兔窦房结组织急性损伤后细胞形态结构改变的动态观察

目的探讨用甲醛湿敷致兔窦房结组织急性损伤后窦房结细胞形态学的动态变化规律.方法将60只日本大耳白兔随机分组,用20%甲醛湿敷窦房结区建立窦房结急性受损术后2 h、1、2、3周及4周(每组10只)实验组模型,对照组与术后2 h组于湿敷后2 h、其余各组分别于相应时间点切取窦房结组织留取标本;观察用TUNEL法检测窦房结细胞凋亡情况.结果光镜下,各实验组均有不同程度的窦房结细胞损伤,主要表现为细胞明显肿胀、粒细胞浸润、细胞坏死及胶原纤维增生等病变.电镜下各实验组细胞超微结构病变亦明显,主要表现在线粒体肿胀及嵴变短、紊乱或断裂甚至消失;内质网则广泛解体、离断;核膜极不规整,核仁裂解,染色质边聚肌丝模糊,片状溶解或坏死.对照组兔窦房结均未见明显的细胞凋亡.实验组兔窦房结均可见不同程度的细胞凋亡,与对照组相比凋亡率均有显著性差异(P＜0.01),但实验组之间凋亡率无统计学意义(P＞0.05).结论用甲醛湿敷法损伤窦房结组织不仅导致窦房结细胞不可逆性损伤,而且可诱发窦房结细胞凋亡.     

自体窦房结细胞异位移植治疗缓慢型心律失常的实验研究

目的 探索自体窦房结细胞异位移植,构建心室异位起搏灶治疗缓慢型心律失常的可行性.方法 将健康成年犬16只随机分为移植组和对照组(每组8只).移植组切取窦房结组织并制成细胞悬液后,注射到自体右心室近心尖部心肌内,对照组切取窦房结后,于右心室相同部位注射等量培养液.2周后建立完全性房室传导阻滞动物模型并进行电生理检查.对移植组犬经股静脉注射异丙肾上腺素和阿托品,研究心率变化.免疫荧光染色观察移植的细胞存活状况及其与心室肌细胞形成的缝隙连接结构.结果 消化分离成年犬窦房结得到的自主搏动的细胞结构和活性保持良好.建立完全性房室传导阻滞模型1 h后,移植组犬心率(91±14)次/min高于对照组(49±11)次/min(t=6.672,P＜0.01),且此室性心律起源于细胞移植部位.注射异丙肾上腺素后,移植组室性心率由(95±11)次/min增加至(118±15)次/min(t=3.497,P＜0.01),而注射阿托品后室性心律无明显改变[分别为(95±11)次/min和(101±17)次/min](t=0.838,P＞0.05).免疫荧光染色法证实,移植的细胞在移植部位存活,且细胞间有缝隙连接蛋白形成.结论 成年犬窦房结细胞移植到自体右心室壁,能够提高完全性房室传导阻滞后的心室率,且对异丙肾上腺素反应良好,对阿托品无明显反应.移植的细胞可与周围细胞形成缝隙连接.     

狗食管窦房结电图的探索

用7F食管双极电极,在麻醉狗的食管记录到以P前波为特征的窦房结电图。其P前波与腔内窦房结电图的P前波同步,形态相似,具有舒张期斜坡与向上斜坡,以及二斜坡过渡匀滑等特征。给异搏定(维拉帕米)后消失,恢复窦性心律时重新出现,表明它是窦房结区电活动在食管的反映。     

关于窦房结电图发展的介绍

早在1907年Keith就描述了窦房结(sinus node,SN),而窦房结电图(sinus node eleetrogram,SNE)的突破性进展却只有十几年历史。 1977年Cramer首先在兔离体右心房标本的特定部位记录到细胞外SNE,同时记录了SN细胞的跨膜动作电位(transmembrane action potential,TAP),证实二者有固定关系。随后Cramer又记录到狗的细胞外SNE。2年后Hariman首次记录到人的SNE,后又在SNE上测定窦房传导时间(sinoatrial conduction time,SACT)。Reiffel和     

