Ciglitazone抑制人肝癌HepG2细胞增殖活性的实验研究

目的 研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂Ciglitazone对人肝癌细胞株HepG2体内、外生长的影响。并探讨其可能机制。方法 培养HepG2细胞,加入不同浓度的Ciglitazone,用生长曲线检测HepG2细胞体外生长情况,用流式细胞仪进行细胞周期分析;Western blot检测Ciglitazone对PPARγ蛋白表达的影响。建立裸鼠肝癌动物模型,随机将其分为两组:对照组(A组,10只),Ciglitazone注射组(B组,10只),B组隔天注射Ciglitazone 100 μl(100μmol/L)连续15次,对照组注射100μl生理盐水,1个月后,切除瘤灶、称瘤重、计算抑瘤率。标本用Western blot检测细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期素依赖性激酶抑制子p21蛋白的表达。结果 (1)Ciglitazone体外抑制HepG2细胞生长,并呈现明显时间和剂量依赖性。(2)经Ciglitazone处理后PPARγ蛋白表达增加。(3)经Ciglitazone治疗后,A组、B组的瘤重分别为(3.73±0.22)g、(2.60±0.35)g,抑瘤率达30％,A组的CyclinD1较B组明显增高,A组的p21蛋白表达水平较B组明显降低。结论 Ciglitazone能抑制肝癌HepG2细胞的恶性增殖(呈明显的时间及剂量依赖性),并诱导其分化,其机制与PPARγ干预细胞周期的调控有关。     

Ciglitazone对裸鼠肝癌移植瘤的血管生成的抑制作用

目的 观察过氧化物酶体增殖激活受体配体Ciglitazone在肝癌治疗中对血管生成的作用.方法 3周龄裸鼠随机分为实验组(10只)、对照组(10只).皮下接种HepG2肝癌细胞,待肿瘤生长至约0.5 cm时,实验组瘤内注射100 μmol/L的Ciglitazone 100 μl,对照组注射100μ生理盐水,隔天注射连续15次.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测第31天的肝癌组织标本内PPAR的表达,免疫组织化学法和蛋白质定量分析法(Western blot)测定癌组织中因子Ⅷ和VEGF的表达.结果 肝癌组织内存在PPAR的表达,实验组PPARγ表达增高[(1.26±0.29)比(0.32 ±0.11),P<0.05],实验组的瘤块体积小、生长慢于对照组[(207.5 ±192.9)mm3比(445.0 ±150.9)mm3;P<0.05],实验组裸鼠体内肿瘤MVD低于对照组[(11.0 ±7.6)比(18.9 ±7.0),P<0.05];实验组裸鼠体内肿瘤VEGF的表达低于对照组(17.2±3.7比47.9 ±11.3,P<0.01).结论 Ciglitazone对肝癌的生长具有抑制作用,抗肿瘤血管形成可能是其中的作用机制之一.     

敲减PPARG对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长影响的研究

目的：探讨敲减过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法：体外培养MCF-7细胞,将PPARG-si RNA和NC-si RNA转染进入MCF-7细胞。分别采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况。将转染后的细胞建立裸鼠移植瘤模型。28 d后处死裸鼠,分离瘤体并称重,计算抑瘤率。采用RT-PCR和蛋白印迹法分别检测瘤体中PPARG、β-catenin和MMP-9的m RNA表达和蛋白水平。结果：与空白对照组比较,NC-si RNA组各指标比较差异无统计学意义（P>0.05）;与空白对照组和NC-si RNA组比较,PPARG-si RNA组MCF-7细胞增殖率降低、细胞凋亡率增加（P<0.05）;与空白对照组和NC-si RNA组比较,PPARG-si RNA组移植瘤质量减少,PPARG、NF-κB和MMP-9的m RNA表达和蛋白水平均降低,抑瘤率增加（P<0.05）。结论：敲减PPARG能抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,促进MCF-7细胞凋亡,抑制裸鼠移植瘤生长,发生机制可能与PPARG调控能量代谢有关。     

