TNF-α在实验性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用

目的探讨TNF-α抑制剂在大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤中的保护作用及其机制。方法健康成年雄性SD大鼠48只,体质量250～300 g,按随机数字表法分为假手术组、SAH组、安慰剂组和TNF-α抑制剂组。采用经视交叉前池注血法建立SAH模型,各组于处理后24 h,对实验动物临床行为进行评估;应用免疫组化方法检测大鼠脑皮层TNF-α表达;应用Western blot方法检测大鼠脑皮层MMP-9蛋白表达。结果免疫组化显示:SAH组大鼠皮层神经元TNF-α表达明显升高,显著高于假手术组;TNF-α抑制剂组TNF-α表达明显下降(P<0.01)。Western blot检测结果显示:假手术组大鼠MMP-9蛋白表达较低[(2.03±0.21)%];SAH组大鼠皮层MMP-9含量明显升高[(98.92±8.33)%,P<0.01];TNF-α抑制剂组MMP-9蛋白表达降低[(52.12±6.25)%],与SAH组相比差异有统计学意义(P<0.01)。临床行为评估显示:TNF-α抑制剂组大鼠临床行为得到明显改善(P<0.01)。结论大鼠SAH后早期脑损伤过程中TNF-α通过调节MMP-9蛋白表达参与SAH后早期脑损伤的病理过程。TNF-α抑制剂能够改善大鼠临床行为,对早期脑损伤发挥保护作用。     

中脑周围非动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者的TNF-α变化及临床意义

目的 检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)在中脑周围非动脉瘤性蛛网膜下腔出血(PNSH)患者血清中的浓度,探讨其变化的临床意义.方法 选取我院2013年1月至2016年11月收治的PNSH患者和动脉瘤性蛛网膜下腔出血(ASAH)患者各40例作为PNSH组和ASSH组,另选取本院同期健康体检者40例作为对照组.所有患者于第1天、第5天、第7天、第14天抽取血液样本,采用ELISA法测定血清中TNF-α的浓度.结果 与对照组比较,PNSH组和ASAH组患者血清TNF-α水平明显上升,第5天达到高峰[(20.57±3.80)pg/mL、(26.15±4.60)pg/mL vs(10.13±2.50)pg/mL],随后开始下降,持续到第7天仍有较高表达[(16.34±3.3)pg/mL、(20.30±2.10)pg/mL vs(10.62±2.17)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05).ASAH组TNF-α浓度在相同的时间点明显高于PNSH组,差异有统计学意义(P<0.05).PNSH组和ASAH组患者的脑血管痉挛(CVS)的程度越重,TNF-α的表达水平越高.PNSH组的CVS发生率为52.5%,明显低于ASAH组的72.5%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TNF-α可作为鉴别ASAH与PNSH的一个参考指标.     

辛伐他汀对蛛网膜下腔出血患者内皮素的影响

目的：研究服用不同剂量的辛伐他汀对蛛网膜下腔出血患者脑脊液和血清内皮素的影响。方法：蛛网膜下腔出血患者被分层随机分配到3组，在基础治疗的基础上给10mg，20mg辛伐他汀或不服辛伐他汀，于0、7和14天时测定脑脊液和血清内皮素浓度。结果：辛伐他汀组患者临床表现较对照组改善明显，治疗7天后，辛伐他汀组患者血清及脑脊液内皮素含量较对照组明显降低，14天时2辛伐他汀组间内皮素含量也有显著性差异。结论：辛伐他汀可降低蛛网膜下腔出血患者血清及脑脊液内皮素含量从而改善临床症状。     

辛伐他汀对蛛网膜下腔出血患者内皮素的影响

目的研究服用不同剂量的辛伐他汀对蛛网膜下腔出血患者脑脊液和血清内皮素的影响.方法 蛛网膜下腔出血患者被分层随机分配到3组,在基础治疗的基础上给10 mg,20 mg辛伐他汀或不服辛伐他汀,于0、7和14天时测定脑脊液和血清内皮素浓度.结果辛伐他汀组患者临床表现较对照组改善明显,治疗7天后,辛伐他汀组患者血清及脑脊液内皮素含量较对照组明显降低,14天时2辛伐他汀组间内皮素含量也有显著性差异.结论辛伐他汀可降低蛛网膜下腔出血患者血清及脑脊液内皮素含量从而改善临床症状.     