大鼠固有窦房结功能的增龄性变化

目的:评估增龄和窦房结功能之间的关系,探讨正常的窦房结随着年龄增大其功能的生理性变化.方法:健康雄性sD大鼠21只,按年龄分为幼年(4 wk,n=8)、成年(18wk,n=7)、老年(104 wk,n=6)3组,阻断自主神经后测量固有的窦房结电生理指标[固有心率(IHR),窦房结恢复时间(SNRT),矫正窦房结恢复时间(CSNRT)].结果:随年龄增大,大鼠固有CSNRT(ms)延长,分别为:(29±6)m,(51±9)ms.(43±10)ms,幼年组和成年组比较(P<0.05),幼年组和老年组比较(P<0.05),成年组和老年组比较(P0.05).结论:固有的窦房结电生理指标CSNRT有增龄性延长,提示固有的窦房结功能存在增龄性降低.     

犬食管导联和窦房结区及右心房电位同步记录的研究

目的探讨经食管导联信号平均无创性直接地记录窦房结电位(SNP)的技术。方法对8只犬进行了系列的实验研究,直接将双极电极放置于犬的食管导联、窦房结区和右房等部位进行同步记录与信号叠加同步记录;还对窦房结区、右房、左房等部位的局部电活动进行同步记录与观察;当交界心律出现时,再记录上述电位关系的改变。结果食管导联记录的P前波与窦房结区记录的电位同步,并超前于右心房的电位。结论采用信号平均叠加方法经食管导联所记录的P前波确为窦房结电位。     

针刺疗法对病窦综合征窦房结功能的作用

目的　观察针刺疗法对病窦综合征的窦房结功能的作用。方法　 5 7例病窦房综合征患者于同时针刺人中、内关、足三里穴治疗前后进行窦房结恢复时间 (SNRT)、窦房传导时间 (SACT)和心率 (HR)测定。结果　 5 7例患者于针刺治疗前的SNRT(1783.6± 718.2 )ms、SACT (135 .7± 41.9)ms、HR(4 3.5± 5 .6 6 )bpm ,与治疗后SNRT(1338.1± 2 13.8)ms、SACT(1114.3± 2 3.6 )ms、HR(5 1.7± 9.46 )bpm对比有显著性差异 (P均 <0 .0 5 ) 。结论　人中、内关、足三里穴同时针刺治疗对病窦综合征的窦房结功能有显著作用。     

窦房结功能减低的测定——几种试验方法 临床应用的探讨

病窦综合征(SSS)的心电图表现包括:(1)显著的窦性心动过缓;(2)心动过缓与室上性心动过速交替出现的快-慢综合征,罕有室性过速;(3)窦房结暂停,缺少房性或交界性逸搏心律;(4)窦房阻滞。然而,亚临床型或间歇发作者,还需附加其他的测试方法。这些方法可分为: 一、窦房结自律性试验: 1.激发试验: (1)运动负荷试验 (2)药物负荷试验(阿托品、异丙肾上腺素) 2.超速抑制试验窦房结恢复时间(SNRT) 3.自主的自律性: 随身携带的ECG监护     

正常窦房结功能的增龄性变化

目的:评估增龄和窦房结功能之间的关系,探讨正常窦房结随年龄增大其功能发生的生理性变化.方法:选取窦房结正常的人为样本,按年龄分为青年、成年、老年3组,了解基础状态下窦房结电生理指标:基础心率(BHR),窦房结恢复时间(SNRT),矫正窦房结恢复时间(CSNRT)的增龄性变化.结果:正常人随年龄增长,BHR和SNRT出现了减慢和延长,但并未出现CSNRT的延长.基础心率在青年组、成年组和老年组分别为:(95±12),(82±13),(80±12)次/min,青年组和成年组比较差异有统计学意义(P<0.05),青年组和老年组比较差异有统计学意义(P<0.05),成年组和老年组比较差异无统计学意义.SNRT在青年组、成年组和老年组分别为(995±106),(1086±138),(1138±131)ms,青年组和成年组比较差异有统计学意义(P<0.05),青年组和老年组比较差异有统计学意义(P<0.05),成年组和老年组比较差异无统计学意义.CSNRT在青年组、成年组和老年组分别为:(355±73),(335±83),(354±91)ms,各组间比较均为P0.05.结论:基础的窦房结电生理指标CSNRT未见有增龄性延长,提示有可能为自主神经调节对窦房结功能起到一定的代偿作用.     

