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1.
目的分析SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-132和miR-212的表达水平及临床意义。方法提取PBMC中的总RNA,运用茎环逆转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测24例健康人及48例SLE患者PBMC中miR-132和miR-212的相对表达水平,分析其与临床检验指标的相关性。结果 SLE患者中miR-132相对表达量为1.72±0.071,与健康人对照组0.99±0.037比较,差异有统计学意义(t=-6.881,P=0.000)。健康人和SLE患者miR-212相对表达水平分别是0.99±0.020和1.03(0.982,1.048),差异未见统计学意义(Z=1.302,P=0.197)。相关性分析结果显示,SLE患者中miR-132的表达量与抗双链DNA(dsDNA)抗体以及SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(r分别为0.740和0.526,P均0.05);而miR-212的表达量与抗dsDNA抗体(r=0.106,P=0.474)和SLEDAI(r=0.005,P=0.973)等临床指标无相关性。结论 miR-132在SLE患者PBMC中的表达水平升高,可能参与SLE的致病过程。 相似文献
2.
《现代检验医学杂志》2017,(5)
目的探究程序性细胞死亡配体1(PD-L1)在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达情况及意义。方法收集2013年2月~2015年12月于长海医院确诊的23例PBC患者和23例健康对照者外周血,用密度梯度离心法分离出PBMC后进行培养,以实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测PBMC中PD-L1的mRNA表达状况,以酶联免疫吸附反应(ELISA)法检测培养液中TNF-α,TGF-β,IL-23和IL-17等细胞因子的表达量,两组之间的变量比较采用两独立样本t检验,以Pearson相关系数表示两变量之间的关系。结果实验组与对照组PD-L1的mRNA表达水平为0.23±0.08 vs 1.27±0.40(t=12.23,P0.000 1),差异具有统计学意义。Pearson相关性分析显示PD-L1与IL-23成负相关(r=-0.531,P=0.009),差异具有统计学意义。结论 PD-L1可能参与了PBC疾病形成过程,是该病预测和治疗潜在的生物标志物。 相似文献
3.
目的研究长链非编码RNA(lncRNA)心肌梗死转录本(MIAT)在胃癌患者外周血白细胞分化抗原(CD)4+T细胞中的表达变化及临床应用价值。方法收集江苏省泰州市人民医院2019年1月至2021年4月就诊的124例胃癌患者, 90例胃良性疾病患者和80名健康对照者的外周血CD4+T细胞。分别应用实时荧光定量PCR和染色质免疫共沉淀联合定量聚合酶链反应检测MIAT表达量和RNA 6-甲基腺嘌呤(m6A)与MIAT基因启动子结合活性。用Spearman检验分析MIAT与临床病理特征、调节性T细胞(Treg)水平之间的相关性, 用受试者工作特征(ROC)曲线评价CD4+T细胞中MIAT对胃癌的诊断效能。结果胃癌患者、胃良性疾病患者和健康对照者外周血CD4+T细胞中MIAT的相对表达量分别为2.849(2.131, 4.062)、1.511(0.916, 1.855)和0.963(0.729, 1.432), 3组间差异有统计学意义(H=158.25, P<0.001)。胃癌患者MIAT的表达水平显著高于胃良性疾病患者以及健康对照组, 差异有统计学意义(Z=100.63, 145.14,... 相似文献
4.
目的检测肺结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)中环状RNA circRNF10的表达水平,探讨其在肺结核病诊断中的应用价值。方法采用实时荧光定量PCR法对2016年3月至2017年3月江西省胸科医院收治的90例未经治疗的活动性肺结核患者、40例肺炎患者、40例肺癌患者及70例健康体检者PBMC中circRNF10的表达水平进行检测。应用受试者工作特征曲线(ROC)曲线分析circRNF10诊断肺结核的敏感度和特异度。结果肺结核患者PBMC中circRNF10表达水平(2.11±1.13)显著高于健康对照组(1.00±0.38)、肺炎组(1.14±0.57)和肺癌组(0.93±0.31),差异有统计学意义(F=38.15,P0.01)。肺结核患中肺部空洞组circRNF10水平显著高于无空洞组(t=7.02,P0.01);肺部病灶范围≥2个肺野组circRNF10水平显著高于2个肺野组(t=4.68,P0.01)。与抗结核治疗前(2.31±0.72)相比,肺结核患者circRNF10表达水平在抗结核治疗后3月(1.27±0.41)(t=5.62,P0.01)、6月(0.94±0.38)(t=7.54,P0.01)均有显著降低。ROC曲线分析显示,circRNF10在鉴别肺结核与健康对照、肺炎患者及肺癌患者的曲线下面积(AUC)分别为0.837、0.782、0.861。结论 PBMC中circRNF10有望作为肺结核诊断和疗效监测的潜在生物标志物。 相似文献
5.