辛伐他汀联合硫酸镁治疗蛛网膜下腔出血的疗效观察

目的：观察辛伐他汀联合硫酸镁治疗蛛网膜下腔出血患者的疗效。方法：将发病1d内60例蛛网膜下腔出血患者随机分为治疗组和对照组。对照组用尼莫地平加氨甲环酸及降颅压、维持水电解质平衡等常规治疗;治疗组在此基础上每天加用25％硫酸镁15mL加生理盐水250mL静滴,辛伐他汀10mg口服,治疗14d。1个月后观察CVS发生率、死亡率和再出血率及3个月后电话随访进行欧洲卒中评分（ESS）、日常生活活动能力评分（ADL）和疗效评定。结果：治疗组与对照组1个月后CVS发生率分别为10．0％、33．3％、死亡率分另q为6．7％、26．7％、再出血率分别为6．7％、26．7％。3个月后总有效率分别为90．0％和50．0％,两组比较差异有统计学意义（P〈0．001）。结论：辛伐他汀联合硫酸镁在SAH后CVS的防治中,能降低CVS的发生率,减少死亡率和再出血发生率,并能改善患者日常生活活动能力。     

清脑定痛汤对蛛网膜下腔出血患者血清IL-6、TNF-α的影响

[目的]观察蛛网膜下腔出血(SAH)患者血清白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化及清脑定痛汤对其的影响。[方法]SAH患者随机分成中西结合组、西药治疗组和西药对照组,分别治疗2周后,对比观察血清IL-6、TNF-α水平的变化。[结果]各组蛛网膜下腔出血患者血清IL-6、TNF-α均升高;清脑定痛汤结合西药治疗能明显降低SAH血清IL-6、TNF-α水平。[结论]蛛网膜下腔出血患者血清IL-6、TNF-α升高,清脑定痛汤与西药结合能有效降低SAH血清IL-6、TNF-α水平,中西药有很好的协同作用。     

辛伐他汀对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌中TNF-α的影响

目的探讨辛伐他汀对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响及其对糖尿病心肌病的作用。方法雄性Wistar大鼠54只,随机分为正常对照组（A组）;糖尿病组（B组）;糖尿病干预组（C组）。于实验的4周、8周和12周分别取6只大鼠称重,测定血糖,血清胰岛素、TNF-α含量,心肌中TNF-α的表达;光镜下观察心肌形态结构变化。结果与正常对照组相比,糖尿病组和辛伐他汀干预组TNF-α显著高于正常对照组（p〈0.01）,且辛伐他汀干预组TNF-α显著低于糖尿病组（p〈0.01或p〈0.05）。光镜下辛伐他汀干预组心肌病变较糖尿病组明显减轻。结论糖尿病心肌组织中TNF-α的升高与糖尿病心肌病变的发生密切相关,辛伐他汀可通过降低TNF-α的表达,减轻心肌病变,从而对糖尿病心肌病起到了保护作用。     

辛伐他汀对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌中TNF-α的影响

目的 探讨辛伐他汀对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响及其对糖尿病心肌病的作用.方法 雄性Wistar大鼠54只,随机分为正常对照圣且(A组);糖尿病生且(B组);糖尿病干预组(C组).于实验的4周、8周和12周分别取6只大鼠称重,测定血糖,血清胰岛素、TNF-α含量,心肌中TNF-α的表达;光镜下观察心肌形态结构变化.结果 与正常对照组相比,糖尿病组和辛伐他汀干预组TNF-α显著高于正常时照组(p<0.01),且辛伐他汀干预组TNF-α显著低于糖尿病组(p<0.01或p<0.05).光镜下辛伐他汀干预组心肌病变较糖尿病组明显减轻.结论 糖尿病心肌组织中TNF-α的升高与糖尿病心肌病变的发生密切相关,辛伐他汀可通过降低TNF-α的表达,减轻心肌病变,从而对糖尿病心肌病起到了保护作用.     