过氧化物酶体增殖物激活受体对小鼠原代肝细胞即时反应基因和细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 转染小鼠pSG5-过氧化物酶体增殖物激活受体α（pSG5-mPPARα）质粒对小鼠原代肝细胞细胞周期调节基因表达的影响。方法 在小鼠原代肝细胞培养中转染pSG5-mPPARα质粒及加入PPARα配体（WY-14643）后，检测即时反应基因（IEG）如fos癌基因（c—fos）、jun癌基因（c—jun）和早期生长反应因-1（EGR-1），细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）表达的变化。用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、蛋白质印迹法（Western blot）方法。结果 EGR-1基因表达在小鼠原代肝细胞培养中转染pSG5-mPPARα质粒及加入PPARα配体WY-14643组与未转染加药组差异无统计学意义，而c—jun、C—los和Cyclin D1基因表达，较未转染加药组明显增强。结论 EGR-1、c—jun、c-fos和Cyclin D1基因在肿瘤发生前阶段肝脏中的异常表达．对肿瘤形成可能具有一定的重要性。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ对人肝癌细胞生长和凋亡的影响及其机制

目的 检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在人肝癌、癌旁和正常肝组织的表达,探讨激活或抑制PPARγ在肝癌细胞株生长和凋亡中的作用及其机制.方法 应用免疫组织化学方法检测20例肝癌、癌旁和正常肝组织中PPARγ的表达,Western blot检测2种肝癌和1种正常肝细胞株中PPARγ表达;PPARγ激动剂15dPGJ2和拮抗剂T0070907分别干预培养的2种肝癌细胞株,噻唑蓝(MTT)检测细胞生存率,流式细胞术(FCM)检测细胞周期及凋亡,试剂盒检测Caspase-3活性变化.结果 肝癌组织中PPARγ表达高于癌旁和正常肝组织(P＜0.05),PPARγ主要在肝癌细胞质中表达;肝癌细胞株PPARγ表达比正常肝细胞株高(P＜0.05);15dPG-J2抑制肝细胞增殖而T0070907则促进肝癌细胞增殖(P＜0.05).15dPG-J2可使肝癌HepG2和SMMC7721细胞G0/G1期细胞比例由(42.5±0.9)%和(49.0±3.8)%增高至(61.0±2.0)%和(67.5±2.2)%,(P＜0.05),S期由(30.5±0.3)%和(43.0±2.5)%降低至(6.6±1.1)%和(25.1±2.0)%(P＜0.05).而且,15dPG-J2可明显促进两种肝癌细胞凋亡,凋亡率分别增加约24.4%和22.4%,并可增强细胞Caspase-3活性(P＜0.05);Caspase抑制剂Z-VAD-FMK则可逆转15dPG-J2对肝癌细胞的促凋亡作用.结论 PPARγ在肝癌细胞中表达升高,其表达主要位于细胞质中,为无活性状态.PPARγ激动剂可活化PPARγ和Caspase通路,抑制肝癌细胞生长,促进细胞凋亡.

