血吸虫可溶性虫卵抗原诱发脑血管内皮细胞缝隙连接蛋白Cx37mRNA及蛋白的表达

目的 通过观察血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)孵育培养的脑血管内皮细胞缝隙连接(GJ)蛋白的表达和分布,探讨脑动脉GJ在脑血吸虫病病理发生中的作用。方法 使用血吸虫SEA孵育培养幼兔脑基底动脉血管内皮细胞,实验分对照组、SEA 1～5组：加入SEA（质量浓度分别为10.0％、5.0％、3.3％、2.5％、2.0％）,应用逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)技术测定兔脑血管内皮细胞GJ蛋白Cx37 mRNA的表达;应用Western 印迹技术测定兔脑血管内皮细胞GJ蛋白Cx37蛋白的表达。结果 对照组和SEA 1 ～5组的GJ蛋白Cx37 mRNA水平分别为0.239±0.037、0.260±0.043、0.218±0.310、0.647±0.040、0.419±0.036、0.513±0.038;其中SEA 3～5组的GJ蛋白Cx37 mRNA水平高于对照组（P均＜0.05）。对照组和SEA 1～5组GJ 蛋白Cx37蛋白表达分别为0.401±0.045、0.485±0.048、0.749±0.052、1.119±0.063、1.015±0.057、0.605±0.047,其中SEA 2 ～5组Cx37蛋白表达高于对照组（P均＜0.05）。结论 血吸虫SEA孵育培养的兔脑血管内皮细胞GJ蛋白Cx37 mRNA及其蛋白水平高于对照组,提示GJ蛋白在SEA及其分泌物浸润脑动脉沉积于脑组织,从而在诱发脑血吸虫病的病理发生机制中可能起重要的作用。     

β2受体对心肌缝隙连接蛋白Cx43的调节

目的探讨β-肾上腺素受体（β-AR）亚型对心肌缝隙连接蛋白connexin43（Cx43）表达及功能的调节。方法采用免疫印迹技术和划痕标记示踪技术（SLDT）观察心肌细胞Cx43的表达和功能变化。结果给予异丙基肾上腺素（ISO）刺激5min，即可明显增加心肌细胞非磷酸化Cx43的表达，同时促进荧光染料在细胞间的扩散；选择性β2-AR拮抗剂ICI 118551，可完全拮抗异丙基肾上腺素所诱导的该作用。结论异丙基肾上腺素主要通过刺激BrAR参与调控Cx43，这可能是β2-AR诱导心律失常的一个重要机制。     

缝隙连接蛋白与动脉粥样硬化

组成缝隙连接的蛋白亚单位称为连接蛋白,现已发现有20种以上的连接蛋白亚型,其中连接蛋白37在人类主要表达在血管内皮细胞。研究表明Conenxin37在动脉粥样硬化的发生,发展中起着重要作用,涉及到切应力,炎症,高胆固醇血症等目前动脉粥样硬化研究的许多热点方面。同时一些研究表明连接蛋白37基因多态性在动脉粥样硬化的发病机制中可能有重要作用。本文将着重在连接蛋白37及其基因多态性与动脉粥样硬化的关系作一综述。     

参仙升脉口服液对缓慢性心律失常大鼠缝隙连接蛋白Cx45的影响

目的观察参仙升脉口服液对缓慢性心律失常大鼠缝隙连接蛋白Cx45的影响,探讨其治疗缓慢性心律失常的机制。方法用普萘洛尔制备缓慢性心律失常大鼠模型,观察参仙升脉口服液对缓慢性心律失常大鼠缝隙连接蛋白Cx45的影响。结果治疗组大鼠心率比模型组大鼠心率明显提高（P〈0．01）,大鼠心肌组织缝隙连接蛋白cx45的表达比模型组明显增高（P〈0．01）。结论参仙升脉口服液可明显提高缓慢性心律失常大鼠缝隙连接蛋白Cx45的表达,这可能是其治疗缓慢性心律失常的机制之一。     

大肠癌癌细胞缝隙连接蛋白Cx43表达及与肿瘤转移的相关性探讨

目的探讨癌细胞能穿出血管内皮进入靶器官继续生长形成转移瘤的机理。方法将人血管内皮细胞单独培养及分别与大肠癌低转移细胞HT29、高转移细胞Lovo共同培养,至细胞长成单层采用免疫组化SP法检测细胞缝隙连接蛋白Cx43表达。结果在单纯血管内皮细胞Cx43蛋白表达最强,次之为与HT29细胞共培养,而与Lovo细胞共培养后Cx43几乎无阳性表达。结论 Cx43蛋白在大肠癌细胞转移中起重要作用;检测Cx43蛋白表达有助于判断肿瘤的转移能力。     

