诱导型一氧化氮合酶和白介素1受体拮抗剂在骨关节炎滑膜和软骨中的表达及意义

炎症前细胞因子白介素 1(IL - 1)通过刺激软骨细胞合成诱导型一氧化氮合酶 (iNOS) ,产生一氧化氮(NO) ,增加基质降解 ,参与关节炎的炎症活动 ,而局部产生的白介素 1受体拮抗剂蛋白 (IL - 1Ra)可阻止软骨破坏。本实验旨在观察iNOS和IL - 1Ra在骨关节炎 (OA)关节滑膜和软骨中的表达及分布。我们收集了 6例OA患者的关节滑膜和软骨标本。通过免疫组化方法对iNOS、CD6 8和IL - 1Ra进行了原位检测。在 6例OA滑膜标本连续切片中 ,滑膜的衬里层细胞、炎症浸润细胞以及血管内皮细胞中均强烈表达iNOS蛋白。IL - 1Ra阳性细胞主要局限于滑膜的衬里层细胞及血管内皮细胞 ,表达强度低于iNOS表达。CD6 8阳性细胞 (检测巨噬细胞的抗体 )仅在滑膜衬里层的表层 (A型滑膜细胞 )及炎症浸润细胞中零星表达。在 6例骨关节炎软骨连续切片标本中 ,iNOS和IL - 1Ra在软骨全层及软骨下骨髓腔内均有强烈表达。结果提示 ,骨关节炎时 ,iNOS主要产生于滑膜衬里层细胞、软骨细胞以及血管内皮细胞 ,而IL - 1Ra主要产生于滑膜衬里层的巨噬样滑膜细胞和软骨细胞 ;iNOS和IL - 1Ra之间的拮抗作用可能在骨关节炎的病理机制中发挥很重要的作用。     

动态增强MRI对于鉴别血清学阴性的手早期类风湿关节炎和骨性关节炎的价值

目的 研究动态增强MRI对于鉴别血清学阴性的手早期类风湿关节炎(RA)和骨性关节炎(OA)的价值.方法 53例疑诊为手RA或OA且X线阴性患者经3～6个月随访直至明确诊断,将其中符合早期RA诊断标准且初诊时血清阴性者18例(RA组)和符合早期OA诊断标准者18例(OA组)纳入研究,另选取18名志愿者(正常对照组);均行全手MR平扫、增强扫描及单层动态增强扫描,测量病变部滑膜强化率、曲线斜率和滑膜厚度,观察RA组和OA组MRI异常征象,滑膜强化率和滑膜强化曲线斜率3组间及3组间两两比较均采用秩和检验;滑膜厚度3组间及3组间两两比较均采用方差分析;RA组与OA组的其他MR征象比较采用秩和检验.结果 RA组、OA组、正常对照组滑膜强化率分别为(100.78±61.96)%、(40.44±15.43)%和(23.56±9.14)%,RA组与OA组比较,u=3.101,P=0.002;RA组与正常对照组比较,u=4.669,P=0.000;OA组与正常对照组比较,u=3.482,P=O.000.滑膜强化曲线斜率值分别为72.50°±13.34°、45.39°±9.94°及14.56°±5.75°,RA组与OA组比较,u=8.002,P=0.000;RA组与正常对照组比较,u=17.102,P=0.000;OA组与正常对照组比较,u=9.100,P=0.000.滑膜厚度分别为(3.3±0.5)、(2.8±0.7)、(1.4±0.6)mm,RA组与OA组比较,q=2.622,P=0.011;RA组与正常对照组比较,q=9.583,P=0.000;OA组与正常对照组比较,q=6.961,P=O.000.滑膜动态强化曲线RA组呈快速上升平台型,OA组呈缓慢上升型,正常对照组呈极慢速上升型.结论 动态增强MR扫描通过滑膜强化率和滑膜厚度等量化指标可以在血清学阴性的早期阶段鉴别RA和OA.RA患者比OA患者的滑膜强化率更高,速度更快,滑膜厚度更大.多种MR征象对于鉴别RA患者与OA患者有价值.     