Abstract：

Objective To investigate the expression of peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in human liver cancer tissue and cells, and to explore the effects and mechanisms of PPARγ on growth and apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells. Methods The expression of PPARγ in 20 cases of liver cancer, tumor adjacent tissue, normal liver, one liver cell line and two liver cancer cell lines were detected by immunohistochemistry or Western blotting. Two incubated malignant cell lines were exposed to PPARγ agonist 15dPGJ2 or antagonist T0070907, cell viability was determined by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay and cell cycle distribution and apoptosis were examined by flow cytometry (FCM). Consequently, the activity of caspase-3 following treatments of 15dPGJ2 or T0070907 was observed by the commercial Caspase-3 Activity Kit. Results The expression of PPARγin liver cancer was higher than that in adjacent and normal liver tissue ( P ＜ 0. 05) and PPART was predominantly expressed in the cytoplasm. Further,the expression of PPARγwas higher in hepatoma cell line than that in normal liver cell line (P＜ 0.05 ). PPARγ agonist 15dPG-J2 inhibited the proliferation while the antagonist T0070907 induced the growth of hepatoma cells (P ＜ 0. 05). G0/G1 phase of HepG2 and SMMC772 cells was blocked by 15dPG-J2, and the ratio were raised from (42.5 ±0.9)% and (49.0 ±3.8)% to (61.0 ±2. 0)% and (67.5 ±2. 2)% ,respectively. Meantime,S phase ratio were decreased from (30. 5 ± 0. 3 ) % and (43.0 ± 2. 5 ) % to ( 6. 6 ± 1. 1 ) % and ( 25. 1 ± 2. 0 ) %. Further, 15 dPG-J2 facilitated significant apoptosis in those cell lines and the increased apoptosis ratio were 24. 4% and 22. 4% respectively.Accordingly,the activity of Caspase-3 induced by 15dPGJ2 were 21-and 23-fold higher than those in control groups (P ＜ 0. 05 ). The Caspase inhibitor Z-VAD-fmk expectedly reversed the apoptosis induced by 15dPGJ2 in HepG2 and SMMC772 cells. Conclusion The expression of PPARγ increases in human hepatoma predominantly in cytoplasm with its inactivated form. 15dPG-J2 ,an agonist of PPART inhibits growth and induces apoptotic in hepatoma cells through activation of PPARγ pathway and the consequent Caspase3 signal.     

吡格列酮对高糖诱导大鼠腹膜间皮细胞合成细胞外基质的作用及机制

目的　观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ配体吡格列酮对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）合成细胞外基质的作用以及调节机制。 方法 胰蛋白酶消化法分离培养RPMC。随机分为正常对照组、高糖组（2.5%葡萄糖）、吡格列酮干预组（10 μmol/L、20 μmol/L+2.5%葡萄糖）、二硫氨基甲酸吡咯烷干预组（PDTC,NF-κB抑制剂,25 μmol/L、50 μmol/L+2.5%葡萄糖）、姜黄素干预组[活化蛋白1（AP-1）抑制剂,15 μmol/L、30 μmol/L+2.5%葡萄糖]。RT-PCR方法检测纤连蛋白（FN）、Ⅰ型胶原（COLⅠ）、纤溶酶原激活抑制因子1（PAI-1）、c-fos、c-jun mRNA表达。ELISA方法检测细胞上清液中FN、COLⅠ和PAI-1蛋白水平。Western印迹方法检测IκBα、磷酸化IκBα（p-IκBα）、NF-κBp65、磷酸化NF-κBp65 （p-p65）蛋白表达。 结果 常规培养的腹膜间皮细胞表达基础量的FN、COLⅠ和PAI-1,高糖显著上调其蛋白及mRNA表达（P < 0.01）。吡格列酮预处理后,高糖诱导的FN、COLⅠ和PAI-1蛋白及mRNA表达显著低于高糖组（P < 0.01）。高糖作用后,磷酸化IκBα和NF-κBp65水平显著增高,c-fos、c-jun mRNA表达增加,与对照组差异有统计学意义（P < 0.01）。PDTC预处理后,高糖诱导RPMC的FN和PAI-1蛋白水平降低（P < 0.01）,COLⅠ蛋白表达无明显变化。AP-1抑制剂姜黄素预处理后,高糖诱导的RPMC FN、COLⅠ和PAI-1蛋白水平均显著降低,与对照组差异有统计学意义（P < 0.01）。吡格列酮抑制高糖条件下磷酸化IκBα和NF-κB p65水平,抑制c-fos、c-jun mRNA表达（P < 0.05或P < 0.01）。 结论 NF-κB和AP-1信号通路参与高糖条件下RPMC的FN、COLⅠ和PAI-1表达的调节。吡格列酮通过NF-κB 和AP-1途径下调高糖诱导的RPMC的FN、 COLⅠ和PAI-1的表达,从而发挥抗纤维化作用。     

PPARγ在肝癌中的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisomeproliferator-activatedreceptor,PPAR)属于核激素受体超家族,PPAR有3种亚型,即PPARα、PPARγ和PPARβ,其中PPARγ与肿瘤的关系最为密切,成为最近研究的热点。本文就PPARγ性质及其在肝癌中的研究进展作一综述。     