辛伐他汀联合尼莫地平治疗蛛网膜下腔出血的临床观察

目的探讨辛伐他汀联合尼莫地平对蛛网膜下腔出血（SAH）的治疗作用。方法将96例原发性SAH患者随机分为治疗组和对照组,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上给予辛伐他汀联合尼莫地平治疗。比较两组患者神经功能缺损情况和脑血管痉挛、脑积水、再出血的发生率及病死率。结果治疗组较对照组患者神经功能缺损评分、脑血管痉挛、脑积水发生率及病死率明显降低（P〈0．05）,而再出血与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论辛伐他汀联合尼莫地平能明显改善SAH患者的神经功能,同时可以减少SAH后脑血管痉挛和脑积水的发生,降低病死率。     

辛伐他汀对蛛网膜下腔出血患者血清NO和NOS的影响

1 临床资料 第一次发作蛛网膜下腔出血(SAH)患者86例,发病后1～34(平均7.2) h入院.分为10 mg辛伐他汀组:30(男15,女15)例,年龄32～65(平均51.6)岁;20 mg辛伐他汀组:30(男16,女14)例,年龄33～64(平均50.9)岁;对照组:26(男14,女12)例,年龄30～62(平均49.6)岁.3组患者性别、年龄、血脂水平均无显著性差异,均无心、肺、肾疾病史.腰穿为均匀血性脑脊液,经CT证实并排除血肿及脑实质出血.除常规治疗外,每天分别口服辛伐他汀10 mg或20 mg连服2 wk.Ⅱ,Ⅲ级患者于发病1 wk内行DSA检查,所有患者均于7～10 d或有临床症状时行TCD检查.于治疗后0,7和14 d采血待测一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS).10 mg组8例发生脑血管痉挛,20 mg组5例发生脑血管痉挛,对照组9例发生脑血管痉挛,3组间无明显差异.收治时组间Hunt's分级无差异,治疗2 wk后经重新Hunt's分级并进性Rigit分析,3组间有显著性差异(P＜0.05).治疗过程中血清NO和NOS含量有变化(表1).     

一种简易大鼠蛛网膜下隙出血模型的建立

目的建立一种操作简单、重复性好的蛛网膜下隙出血(SAH)动物模型。方法42只Wistar大鼠随机分为SAH组、假手术组和正常对照组。SAH组鼠尾取血(用自制套管针控制注血深度)注入枕大池造成SAH,假手术组注入等量的生理盐水,正常对照组不做处理。以LOEFFLE神经行为学评分方法和解剖学观察进行模型的评价。结果SAH组各时点神经行为学评分明显低于假手术组相应各时点(t=4.78～10.30,P<0.01)。正常对照组及假手术组大鼠蛛网膜下隙未见积血,SAH组大鼠枕大池见片状积血。结论枕大池注血法建立SAH大鼠模型简单、可靠,重复性好。     

肿瘤坏死因子基因转导的肿瘤疫苗对小鼠机体免疫的影响

目的：用肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞作为肿瘤疫苗，研究其对小鼠机体免疫活性的影响。方法：小鼠分5组，采用经^60Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癌细胞(BEL—7404—TNF—^60Co)、未经^60Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癫细胞(BEL—7404—TNF)、经^60Co照射的人肝癌细胞(BEL—7404—^60Co)、未经^60Co照射的人肝癌细胞(BEL—7404)和生理盐水分别接种小鼠，用MTT法检测各组小鼠脾脏NK细胞活性，用SABC免疫组化法检测T淋巴细胞亚群。结果：肿瘤疫苗接种小鼠后，BEL—7404—TNF—^60Co组小鼠脾脏NK细胞活性及T淋巴细胞亚群CD4^ 、CD8^ 增高，与BEL—7404组、BEL—7404—^60Co组、生理盐水组相比差异有显著意义(P＜0．05、P＜0．01)。BEL—7404—TNF—^60Co组和BEL—7404—TNF组相比，NK细胞活性、T淋巴细胞亚群CD4^ 、CD8^ 均无显著差异(P＞0．05)。结论：肿瘤坏死因子基因转导的肿瘤疫苗具有提高小鼠机体免疫力的作用。     