膝关节股骨外髁髁间侧壁软骨Ⅰ、Ⅲ型胶原和IL-1α、IL-1Ra分布的研究及其临床意义

目的 :观察分析成人股骨外髁髁间侧壁软骨组织IL - 1α、IL - 1Ra和I、Ⅲ型胶原分布特点。方法 :对 14例患者行膝前交叉韧带重建术、髁间窝成形时所取的股骨外髁髁间侧壁软骨标本进行免疫组化染色 ,观察软骨细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及IL - 1α、IL - 1Ra分布。结果 :Ⅰ型胶原见于软骨表层 ,Ⅲ型胶原分布于整个软骨表层和中间层。IL - 1α和IL - 1Ra分布一致 ,仅限于软骨表层。结论 :(1)股骨外髁髁间侧壁软骨与典型的正常负重区透明软骨不同。这可能是此区软骨的特征性表现 ,但不排除退变可能。 (2 )股骨髁间侧壁软骨作为正常软骨的移植来源 ,提供软骨细胞和骨软骨进行自体移植以修复软骨损伤时应该慎重。     

白介素1受体拮抗蛋白间接体内转基因对兔骨性关节炎的抑制作用

目的　探讨IL 1受体拮抗蛋白 (IL 1Ra)间接体内转基因对兔骨性关节炎临床表现及关节软骨破坏的抑制作用。方法　 30只新西兰大白兔(8月龄 ,雌性 ,体重 2 5～ 3 0kg)随机分成 3组 ,左膝关节部分滑膜切除 ,分离并培养滑膜成纤维细胞。用携带标记基因或IL 1Ra基因的逆转录病毒分别转染从第 2组或第 3组兔膝关节分离出来的滑膜细胞。采用兔右膝关节前交叉韧带横断术 (ACLT)建立骨关节炎模型。把自体滑膜细胞回输第 1组兔右膝关节腔内 ,把转染标记基因或IL 1Ra基因的自体滑膜细胞回输第 2组或第 3组兔右膝关节腔内。2、4周后 ,用ELISA方法检测右膝关节液中IL 1Ra水平。用膝关节临床评估级别对转IL 1Ra基因组和对照组膝关节局部疼痛刺激反应、步态改变、关节肿胀和活动范围进行评估。根据墨汁软骨表面着色和软骨组织病理改变情况对软骨破坏程度进行分级。结果　转IL 1Ra基因组 (第 3组)兔膝关节液中IL 1Ra水平明显升高 ,在基因转入关节腔后第 2周时为 2 0 6± 1 8ng/ml,第 4周时为 4 82± 0 5 2ng/ml;而 2、4周时 ,对照组(第 1、2组 )关节液中IL 1Ra水平均很低 ;转IL 1Ra基因组膝骨性关节炎的临床表现及膝关节软骨破坏程度 (大体及组织学观察 )均明显轻于对照组。结论　IL 1Ra间接体内转基因治疗能使关节     

细胞核因子κB受体活化因子配基在强直性脊柱炎的表达及意义

目的 检测细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)在强直性脊柱炎(AS)患者脊柱外关节滑膜组织中的表达．并以类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)患者和健康者外周关节滑膜组织为对照,了解RANKL表达在AS患者关节炎症病理机制中的意义。方法 应用单克隆抗体,通过免疫组织化学方法检测13例AS、16例RA、17例OA及6例健康对照关节滑膜组织中RANKL、CD68蛋白表达及分布情况,通过计算机辅助图像分析系统和半定量分析方法确定RANKL在各滑膜组织中的表达水平,分析RANKL的表达与炎性指标及关节X线分期之间的相关性。结果 AS和RA患者组滑膜组织RANKL表达水平明显升高,阳性细胞主要见于滑膜组织衬里层和滑膜软骨交界区,OA患者组和健康对照组滑膜组织中则未见阳性表达信号。AS和RA患者滑膜组织中RANKL表达水平与关节X线分期呈正相关(相关系数r分别为0．41、0．73,P值分别为0．021、0．003)。结论 RANKL在AS患者骨质破坏的病理机制中具有重要作用,其表达量的多少在一定程度上可反映AS患者骨质破坏程度,AS患者滑膜组织中RANKL表达模式与RA相似,提示AS外周关节骨质破坏的病理机制可能与RA类似。     