解偶联蛋白-2、PPARγ在梗阻性黄疸及胆道再通大鼠肝脏氧化损伤中的作用

目的 研究解偶联蛋白-2(UCP-2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在梗阻性黄疸及胆道再通大鼠肝脏中的表达与肝功能及超微结构改变的关系.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机分为3组:假手术组(A组)、梗阻性黄疸1周组(B组)、梗阻性黄疸1周胆道再通1周组(C组),检测各组大鼠血清中直接胆红素(DBIL)、总胆红素(TBIL)和丙氨酸转氨酶(ALT)水平.免疫组织化学法检测UCP-2、PPARγ蛋白在肝脏中的表达.结果 血清DBIL、TBIL、ALT水平:B组明显高于A组,C组明显低于B组.PPARγ的表达:B组明显低于A组,C组较B组明显增强;UCP-2的表达:B组明显强于A组,C组较B组明显减弱.在电镜下可见B组超微结构改变较A组显著,C组超微结构改变较B组明显减轻.结论 梗阻性黄疸氧化损伤,造成肝功能及超微结构的改变,解除梗阻有利于肝功能及超微结构的恢复.PPARγ可能参与梗阻性黄疸及胆道再通肝脏的氧化与抗氧化反应,UCP-2可能参与肝脏氧化损伤时氧自由基的清除,减轻肝脏氧化损伤.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂15-脱氧前列腺素J2对小移植肝再灌注损伤的保护作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARy)激动剂15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对小移植肝大鼠再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 将108只SD大鼠随机分为3组:(1)15d-PGJ2预处理组;(2)15d-PGJ2+GW9662组;(3)生理盐水对照组(NS组).检测术后6、24、72 h血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;检测术后24 h肝组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;检测肝组织中髓性过氧化物酶(MPO)活性以反映中性粒细胞的浸润;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;观察术后24h光镜下肝组织病理学变化.结果 与NS组和15d-PGJ2+GW9662组比较,15d-PGJ2预处理组术后6、24、72 h血清ALT和AST水平明显降低(P＜O.01);术后24h SOD活性明显升高而MDA含量降低,差异有统计学意义(P＜0.01);肝组织中TNF-α含量及MPO活性亦明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);苏木素-伊红(HE)染色显示:NS组和15d-PGJ2+GW9662组术后24 h,表现为明显的肝细胞空泡变性,肝窦扩张,炎症细胞浸润;15d-PGJ2组较其他两组肝组织损伤轻微.结论 PPARγ激动剂15d-PGJ2对小移植肝术后再灌注损伤有明显的保护作用,其保护机制可能与提高机体抗氧化能力,抑制脂质过氧化及减轻炎症反应密切相关.

Abstract：

Objective To investigate the protective effect of peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) agonist 15d-PGJ2 against reperfusion injury in small-for-size liver grafts and its probable mechanisms. Methods 108 adult male SD rats were randomly divided into three groups: ( 1 ) 15d-PGJ2 group; (2) 15d-PGJ2 + GW9662 group; (3) NS control group. Serum aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) levels at 6, 24 and 72 h after reperfusion and histopathological changes were analyzed, the contents of malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD) in liver grafts after 24 h were determined, myeloperoxidase (MPO) activity was examined to assay neutrophil infiltration into the grafts at 24 h after reperfusion, and transforming growth factor (TGF)-α levels at 24 h after reperfusion were measured by using enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA method). Results As compared with NS control group and 15d-PGJ2 + GW9662 group, serum AST and ALT levels were significantly reduced at 6, 24 and 72 h after reperfusion in 15d-PGJ2 group (P ＜0. 01 ). Histopathological analysis revealed apparent bulb-like degeneration, hepatic sinusoid dilation, and inflammatory cell infiltration in periportal area at 24 h in NS group and 15d-PGJ2 + GW9662 group after transplantation, while in the 15d-PGJ2 group, minimal damage was observed at 24 h after transplantation under the light microscopy, the contents of MDA were lower and SOD levels were higher than in other groups ( P ＜0. 01 ). As compared with NS group and 15d-PGJ2 + GW9662 group, TNF-α levels and MPO activity at 24 h after transplantation were also significantly decreased in 15d-PGJ2 group (P ＜ 0. 01 ). Conclusion PPARγagonist 15d-PGJ2 could ameliorate reperfusion injury in small-for-size liver grafts significantly, which was mediated in part by increasing antioxidant ability, inhibiting lipid peroxidation, and down-regulating inflammatory reaetion.     