病态窦房结综合征的治疗

病态窦房结综合征(sick sinus syndrome,SSS)简称病窦综合征,是由于窦房结或其周围组织器质性病变导致窦房结冲动形成障碍,或窦房结至心房冲动传导障碍所致的多种心律失常和多种症状的综合征,主要特征为窦性心动过缓,当合并快速性心律失常反复发作时称为心动过缓-心动过速综合征(慢-快综合征).     

甲醛致家兔窦房结损伤模型的建立

目的 建立甲醛诱导的兔窦房结损伤模型。方法 采用40%甲醛溶液损伤兔窦房结,检测心率、窦房传导时间、窦房结恢复时间和校正窦房结恢复时间等指标,比较不同损伤方法、损伤程度、损伤持续时间等,并采用阳性药对模型进行验证。结果(1)损伤方法:湿敷法可通过时间及面积大小控制损伤程度;滴注法创伤小,可通过甲醛量来控制损伤程度,但易造成窦房结周围组织损伤;(2)损伤程度和维持时间:心率下降百分率小于基础心率的30%时,模型维持时间小于7 d;下降至基础心率的30%~60%时,模型维持时间可达70 d;下降大于60%基础心率的模型动物死亡率较高;(3)阳性药物的验证:阿托品和心宝丸均增加窦房结损伤模型心率,改善窦房结功能的作用。结论 甲醛湿敷法建立兔窦房结损伤模型较滴注法可靠性更高,损伤程度宜将心率下降百分率控制在基础心率30%至60%之间,模型维持时间长且动物死亡率低。     

犬窦房结组织带蒂自体移植治疗完全性房室传导阻滞疾病的实验研究

目的将窦房结组织带蒂移植入自体心室中,通过观察带蒂移植的窦房结组织能否存活并与心室肌建立细胞连接;射频消
融希氏束建立完全性房室传导阻滞动物模型,观察其能否起搏心室;为完全性房室传导阻滞探索新的治疗思路和方法。方法健
康家犬10只,随机分为移植组和对照组,每组各5只。安置临时心外膜起搏导线后,将犬窦房结组织带蒂移植于实验组自体右
心室心外膜下,对照组仅切除窦房结组织,于第1、2、3、4周观测体表心电图变化。4周后射频消融希氏束,建立完全性房室传导
阻滞动物模型。建立模型后对两组动物经股静脉微泵注射异丙肾上腺素（ISO）,观察心率变化。并观测带蒂移植后的窦房结组
织学及超微结构变化。结果体表心电图无明显变化。射频消融希氏束后,移植组和对照组均表现为完全性房室传导阻滞心电
图,两组室性心率无明显差别（P>0.05）。注射ISO后,两组室性心率改变不明显（P>0.05）。带蒂移植的窦房结组织可以存活,
并与心室肌细胞建立桥粒连接,但细胞连接数目不多,不能起搏心室。结论带蒂移植入自体心室的窦房结组织细胞可以和心肌
细胞建立细胞连接。
     

Effect of Qiangxin Fumai Granule（强心复脉颗粒） on Electrophysiological Functions of the Sinoatrial Node during Ischemia-reperfusion of the Right Coronary Artery in Rabbits