《临床与病理杂志》2014,(4)
目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和miR-125b在新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)患儿和正常新生儿血液中表达水平及相关性。方法:收集20例正常新生儿和20例HIE患儿血液标本,分离血浆和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),利用real-time PCR检测PBMC中miR-125b表达,ELISA方法检测血浆中VEGF含量。结果:与正常对照组相比,HIE患儿PBMC中miR-125b表达显著降低(P=0.00002),而血浆中VEGF水平显著升高(P=6.26×10–8);同时在正常组中,miR-125b表达与VEGF水平无相关性(r=0.016,P=0.946,n=20),但在HIE组(r=–0.505,P=0.023,n=20)二者却呈显著负相关。结论:新生儿脑缺血缺氧时可能通过降低miR-125b表达从而升高VEGF表达。 相似文献
6.
目的探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)和IL-21在免疫性血小板减少症(ITP)中的作用。方法采集15例ITP患者及20例健康对照者外周血,用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR5+CD4+Tfh细胞的百分率,ELISA法检测血清IL-21水平;用实时荧光定量PCR检测PBMC中IL-21 mRNA的表达。结果 ITP组PBMC中CXCR5+CD4+Tfh细胞比例(17.55±1.015)%显著高于健康人对照组(10.19±0.343)%,差异有统计学意义(t=7.657,P0.01);ITP组血清中IL-21水平(100.7±3.71)pg/mL显著高于健康人对照组(64.6±0.81)pg/mL,差异有统计学意义(t=10.84,P0.01),且两者之间存在明显相关性(r=0.689 3,P0.01)。ITP患者IL-21 mRNA的相对表达量4.319±0.767明显高于健康人对照组1.125±0.052,差异有统计学意义(t=4.813,P0.01)。结论 ITP患者外周血Tfh细胞比例、IL-21水平及IL-21 mRNA表达均增高,可能在ITP的发病机制中发挥重要作用。 相似文献
7.
目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的表达水平,及与病情活动度的关系。方法选取40例活动期RA患者及40例同期健康体检人群,分别设为RA组和HC组。实时荧光定量PCR法检测PPAR-γmRNA的表达水平,分析其与病情活动度的关系。结果 RA组患者PPAR-γmRNA表达水平高于HC组,差异有统计学意义(P0.05)。以DAS28评分为5.1为界分组,DAS285.1患者(26例)PBMC中PPAR-γmRNA的表达高于DAS28≥5.1患者(14例),差异有统计学意义(P0.05)。RA组患者PBMC中PPAR-γmRNA的表达与DAS28-CRP评分呈负相关(r=-0.467,P0.05)。结论 RA患者疾病活动度越低,PPAR-γ越高表达,提示PPAR-γ的表达可能是反映RA疾病活动度的一个有用指标。 相似文献
8.
目的检测重症肌无力患者外周血单个核细胞(PBMC)中锌指样转录因子4(KLF4)、孤儿核受体γt(RORγt)、microRNA-206的表达水平,探讨它们在重症肌无力患者发病中的作用。方法采集重症肌无力患者及健康对照者清晨空腹外周血标本,梯度离心得到人PBMC。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中KLF4、RORγt mRNA、microRNA-206的相对表达量。结果重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA为0.594±0.181,健康对照者为0.089±0.025;重症肌无力患者PBMC中RORγt mRNA表达水平为0.570±0.266,健康对照者为0.067±0.016,重症肌无力患者均显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。重症肌无力患者PBMC中microRNA-206表达水平为0.053±0.018,健康对照者为0.134±0.056,重症肌无力患者显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。重症肌无力患者PBMC中KLF4、RORγt相对表达量与microRNA-206表达水平均呈负相关(r=-0.675,P0.05,r=-0.806,P0.05)。结论重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA、RORγtmRNA的表达水平增高及microRNA-206表达水平下降,和疾病的发生和发展有密切的关系。 相似文献
9.