缝隙连接蛋白Cx43的磷酸化对缝隙连接通讯的调控

缝隙连接介导细胞间通讯。磷酸化通过影响缝隙连接蛋白生命周期中的各个过程而调节细胞间通讯,这些过程涉及到缝隙连接蛋白的转运、组装/解离、降解以及通道的门控等。本文将探讨缝隙连接蛋白Cx43的磷酸化对缝隙连接通讯的调控,继而讨论Cx43蛋白的磷酸化特异性抗体,有助于我们深入研究特定位点的磷酸化事件对缝隙连接通道功能的影响。     

波生坦对慢性低氧性肺动脉高压大鼠右心室肥厚及缝隙连接蛋白(Cx)43表达的影响

目的:研究波生坦(bosentan,BST)对慢性低压低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠右心室肥厚及缝隙连接蛋白43(Cx43)表达量的影响。方法:将24只实验动物随机分为正常组、HPH组、安慰剂组和BST治疗组,每组各6只。正常组:常压常氧下饲养6周;其他3组大鼠置于低压低氧仓内8h/d,共6周,从第4周开始,每天给BST治疗组大鼠BST(100mg/kg)灌胃,安慰剂组生理盐水灌胃。6周后,所有大鼠测定血流动力学指标:如平均肺动脉压力(mPAP)、右心室收缩压(RVSP)、右心室收缩压上升最大速率(dp/dtmax),以及右心室肥厚度[如右心室质量/(左心室质量+室间隔质量),RV/(LV+S)]和右心室质量/体质量(RW/BW)。收集动脉血检测血浆内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)水平。Masson染色观察心肌胶原纤维容积百分比的变化,免疫组化染色法和Westernblot观察Cx43的变化。结果:BST治疗组大鼠的mPAP、RVSP、RV/(LV+S)、RW/BW及心肌胶原纤维容积百分比均较HPH组显著降低(P0.05),但血浆NO、ET-1的水平和心肌Cx43表达量显著升高(P0.05)。结论:BST在降低肺动脉压力的同时,还可抑制右心室肥厚和Cx43表达量的降低。     

心房肌缝隙连接蛋白40、43表达改变与心房颤动的关系

目的研究心房颤动患者心房肌缝隙连接蛋白(Cx)40、43表达的改变,探讨Cx在房颤发生与维持中的作用.方法39例接受开胸手术者分为房颤组和窦性心律组,手术时取右心耳及左心房各约100mg,采用Western blot与免疫组织化学技术,检测心房肌Cx40、Cx43表达量与分布的改变.结果房颤组Cx40表达量在左心房、右心耳较窦性心律组高,Cx43表达量在左心房较窦性心律组高,在右心耳无差异.免疫组化显示房颤组Cx40、Cx43均分布紊乱,聚集于胞浆或核周.结论房颤患者心房肌Cx40、Cx43表达增高,且分布异常,提示心房肌Cx40、Cx43表达改变与心房颤动的发生与维持有关.     

缝隙连接蛋白和心房颤动的研究进展

<正>心房颤动是临床最常见的心律失常,在一般人群中,心房颤动发病率为0.4%~1.0%,且发病率随年龄的增长而急剧增加[1]。心房颤动是栓塞事件的独立危险因素,可以引起心房内血栓、脑栓塞等严重并发症。栓塞事件随着年龄显著增高,是我国老年人发病率、致死率较高的一种疾病[2]。近年研究发现,缝隙连接蛋白的空间分布异常可导致心律失常的发生,其在心房颤动的心房电重构、结构重构中扮演着重要角色,直接参与心房颤动的发生与持续。本文就将连接蛋     

脑利钠肽对新生大鼠心室肌细胞缝隙连接蛋白Cx43含量的影响

观察脑利钠肽(BNP)对缝隙连接蛋白Cx43含量的影响,探讨BNP对心室肌细胞电生理特性的直接效应。以培养新生大鼠心室肌细胞为实验模型,分为实验组和对照组,实验组以不同浓度(1×10-8,1×10-7,1×10-6mol/L)的BNP处理心肌细胞24h后,通过免疫印迹法(Westernblot)反映心肌细胞Cx43总蛋白含量变化;通过免疫组化法在激光共聚焦显微镜下观察GJ通道的密度变化。结果:Westernblot显示BNP处理组和对照组比较Cx43条带显色密度减弱并有统计学意义(P<0.01),且随着BNP的剂量越大,Cx43条带密度减弱越明显。在共聚焦显微镜下观察到的Cx43的特异性荧光经过强度定量分析后得出实验组GJ通道Cx43密度比对照组减弱(P<0.01)。结论:一定浓度的BNP可使GJ蛋白Cx43的含量下调。BNP有可能参予心室肌细胞GJ的重构,从而在“致心律失常基质”的形成中起作用。     