Objective： To study the effect of the Chinese medicine Qiangxin Fumai Granule （强心复脉颗粒, QFG） on electrophysiological functions of the sinoatrial node during ischemia-reperfusion （IR） of the right coronary artery in rabbits. Methods： The right coronary artery IR model in rabbits was adopted. The modeled rabbits were randomly divided into 4 groups： the model group, the atropine group, the highdose QFG group, and the low-dose QFG group, with 8 animals in each group. In addition, twelve rabbits were selected for the sham-operative group. The drugs were administered once via duodenal perfusion after modeling had been stabilized for 10 min. The changes in AA interval, the sinoatrial conduction time （SACT）, the sinus node recovery time （SNRT）, the corrected sinus node recovery time （CSNRT） and the index of sinus node recovery time （ISNRT） at different time points during ischemia and reperfusion were measured. Results： The AA interval was prolonged for more than 40 ms in the model group during ischemia. Compared with the model group, the four electrophysiological parameters abovementioned in the high-dose QFG group and the low-dose QFG group were decreased to different extents at each time point （P〈0.01 or P〈0.05）, and no statistically significant differences were found between the QFG groups and the atropine group （P〉0.05）. Conclusion： QFG is beneficial for accelerating the recovery of sinus node autorhythmicity and conduction function, so as to protect electrophysiological functions of the sinoatrial node. Accelerating the recovery of autorhythmicity and conduction function in the sinus node is considered its electrophysiological mechanism in the treatment of sinoatrial node injury induced by ischemia.     

去辣椒素敏感性窦房结传入神经的大鼠模型的建立

目的:探讨建立去除大鼠辣椒素敏感性窦房结传入神经模型的方法.方法:在大鼠上腔静脉周围应用高浓度的辣椒素建立去辣椒素敏感性窦房结传入神经模型,通过免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测传入神经递质P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)的变化.结果:经辣椒素处理后在不同的观察时间,激光共聚焦显微镜观察显示窦房结区域CGRP和SP阳性神经纤维消失,而假手术组大鼠则清楚地呈现CGRP和SP的阳性神经纤维.结论:应用高浓度的辣椒素于大鼠上腔静脉根部周围可以建立去辣椒素敏感性窦房结传入神经大鼠模型.该模型指标稳定,造模方法可重复性强.     

益阳活血方对损伤兔窦房结组织保护的形态学研究

目的探讨中药复方益阳活血方对甲醛引起的兔窦房结组织损伤的保护作用。方法取60只大耳白兔,随机分为正常组,模型组,阿托品组,益阳活血方高、中、低剂量组,每组10只,除正常组不造模外,余各组采用甲醛加压注射渗透法建立兔窦房结组织损伤模型,模型稳定后开始给药,疗程(7 d)结束后取材,光镜、电镜下观察窦房结组织病理形态学变化。结果除正常组外,各实验组均有不同程度的窦房结细胞损伤。光镜下主要表现为细胞肿胀,炎性细胞浸润以及细胞坏死等病变,电镜下主要表现为线粒体肿胀,嵴断裂、减少,核膜不规则,核仁裂解,染色质边集等。对比各治疗组窦房结组织病理形态学改变可以看出,益阳活血方高剂量组优于中、低剂量组及阿托品组。结论益阳活血方对窦房结组织病理性损伤有明显的保护作用,可能是治疗病态窦房结综合征的机制之一。     

L-精氨酸对兔右冠状动脉缺血再灌注时窦房结功能及房室结传导有效不应期的干预作用

目的 观察L-精氨酸(L-Arg)对兔右冠状动脉缺血再灌注(IR)窦房结(SAN)传导时间(SACT)和恢复时间(SNRT)及房室结(AVN)传导有效不应期(AVERP)的影响。方法 在体成年兔右冠状动脉缺血再灌注模型分4组正常对照组,IR(缺血90min,再灌注90min)+生理盐水组,IR+L-Arg组和IR+左型精氨酸甲酯(L-NAME)组。在不同时相分别测定各组心房快速起搏或程序电刺激后的SACT、SNRT和AVERP。结果 IR+L-Arg组缺血期及再灌注早期3项指标均有不同程度的下降,而再灌注后期升高;IR+L-NAME组结果却基本相反(P<0.01)。3组组内比,IR+L-Arg组和L-NAME组于缺血期与再灌早期3项指标均升高;再灌注后期,IR+L-Arg组无治疗意义甚至加重SAN和AVN损伤,而IR+L-NAME组3项指标下降。结论 随着缺血时间延长SAN功能损伤加重;早期再灌注损伤敏感;组织内适当补充L-Arg,于缺血期和再灌早期对SAN电生理功能和AVERP恢复是有益的,于再灌注后期可能加重损伤。     

