蜂毒肽对新生大鼠心肌细胞Na^＋,K^＋—ATP酶基因表达的影响

目的　观察蜂毒肽对新生大鼠培养心肌细胞Na ,K ATP酶α1和 β1亚基mRNA的表达。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术。药物与培养的心肌细胞温育 1h后 ,观察蜂毒肽对Na ,K ATP酶基因表达的影响。用GAPDHmRNA作为内参照。　结果　蜂毒肽对α1亚基mRNA表达有显著促进作用。经GAPDH校正 ,光密度值对照组为 0 .47± 0 .14(n =5 ) ,蜂毒肽 0 .0 1mmol/L组为 0 .6 6± 0 .10 (n =6 ,P <0 .0 5 ) ,哇巴因 1mmol/L组为 0 .6 7± 0 .0 9(n =6 ,P <0 .0 5 )。蜂毒肽 0 .0 1mmol/L组和哇巴因 1mmol/L组对Na ,K ATP酶β1亚基mRNA表达无显著影响。结论　蜂毒肽 0 .0 1mmol/L对Na ,K ATP酶α1亚基mRNA表达有促进作用 ,但对 β1亚基mRNA的表达无促进作用     

MgSO4对大鼠脑缺血再灌流损伤后Na+－K+－ATP酶活性、NO的影响

目的探讨MgSO     

MgSO4对大鼠脑缺血再灌流损伤后Na+－K+－ATP酶活性、NO的影响

目的 :探讨MgSO4 对大鼠脑缺血再灌流损伤的保护作用。方法 :采用线栓法将SD大鼠制成脑缺血再灌流模型 ,分组测定钠泵 (Na -K -ATP酶 )活性、一氧化氮 (NO)含量、脑含水量以及镁剂对其影响。结果 :对照组与假手术组比较 :Na -K -ATP酶活性降低 ,NO含量与脑含水量增加 ,且均有显著性 ;治疗组 ( 50 0mg/kgMgSO4 )与对照组比较 :Na -K -ATP酶活性增加、NO含量及脑含水量降低 ,且均有显著性。结论 :MgSO4 能提高大鼠脑缺血再灌流损伤后Na -K -ATP酶活性 ,降低NO含量及脑含水量 ,对脑损伤有保护作用     

腹主动脉狭窄致心功能不全大鼠主动脉Na+/Ca2+交换功能变化

探讨压力负荷增高致心功能不全大鼠主动脉Na     

旋覆代赭汤及其拆方对RE大鼠血浆Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影响

[目的] 探讨反流性食管炎(RE)食管黏膜血浆细胞能量代谢与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。[方法] 将120只Wistar大鼠按照随机数字法随机分为10组,每组12只,即正常组、模型组、旋覆代赭汤全方组(全方组)、苦降组、甘升组、升降相因组、去苦降组、去甘升组、去升降相因组和西药组;除正常组外,其余9组行"4.2 mm幽门夹+胃底2/3结扎术"造模。治疗14 d后,即造模后第22天处死,检测各组大鼠血浆Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活性。[结果] 实验后各模型组大鼠ATP酶活性低于正常组;全方组、西药组酶活性较好,与正常组差异无统计学意义(P>0.05),与模型组相比有统计学差异(P<0.05);苦降组及去甘升组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),与全方组及西药组比较差异有统计学意义(P<0.05);正常组与其他各组比较,均有统计学差异(P<0.05);西药组与全方组比较,差异无统计学意义。[结论] 旋覆代赭汤全方组能提高模型大鼠血浆Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活性,改善模型大鼠食管黏膜组织形态学病变,且作用优于各拆方组。     

Na+／H+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护机制

[目的]探讨Na /H 交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制.[方法]通过观察糖尿病鼠单个心肌细胞在缺氧/复氧时细胞胞浆Ca2 ＞浓度的动态变化以及Na /H 交换体阻滞剂(EIPA)在不同时相(糖尿病单纯缺氧组即DM组,缺氧/复氧全程给药组即DM-EIPA组,复氧前给药1组即DM-EIPA 1组,复氧前给药2组即DM-EIPA 2组)对Ca2 浓度的影响来研究Na /H 交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制.[结果]DM-EIPA组在180 min的缺氧期间Ca2 浓度的上升幅度显著低于DM组、DM-EIPA 1组和DM-EIPA 2组;在复氧期间DM*EIPA组和DM-EIPA 2组Ca2 浓度的上升幅度显著低于DM组,而前两组之间差异无显著性意义.[结论]EIPA可以通过减轻钙超载而对缺血再灌注的糖尿痛鼠心肌细胞起保护作用,可能对糖尿病心肌病的发生发展有预防作用.     

