧化能力、清除氧自由基、减轻细胞膜脂质过氧化状态和维持细胞膜的完整性有关.     

凝结芽孢杆菌TBC169株对亚急性衰老模型小鼠的抗衰老作用

目的 探讨凝结芽孢杆菌对亚急性衰老模型小鼠的抗衰老作用.方法 用D-半乳糖复制小鼠亚急性衰老模型,监测小鼠脑、心、肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)的水平并观察高、低剂量的凝结芽孢杆菌对这些指标的影响.结果 低剂量凝结芽孢杆菌能显著改善衰老模型小鼠脑组织SOD、 GSH-Px活性(P＜0.05),极显著改善肝组织GSH-Px活性、心脏组织SOD活性及降低心脏组织MDA水平(P＜0.01);高剂量凝结芽孢杆菌可显著降低肝组织MDA水平(P＜0.05)和极显著改善心脏组织GSH-Px活性(P＜0.01).结论 凝结芽孢杆菌TBC169株可诱导抗衰老酶合成,减少产生或加速清除自由基,起到延缓衰老作用.     

枸杞多糖抑制绿脓杆菌毒素引起的小鼠巨噬细胞RAW264.7氧化损伤作用研究

目的探讨枸杞多糖减轻绿脓杆菌毒素(Pyocyanin,PCN)对小鼠巨噬细胞RAW264.7氧化损伤机制。方法细胞分为对照组(未处理组),绿脓杆菌毒素处理组,枸杞多糖处理组及枸杞多糖+绿脓杆菌毒素处理组,通过细胞MTT法检测绿脓杆菌毒素处理后枸杞多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7活性的保护作用;采用Western blot检测不同处理组细胞凋亡相关蛋白的表达;采用荧光染色法检测ROS的表达;采用ELASA法检测不同时间点细胞上清中IL-4的表达;采用流式细胞仪检测不同处理组细胞凋亡情况。结果 50μmol/L PCN处理后导致细胞增殖能力下降,凋亡抑制蛋白Bcl-xl表达量下调,ROS表达量上升(t=3.95,P0.05)。随着处理时间的延长,PCN能够刺激细胞促炎因子IL-4过量表达,促进巨噬细胞细胞凋亡(t=7.15,P0.05)。100 mg/ml LBP预处理RAW264.7细胞可显著促进Bcl-2(t=1.24,P0.05)和Bcl-xl的表达(t=1.51,P0.05),促炎因子IL-4和胞内ROS的表达显著下调(t值分别为8.15和2.57,均P0.05),并PCN造成的巨噬细胞凋亡减少。结论 LBP可抑制PCN造成的胞内ROS产生,抑制IL-4释放,调控凋亡抑制蛋白Bcl-2、Bcl-xl和凋亡蛋白Caspase3的表达,进而提高PCN作用后RAW264.7细胞的增殖能力,为进一步研究绿脓杆菌致病机制及LBP的免疫保护作用提供了理论基础。     

大豆多肽螯合锌对自然衰老小鼠的作用

目的 探讨大豆多肽螯合锌对自然衰老小鼠模型的影响及其机制.方法 自然衰老的小鼠分别给予400 mg/kg大豆多肽、40 mg/kg硫酸锌和400 mg/kg大豆多肽螯合锌溶液连续灌服4 w.采用酶化学方法检测肝组织匀浆的丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂褐质(LPO)、总抗氧化能力(T-AOC)的含量等指标.结果 成功建立了小鼠衰老模型.大豆多肽鳌合锌可以明显增加衰老小鼠的进食量和进水量(P＜0.01),可以明显地降低衰老小鼠肝脏中的MDA(P＜0.05)、SOD(P＜0.01),可以明显地增强衰老小鼠肝脏总氧化能力(P＜0.05).结论 大豆多肽鳌合锌可以通过抗氧化机制达到对抗衰老的作用.     

九种中药多糖含药血清对小鼠腹腔巨噬细胞释放细胞因子的影响

目的 研究黄芪等中药多糖干预小鼠免疫功能的部分机制.方法 常规提取黄芪、防风、当归、柴胡、枸杞、地黄、板蓝根、蒲公英、香菇等9味中药多糖组分,分别按大、中、小剂量灌胃给药,制备小鼠含药血清;选择浓度为20％的含药血清干预体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ),并用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Mφ释放白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α等细胞因子(CK)的水平.结果 除柴胡多糖外,其余8种中药多糖含药血清对IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α中一个或多个CK水平具有明显升高或降低作用(P＜0.05或P＜0.01),且具有浓度差异性(P ＜0.05或P＜0.01).结论 黄芪等8味中药调节机体免疫功能的机制,可能与这些中药的多糖组分在体内干预巨噬细胞释放IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等CK有关.     

