梅毒患者外周血淋巴细胞CD28-B7分子的表达及意义

目的探讨CD28-B7 T淋巴细胞活化协同刺激分子在梅毒发病、发展及转归中的作用。方法应用流式细胞仪和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对60例梅毒患者（早期梅毒患者和血清固定患者各30例）和30例正常人外周血淋巴细胞中B7（CD80/CD86）及CD4＋T淋巴细胞中CD28的表达进行检测。结果①梅毒患者外周血淋巴细胞表面CD28的表达水平低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;血清固定组和早期梅毒组比较,CD28表达水平的差异无统计学意义（P〉0.05）。②梅毒患者外周血淋巴细胞CD80及CD86的表达水平明显低于正常对照组（P〈0.05）,但CD80和CD86的表达水平在血清固定组和早期梅毒组间无统计学意义（P〉0.05）。结论本研究提示梅毒患者外周血淋巴细胞表面CD80、CD86及其受体CD28的表达下调,通过影响CD28-B7协同刺激通路,抑制T细胞尤其是CD4＋T淋巴细胞活性功能,可能参与了梅毒的发病、发展及转归过程。     

慢性丙型肝炎患者治疗前后外周血T细胞CD28、CD152水平变化分析

目的 观察慢性丙型肝炎患者治疗前后外周血T细胞CD28、CD152水平变化,为慢性丙肝临床治疗提供依据.方法 选择40例慢性丙型肝炎患者作为观察组,40例健康人作为对照组,利用流式细胞仪测定用荧光抗体CD4-PECY5、CD8-PE标记过的患者CD4＋淋巴细胞和CD8＋淋巴细胞表面CD28、CD152表达水平,分析其治疗前后变化水平.结果 观察组慢性丙型肝炎患者治疗前CD4＋ CD28、CD8＋ CD28明显低于对照组（P＜0.05）;观察组患者经过治疗后CD4＋ CD28、CD8＋CD28明显升高（P＜0.05）;治疗后观察组患者CD4＋ CD28、CD8＋ CD28与对照组相比较无明显差异（P＞0.05）;观察组慢性丙型肝炎患者治疗前CD4＋ CD152明显高于对照组（P＜0.05）;观察组慢性丙型肝炎患者治疗前CD8＋ CD152与对照组无明显差异（P＞0.05）;观察组患者经过治疗后CD4＋ CD152明显降低（P＜0.05）,CD8＋ CD152＋无明显变化（P＞0.05）;治疗后观察组CD4＋ CD152＋、CD8＋ CD152与对照相比较无明显差异（P＞0.05）;治疗前HCV-RNA阳性率为82.5％ （33/40）,治疗后为17.5％ （7/40）,治疗后HCV-RNA阳性率明显降低（P＜0.05）.结论 外周血T细胞CD28、CD152水平变化能反映慢性丙型肝炎患者HCV RNA复制情况及免疫系统状态.     

喘息性肺炎患儿外周血中共刺激分子CD28及淋巴细胞亚群的变化

目的：探讨喘息性肺炎患儿外周血中共刺激分子CD28和淋巴细胞亚群的表达及意义。方法：应用流式细胞仪（FCM）检测了喘息性肺炎患儿及正常儿童外周血中共刺激分子CD28和淋巴细胞亚群的表达。结果：喘息性肺炎组共刺激分子CD28表达水平与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。T细胞亚群分析显示,喘息性肺炎患儿CD8＋CD28＋较对照组升高（P〈0.05）,CD8＋CD28-、CD4＋CD28＋较对照组降低（P〈0.05）,CD4＋CD28-与对照组相比差异无统计学意义。喘息性肺炎组CD3＋、CD3＋CD4＋、CD4＋/CD8＋较正常组降低,差异有统计学意义（P〈0.01）,CD3-CD19＋表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）,CD3＋CD8＋差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：共刺激分子CD28参与了喘息性肺炎的发病机制,阻断第二信号有望成为治疗喘息性肺炎的一条新途径。     