基于CoroNaTM Green检测细胞内Na+浓度的流式细胞术分析方法的建立和评价

目的:建立并评价以CoroNa Green检测细胞内Na+含量变化的流式细胞术方法。方法:完全生长培养基培养的H9c2心肌细胞分别给予Na+通道阻断剂TTX(最终作用浓度分别为10、50 nmol/L)和Na+通道激动剂Veratridine(最终作用浓度分别为5、10μmol/L),加CoroNa Green后用流式细胞仪对其信号进行检测;H9c2心肌细胞在含有NaCl(最终作用浓度分别为25、50、100、150 mmol/L)的完全生长培养基中培养24 h,加CoroNa Green后用流式细胞仪对其信号进行检测。结果:与阳性对照组相比,等渗状态给予Na+通道阻断剂TTX大于10 nmol/L时胞内荧光信号强度明显减少(P<0.05),而Na+通道激动剂Veratridine对胞内荧光信号强度无明显影响(P>0.05);在高渗状态下,随着NaCl浓度的增高,细胞内荧光信号明显增强(P<0.05),提示Na+内流明显增多。结论:CoroNa Green作为新型的荧光Na+指示剂,与流式细胞术结合,可以简便、有效的检测细胞内游离Na+含量。     

骨骼肌卫星细胞移植对残存心肌细胞游离Ca2+的影响

目的研究骨骼肌卫星细胞移植对梗塞心肌残存心肌细胞游离Ca     

清营汤对家兔脑脊液CKP、血清Na^＋、K^＋及氧自由基的影响

目的：为进一步探讨清营汤治疗温病营分证的作用机理,方法：在成功复制家免实验性营热阴伤动物模型的基础上,采用拆方研究的方法,测定了实验前后家兔脑脊液中肌磷酸激酶（CKP）,血清Na^ ,K^ ,以及超氧化物歧休酶（SOD）,过氧化脂质代谢产物丙二醛（MDA）的变化,结果：清营汤组,滋阴组和清解活化组血浆中MDA的含量皆明显降低,SOD的活力提高,血清K^ ,Na^ 的降低皆受到抑制,其中尤以清营汤组和滋阴组最为显著,清营汤组,滋阴组和清解活化组家兔脑脊液CK的活力明显都低于病理组,基保清营汽组与正常对照组无明显差异,而滋阴组一清解活化组与正常对照组之间差异显著并以清解活化组尤为明显,结论：清营汤的药理作用是多方面的,具有保护脑组织损伤,维持电解质平衡,抗脂质过氧化的作用,其作用的产生与配伍中的滋养营阴药物密切相关。     

MLC2—糜酶融合基因在培养乳鼠心肌细胞中的表达

采用不同程度删除启动子序列的糜酶结构基因和肌球蛋白轻链-2基因（MLC2）启动子相拼接，构建了系列融合基因表达克隆。接改进的磷酸钙介导细胞转染法转染分离培养的Wistar乳鼠心肌细胞，提取细胞总RNA。经Dot-blot杂交和光密度扫描分析显示，融合基因中的MLC2启动子能有效地调控糜酶基因在心肌细胞中转录表达，糜酶结构基因ATG前含有6bP糜酶自身启动子序列的融合基因M88克隆表达水平最高，随着ATG前糜酶启动子序列的增加，融合基因在心肌细胞中的表达水平逐渐降低。     

黄芪注射液对高糖或AGEs培养肾小球系膜细胞增殖和Na+-K+-ATP酶活性的影响

[目的]观察黄芪注射液对高糖或糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)增殖和Na⁺-K⁺-ATP酶活性的影响。[方法]用含高糖或AGEs的培养液配制黄芪注射液、氨基胍,同时设对照。GMC培养48h后,四甲基氮唑盐(MTT)法考察GMC的增殖情况,试剂盒测试细胞悬液中细胞蛋白含量,再进行Na⁺-K⁺-ATP酶测定。[结果]葡萄糖或AGEs中GMC的吸收度值增大,Na⁺-K⁺-ATP酶活性显著降低,与正常培养液比较具有显著性差异。而加入黄芪注射液后,则表现为对抗高糖或AGEs对GMC的增殖作用,并能提高Na⁺-K⁺-ATP酶活性。[结论]黄芪注射液能抑制高糖或AGEs对GMC的过度增殖,修复高糖或AGEs致GMC的Na⁺-K⁺-ATP酶活性降低,起到保护细胞的作用。     