枸杞多糖胶囊对小鼠急性毒性的影响

目的观察小鼠口服枸杞多糖胶囊的毒性反应。方法采用一次最大限量法给药测定小鼠口服枸杞多糖胶囊的急性毒性;以枸杞多糖胶囊高剂量组(10 g·kg-1·d-1)、中剂量组(5 g·kg-1·d-1)、低剂量组(2.5 g·kg-1·d-1),灌胃小鼠,连续24 w,观察小鼠的体重、血液学、血液生化学、组织病理指标的变化。小鼠骨髓细胞微核试验及小鼠精子畸形试验对枸杞多糖胶囊进行安全性评价。结果枸杞多糖胶囊最大给药浓度20g/kg时,小鼠未见毒性反应。各给药组小鼠体重与对照组比较,无统计学差异(P>0.05)。不同剂量的枸杞多糖胶囊对小鼠血液学、生化学指标、脏器形态学、小鼠骨髓细胞微核率及小鼠精子畸形率的影响均未见异常。结论枸杞多糖胶囊无毒且未见遗传毒性作用。     

山茱萸多糖对衰老模型大鼠学习记忆能力影响的研究

目的 以山茱萸多糖对D-半乳糖致衰大鼠抗脑老化及学习记忆能力的影响,探讨其在改善脑老化方面的作用及可能机制.方法 采用D-半乳糖诱导的衰老模型Wistar大鼠为实验对象,经胃灌服不同剂量山茱萸多糖(0.14、0.28 g/kg),连续灌服30 d.测定各组大鼠学习记忆能力、脑组织丙二醛(MDA)、脂褐素(LF)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和单胺氧化酶B(MAO-B)活性,同时观察不同剂量山茱萸多糖对衰老模型大鼠上述指标的影响.结果 衰老模型组MDA、LF含量、MAO-B活性较青年组明显增加(P＜0.01),而学习记忆能力、SOD活性明显低于青年组(P＜0.01);不同剂量山茱萸多糖组学习记忆能力、SOD活性明显高于衰老模型组(P＜0.05,P＜0.01),而MDA、LF含量、MAO-B活性显著低于衰老模型组(P＜0.05,P＜0.01),以山茱萸多糖大剂量组效果更显著,山茱萸多糖大剂量组作用优于小剂量组.结论 山茱萸多糖可通过提高机体抗氧化能力、抑制脂质过氧化、提高老化相关酶活性发挥抗脑老化作用,提高大鼠学习记忆能力.     

螺旋藻对衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的 探讨螺旋藻对D-半乳糖所致衰老小鼠学习、记忆障碍的改善作用.方法 使用D-半乳糖建立小鼠衰老模型,用螺旋藻灌胃进行实验性治疗.持续6 w后,通过避暗实验、Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力以及脑组织单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性.结果 与对照组相比,模型组小鼠的学习、记忆能力下降(P＜0.05或P＜ 0.01),MAO活性升高(P＜0.01),GSH-Px活性降低(P＜0.05);与模型组相比,治疗组的学习、记忆能力不同程度地得到恢复(P＜0.05),MAO活性降低(P＜0.05),GSH-Px活性升高(P＜0.05).结论 螺旋藻可改善由D-半乳糖所致衰老小鼠的学习、记忆障碍.     

二精灵抗皮肤衰老作用的药理实验研究

二精灵(2JL)由黄精(Rhizome of King Solomoseal)和枸杞子(Fruit o barbary Wolfber-ry)组成,常服能助气固精,补填丹田,活血驻颜,长生不老[1].枸杞和枸杞多糖能显著提高小鼠果蝇的平均寿命,表明其有延缓衰老作用2].黄精也具有一定的延缓衰老作用[3].古方二精灵在抗皮肤衰老作用方面的实验研究,迄今未见报道.为此,我们对二精灵进行了抗皮肤衰老的药理实验研究.     