乙型肝炎外周血T淋巴细胞上CD28分子表达与病毒载量的关系

目的：分析HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者、HBeAg阳性乙肝病毒携带者外周血T淋巴细胞上CD28表达情况及其与HBV病毒载量的关系。方法采集健康人、HBeAg阳性乙肝病毒携带者、HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的外周血,抗体标记,采用流式细胞技术检测CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^＋T淋巴细胞,同时检测肝功能HBV DNA。结果慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组CD4^＋CD28^＋T细胞、CD8^＋CD28^＋T细胞百分率明显低于健康对照组（P〈0.05）;HBV DNA≥107组CD8^＋CD28^＋T细胞百分率低于HBV DNA＜107组（P〈0.05）。结论乙型肝炎病毒感染者CD8^＋T细胞上CD28的低表达与高病毒载量有关。     

共刺激分子CD28/CTLA-4:B7在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞中的表达

目的 探讨CD28、CTLA-4（CD152）、B7—1（CD80）及B7—2（CD86）共刺激分子在强直性脊柱炎（AS）患者的外周血淋巴细胞上的表达异常与免疫功能紊乱的关系。方法 采用流式细胞仪检测69例AS患者和50例健康对照者CD28和CTLA-4在外周血CD3^＋、CD4^＋T和CD3^＋、CD8^＋T细胞上的表达及CD80和CD86在CD19^＋B细胞上的表达。用ELISA法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平。结果 AS患者CD3^＋、CD4^＋T和CD3^＋、CD8^＋T细胞上的CD28和CTLA-4，CD19^＋B细胞上CD80和CD86的表达较正常对照组显著增高（P〈0．05）；AS患者血清中2种免疫球蛋白IgG、IgA的水平较正常对照组显著增高（P〈0．01）。结论 AS患者T细胞上表达过量的CD28，与B细胞的B7结合，激活T、B细胞，产生大量免疫球蛋白，同时刺激激活的T细胞表达CTLA-4，使T细胞不能充分表现效应功能。     

T淋巴细胞亚群变化与脓毒症发病的关系

目的探讨脓毒症发病过程中T淋巴细胞亚群变化及其临床意义。方法选取医院2010年1月-2013年1月间收治的脓毒症患者62例设为观察组,设同期非脓毒症的危重症患者60例为对照组,采用流式细胞仪检测2组患者24h外周血CD3＋（CD3阳性淋巴细胞）、CD4＋（CD4阳性淋巴细胞）、CD8＋（CD8阳性淋巴细胞）的百分比,及CD4＋／CD8＋值改变情况,研究数据采用SPSS12．0统计软件处理,以评价机体细胞免疫功能变化情况。结果观察组外周血CD3＋、CD4＋及CD4＋／CD8＋值均低于对照组,组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）;观察组中死亡患者外周血CD4＋、CD8＋及CD4＋／CD8＋值均低于存活组,组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论脓毒症患者处周血CD3＋、CD4＋及CD4’／CD8＋值均显著降低,且死亡组患者上述指标显著低于存活组,表明脓毒症患者存在免疫功能损害,且外周血CD4＋、CD8＋及CD4＋／CD8＋值愈低,提示患者预后不佳。     

结核病患者外周血T淋巴细胞CD28/CTLA-4表达及意义

目的分析结核病患者外周血共刺激分子CD28/CTLA-4(CD152)表达,评价患者的免疫状态。方法采集21例初诊结核病患者及15例健康对照者外周血,采用多参数流式细胞术检测分析共刺激分子CD28、CD152的表达,以及分析其亚群CD4+CD152+细胞、CD4+CD28+细胞、CD8+CD28+细胞、CD8+CD152+水平的变化。结果与健康者比较,结核病患者外周血CD28+细胞、CD152+细胞水平明显增高(P0.01)。对共刺激分子CD28、CD152进行亚群分析,结核病患者外周血CD4+CD152+细胞、CD4+CD28+细胞、CD8+CD152+细胞水平明显高于健康者(P0.05),CD8+CD28+细胞水平无统计学意义(F=2.647,P=0.113)。结论结核病患者外周血共刺激分子CD28/CD152(CT LA-4)表达增加,且CT LA-4在CD4+和CD8+T细胞上表达均增加,提示可能存在T细胞活化或抑制信号调节失衡。     