不同浓度15d-PGJ2对骨髓细胞PPARγ2及骨代谢相关基因表达的影响

目的观察不同浓度15d-PGJ2对大鼠骨髓细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)及骨代谢相关基因核因子-κB活化受体配体(RANKL)、碱性磷酸酶(ALP)、骨保护素(OPG)、核因子-κB活化受体(RANK)及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)mRNA表达水平的变化,探讨PPARγ2内源性配体15d-PGJ2对骨髓细胞PPARγ2及骨代谢相关基因表达的影响。方法体外培养大鼠骨髓细胞,加入不同浓度15d-PGJ2(0、10、20、30μmol/L)干预24h后,采用半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测骨髓细胞PPARγ2、RANKL、ALP、OPG、RANK、TRAPmRNA表达水平,比较不同浓度15d-PGJ2对骨髓细胞PPARγ2及骨代谢相关基因表达的影响。结果不同浓度15d-PGJ2呈剂量依赖性下调RANKL、ALP、OPGmRNA的表达水平,同时呈剂量依赖性上调PPARγ2、RANK、TRAPmRNA的表达水平,组间比较差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论 15d-PGJ2可能通过激活PPARγ2转录活性抑制骨髓细胞成骨细胞标记物基因的表达,促进破骨细胞标记物基因的表达,这可能是15d-PGJ2参与增龄相关的骨质疏松发生的原因之一。     

二十碳五烯酸对人肝癌HepG2细胞生长作用的实验研究

目的研究二十碳五烯酸（EPA）对人肝癌HepG2细胞生长影响。方法经EPA处理的HepG2细胞（实验组）,采用MTF法检测细胞增殖,荧光染色、透射电镜观察细胞凋亡形态改变,流式细胞胞仪检测细胞凋亡。结果与对照组比较,EPA在45ug/ml和60ug／ml两个浓度对HepG2细胞的抑制率在24h、48h、72h分别为36．7％和52．1％、68．1％和94．8％、94．2％和99．7％;形态学上可见实验组细胞的凋亡显著,凋亡小体明显著多。流式细胞仪可以见到明显的细胞凋亡。结论EPA呈剂量和时间依赖性方式抑制肝癌HepG2细胞的生长增殖。细胞凋亡是其途径之一。     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷对HepG2中SLIT2甲基化和细胞恶性表型影响的实验研究

目的评估5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-aza-2dc）对人肝癌细胞系HepG2中抑癌基因SLIT2甲基化状态和细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,探讨SLIT2基因在肝癌中的作用及5-aza-2dc的体外抑制肝癌的效应。方法实验分为对照组和加药组,分别应用MSP、MTT、划痕实验、侵袭实验、AnnexinV—FITC／PI双染实验检测细胞中SLIT2基因的甲基化状态和细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡的变化。结果5-aza-2dc处理后,HepG2细胞株中SLIT2基因甲基化程度得到一定程度逆转,并呈现出剂量依赖性;划痕实验48h后,对照组肝癌细胞明显向划痕的中央迁移,而药物处理组肝癌细胞迁移受到抑制;侵袭实验24h后,加药组细胞的侵袭能力较对照组降低（P〈0．05）;AnnexinV．FITC／PI双染实验显示加药组细胞凋亡率显著增加（P〈0．01）。结论5-aza-2dc对HepG2细胞有抑制细胞增殖、促进凋亡及抑制细胞迁移和侵袭能力等作用,其中对抑制细胞迁移和侵袭的作用可能是通过逆转SILT2基因甲基化、恢复其表达来实现的。     

p16蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨ｐ１６蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法 采用ＬＳＡＢ免疫组化法对１０７例乳腺癌标本进行ｐ１６蛋白的检测。结果 ｐ１６蛋白阳性率为４０．１９％，生存时间≤５年，〉１０年ｐ１６蛋白阳性率分别为８．００％和７５．６８％，ｐ１６蛋白表达阳性者生存时间明显长于阴性者。结论 ｐ１６蛋白的检测是判断乳腺癌预后的重要因素。     