类风湿性关节炎滑膜细胞蛋白酪氨酸激酶的RNA表达水平分析

根据已知的PTKs的氨基酸序列保守区设计简并引物,采用3‘快速末端扩增法（3‘RACE）扩增了滑膜细胞中PTKs cDNAs的3‘末端,然后通过RNA点杂交方法分别观察了这些PTKs在类风湿性关节炎(RA）和骨性关节炎（OA）病人滑膜细胞中的表达水平。结果从RA FLS细胞中共克隆到6种已知PTKs cDNA片段,分别为血小板衍生生长因子受体A（PDGFRA）、胰岛素样生长因子－1受体（IGF－1R）、含盘状（discoidin）结构域的受体型酪氨酸激酶（DDR2）、Lyn、Janus激酶1（JAK1）和TYK2。RNA点杂交结果显示,在4例RA病人和2例OA病人的滑膜细胞中都表现为：PDGFRA、IGF－1R和DDR2在RA滑膜细胞中的表达水平高于OA滑膜细胞,其它几种激酶在两种细胞中的表达水平无明显差别,说明RA滑膜细胞至少表达PDGFR、IGF－1R、Lyn、DDR2、JAK1和TYK2等6种PTKs,其中PDGFRA、IGF－1R和DDR2可能与RA滑膜细胞的过度增殖和对软骨的侵蚀性相关。     

超声激励脉冲编码技术对膝关节疾病的诊断价值

目的探讨超声激励脉冲编码技术对类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)和骨关节炎(osteoarthritis ,OA)中膝关节病变的诊断价值。方法对5 6例类风湿性关节炎患者112个膝关节和4 1例骨关节炎82个膝关节进行了详细的二维及彩色多普勒检查,并与MRI检查结果进行比较。结果RA/OA组髌上囊或关节腔积液及髌上囊内滑膜增生的诊断结果经对比,超声与MRI无明显的差异(P >0 .0 5 ) ;对髌上囊两侧隐窝内的滑膜增生,MRI优于超声,超声为MRI的76 % ;对RA/OA组软骨Ⅰ级退变的显示,MRI明显高于超声;对软骨Ⅱ～Ⅳ级的退变,超声与MRI结果基本一致。RA组与OA组对比,RA患者以滑膜增生为主;OA患者以软骨及骨质破坏为主。结论超声激励脉冲编码技术是一项有价值的诊断技术,对RA和OA的诊断具有高度的特异性和敏感性。     

人关节滑膜细胞晚期糖基化终产物结合蛋白的表达及其调节

为探讨人关节滑膜细胞是否表达晚期糖基化终产物 (AGEs)结合蛋白 ,并研究其表达的调节因素 ,分离、培养正常人关节A型和B型滑膜细胞 ,用放射性配体 受体结合法检测滑膜细胞表面AGEs结合蛋白 ,并观测TNF α、IL 1β和AGE修饰的白蛋白 (AGE HSA)对滑膜细胞AGEs结合蛋白表达的影响。结果显示 ,滑膜细胞表面存在AGEs结合蛋白 ,A型细胞Kd =(1.2 7± 0 .19)× 10 -6M ,B型细胞Kd =(1.38± 0 .16 )× 10 -7M。TNF α、IL 1β和AGE HSA能上调滑膜细胞AGEs结合蛋白的表达。提示人类关节滑膜细胞可表达对AGEs特异的结合蛋白 ,关节固有细胞可能参与了透析相关性淀粉样变的发病过程     