CTLA-4与CD28在FⅧ抑制物阳性的血友病A患儿中的表达分析

目的 探讨细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4）与CD28在FⅧ抑制物阳性的血友病A患儿中表达百分比。方法 收集自2016年12月1日至2018年1月1日就诊于首都医科大学附属北京儿童医院血友病专业门诊的血友病A患儿,共计入组患儿58例,其中FⅧ抑制物阳性者28例,阴性者30例。应用改良Nijmegen法检测FⅧ抑制物滴度,流式细胞术检测外周血T细胞上的CD3、CD4、CTLA-4和CD28的表达,分析比较两组CTLA-4+Th细胞、CD28+Th细胞的百分比和CTLA-4/CD28轴的平衡情况。结果 FⅧ抑制物阳性组患儿外周血CTLA-4+Th细胞百分比为2.95%（1.41%,5.50%）,阴性组患儿表达百分比为4.95%（2.20%,7.80%）,阳性组显著低于阴性组（P=0.038）;阳性组患儿外周血CTLA-4/CD28细胞比值为0.03（0.01,0.06）,阴性组患儿表达比值为0.05（0.02,0.08）,阳性组显著低于阴性组（P=0.042）;而CD28+Th细胞表达差异无统计学意义（P=0.065）。对低滴度组和高滴度组进行比较,上述检测细胞在两组间差异无统计学意义。结论 CTLA-4/CD28细胞百分比比值在FⅧ抑制物阳性与阴性的血友病A患儿存在差异,抑制物阳性组显著低于阴性组,并且这种差异主要由CTLA-4+Th细胞表达百分比差异引起。CTLA-4的低表达可能是抑制物产生的原因之一。     

多发性硬化患者外周血T淋巴细胞凋亡和Fas的表达

目的 探讨多发性硬化（MS）患者外周血T淋巴细胞凋亡和Fas表达及其与复发缓解病程的关系。方法 42例复发缓解型MS患者，根据其病程分为复发期组20例和缓解期组22例，另外选择20例健康人作为对照组，采用五色流式细胞术（FCM）检测以上三组外周血T淋巴细胞凋亡和Fas表达的情况。结果三组间外周血T淋巴细胞Fas的表达无明显差别。复发期MS患者凋亡的CD4^＋T淋巴细胞（由AV染色标记）和Fas相关的CD4^＋T淋巴细胞凋亡（由AV^＋CD95^＋／CD4^＋标记）明显低于缓解期MS患者和对照组（均P〈0．05）。复发期MS患者和缓解期MS患者凋亡的CD8^＋T淋巴细胞（由AV染色标记）和Fas相关的CD8^＋T淋巴细胞凋亡（由AV^＋CD95^＋／CD8^＋标记）都明显低于对照组（均P〈0．05），但复发期MS患者和缓解期MS患者之间无明显差异（P〉0．05）。结论T 淋巴细胞的凋亡和Fas的表达与复发缓解型MS患者的发病和病情的加重有关，MS患者对Fas／FasL介导凋亡的抵抗可能参与了MS发病的调节机制。     

儿童特发性血小板减少性紫癜外周血中CD4、CD28、sFas和sFasL表达的临床研究

目的探讨T淋巴细胞表面分子CD4、CD28和凋亡蛋白sFas和sFasL在急慢性特发性血小板减少性紫癜（ITP）发病中的变化。方法用流式细胞术分别检测25例急性ITP和20例慢性ITP患儿及20例正常对照儿童外周血CD4＋ 、CD28＋、CD4＋ CD28＋的表达;用酶联免疫夹心法（ELISA）测定急性ITP和慢性ITP患儿及正常儿童外周血sFas和sFasL的水平。结果①ITP患儿外周血中CD4＋、CD28＋及CD4CD28＋表达均低于正常对照组（P〈0．05）,aITP和cITP组间没有显著差异（P〉0．05）;CD4＋细胞中CD三表达与正常对照相比无显著差异（P〉0．05）;②ITP患儿外周血淋巴细胞中的CD2s表达率与CD4表达率呈正相关（P〈0．05）;③aITP和cITP组患儿血清中的sFas和sFasL表达水平均明显高于对照组（P〈0．05）,且cITP组高于aITP组（P〈0．05）;3组之间有显著差异（P〈0．05）;④sFas和sFasL的表达水平呈正相关（r=0．660,P〈0．05）,CD28＋表达率和sFas水平没有明显相关性（P〉0．05）。结论①CD4＋T细胞分子和协同刺激分子CD28＋参与了儿童ITP的发病过程;且CD4＋分子减少并非由于协同刺激CD28分子表达降低所致,CD4T淋巴细胞无协同刺激分子CD28表达缺陷;②sFas和sFasL表达异常参与了儿童aITP和cITP的免疫病理过程,监测其变化有助于ITP的分型和预后。     