甲状腺乳头状癌的p16蛋白与雌激素受体表达及其相关性研究

目的　探讨p16蛋白与雌激素受体在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用及其相关性。方法　应用免疫组化法对 5 0例甲状腺乳头状癌标本进行 p16蛋白及雌激素受体检测。 结果　p16蛋白表达及雌激素受体与甲状腺乳头状癌的组织分化、淋巴结转移及预后有关。结论　p16蛋白表达与雌激素受体水平有助于甲状腺癌的分化及预后的判断     

HSP70在阿霉素致HepG2细胞凋亡中的作用

目的 探讨HSP70在阿霉素(Doxorubicin)所导致的肝癌细胞(HepG2)凋亡中的作用。方法 采用Western blot检测细胞内HSP70水平;应用MTT法检测不同浓度阿霉素作用下的HepG2细胞的活力;流式细胞术用于检测阿霉素作用后HepG2细胞的凋亡率。(Annexin V-FITC及PI双染)结果 HepG2细胞在热应激处理后HSP70表达增加,且与温度、受热时间及恢复时间有关;HepG2/ADM耐药细胞株的HSP70表达明显高于亲本细胞HepG2;HSP70表达越高,细胞对阿霉素敏感性越低,细胞存活率与HSP70水平呈明显正相关,相关系数为0.9678(t=0.0069＜0.01);在1ug/ml、3ug/ml浓度阿霉素作用下,HSP70高表达的HepG2细胞凋亡率为1.53％、3.71％,而对照组为3.61％、5.33％。结论 HSP70对阿霉素导致的HepG2细胞凋亡有一定抑制作用,HSP70高表达可以降低细胞对阿霉素的敏感性。     

三种中心静脉导管医用生物材料对XWLC-05细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的探讨聚氨酯、硅胶、聚氯乙烯3种中心静脉导管医用生物材料对XWLC-05(Xuanwei LungCancer-05)细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,为临床选择中心静脉导管提供依据。方法取XWLC-05细胞系复苏、培养并传代,取第3代细胞分别与大小为1.0 cm×1.0 cm的聚氨酯、硅胶、聚氯乙烯培养,以不加材料培养作为对照。培养72 h时倒置显微镜下观察细胞生长情况;培养24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖,采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率。结果倒置显微镜下观察示,培养72 h对照组细胞生长良好,聚氨酯组与硅胶组细胞生长情况与对照组相似;聚氯乙烯组细胞数量减少,坏死、溶解,残留贴壁细胞形态畸形,透光度降低。MTT法检测3种材料与细胞共培养24、48 h,细胞增殖、细胞周期及凋亡率与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。72 h时与对照组比较,各实验组材料均显著抑制细胞增殖(P<0.05),其中聚氯乙烯组较硅胶组及聚氨酯组明显(P<0.05),硅胶组及聚氨酯组间差异无统计学意义(P>0.05);各实验组材料均显著影响细胞凋亡率和细胞周期,其中聚氯乙烯组显著,硅胶组次之,聚氨酯组最小,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论聚氯乙烯显著影响XWLC-05细胞的增殖、凋亡及细胞周期;与聚氯乙烯、硅胶相比,聚氨酯材料具有较好生物相容性。     