目的检测支气管哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-9mRNA水平,探讨IL-9在支气管哮喘发生、发展中的意义。方法收集支气管哮喘患者和健康对照者外周血标本,分离PBMC,经佛波酯和离子霉素刺激活化后提取总RNA并逆转录成cDNA。采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测IL-9mRNA的表达水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中总IgE浓度。结果建立人IL-9的SYBRGreenⅠ检测方法。支气管哮喘急性发作期患者PBMC中IL-9mRNA水平显著高于健康对照组(P0.05),而临床缓解组和健康对照组间差异无统计学意义(P0.05)。支气管哮喘急性发作期患者PBMC中IL-9mRNA水平与总IgE浓度呈正相关。结论支气管哮喘患者PBMC中IL-9mRNA水平升高,与疾病的发生、发展关系密切。 相似文献
10.
目的探讨micorRNA-335(miR-335)表达及甲基化水平在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的应用。方法用荧光定量PCR检测43例MM患者和30例体检健康者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-335的表达水平,用甲基化特异性PCR(MSP)检测miR-335启动子区甲基化水平,分析其与各临床指标的相关性。结果 43例MM患者PBMC中miR-335的表达水平为34.8(15.3,84.9),显著低于健康对照组的269.4(63.3,780.2),Z=4.384,P0.05。11例MM患者(25.6%,11/43)呈现完全甲基化,其余患者均为部分甲基化,而23例体检健康者(76.7%)呈现完全非甲基化(Uc=6.62,P0.05)。初诊MM患者miR-335表达量高于复发/进展期患者(Z=2.309,P0.05),但复发/进展期患者中miR-335启动子区甲基化程度(75%)高于初诊患者(25%),T=24.5,P0.05。MM患者miR-335表达水平与轻链λ浓度呈相关性(r=0.51,P0.05)。结论 MM患者miR-335表达水平和甲基化可作为MM潜在的辅助诊断指标。 相似文献
11.
目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中分叉头框(forkhead box,FOX)转录因子-1 mRNA表达水平的变化,了解它在T2DM发病中的作用。方法采用RT-PCR法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法对62例T2DM患者和40例健康人检测PBMC中FOX01 mRNA表达水平。结果T2DM患者PBMC中FOX01 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.05)。结论T2DM患者的FOX01 mRNA表达较健康对照组表达增加。 相似文献
12.
目的检测类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞亚型分布和功能分子表达水平, 分析上述指标与RA发病相关性。方法收集2020年6月至2021年12月在同济大学附属东方医院就诊或体检的62例RA患者(RA组)、52名健康对照者(HC组)和12例疾病对照患者(疾病对照组), 采集外周血, 密度梯度离心法分离单个核细胞, 单核细胞可分为经典型(CM)、中间型(IM)和非经典型(NCM), 流式细胞术分析单核细胞亚型分布、人白细胞DR抗原(HLA-DR)的表达以及胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。采用Kruskal-WallisH检验、χ2检验、Mann-WhitneyU检验、Wilcoxon配对符号秩检验、Spearman相关系数检验和Logistic回归分析进行统计学分析。采用ROC曲线分析IM比例对RA的诊断价值。结果 RA组[0.40(0.40, 0.50), 7.60%(5.97%, 8.53%)]和疾病对照组[0.40(0.40, 0.68), 8.20%(5.85%, 10.28%)]的单核细胞绝对值和占白细胞百分比均高于HC组[0.30(0.30, 0.40), 5.8... 相似文献
13.
目的探讨肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中长链非编码RNA(lncRNA)核富含丰富的转录本1(NEAT1)的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测65例肺结核病患者(结核组)及30例健康体检者(健康对照组)PBMC中lncRNA NEAT1的表达量,分析其与结核病发生发展以及转归的相关性。结果 RT-PCR检测结果显示lncRNA NEAT1在肺结核患者PBMC中的相对表达水平是健康对照组的4.90±0.72倍,差异有统计学意义(P0.01)。LncRNA NEAT1在初治和复治病例中表达差异无统计学意义(P0.05);lncRNA NEAT1在肺部有无空洞及空洞数量分组之间表达差异有统计学意义(P0.05),即lncRNA NEAT1随空洞累及范围的增加而升高。肺结核患者PBMC中lncRNA NEAT1表达量随着治疗时间逐渐下降,恢复至正常水平。结论肺结核患者PBMC中lncRNA NEAT1表达升高,且与肺结核的发展和转归有关,监测PBMC中lncRNA NEAT1表达或可以评估结核病患者预后情况。 相似文献
14.