骨性关节炎的联合基因治疗研究

目的:探讨白细胞介素1受体拮抗蛋白(IL-1Ra)及白细胞介素10双基因转染在关节中的表达及在骨性关节炎(OA)治疗中的作用。方法:构建PLXRN-IL-1Ra、PLXRN-IL-10逆转录病毒载体,体外转染同种异体原代滑膜细胞,将转染了外源基因的滑膜细胞注射入兔骨性关节炎膝关节腔。外源基因注射后第7天,用PBS灌洗兔膝关节,ELISA分析转基因表达;外源基因注射后第14天处死动物,ELISA及免疫组化分析转基因表达,软骨滑膜常规石蜡切片观察病理改变,并进行软骨组织学评分。结果:外源基因转移后14天表达尚很稳定,治疗基因在受体关节的滑膜衬里部位表达。只接受人IL-1Ra基因治疗的兔膝关节软骨损坏明显减轻;单纯人IL-10基因治疗膝关节也有一定效果;两种基因同时导入时,有非常明显的抑制软骨破坏和软骨基质降解的作用。结论:以逆转录病毒为载体将IL-1Ra、IL-10同时转移入早期骨关节炎关节内,有稳定的外源基因表达,且联合基因治疗效果明显优于单独转移入其中任何一种基因,提示靶向于多种炎性因素的治疗更为有效。     

膝关节类风湿关节炎与骨关节炎MRI对比研究

目的对比分析晚期膝关节类风湿关节炎(RA)和膝关节骨关节炎(OA)的MRI表现。资料与方法对2010年7月—2012年8月经我院确诊的膝关节RA病人33例(共40个膝关节)和OA病人58例(共60个膝关节)行MRI检查并分组,统计RA组和OA组半月板、关节软骨、软骨下骨、滑膜病变的发病率和发病程度,比较两组间统计学差异。结果 RA组内、外侧半月板各部位损伤程度均重于OA组(均P<0.05);RA组胫股外侧关节软骨病变程度重于OA组(股骨外侧髁和胫骨外侧平台的Z值分别为5.702和7.534,均P<0.05),两组的髌股关节及胫股内侧关节软骨病变程度的差异无统计学意义(P>0.05);RA组的胫股内、外侧关节软骨下骨病变程度重于OA组(股骨内、外侧髁的χ2值分别为6.730和23.938,胫骨内、外侧平台的χ2值分别为12.033和41.017;均P<0.05),两组的髌股关节软骨下骨病变的差异无统计学意义(P>0.05)。RA组膝关节共有97.5%(39/40个膝关节)的滑膜弥漫性增厚,其中半数(20个膝关节)有关节裸区骨质结构破坏;OA组共有21.7%(13/60个膝关节)的滑膜增厚,范围较局限,无一例关节裸区骨质结构破坏。结论膝关节RA可造成滑膜弥漫肥厚,易造成半月板弥漫破坏、关节软骨及骨质广泛受累。膝关节OA可造成滑膜局限增厚,病变易累及内侧半月板后角和体部、胫股内侧关节及髌股关节。     