Expression of gap junction protein connexin 32 in chronic liver diseases

BACKGROUND: Gap junctions contain intercellular channels through which contacting cells communicate directly. The expression of connexin 32, a major gap junction protein in the liver, during the progression of chronic liver diseases has not yet been clarified. METHODS: Immunohistochemical staining was performed using anti-connexin 32 antibody on 6 specimens of normal human liver, 7 of chronic viral hepatitis, and 7 of liver cirrhosis. RESULTS: The number of gap junction plaques in chronic viral hepatitis and liver cirrhosis was significantly smaller than that in normal liver (10350+/-2180 and 7550+/-3040 vs 22560+/-3700 spots/mm2, p<0.01). The number of gap junction plaques tended to be lower in liver cirrhosis than in chronic viral hepatitis. CONCLUSION: These results suggest that in chronic liver diseases impaired intercellular communication between hepatocytes occurs.     

上皮性卵巢癌组织中Seprase的表达及意义

目的 探讨Seprase在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系.方法 采用显微切割技术对31例新鲜冰冻的卵巢癌组织(实验组)进行处理,获取较纯的卵巢癌细胞,采用RT-PCR和Western blot技术检测Seprase mRNA 和蛋白的表达,与9例正常卵巢组织(对照组)作对比.结果 实验组全部表达Seprase mRNA,而对照组仅3例(33.33%)表达.卵巢癌组织和正常组织中Seprase mRNA的相对含量分别1.13±0.27和0.47±0.13,两者相比,P＜0.05.实验组26例(83.87%)表达Seprase蛋白,而对照组仅2例(22.22%)表达.卵巢癌组织和正常组织中Seprase蛋白的相对表达量分别为1.29±0.37和0.51±0.19,两者相比,P＜0.05.Seprase蛋白的表达与卵巢癌FIGO分期、组织学分级有关(P＜0.05).Seprase mRNA表达与卵巢癌组织学分级有关(P＜0.05),而与患者年龄、肿瘤大小、FIGO分期、淋巴结转移和组织学类型无关(P＞0.05).结论 Seprase参与了卵巢癌的发生发展,可能成为卵巢癌的诊断指标及基因治疗靶点.     

Elevated IL-37 levels in the plasma of patients with severe coronary artery calcification

Background Coronary artery calcification (CAC) is a predictor of cardiovascular events and plaque burden and is closely associated with chronic inflammation. Interleukin (IL)-37 is a newly discovered member of the IL-1 family and is considered an anti-inflammatory cytokine. Our recent study on mice indicated that IL-37 could attenuate atherosclerosis and vascular calcification, which suggests that IL-37 could be associated with the development of atherosclerosis and related diseases. The aim of this study was to investigate if IL-37 plays a role in the progression of CAC in patients. Methods Two hundred participants with suspected cardiovascular disease were recruited. The levels of plasma IL-37, osteoprotegerin (OPG), hypersensitive C-reactive protein (hsCRP) together with other biochemical parameters were measured, and a coronary calcium assessment was carried out by multi-detector row CT. A score of < 10 AU (Agatston units) denotes an absence of CAC, a score of 11–100 AU denotes mild CAC, 101–400 denotes moderate CAC, and > 400 AU denotes severe CAC. Results Our initial data showed that there were no apparent differences in plasma IL-37 levels among patients with or without mild or moderate CAC. However, IL-37 levels were significantly increased in patients with severe CAC (P < 0.001). Similar results were observed for plasma OPG and hsCRP levels. When IL-37 levels in patients with severe calcification were compared with that in all of the other non-severe CAC groups, it became apparent that there was a significant positive correlation between IL-37 level and severe CAC (r = 0.360, P < 0.001; OR = 1.033) using Spearman’s correlation and binary logistic regression analysis. Conclusions This study demonstrates that the anti-inflammatory cytokine IL-37 is associated with high coronary calcium levels, suggesting that IL-37 expression may be caused by the activation of inflammation and that IL-37 might become a predictor of severe CAC in the future, which requires further investigation.     