脑梗塞患者ET与红细胞膜Na^＋-K^＋，Ca^2＋-Mg^2＋ ATP酶的关系及其对血液粘度的影响

目的探讨脑梗塞患者(CI)血浆内皮素(ET)水平与红细胞膜Na+-K+、Ca2+-Mg2+ATPase活力的关系及其对血液粘度的影响.方法测定49例CI和29例健康人的ET、Na+-K+ATPase、Ca2+-Mg2+ATPase以及血液粘度等指标.结果CI组ET水平与Na+-K+ATPase、Ca2+-Mg2+ATPase活力呈明显负相关(P均＜0.05);与ηb、ηp、ηre、HCT、K值、EAT、TK呈明显正相关.多元逐步回归统计分析ηb与ET的关系最为密切(P＜0.01).结论①ET、Na+-K+,Ca2+-Mg2+ATP酶活力的变化能引起血液粘度改变.其中ET主要是通过收缩血管,改变红细胞膜Na+-k+泵、Ca2+泵的活性,导致红细胞变形能力下降.②临床上采用保护血管张力的药物、稀释血液等综合治疗,能有效地预防和治疗脑动脉粥样硬化和CI.     

黄精多糖预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的 研究黄精多糖(Polygona-Polysaccharose,PSP)预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)损伤的保护作用及与其抗氧化作用的关系.方法 实验用SD新生大鼠(出生1～3 d)20只,雌雄不拘,常规方法培养心肌细胞,在培养48 h后按随机数字表法分为4组(每组重复实验6次):正常对照组(Control组)、A/R组、缺氧预处理(anoxia preconditioning,APC)组(APC+AR组,3次短暂缺氧复氧,再进行A/R操作)、PSP预处理组(PSP+A/R组).对以下指标进行检测:细胞存活率(MTT法),培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性;心肌细胞凋亡率(流式细胞仪).结果 与对照组比较,A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中SOD活性均明显降低(均P<0.01),而细胞培养液中MDA含量、LDH活性及心肌细胞凋亡率均明显增加(均P<0.01).与A/R组比较,APC+A/R组与PSP+A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中SOD活性均明显增加(均P<0.01),同时细胞培养液中MDA含量、LDH活性及心肌细胞凋亡率均明显降低(均P<0.01).与APC+A/R组比较,PSP+A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中MDA含量及LDH、SOD活性和心肌细胞凋亡率差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 PSP预处理可减轻心肌细胞A/R损伤,具有模拟APC作用,其机制可能与PSP的抗氧化作用有关.     

2型糖尿病性血管病和红细胞膜Na+.K+-ATP酶活性

目的探讨2型糖尿病性血管病患者的红细胞膜Na     

表没食子儿茶素没食子酸酯预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤保护及相关机制的研究

目的 建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤模型,探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及相关机制.方法 分离培养SD乳鼠心肌细胞,心肌细胞在培养48 h后随机分为3组(每次取18只乳鼠,每组实验重复6次):正常对照组、A/R组、EGCG预处理组(EGCG+A/R组).采用MTT比色法测定各组心肌细胞存活率,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,黄嘌呤氧化酶法测定各组心肌细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的含量,硫代巴比妥酸法测定各组心肌细胞内丙二醛(MDA)的含量,流式细胞分析仪检测各组心肌细胞内活性氧(ROS)的含量.结果 与对照组比较,A/R 组心肌细胞存活率、细胞内SOD含量均明显降低(均P<0.01),而心肌细胞内MDA、ROS以及细胞释放的LDH均明显增加(均P<0.01).与A/R组比较,EGCG+A/R组心肌细胞存活率、细胞内SOD含量均明显增加(均P<0.01),同时心肌细胞内MDA、ROS及细胞释放的LDH均明显降低(均P<0.01).结论 EGCG预处理可减轻心肌细胞A/R损伤,其机制可能为EGCG增加了细胞的内源性抗氧化剂活性,降低心肌细胞A/R后氧自由基的生成.