白花蛇舌草核苷类化学成分分离

目的:研究白花蛇舌草的化学成分。方法:药材采用水提取,提取液用大孔吸附树脂,硅胶,小孔树脂凝胶(MCI),羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex)柱色谱及半制备HPLC进行分离,并通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从白花蛇舌草中分离得6个化合物,分别鉴定为胸腺嘧啶-2'-脱氧核苷(2'-deoxythymidine,1),2'-O-甲基肌苷(2'-O-methylinosine,2),肌苷(inosine,3),尿苷(uridine,4),鸟苷(guanosine,5),β-腺苷(β-adenosine,6)。结论:6个化合物均为首次从该属植物中分离得到。     

柱前衍生化HPLC分析白花蛇舌草多糖中单糖组成

目的:采用微波提取法提取不同产地白花蛇舌草水溶性多糖,并对多糖的含量及组成进行研究.方法:以苯酚-硫酸法测定总糖含量,柱前衍生化高效液相色谱法鉴别和测定其多糖的单糖组成.结果:不同产地药材中多糖含量以广东最高,白花蛇舌草多糖是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及甘露糖组成的杂多糖.结论:柱前衍生化高效液相色谱法分析白花蛇舌草多糖中单糖组成方法简便,快速,准确.     

白花蛇舌草多糖提取的工艺优化及抗氧化活性研究

目的:优选白花蛇舌草的水提醇沉多糖提取工艺条件。方法:以白花蛇舌草多糖含量为指标,蒽酮比色法测定指标成分含量,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察料液比、超声提取时间、重复提取次数和乙醇浓度对白花蛇舌草多糖含量的影响,优化其提取工艺。并用DPPH自由基清除率法对其抗氧化活性进行测定。结果:白花蛇舌草多糖最佳提取的工艺条件为料液比1:14,提取时间30~40 min,重复提取次数3次,提取乙醇浓度60%。自由基清除实验显示,白花蛇舌草多糖具有浓度相关的自由基清除能力和抗氧化能力。结论:优选的水提醇沉提取工艺稳定可行,所提取白花蛇舌草多糖具有较强的自由基清除效果,是一种极具开发潜力的优良天然抗氧化剂。     

白花蛇舌草总多糖的分离纯化、结构鉴定及初步免疫活性分析

目的:分离纯化白花蛇舌草总多糖,研究其对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫增强活性。方法:采用超滤技术分离纯化白花蛇舌草总多糖,高效凝胶渗透色谱-示差检测器方法测定相对分子质量,柱前衍生化HPLC分析其单糖组成;采用环磷酰胺致免疫低下小鼠碳粒廓清试验研究其免疫活性。结果:从白花蛇舌草中分离得到1个单一多糖组分ODP-1,其相对分子质量20.88 k Da,单糖组成为甘露糖-鼠李糖-半乳糖醛酸-葡萄糖-半乳糖-阿拉伯糖,摩尔比0.005∶0.033∶0.575∶1.000∶0.144∶0.143;免疫活性试验结果表明,ODP-1可升高环磷酰胺致免疫低下小鼠廓清指数、吞噬指数、胸腺指数和脾指数。结论:白花蛇舌草多糖ODP-1为均一多糖,具有免疫增强活性。     

正交试验法优选复方白花蛇舌草胶囊水提工艺

目的:优选复方白花蛇舌草胶囊的水提工艺。方法:采用L9(34)正交试验,考察了加水量、提取时间和提取次数对复方白花蛇舌草胶囊总黄酮含量和浸膏得率的影响,优选复方白花蛇舌草胶囊的最佳水提工艺。结果:最佳水提工艺为:12倍加水量提取3次,每次1.5 h。结论:所确定的优化工艺稳定可行,可为复方白花蛇舌草胶囊的制剂开发提供依据。     