INFLUENCE OF METHOXYFLURANE-NITROUS OXIDE ANALGESIA DURING CHILDBIRTH ON RENAL AND HEPATIC FUNCTION

Blood urea content and the serum concentrations of sodium, creatinine,uric acid, glutamic oxaloacetic transaminase (g.o.t.), glutamicpyruvate transaminase (g.p.t.) and bilirubin were measured beforedelivery, on the 2nd and 3rd days and on the 5th day after delivery.In two groups of mothers, one receiving nitrous oxide analgesisand the other a combination of nitrous oxide and methoxyflurane,blood urea and serum sodium and g.o.t. were increased followinglabour and nitrous oxide analgesia; s.g.p.t. was increased onlyin the late post-partum period. Serum sodium, creatinine, uricacid, urea, g.o.t. and g.p.t. increased following exposure tomethoxyflurane. The increase in serum sodium, uric acid andurea was dose-dependent. Capillary concentrations of uric acidin the neonates showed dose-dependent changes in response tomethoxyflurane.     

原发性肝癌伴胆道癌栓的诊治

目的 总结探讨16例原发性肝癌伴胆道癌栓的临床特点、病理改变、诊治方法和改善预后的途径。方法 综合分析16例病例的一般资料、临床表现、影像学和病理检查。均接受外科手术治疗，其中原发肿瘤切除 胆道癌栓清除 T管引流-化疗14例，单纯癌栓清除 T管引流2例，术后TACE14例，化疗药物T管滴注或灌注9例，术后二者同时化疗者9例。结果 无手术死亡。原发灶未切除仅T管引流2例，术后生存时间为2．5个月和4．5个月。14例原发灶切除者，术后生存1年、1．5～2年、2～2．5年、2．5～3年分别为12例、9例、6例和3例，其中1例存活4．5年。结论 原发性肝癌伴胆道癌栓患者，积极手术治疗和综合治疗是提高生活质量和改善预后的有效方法。     

多途径介入治疗肝癌的疗效分析

目的 探讨多途径介入治疗肝癌，并对其疗效加以分析。方法 34个肝癌病灶（26例）的多作乱介入性治疗在超声引导下进行。＜3cm20个病灶,局部微波治疗＋门静脉化疗；＞3cm14个病灶，12个病灶行局部无水酒精注射治疗＋门静脉化疗，2个病灶行局部微波治疗＋无水酒精注射治疗＋门静脉化疗；7例合并门静脉癌栓者，加做门静脉癌栓内无水酒精注射治疗。结果 随访12－25个月，一年生存率100％，两年生存率88.42%。微波治疗组均经活栓证实完全性坏死；无水酒精注射治疗组US及CT报告病灶稳定。门静脉化疗预防组无癌栓出现；治疗组癌栓4例缩小，3例消失。结论 多途径介入治疗对预防肝癌转移，延迟复发，改善预后有肯定意义，明显延和生存期。     

重组人骨形成蛋白2与骨诱导剂对大鼠骨髓间充质干细胞增殖分化的影响

目的观察重组人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein2,rhBMP-2)与骨诱导剂对SD大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的增殖与成骨作用。方法体外培养大鼠MSCs,分为实验组与对照组。对照组:不加rhBMP-2与骨诱导剂。实验组:骨诱导剂单独作用于SD大鼠MSCs(A组);rhBMP-2分别以浓度为10(B组)、50(C组)、100(D组)、200μg/L(E组)单独作用于SD大鼠MSCs;rhBMP-2分别以浓度为10(F组)、50(G组)、100(H组)、200μg/L(I组)联合骨诱导剂作用于SD大鼠MSCs。测定第3、6、9、12天的增殖状况(MTT法)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨钙素(osteocalcin,OC)水平。结果倒置相差显微镜观察SD大鼠MSCs原代培养时,细胞接种12h后即可贴壁;48h细胞成梭形,形似成纤维细胞;4d时细胞为多角形、纺锤形;6d时,成纤维细胞散在分布,少量呈集落样生长,为漩涡状、放射状排列;10d左右,细胞基本铺满瓶底,融合成片。传代细胞5~7d即可长满瓶底。各时间点A~I组均能显著促进MSCs成骨活性(ALP和OC)的表达。B~E组同时具有促进MSCs增殖作用,并呈浓度依赖性;F~I组增殖及ALP、OC含量均高于A~E组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论rhBMP-2与骨诱导剂联合作用可在促进MSCs增殖的同时提高其成骨活性。