水通道蛋白-4对蛛网膜下隙出血后脑水肿的影响

目的研究大鼠蛛网膜下隙出血(SAH)后脑水肿病理过程中水通道蛋白-4(AQP-4)的表达与脑水肿形成之间的关系。方法采用大鼠断尾取血,枕大池注入自体血的方法制作大鼠SAH模型,用干湿质量法和免疫组化法分别检测SAH后不同时间段脑含水量和AQP-4蛋白表达的变化。结果SAH后8 h,脑组织AQP-4蛋白在脑水肿区表达开始增强,至2 d达到高峰,此时脑组织严重水肿;第7天,AQP-4的表达已减少,脑水肿减轻。结论SAH后AQP-4表达明显增强,与脑水肿呈正相关关系。AQP-4可能在SAH后脑水肿的形成过程中起重要作用。     

肿瘤坏死因子对大鼠纤维连接蛋白的作用

静脉注射肿瘤坏死因子(TNF,30μg/100g体重)后,大鼠血浆纤维连接蛋白(Fn)含量逐渐降低(与实验开始时比),1/2h时最明显(P<0.05)。对照组无明显变化。血浆Fn与TNF一起体外孵育未见Fn降低,因此TNF的上述作用似非直接。与此同时,组织Fn含量及免疫荧光强度均增加,尤以肾内变化为显。由于血浆Fn降低,而组织Fn升高,因此TNF通过增强微血管通透性导致血浆Fn向组织转移的可能性有待进一步证实。     

一种非开颅大鼠蛛网膜下腔出血动物模型的建立

目的:建立一种有效模拟临床颅内动脉瘤破裂后蛛网膜下腔出血病理生理过程的大鼠SAH模型.方法:显微操作经颈外动脉导入尼龙线至颈内动脉颅内段,刺破其分叉处造成大鼠SAH,观察各实验组大鼠死亡率、神经行为功能、脑含水量、大体病理解剖及海马区病理变化.结果:SAH模型成功率96.7%,死亡率10.34%;实验大鼠蛛网膜下腔发现血液或血凝块凝集;SAH后神经行为异常,24h神经功能评分为3.08±0.56分;脑含水量增加,皮层含水量为80.37±0.58%,脑干含水量为74.14±1.07%;海马CA1区神经元有水肿变性等改变.结论:非开颅血管内线穿刺法能可靠制备大鼠SAH模型并有效模拟临床颅内动脉瘤破裂出血后的蛛网膜下腔出血的病理生理过程.     

胰岛素样生长因子-1在大鼠蛛网膜下隙出血中的表达

①目的观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在大鼠蛛网膜下隙出血中的表达及意义.②方法采用枕大池注血法建立大鼠蛛网膜下隙出血模型,应用原位杂交方法观察大鼠蛛网膜下隙出血后1 h、2 h、8 h、1 d、2 d、3 d、5 d的IGF-1表达阳性细胞面积、个数及吸光度值,并与正常对照组、假手术组进行比较.③结果大鼠蛛网膜下隙出血后2 h～3 d实验组各脑区IGF-1表达阳性细胞面积、个数及吸光度值均明显高于正常对照组和假手术组,差异有显著性(F=12.65～792.89,q=4.36～76.39,P<0.05);大鼠蛛网膜下隙出血后1 h实验组脑皮质区吸光度值较假手术组高(q=4.36,P<0.05).皮质IGF-1的表达高峰出现较丘脑和海马区早1 d.④结论 IGF-1在大鼠蛛网膜下隙出血后的病理生理过程中可能起着非常重要的作用.     