HPLC测定白花蛇舌草配方颗粒中槲皮素和山奈素含量

目的:建立测定白花蛇舌草配方颗粒中槲皮素和山奈素含量的HPLC方法。方法:采用正交试验优化白花蛇舌草配方颗粒的提取工艺,用HPLC测定白花蛇舌配方颗粒中槲皮素和山奈素的含量。色谱柱为Hypersil ODS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2%磷酸(45∶55),检测波长360 nm,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃。结果:槲皮素在0.09～0.72μg线性关系良好(r=0.999 9),山奈素在0.034 3～0.274 4μg线性关系良好(r=0.999 9),槲皮素、山奈素的平均加样回收率分别为100.80%(RSD 1.79%),101.75%(RSD 1.76%)。结论:该方法简便、快速、重复性好,可作为白花蛇舌草配方颗粒中槲皮素和山奈素的含量测定。     

响应面法优化白花蛇舌草中总黄酮的提取工艺

目的优化白花蛇舌草中总黄酮的提取工艺。方法在单因素试验基础上,以总黄酮为指标,根据Box-Benhnken中心组合设计原理,利用响应面分析法考察料液比、提取浓度、提取时间对白花蛇舌草总黄酮的影响。结果白花蛇舌草中总黄酮提取最佳工艺条件为乙醇浓度90%、料液比1:22、提取时间90min。结论通过响应面法优选的白花蛇舌草总黄酮提取工艺合理可行,可为该药材进一步研究提供实验依据。     

白花蛇舌草药材的HPLC指纹图谱研究

目的:建立白花蛇舌草药材HPLC指纹图谱,结合化学计量学手段,对多批次药材进行质量控制。方法:采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(各含0.1‰乙酸)为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长238 nm,柱温30℃;建立白花蛇舌草药材HPLC指纹图谱,通过比对化学分离对照品的保留时间,对主要特征峰进行化学指认;对22批药材进行相似度评价,并进行主成分分析和聚类分析。结果:建立了专属性、精密度、重现性和稳定性均较好的白花蛇舌草药材HPLC指纹图谱;11个特征峰得到明确化学指认;17批白花蛇舌草指纹图谱相似度值明显高于5批伪品;主成分分析结果显示,17批白花蛇舌草密集分布在一个区域,而5批伪品离散分布在此区域外;对22批药材进行聚类分析,17批白花蛇舌草聚为一类,5批伪品均未与其聚为一类;进一步运用聚类分析对17批白花蛇舌草进行质量评价,总共可聚为4类。结论:将HPLC指纹图谱与化学计量学手段相结合,可对白花蛇舌草进行真伪鉴别和质量评价,可为提高其整体质量控制方法提供参考。     

白花蛇舌草-半枝莲药对提取物抑菌活性部位研究

目的 通过测定白花蛇舌草-半枝莲药对醋酸乙酯/95%乙醇(1∶1)提取上清液F0、析出浸膏F1、析出浸膏经AB-8大孔树脂富集后组分F2及F2经聚酰胺分离得到的各组分的抑菌活性,寻找药对提取物抑菌活性的活性部位或活性成分.方法 采用一剂量法和二倍稀释法测定各提取对5种微生物(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、毛霉、酵母菌)的抑菌活性.结果 与结论F0抑制金黄色葡萄球菌活性最强;F1没有抑菌活性;F1经过大孔树脂富集后组分F2抑菌活性得到显著增强,其抑制枯草芽孢杆菌活性强于F0,抑菌效价值达8.37μg·ml-1;F2经聚酰胺分离得到的F2-10组分是抑制枯草芽孢杆菌的活性部位;各提取物对霉菌和酵母菌均无抑制活性.     