摘要:目的:探讨免疫球蛋白样转录子3(ILT3)在胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)和CD3+CD8lowT淋巴细胞亚群中的表达,并分析其表达与胃癌生物学行为和临床病理学特征的关系。 方法:选择80例胃癌患者及40例健康人对照者为研究对象,用实时荧光定量PCR检测PBMC的ILT3 mRNA的表达,流式细胞术(FACS)检测外周血CD3+CD8lowT淋巴细胞亚群中ILT3的表达,并结合临床病理特征进行分析。 结果:胃癌患者与健康人对照者PBMC的ILT3 mRNA相对表达量分别为8.465±0.674和6.234±0.556,差异有统计学意义(t=2.160,P<0.05);低分化和中、高分化胃癌患者PBMC的ILT3 mRNA相对表达量分别为8.217±0.433(n=66)和3.656±0.195(n=14),差异有统计学意义(t=4.802,P<0.01);肿瘤未侵及深肌层与侵及深肌层比较,PBMC的ILT3 mRNA相对表达量分别为3.495±0.243(n=24)和7.316±0.404(n=56),差异有统计学意义(t=5.971,P<0.01)。胃癌患者和健康人对照者CD3+CD8lowT淋巴细胞亚群ILT3阳性率为(75.53±2.20)%和(12.83±0.94)%,差异有统计学意义(t=19.67,P<0.01)。 结论:胃癌患者PBMC的ILT3 mRNA表达与肿瘤细胞分化和浸润程度有关。ILT3在胃癌患者CD3+CD8lowT细胞亚群的表达增强,提示其可能参与肿瘤的免疫逃逸。 相似文献
15.
目的:分析类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者自身反应性B细胞及与之功能相关的自身抗体和信号分子的表达。方法:采用流式细胞仪分析22例RA患者及10例正常对照者的外周血自身反应性B细胞比率及RA和骨关节炎(OA)患者(n=10)外周血单个核细胞(PBMC)Th2的表达。用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测RA患者及正常对照者PBMC细胞外信号调节激酶(ERK)、黏着斑激酶(FAK)基因的相对表达量,并采用蛋白印迹法检测NF-κB信号通路的磷酸化格局;用ELISA法检测和分析RA及OA患者血清及关节滑膜液抗Ⅱ型胶原抗体水平,同时检测RA患者血清及关节滑膜液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达状况。结果:相对于正常对照者,RA患者外周血中存在高表达CD19+的自身反应性B细胞;同时其PBMC中ERK基因相对表达量提高、NF-κB信号通路磷酸化活跃。相对于OA患者,RA患者关节滑膜液中抗Ⅱ型胶原抗体水平显著升高。RA患者关节滑膜液中MMP-3及TIMP-1等水平较其自身血清中升高。结论:RA患者自身反应性B细胞及相关分子的异常表达可能是介导RA发病的又一重要因素。 相似文献
16.
目的 观察老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者痰培养结果与外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-125b、miR-133、miR-146a的相关性。方法 回顾性选取2021年1月至12月在江苏东南大学附属南京同仁医院收治的79例老年AECOPD患者为AECOPD组,根据痰培养结果分为阳性组(n=39)和阴性组(n=40);另选取同期在该院收治的43例老年COPD稳定期患者作为COPD稳定组。检测PBMC中miR-125b、miR-133、miR-146a相对表达量与血清中炎症相关指标[降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]水平,分析各组间指标差异,并采用Spearman相关性分析AECOPD患者PBMC中miR-125b、miR-133、miR-146a与血清炎症指标的相关性。结果 AECOPD组患者PBMC中miR-125b相对表达量、血清PCT、TNF-α、IL-6水平为0.87、0.38 ng/mL、41.98μg/L、250.01 pg/mL,高于COPD稳定组(0.49、0.05 ng/mL、21.16μg/... 相似文献
17.
目的探讨产妇外周血和胎儿脐血白细胞介素28(IL-28)启动子甲基化差异及其对IL-28表达的影响。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测产妇外周血和胎儿脐血IL-28启动子甲基化水平的差异;分离外周血单核细胞(PBMC),比较DNA甲基化酶活性的差异;RT-PCR检测两者PBMC中IL-28mRNA的含量;采用ELISA法检测产妇外周血和胎儿脐血IL-28水平的差异。结果 IL-28启动子在胎儿脐血中均以甲基化形式存在,而在产妇外周血中为非甲基化形式;胎儿脐血PBMC细胞核甲基化酶活性升高(P<0.05);IL-28mRNA在产妇外周血PBMC中的表达水平高于胎儿脐血PBMC;胎儿脐血IL-28含量较产妇外周血低(P<0.01)。结论胎儿脐血细胞核内甲基化酶活性升高导致IL-28启动子高甲基化,进而引起IL-28的合成和分泌降低。 相似文献
18.