子宫内膜异位症并盆腔积液患者 CD8＋CD28-T细胞的表达及临床意义

目的：探讨CD8＋CD28-T细胞在子宫内膜异位症（ EMT）发病机制中的作用。方法收集EMT患者合并盆腔积液80例（Ⅰ期15例、Ⅱ期12例、Ⅲ期22例、Ⅳ期31例）,采用流式细胞术检测其外周血及盆腔积液内CD8＋CD28-T细胞及其胞内细胞因子转化生长因子β1（TGF-β1）及白介素10（IL-10）比率,并选取同期年龄相似的20例健康体检女性志愿者为对照组。结果与健康对照组比较,Ⅰ-Ⅳ期EMT患者外周血CD8＋CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10比率均明显升高,表现为Ⅳ＞Ⅲ＞Ⅱ＞Ⅰ,且两两比较差异均有统计学意义（ P ＜0.05）;EMT患者盆腔积液CD8＋CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10的频率同样表现为Ⅳ＞Ⅲ＞Ⅱ＞Ⅰ,且以TGF-β1的组间差异最为明显（ P ＜0.05）。 CD8＋CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10与分期呈正相关（ rs ＝0.791,0.753,0.726, P ＜0.05）。结论 CD8＋CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10在EMT发病机制当中具有重要作用,三者可能是EMT的一个不利因素,并且与EMT的分期密切相关;细胞因子TGF-β1在EMT盆腔积液形成过程中起到重要作用。     

SLE患者CD4~+和CD8~+T淋巴细胞CD70的表达

目的了解SLE患者T淋巴细胞CD70 mRNA及其蛋白的表达情况,探讨CD70在SLE发病机理中的作用。方法用定量RT-PCR方法测定15例活动期、15例非活动期SLE患者和l5例正常人对照组外周血CD4+CD8+T淋巴细胞CD70 mRNA转录水平。用流式细胞仪检测各组的CD4+CD70+T/CD8+CD70+T淋巴细胞阳性率。结果活动期、非活动期SLE患者CD4+T淋巴细胞CD70 mRNA转录水平高于正常对照组,且活动期SLE患者CD4+T淋巴细胞的CD70mRNA转录水平高于非活动期SLE患者(P0.05)。活动期、非活动期SLE患者CD8+T淋巴细胞CD70 mRNA转录水平与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。活动期、非活动期SLE患者外周血CD4+CD70+T淋巴细胞阳性率高于正常对照组,且活动期SLE患者CD4+CD70+T淋巴细胞阳性率明显高于非活动期SLE患者(P0.05)。活动期、非活动期SLE患者CD8+CD70+T淋巴细胞阳性率与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 CD4+T淋巴细胞CD70的过度表达在SLE的发生发展中可能起作用,并且CD70过度表达可以作为SLE疾病活动的一个指标。     