江苏产白花蛇舌草HPLC指纹图谱的研究

目的:建立江苏产白花蛇舌草HPLC指纹图谱.方法:采用Kramasil C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速1ml/min,检测波长为254nm,以芦丁为参照物,建立白花蛇舌草HPLC指纹图谱.结果:共标出白花蛇舌草药材10个共有峰.各批次白花蛇舌草的指纹图谱共有峰的相对保留时间基本一致,但其相对峰面积存在一定的差异.结论:本实验建立的白花蛇舌草指纹图谱重现性好,精密度高,方法稳定,可以用于白花蛇舌草药材的真伪鉴别.     

应用位点特异性引物鉴定白花蛇舌草

目的:建立一种简便实用的白花蛇舌草药材的DNA分子鉴定方法.方法:收集目前市场上出现的白花蛇舌草及伪品共9种,分别提取总DNA,扩增rDNA ITS-2区序列,对比所有样品的该段核苷酸序列,并设计能专一性鉴别白花蛇舌草的位点特异性引物.结果:白花蛇舌草及其混淆品在ITS-2区的序列有显著差异.用位点特异性引物对所有样品DNA进行PCR扩增,只有白花蛇舌草有明显的约392 bp扩增产物,而其它8种植物在同等条件下无阳性产物.结论:所设计的鉴别引物对白花蛇舌草有高度的特异性.     

GC-MS结合保留指数分析白花蛇舌草挥发性成分

目的:分析白花蛇舌草中的挥发性成分.方法:采用水蒸气蒸馏法提取白花蛇舌草全草的挥发性成分,GC-MS结合保留指数进行分析鉴定.结果:采用GC-MS分析,检出55个组分;MS结合保留指数定性,鉴定出其中29个成分.结论:该方法分析白花蛇舌草中挥发性成分,更准确、简单、快速并节省药材.     

白花蛇舌草多糖的抗氧化活性研究

目的:评价白花蛇舌草多糖的体外抗氧化能力。方法:以热水回流提取法(料水比1∶31.26,84.71℃下提取2.07h,提取2次)从白花蛇舌草(HDW)提取的多糖为材料,通过1,1-二苯基-2苦肼基自由基(DPPH)清除率、总的抗氧化活性和还原能力测定等体外抗氧化试验来评价白花蛇舌草多糖的体外抗氧化能力。结果:白花蛇舌草多糖清除DPPH自由基、总的抗氧化活性和还原能力均随多糖浓度的增加而上升;1mg/mL的多糖对DPPH自由基的清除率高达82.66%;1mg/mL多糖的总的抗氧化活性在695nm下吸光值为1.641;1mg/mL多糖的还原能力在700nm下吸光值为0.773。结论:白花蛇舌草多糖有较强的抗氧化能力,对体外自由基有较好的清除作用。     

白花蛇舌草中总三萜酸的提取纯化工艺

目的: 优选白花蛇舌草中总三萜酸的提取纯化工艺.方法:以总三萜酸提取率为指标,利用正交实验法考察最佳提取工艺;以静态吸附和解析实验筛选树脂型号,考察动态吸附与解析最佳条件.结果:最佳提取工艺为: 70%乙醇10倍量回流提取1.5 h。AB-8型大孔树脂最佳纯化工艺为上样流速2 BV.H-1,上样液pH值5,上样浓度0.25 mg.mL-1,洗脱剂pH值7,洗脱乙醇浓度80％,洗脱速度2BV.H-1。结论：该工艺操作简单、稳定可行,重复性好,适合白花蛇舌草总三萜酸的提取纯化。     

白花蛇舌草总黄酮大孔树脂纯化工艺及其体内抑瘤作用的研究

目的:优化筛选大孔树脂富集纯化白花蛇舌草总黄酮的工艺条件,并测定其体内抗肿瘤的作用.方法:采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,以吸附率、解析率为指标,对5种不同性能的树脂D-101、AB-8、NKA-9、HDP-826及聚酰胺进行筛选,结合单因素试验考察大孔树脂纯化总黄酮的工艺参数;建立MFC荷瘤小鼠模型,随机将其分为模...     