目的检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)α干扰素(IFN-α)的诱导表达及白细胞介素12(IL-12)表达,评价慢性乙肝患者PBMC的细胞免疫功能。方法poly IC体外刺激正常对照组和慢性乙肝病人PBMC,取培养上清利用病毒保护试验测定干扰素治疗前后病人PBMC表达的干扰素抗病毒生物学活性。同时在IFN-α治疗前后,用RT-PCR检测慢性乙肝患者不同干扰素应答组病人PBMC IL-12表达的变化。结果干扰素治疗前应答组病人(n=4)和无应答组病人(n=12)PBMC分泌的干扰素生物学活性显著低于正常对照组(n=10)(P<0.01)。应答组病人PBMC分泌的干扰素活性随治疗时间延长而增加,1个月时已显著高于无应答组病人(P<0.01);无应答组病人PBMC分泌的干扰素活性始终处于低水平。治疗前,应答组和无应答组病人PBMC的IL-12 mRNA水平都显著高于正常对照组(P<0.01);治疗后,应答组病人IL-12水平随治疗时间延长而降低,1个月时已显著低于无应答组病人(P<0.05),无应答组病人IL-12水平始终处于较高水平。结论慢性乙型肝炎病人的细胞免疫功能受损,PBMC不能正常表达IFN-α,但应答组病人经干扰素治疗后IFN-α表达能力逐渐恢复。慢性乙肝患者PBMC IL-12表达与肝脏炎症活动有关。慢性乙肝患者PBMC IFN-α活性检测结果也许可以作为干扰素治疗效果的预测指标。 相似文献
19.
急性弥漫性腹膜炎SIRS患者Toll样受体及炎症介质的表达变化 总被引:3,自引:0,他引:3
目的观察急性弥漫性腹膜炎并发全身炎症反应综合征(SIRS)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体(TLR)2,4mRNA及下游炎症介质的表达变化,探讨TLR与SIRS的关系。方法72例急性弥漫性腹膜炎患者分为SIRS组(45例)与非SIRS组(27例),另设40例健康志愿者为对照组。采用鲎试剂法检测血浆LPS水平,RT-PCR法检测PBMC中TLR2,4mRNA的表达,ELISA法检测血清TNF-α和IL-6的表达。结果72例急性弥漫性腹膜炎患者血浆LPS浓度、PBMC中TLR2,4mRNA及血清TNF-α和IL-6表达均显著增高,且SIRS组增高较非SIRS组有显著统计学意义(P<0.01)。结论急性弥漫性腹膜炎SIRS患者PBMC中TLR2,4基因表达显著增加,提示TLR在急性弥漫性腹膜炎SIRS的发生发展过程中发挥了重要的作用。 相似文献
20.
目的:通过检测类风湿关节炎(RA)患者在接受英夫利昔单抗治疗前后外周血中白细胞介素-17(IL-17)的基因表达水平,探讨IL-17能否在英夫利昔单抗治疗RA疗效预测中发挥作用。方法:分别提取RA患者(n=20)和健康志愿者(n=20)的外周血单核细胞(PBMC),通过real-time PCR方法测定PBMC中IL-17的基因表达水平。观察英夫利昔单抗治疗3个月后,IL-17基因表达水平与疾病活动度评分(DAS)改变的相关性,以及治疗前IL-17/TNF-α基因表达水平与治疗反应之间的关系。结果:在RA患者的PBMC中IL-17基因的表达水平明显高于健康志愿者(P<0.05)。英夫利昔单抗治疗3个月后,IL-17基因表达水平与DAS的改变无显著相关性。虽然本研究发现RA患者治疗前的IL-17/TNF-α基因表达水平比值越低,则倾向于对治疗反应越好,但两者间无显著相关性(r=-0.28,P=0.070)。结论:从本研究现有的结果来看,IL-17尚不足以对英夫利昔单抗治疗RA的疗效起到良好的预测作用,其相关关系仍需进一步研究。 相似文献