脑出血大鼠脑内脑源性神经营养因子蛋白及mRNA表达变化与意义

目的观察脑出血模型大鼠脑内脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白和mRNA的分布。方法取健康成年SD大鼠39只,随机分为正常对照组(3只)、假手术组(18只)、模型组(18只)。通过微量注射器向苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.4 U建立脑出血模型(模型组),用免疫组织化学方法和原位杂交法分别观察脑出血后2、6 h,1、4、7及14天共6个时间点BDNF蛋白及mRNA的表达变化,以阳性细胞计数作为观察指标。以假手术组、正常对照组作对照。结果脑出血后2 h BDNF蛋白主要表达于血肿周围的小胶质细胞,6 h表达开始增高,1天达高峰,部分表达于神经元,以后逐渐降低,到第7天基本恢复到正常水平,14天后仍可见到少量阳性反应极弱的BDNF阳性细胞;在6 h,1、4天3个时间点上,模型组与正常对照组及假手术组比较差异有显著性(P<0.05);而BDNF mRNA主要表达于神经元,1天后达高峰,7天后两者的表达水平继续下降但仍高于正常,14天后降至基础水平,在6 h,1、4天3个时间点上,模型组与正常对照组及假手术组比较差异有显著性(P<0.01)。结论脑出血后BDNF蛋白及mRNA的表达呈时段性增高。     

血浆白介素-37水平与冠状动脉病变程度的相关性研究

目的 探讨急性冠状动脉综合征(acute cornary syndrome,ACS)患者血浆白介素-37(interleukin-37,IL-37)水平与冠状动脉病变程度的关系.方法 选取2016年1-12月因胸闷、胸痛等症状就诊于河北医科大学第二医院并行冠状动脉造影的患者作为研究对象,依据患者的症状、心电图、心肌酶、...     

S100A2基因及其蛋白在食管癌中的表达及其临床意义

目的:观察S100A2 mRNA及其蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与食管癌临床病理特征之间的关系,并探讨其在食管癌发生、发展中的作用及临床应用价值.方法:收集40例手术切除的食管鳞状细胞癌标本,同时取40例手术切缘食管正常黏膜组织.应用免疫组织化学S-P法检测其中S100A2蛋白的表达,原位分子杂交技术检测S100A2mRNA的表达.结果:S100A2 mRNA及S100A2蛋白在食管鳞状细胞癌组织中阳性表达率均明显低于正常食管黏膜(77.5% vs 100%,72.5% vs 100%,均P<0.01); 其中高、中、低分化三组间差异均有显著性(均P<0.05),并且高、中分化组S100A2 mRNA的阳性表达率均明显高于低分化组(分别为93.3%vs 85.7%,86.7%vs 85.7%,均P<0.05);无淋巴结转移组S100A2 mRNA阳性表达率均明显高于有淋巴结转移组(分别为92%vs 53.3%,92%vs 40%,均P<0.01).食管鳞状细胞癌组织中S100A2 mRNA和S100A2蛋白的表达呈明显正相关(r=0.607,P<0.001).结论:S100A2在食管癌的发生发展中具有重要作用,并可能作为判断食管癌生物学行为的重要参考指标.     

慢性乙型肝炎患者高迁移率族蛋白1mRNA的表达及其临床意义

目的:通过检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)高迁移率族蛋白1(HMGB1) mRNA的表达情况,研究HMGB1在乙型肝炎中的临床意义．方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 对54例慢性乙型肝炎患者和10例健康对照者PBMCs HMGB1 mRNA的表达进行检测, 同时应用ELISA法检测外周血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)和内毒素(LPS)水平,比较各组HMGB1 mRNA表达水平的差异及其与 TNF-α、LPS、总胆红素(TBIL)、凝血酶原活动度(PTA)的关系．结果:PBMCs HMGB1 mRNA的表达水平在慢性重型肝炎组分别高于慢性肝炎组(0．89± 0．06 vs 0．70±0．10,P<0．01)和正常对照组 (0．89±0．06 vs 0．58±0．08,P<0．01),慢性肝炎组高于正常对照组(0．70±0．10 vs 0．58±0．08． P<0．01)．在23例慢性重型肝炎患者中,11例未恢复患者PBMCs HMGB1 mRNA表达水平明显高于12例恢复的患者(0．93±0．04 vs 0．85± 0．05,P<0．01)．其中12例已恢复的慢性重型肝炎患者,患者恢复期PBMCs HMGB1 mRNA 的表达水平较发病期明显下降(0．72±0．07 vs 0．85±0．05,P<0．01)．HMGB1 mRNA表达水平与外周血浆LPS、TNF-α及TBIL均呈显著正相关(r=0．74,0．64,0．71,均P<0．01),与PTA呈负相关(r=-0．82．P<0．01)．结论:HMGB1在乙型肝炎发病过程中可能起重要作用,HMGB1 mRNA的表达水平高低与病情轻重密切相关．