内侧副韧带切断合并半月板部分切除对大鼠膝关节软骨、滑膜和细胞因子的影响

目的:观察内侧副韧带切断合并半月板部分切除对大鼠膝关节软骨、滑膜和关节液中细胞因子的影响。方法:20只SD大鼠,行内侧副韧带切断和内侧半月板部分切除术,分别在术后第1、2、3、4和5周各处死4只大鼠并取材;另备4只作为正常对照。组织学观察其关节软骨和滑膜的变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定关节液中细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达。结果:膝关节内侧副韧带切断和部分半月板切除后,大鼠关节液中IL-1β和TNF-α表达显著增高,TNF-α在术后第1周时、IL-1β在术后第2周时达到峰值,然后逐渐下降,第5周时仍显著高于正常对照水平。术后第1周,关节软骨丢失,软骨层变薄;软骨细胞减少,排列层次紊乱,有簇聚现象;蛋白多糖分泌减少,表面的软骨组织甲苯胺蓝染色失染。第2周,软骨继续退变,表面软骨纤维化,软骨下骨硬化,部分侵入软骨层,蛋白多糖进一步丢失,甲苯胺蓝染色失染严重。从第3周开始,正常的软骨细胞基本消失,呈纤维样变,软骨下骨硬化;髓腔融合、开放、纤维化,呈现晚期骨性关节炎的改变。滑膜细胞从术后第1周开始增生,炎细胞浸润;第2周滑膜炎症加重,并有血管增生;第3周滑膜已出现明显的纤维化改变。结论:内侧副韧带切断伴内侧半月板部分切除后,大鼠膝关节呈现骨性关节炎的改变,关节液中IL-1β和TNF-α表达显著增高。     

破骨细胞在强直性脊柱炎滑膜组织中的分化及其在外周关节骨质破坏病理机制中的作用

目的检测破骨细胞在强直性脊柱炎（AS）外周关节滑膜组织中的分化情况,了解破骨细胞的分化与AS患者外周关节骨质破坏病理改变的相关性。方法应用单克隆抗体,通过免疫组织化学及酶组织化学染色的方法检测13例AS、16例类风湿关节炎（RA）、17例骨关节炎（OA）及6例健康对照关节滑膜组织中CD68蛋白表达及TRAP染色阳性滑膜细胞的分布状况,并通过计算机辅助图像分析系统和半定量分析方法确定CD68分子表达水平及TRAP染色阳性细胞在各研究组滑膜组织中的差异性。结果滑膜组织中均有CD68阳性细胞,AS和RA组CD68表达水平较OA组和健康对照组显著增高（P〈0．05）,其阳性细胞主要分布于滑膜衬里层,衬里下层也见少量表达;OA和健康者滑膜中仅有少量CD68阳性细胞分布。TRAP染色阳性细胞位于滑膜组织衬里层、淋巴细胞聚集区及滑膜软骨交界区,其中AS组阳性细胞百分数显著低于RA组,OA及正常对照组阳性细胞少见。RA组阳性细胞百分数与RANKL表达水平呈正相关（r=0．442,P=0．043）。结论炎症关节滑膜组织中表达CD68分子及TRAP染色阳性滑膜细胞数量的增加为破骨细胞的分化、成熟提供了充足的细胞数量基础,破骨细胞数量和活性上调是造成强直性脊柱炎外周关节骨质破坏的重要前提。     

β受体阻滞剂普奈洛尔对大鼠脑创伤后脑组织中IL-1β和IL-1Ra的影响

目的探讨β受体阻滞剂（普奈洛尔）对大鼠脑创伤后脑组织中白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1Ra）的影响。方法选取SD大鼠72只,随机分为对照组（36只）、治疗组（36只）。采用改良的Feeney法致大鼠右顶叶脑创伤模型,分别给予生理盐水、普奈洛尔腹腔注射（40mg／kg）。每组于致伤后6、24、72小时3个时相点,取右顶叶损伤区脑组织,苏木精-伊红染色（HE染色）法观察其病理变化,免疫组织化学和免疫印迹（Western blotting）方法检测其中IL-1β和IL-1Ra的表达。结果对照组：伤后6小时即可见变性坏死神经元,且IL-1β有大量表达,24小时达高峰;IL-1Ra有极少表达并逐渐升高。治疗组：变性坏死神经元明显减少,IL-1β表达降低;而IL-1Ra6小时即有明显表达并持续至72小时;且IL-1β／IL-1Ra比值较对照组降低。两组比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论β受体阻滞剂能明显降低大鼠脑损伤区IL-1β表达、提高IL-1Ra表达,可能对减轻大鼠脑创伤后炎性损伤具有一定作用。     