大鼠蛛网膜下隙出血后骨髓源性神经干细胞移植对脑组织的修复作用

目的探讨大鼠蛛网膜下隙出血（SAH）后骨髓源性神经干细胞（BMSCs-D-NSCs）移植对脑组织的修复作用。方法成功建立Wistar大鼠SAH模型后,随机分为对照组、DMEM组和BMSCs-D-NSCs组,SAH模型两次采用枕大池注入0.3mL自体血的方法建立,后两组在模型制作后24h于枕大池分别注入30μL的DMEM和BMSCs-D-NSCs。BMSCs-D-NSCs用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记。用神经功能等级评分对移植后大鼠的神经功能进行评估;用免疫组化染色观察BrdU阳性细胞。结果BMSCs-D-NSCs组10～40d神经功能等级评分与其他两组相比,差异有显著统计学意义（F=3.508～4.444,q=3.01～3.67,P〈0.05）。在BMSCs-D-NSCs移植后约40d,取脑组织行免疫组织化学染色检查,大脑皮质内可见BrdU阳性细胞存在。结论SAH后移植BMSCs-D-NSCs可以有效地促进大鼠神经功能的恢复;BMSCs-D-NSCs能够分化为神经元从而发挥对SAH后的大脑的修复作用。     

TUMOR NECROSIS FACTOR-ALPHA POLYMORPHISM AND SECRETION IN MYASTHENIA GRAVIS

Objective To analyze the relationship between tumor necrosis factor-alpha (TNFo) gene promoter -308 polymorphism and myasthenia gravis (MG) in Chinese and analyze secretion of TNFo in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) in MG patients.Methods A biallelic polymorphism at position -308 in the promoter of TNFα gene was screened by PCR amplification and NcoI recognition site. One hundred and twenty-three MG cases and 115 healthy controls were included in this study. MG patients were classified to different groups according to clinical type, age at onset, and sex respectively. PBMC were isolated from 20 patients and 20 healthy controls, and then cultured in the presence or absence of phytohemagglutinin (PHA) and acetycholine receptors (AchR). The supernatants were harvested after incubation and stored until TNFαwas assayed by enzyme-linked immunosorbent assay.Results The frequency of TNFα-308 allele 2 (A) was found significantly increase in MG patients and showed a trend especially in late onset (≥ 40 years) and male patients (P ＜ 0.05). The allele A had no relationship with thymic pathogenesis in MG patients. But frequency of allele A was significantly higher in general type than in ocular type (P ＜ 0.05). MG patients had a higher inducible level of TNFα by PHA and AchR, and could be down regulated after treatment.Conclusion Polymorphism in TNFα gene promoter -308 is associated with onset of MG. The microsatellite allele TNFα2 confer risk for the development of MG in Chinese patients. MG patients have a higher inducible level of TNFα.     

氨溴索对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺的保护作用

①目的　探讨氨溴索对肿瘤坏死因子α(TNF α)在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)大鼠模型肺内表达与分布的影响以及肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的影响。②方法　实验大鼠随机分为 3组 :健康对照组 (n =8) ,COPD模型组 (n =1 2 ) ,氨溴索干预组 (n =1 2 )。采用熏吸香烟并气管内注入脂多糖法建立大鼠COPD模型 ,氨溴索干预组于COPD模型开始建立时腹腔注射氨溴索溶液 4 0mg/ (kg·d) ,连续 4 0d。观察各组气道炎症的病理特点、超微结构特点、血气指标、肺泡平均内衬间隔、平均肺泡数。应用原位杂交法检测TNF α基因表达的相对含量。③结果　所建COPD模型的病理以及病理生理学改变符合人类COPD的特点。氨溴索干预组肺泡平均内衬间隔、平均肺泡数、TNF α表达强度与健康对照组、COPD模型组比较差异有显著性 (F =3.2 4～ 1 1 .1 1 ,q =4 .74～ 36 .2 2 ,P <0 .0 1 ) ;动脉血氧分压、二氧化碳分压差异亦有显著性 (F =3.30、8.79,q =3.5 0～ 8.6 9,P <0 .0 5 )。 ④结论　长期应用氨溴索对COPD大鼠模型气道炎症有明显的抑制作用