肾康胶囊的质量控制研究及工艺优化

目的:建立肾康胶囊的质量控制方法和确定最佳提取工艺。方法:根据处方组成,采用薄层色谱法对白花蛇舌草、穿山龙、半枝莲、青风藤、莪术、龙葵进行定性鉴别,HPLC法对君药白花蛇舌草中齐墩果酸、穿山龙中薯蓣皂苷元,臣药丹参中丹参酮Ⅱ_A的含量测定。结果:白花蛇舌草、穿山龙、半枝莲、青风藤、莪术、龙葵定性鉴别分离度好,专属性强。丹参酮Ⅱ_A平均加样回收率为93.2%,RSD为2.718%,齐墩果酸平均加样回收率为99.8%,RSD为1.882%,薯蓣皂苷元平均加样回收率为101.9%,RSD为1.98%。最佳提取工艺为提取时间3 h,液料比10,提取次数2。结论:该方法简便,可靠,准确,可用于肾康胶囊的质量控制。     

HPLC测定白花蛇舌草不同采收期及不同部位中异高山黄芩素含量

目的:建立高效液相色谱测定不同采收期白花蛇舌草茎、叶中异高山黄芩素含量的方法。方法:采用KromasilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸(44∶56),检测波长280 nm,柱温35℃。结果:异高山黄芩素进样量在0.145~1.595μg线性关系良好(r=1)。异高山黄芩素的平均加样回收率为99.97%,RSD 0.95%。8~9月份采收的白花蛇舌草中异高山黄芩素含量最高,叶中含量是茎中含量的3~4倍。结论:该测定方法简便、准确、可靠,可用于白花蛇舌草的质量控制,并为白花蛇舌草合理采收提供理论依据。     

白花蛇舌草抗乙肝病毒化合物体外筛选

目的 找出白花蛇舌草中抗乙肝病毒(RBV)的有效部位及活性成分.方法 选取白花蛇舌草有效部位及分离单体进行抗乙肝病毒体外活性测试.结果 从白花蛇舌草全草的95％乙醇提取物中,分离提取得到6个化合物;白花蛇舌草乙酸乙酯提取物在半数毒性浓度下对乙肝病毒表面抗原(HbsAg)和乙型肝炎e抗原(HbeAg)的50％抑制浓度(IC50)分别为236.4μg/ml和396.2μg/ml,治疗指数(TI)分别为3.40和2.03.结论 乙酸乙酯提取物属于低毒有效部位,其抗病毒机制值得进一步研究与开发,其余样品的治疗指数偏低或者毒性过强.     

不同产地白花蛇舌草挥发性成分初步研究

目的通过分析不同产地白花蛇舌草挥发油的成分,了解不同产地药材挥发性成分的差别,为白花蛇舌草制定科学的质量标准以及合理开发利用提供初步实验依据.方法采用水蒸气蒸馏法提取白花蛇舌草挥发油,测定其挥发油出油率,并采用GC-MS法对挥发油中化学成分进行鉴定.结果不同产地白花蛇舌草挥发油出油率为0.25%～0.30%;分别检出24～28个化学成分,其中广东产白花蛇舌草含主要成分16个,江西产白花蛇舌草17个,广西产白花蛇舌草14个.结论广东、江西、广西白花蛇舌草挥发油出油率基本相同,但化学成分有所差异;挥发油成分以脂肪酸及脂肪酸酯类为主.     

金银花叶中木犀草素的分离与鉴定

目的 建立一种可以从金银花叶中分离出木犀草素的方法.方法 采用超声提取,石油醚回流脱色、大孔树脂柱和聚酰胺柱分离相结合的方法,通过薄层色谱、紫外光谱、红外光谱、高效液相色谱进行鉴定,最终得到木犀草素产品.结果 此产品纯度最高可达81.6%,得率为28.9 μg·g-1.结论 建立了从金银花叶中分离木犀草素的新工艺.