Sodium magnetic resonance imaging of proteoglycan depletion in an in vivo model of osteoarthritis

RATIONALE AND OBJECTIVES: The aim of the study was to investigate the feasibility of using sodium magnetic resonance imaging (MRI) as a noninvasive quantitative technique for measuring proteoglycan (PG) content in an in vivo porcine model of osteoarthritis (OA). MATERIALS AND METHODS: Biochemical conditions similar to those of OA were created by an intra-articular injection of recombinant porcine interleukin-1beta (IL-1beta) into the knee joint of pigs (n = 6) before performing MRI. The contralateral knee joint was given a saline injection to serve as an internal control. Sodium MRI data were acquired on a 4-T clinical MR scanner and used to compute quantitative sodium and fixed charge density (FCD) maps based on a previously established methodology. In vivo FCD maps were compared with FCD maps obtained using ex vivo patellae harvested from the specimens. The tissue and joint fluid were subjected to histologic and immunohistochemical analyses as independent measurements of IL-1beta activity and PG loss. RESULTS: The average FCD of IL-1beta-treated patellae was measured to be 49% lower than that of saline-treated patellae, indicating a loss of PG content. These results were supported by histologic and immunochemical findings, most notably a reduction in staining for PG and an increase in matrix metalloproteinases in the synovial fluid. CONCLUSION: Sodium MRI can serve as a quantitative method to measure in vivo changes in PG content in an animal model of OA. The use of a noninvasive quantitative in vivo PG measurement technique such as sodium MRI on an animal model would aid greatly in efforts to monitor the efficacy of treatments for OA. Furthermore, these results indicate that early degenerative events could be detected noninvasively in vivo in humans with PG-depleting diseases such as OA.     

基质金属蛋白酶-1在创伤性骨关节炎软骨及滑膜中的表达

目的　观察基质金属蛋白酶 - 1(MMP - 1)在兔前交叉韧带切断 (ACLT)创伤性骨关节炎 (OA)软骨及滑膜中的表达和分布 ,探讨MMP - 1表达与创伤性软骨退变之间的关系。　方法大耳白兔 2 0只行单侧ACLT术 ,术后 4周及 8周各处死 10只 ,另选 10只行单侧膝关节切开术作为假手术对照 ,于术后 8周处死。于解剖显微镜下行股骨关节面软骨退变大体评分 ,用免疫组化的方法检测MMP - 1在软骨及滑膜中的表达及分布。　结果　大体评分显示ACLT组软骨退变明显重于对照组 (P <0 .0 1) ,其中 8周组软骨退变程度又明显高于 4周组 (P <0 .0 5 )。MMP - 1主要在软骨表层及中上层、滑膜衬里层表达 ,其表达量随OA进展逐渐增高 (P <0 .0 5 )。OA早期 ,MMP - 1在滑膜中的增长滞后于它在软骨中的增长。　结论　MMP - 1与创伤性OA软骨退变关系密切 ,早期软骨退变主要源于软骨自身代谢改变 ,其后滑膜亦参与软骨退变。     