骨髓间充质干细胞对大鼠肾脏衰老的影响

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)延缓肾脏衰老的机制.方法 皮下注射D-半乳糖建立肾脏衰老模型,大鼠尾静脉注射3×10<'-4>个MSCs进行生物治疗,应用终浓度为20 μmol/L荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的MSCs回输大鼠体内,制作,肾脏冰冻切片,在荧光显微镜下观察MSCs是否定位于肾脏;采用光镜和图像分析系统对大鼠肾脏各项形态学指标进行定量分析;采用硫代巴比妥酸和黄嘌呤氧化法分别检测血清和肾脏中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;应用实时定量-逆转录PCR和免疫印迹法榆测各组肾脏组织中血管内皮生长因子(VEGF)及P16的表达.结果 MSCs能够归巢到衰老大鼠的肾脏.治疗组肾小球形态大小、肾小球硬化率、肾小球平均细胞数均与模型组不同(P<0.05).治疗组与模型组相比,血清与肾脏中SOD的活性均明显增高,MDA含量也显著降低(P<0.05);与模型组相比,治疗组大鼠肾脏内的VEGF蛋白和VEGF mRNA表达升高(P<0.05).治疗组大鼠肾脏内的P16蛋白和P16 mRNA表达下降(P<0.05).结论 MSCs分泌VEGF、降低P16的表达可能是改善衰老肾脏的作用机制之一.     

车前子多糖对衰老模型大鼠脑氧化-非酶糖基化影响的实验研究

目的 探讨车前子多糖对D-半乳糖致衰大鼠氧化-非酶糖基化作用的影响,明确车前子抗衰老作用及机制.方法 选用D-半乳糖衰老模型Wistar大鼠作研究对象,观察不同剂量车前子多糖对衰老模型大鼠总抗氧化能力(T-AOC)、抑制羟自由基能力(AHR)、脑单胺氧化酶B活性(MAO-B)、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSH)比值、羰基化蛋白、醛糖还原酶(AR)和晚期糖基化终末产物特异性受体(RAGE)mRNA表达水平的影响,并与衰老模型组和车前子水煎剂组进行比较. T-AOC、AHR、MAO-B活性、GSH/GSSH、羰基化蛋白含量采用分光光度法,AR mRNA 和RAGE mRNA检测采用RT-PCR法.结果 衰老模型组羰基化蛋白含量、MAO-B活性较青年组明显增加(P＜0.01),而T-AOC、GSH/GSSG比值降低(P＜0.01),AR mRNA表达明显低于青年组(P＜0.01),而RAGE mRNA表达明显高于青年组(P＜0.01).车前子多糖和车前子水煎剂组各组T-AOC、GSH/GSSG、AHR,AR mRNA表达明显高于衰老模型组(P＜0.05,P＜0.01),而羰基化蛋白含量、MAO-B和RAGE mRNA表达显著低于衰老模型组(P＜0.05,P＜0.01).以车前子多糖大剂量组效果最明显.结论 车前子及其多糖可通过提高机体抗氧化能力和清除羰基能力而发挥抗脑老化作用,车前子多糖是其作用的重要成分.     

野玫瑰根多糖对D-半乳糖所致衰老模型小鼠免疫功能影响的实验研究

目的探讨野玫瑰根多糖对D-半乳糖所致衰老模型小鼠免疫功能的影响。方法对D-半乳糖所致衰老模型小鼠分别以6、12ml／kg野玫瑰根多糖灌胃15d，测定红细胞C3b受体花环率（RBC-C3bRR）、红细胞免疫复合物花环率（RBC-ICR）、脾淋巴细胞增殖反应、IL-2活性。结果高、低剂量的野玫瑰根多糖对上述指标均有明显的恢复作用（P〈0．05或P〈0．01）。结论野玫瑰根多糖可通过改善免疫功能发挥抗衰老作用。     

D-半乳糖致衰老模型大鼠脑组织Ach活性、NGF表达变化及山茱萸多糖的干预作用

目的 探讨山茱萸多糖对D-半乳糖致衰老模型大鼠脑组织神经生长因子(NGF) mRNA表达的影响及其可能的作用机制.方法 选用Wistar大鼠46只,随机分组,每组雌雄各半,其中青年对照组12只、衰老模型组10只、山茱萸多糖组24只(小剂量和大剂量组各12只).采用D-半乳糖法制作衰老模型,造模成功后按照0.14 g/kg体重和0.28 g/kg体重经胃灌服山茱萸多糖水溶液,连续给药30 d.分光光度法测定脑脂褐素( lipofuscin,LP)含量、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,RT-PCR法检测脑组织NGF mRNA表达.结果 衰老模型组LP含量、AchE活性均较青年组明显增加(P＜0.01),而NGF mRNA表达明显低于青年组(P＜0.01);山茱萸多糖小剂最组和大剂量组NGF mRNA的表达明显高于衰老模型组(P＜0.01),而LP含量和AchE活性显著则明显低于衰老模型组(P＜0.05,P＜0.01),山茱萸多糖大剂量组上述作用明显好于小剂量组(P＜0.05).结论 山茱萸多糖可抑制脑的脂质过氧化,降低AchE活性、上调NGF mRNA表达而发挥抗衰老作用.