L-精氨酸对兔右冠状动脉缺血再灌注时窦房结功能及房室结传导有效不应期的干预作用

OBJECTIVE: To study the effect of L-arginine (L-Arg) on sinoatrial conduction time (SACT) and sinus node recovery time (SNRT) and atrioventricular nodal effective refractory period (AVERP) in the course of ischemia- reperfusion (IR) of the right coronary artery in rabbits. METHODS: Thirty-two rabbit models of ischemia-reperfusion of the right coronary artery were randomly divided into control group, IR+saline group, IR+L-Arg group and IR+ L-arginine-methyl ester (IR+L-NAME group, 8 rabits in each group. At different time points after ligation or loosening of the artery, SACT, SNRT and AVERP were measured respectively by fast pacing of the right atrium and programmed electrical stimulations. RESULTS: Compared with the control group, SACT, SNRT and AVERP of the other groups were all prolonged significantly P<0.01 . In comparison with IR+NS group, at each time point, SACT, SNRT and AVERP of IR+L-Arg group were decreased during ischemia and in the early phases of reperfusion, followed by elevation during the latter stages of the reperfusion, as were contrary to the changes in IR+L-NAME group. CONCLUSIONS: The longer duration of ischemia persists, the severer are the functional damages of the sinoatrial node. Adequate supply of L-Arg to the tissues during ischemia and the early stages of the reperfusion may alleviate the damages, but its administration in the latter stages of reperfusion might contribute to the contrary result.     

大鼠窦房结电压门控钠通道不同亚型的表达及其对心率的影响

目的 检测大鼠窦房结中电压门控钠通道不同亚型的表达情况并探讨其功能.方法 采用免疫荧光技术检测钠通道亚型Nav1.1、Nav1.2、Nav1.3、Nav1.5、Nav1.6、Nav1.7在大鼠窦房结中的表达,用激光共聚焦显微镜进行观察和图像分析.建立大鼠离体灌流心脏模型,观察钠通道特异性阻断剂河豚毒素对离体灌流心脏自发性节律即固有心率的影响.结果 河豚毒素敏感的神经型钠通道亚型Nav1.1、Nav1.6、Nav1.7以及河豚毒素不敏感的心脏型Nav1.5均存在于大鼠窦房结组织中,但是神经型钠通道的蛋白表达更为丰富(P＜0.05).100 nmol/L河豚毒素灌流可以选择性阻断神经型钠通道亚型(推测为Nav1.1、Nav1.6、Nav1.7),同时不阻断河豚毒素不敏感的钠通道亚型(推测为Nav1.5),大鼠固有心率不受影响[(0.5±2.9)%,P＞0.05];2 μmol/L河豚毒素同时阻断河豚毒素敏感的钠通道亚型以及对河豚毒素不敏感的钠通道亚型后,大鼠固有心率显著下降[(22.1±2.1)%,P＜0.001].结论 Nav1.1、Nav1.5、Nav1.6和Nav1.7在大鼠窦房结组织中均有表达.虽然神经型钠通道亚型的蛋白含量更为丰富,心脏型Nav1.5对于维持正常的窦房结活动可能更为重要.     

ATP敏感性钾通道开放剂对培养乳鼠窦房结细胞模拟缺血时细胞活性的影响

目的 观察ATP敏感性钾（KATP）通道开放剂对模拟缺血窦房结细胞活性的细胞,并探讨其作用机制。方法 取培养2d的窦房结细胞,以低渗（85msmol/L）台盼蓝染色四唑盐（MTT）比色观察窦房结细胞活性的变化。结果 模拟缺血4h后,窦房结细胞脆性增加、活性降低;KATP通道开放剂Pinacidil和Diazoxide能显著降低模拟缺血窦房结细胞脆性,增加细胞的活性,但两组间无明显的统计学差异;KATP通道阻断剂5-HD能逆转Pinacidil及Diazoxide的上述作用。结论 KATP通道开放剂Pinacidil和Diazoxide对缺血窦房结细胞具有显著的保护作用,但这种效果能为KATP通道阻断剂5-HD阻断。本研究提示窦房结细胞线粒体内膜可能有KATP通道存在,它的开放可能是细胞获得保护的关键。