IL-8基因真核表达载体的构建及其在OVCAR-3卵巢癌细胞中的表达

目的:构建白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)基因真核表达载体,瞬时转染OVCAR-3卵巢癌细胞,为进一步探讨其与肿瘤发生发展关系奠定基础.方法:采用RT-PCR法自健康志愿者外周血单个核细胞扩增IL-8基因,构建pcDNA3.1( )/IL-8重组质粒;脂质体介导将外源基因转入OVCAR-3卵巢癌细胞,半定量RT-PCR、Western印迹及ELISA法鉴定其mRNA及蛋白瞬时表达后,MTT法检测细胞转染前后生长增殖特性的改变,FCM检测细胞周期的变化.结果:重组质粒双酶切电泳结果显示,相应位置(300 bp,5 400 bp)可见2条清晰特异的DNA条带;DNA测序结果进一步显示,重组质粒中插入的基因片段全长 300 bp,编码序列与GenBank报道的基因序列相符,阅读框保持不变;RT-PCR、Western 印迹检测及ELISA检测结果显示,转染后OVCAR-3细胞IL-8 mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);MTT检测结果显示,IL-8转染细胞组转染3 d后的光密度值(D值)显著高于未转染细胞组(P<0.05);FCM分析结果显示,OVCAR-3细胞转染IL-8基因后进入S期的细胞比例显著增高,增殖指数也相应上升,与未转染及空质粒转染组细胞相比,差异显著(P<0.05).结论:IL-8基因真核表达载体成功构建并瞬时转染OVCAR-3卵巢癌细胞;IL-8可以自分泌方式促进卵巢癌OVCAR-3细胞生长增殖.     

Potent inhibition of cartilage biosynthesis by coincubation with joint capsule through an IL-1-independent pathway

The reason for the increased risk for development of osteoarthritis (OA) after acute joint trauma is not well understood, but the mechanically injured cartilage may be more susceptible to degradative mediators secreted by other tissues in the joint. To establish a model for such interactions, we coincubated bovine cartilage tissue explants together with normal joint capsule and found a profound (∼70%) reduction in cartilage proteoglycan biosynthesis. This reduction is due to release by the joint capsule of a heat-labile and non-toxic factor. Surprisingly, while cultured synovium is a canonical source of interleukin-1 (IL-1), blockade either by soluble IL-1 type II receptor (sIL-1r) or IL-1 receptor antagonist (IL-1RA) had no effect. Combined blockade of IL-1 and tumor necrosis factor α (TNF-α) also had no effect. To support the clinical relevance of the findings, we harvested joint capsule from post-mortem human knees. Human joint capsule from a normal adult knee also released a substance that caused an ∼40% decrease in cartilage proteoglycan biosynthesis. Furthermore, this inhibition was not affected by IL-1 blockade with either sIL-1r or IL-1RA. These results suggest that joint capsule tissue from a normal knee joint can release an uncharacterized cytokine that potently inhibits cartilage biosynthetic activity by an IL-1- and TNF-independent pathway.     

ALA-induced porphyrin formation and fluorescence in synovitis tissue: In-vitro and in vivo studies

The synovial inflammatory process in rheumatoid arthritis (RA) is accompanied by massive tumor-like proliferation and activation of the connective stroma. These abnormal cells actively invade and destroy the peri-articular bone and cartilage at the margins of joints where synovium and bone are attached. There is still a lack of minimally invasive synovectomy methods, which might be suitable for the smaller joints. Unfortunately, these joints are usually involved in the disease. Photodynamic therapy has been evaluated as a possible treatment modality for RA synovitis. The present study describes the differences of 5-aminolevulinic acid (5-ALA) and 5-ALA ester-induced protoporphyrin IX (PpIX) production in cell cultures obtained from patients with RA, osteoarthritis (OA) and human sarcoma cell line (HS 192.T) and in a collagen-induced arthritis model in rats. The incubation of cells with hexyl aminolevulinate (HAL) induced the same amount of fluorescence as 5-ALA and methyl aminolevulinate (MAL) at about a 100-fold lower concentration. Incubation with HAL-induced accumulation of at least twice as much porphyrins in RA- and HS 192.T-cells than 5-ALA and MAL in OA-cells. Similar levels of porphyrins were accumulated in RA and the malignant cells. In vivo, intra-articular application of 5-ALA induced a significant porphyrin accumulation in synovitis tissue as measured by in situ fluorescence spectroscopy. In contrast to our in vitro results and other reports, we could not detect enhanced fluorescence after application of up to 0.1 mg HAL.