系统性红斑狼疮患者Fas和CD40L表达的初步研究

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者凋亡调节蛋白受体Fas及共刺激分子CD40L的表达情况及其相互之间的调节。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测SLE患者和正常人血清sFas和sCD40L的水平并分析两者之间的相关性;同时分离10例SLE患者和10例正常对照的外周血淋巴细胞：①将细胞培养48 h后,采用流式细胞仪检测T细胞亚群表面Fas及CD40L的表达情况;②在培养过程中分别加入抗FasL抗体阻断Fas信号及抗CD40L抗体阻断CD40L信号后,观察T细胞亚群表面CD40L及Fas的表达。结果①SLE患者血清sFas和sCD40L平均水平分别为4.18μg/L和5.87μg/L,显著高于正常对照组2.27μg/L和2.31μg/L,且SLE患者血清sFas活动期高于稳定期（P〈0.01或P〈0.05）;sFas、sCD40L水平与SLEDAI（疾病活动指数）之间存在一定的正相关性（r=0.688,r=0.253,P均〈0.05）,但sFas与sCD40L水平之间未显示明显相关（r=0.201,P〉0.05）。②经细胞培养后,SLE患者CD4（＋）和CD8（＋）T细胞表面Fas表达增加,与正常对照组比较,差异有显著性（P〈0.01或P〈0.05）;SLE患者CD4（＋）和CD8（＋）T细胞表面CD40L表达增加,与正常对照组比较,差异有显著性（P均〈0.05）。③SLE患者CD4（＋）及CD8（＋）T细胞上Fas与CD40L表达均呈正相关关系（r=0.311和r=0.517,P均〈0.05）。④加入抗FasL抗体阻断后,CD4（＋）和CD8（＋）T细胞表面CD40L表达下降,与阻断前比较,差异有显著性（P〈0.05）;加入抗CD40L抗体阻断后,CD4（＋）和CD8（＋）T细胞表面Fas表达与阻断前比较差异无显著性（P〉0.05）。结论SLE患者血清sFas和sCD40L水平升高且呈正相关关系;T细胞亚群表面Fas及CD40L高表达且呈正相关关系;T细胞上Fas的表达调控CD40L的表达。说明凋亡调节蛋白Fas及共刺激分子CD40L可能共同参与SLE的发病过程。     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎外周血T淋巴细胞上CD28表达初步研究

目的分析HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞CD28表达特点。方法采集健康人、HBeAg阳性乙肝病毒携带者、HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的外周血,抗体标记,采用流式细胞技术检测CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T淋巴细胞,同时检测肝功能、HBVDNA。结果慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T细胞、CD28+T细胞明显低于健康对照组(P<0.05);高病毒载量组(HBVDNA≥107组)CD8+CD28+T细胞低于低病毒载量组(HBVDNA<107组)(P<0.05)。结论所有结果显示乙型肝炎病毒持续感染状态与CD8+T细胞上共刺激分子CD28的表达低下有关,而CD8+T细胞上CD28的低表达与高病毒载量有关。     

反复自然流产患者外剧血中CD4＋CD25＋Treg细胞、IL-8和IL-10的表达

目的对反复自然流产患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）百分率和IL-8、IL-10含量变化及可能产生的作用进行探讨。方法采用三色流式细胞术检测120例反复自然流产患者、120名正常妊娠妇女和120名正常非妊娠妇女外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞比例,ELISA法检测上述研究对象IL-8和IL-10含量。结果反复自然流产组妇女外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的百分率和IL-10水平明显低于正常非妊娠组和正常妊娠组．而IL-8明显高于正常非妊娠组和正常妊娠组,差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论外周血CD4＋CD25＋Treg细胞、IL-8和IL-10水平与反复自然流产的发生有关。     

T细胞亚群检测对传染性单核细胞增多症的临床意义

目的探讨T细胞亚群检测对传染性单核细胞增多症(IM)的临床意义。方法采用流式细胞术检测IM患儿急性期、恢复期(更昔洛韦治疗后2周)、随访期(治疗后4周)以及正常对照组外周血淋巴细胞亚群,并对结果进行比较。结果 IM患儿急性期以及恢复期较对照组外周血中CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值均明显下降(P<0.05),CD8+T细胞百分比则明显升高(P<0.05)。恢复期(更昔洛韦治疗后2周)CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值较治疗前升高(P<0.05),而CD8+T细胞百分比则较治疗前降低(P<0.05),差异均有统计学意义。随访组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论外周血T细胞亚群的检测对评估IM患儿的细胞免疫功能状况、辅助诊断和指导治疗具有临床意义。