蛋白质组学在糖尿病研究中的应用

蛋白质组学是对基因编码蛋白质进行大规模分析的一门新兴学科。通过蛋白质组学方法可以发现脂肪细胞中与胰岛素抵抗相关的蛋白质;研究1型糖尿病中白细胞介素(IL)-1的致病过程;寻找血浆、尿液中的糖尿病标志蛋白;根据肾脏、心脏的蛋白质变化分析糖尿病肾病发病的关键酶如弹性蛋白酶等,及糖尿病心肌病的主要靶点如线粒体等;研究噻唑烷二酮类药物的降脂、降压、降糖的综合作用等。蛋白组学的进一步完善与发展,必将为糖尿病的治疗开辟新的方向。     

蛋白质组学在糖尿病研究中的应用

蛋白质组学是对基因编码蛋白质进行大规模分析的一门新兴学科.通过蛋白质组学方法可以发现脂肪细胞中与胰岛素抵抗相关的蛋白质;研究1型糖尿病中白细胞介素（IL）-1的致病过程;寻找血浆、尿液中的糖尿病标志蛋白;根据肾脏、心脏的蛋白质变化分析糖尿病肾病发病的关键酶如弹性蛋白酶等,及糖尿病心肌病的主要靶点如线粒体等;研究噻唑烷二酮类药物的降脂、降压、降糖的综合作用等.蛋白组学的进一步完善与发展,必将为糖尿病的治疗开辟新的方向.     

糖尿病肾病患者血浆动态蛋白质组学研究

目的探讨糖尿病肾病（DN）患者血浆差异蛋白表达情况,为寻找DN敏感血浆蛋白标志物提供依据。方法 4例确诊的DN患者（DN组）和4例健康人群（对照组）作为研究对象,应用荧光差异双向凝胶电泳分析两组血浆蛋白质组差异表达,以上调或下调1.5倍为截断值筛选出差异表达的蛋白质斑点进行质谱分析。结果成功构建DN患者血浆蛋白差异表达双向凝胶电泳图谱,并分析鉴定出6种差异表达蛋白;通过质谱分析和蛋白质数据库（UniProtKB/Swiss-Prot）比对鉴定出6种蛋白质,分别为补体C3、C4、凝溶胶蛋白前体、纤维蛋白原γ、载脂蛋白E和细胞骨架蛋白16。结论荧光差异双向凝胶电泳可鉴定筛选出DN患者与正常人群差异表达的血浆蛋白质,并为进一步筛选DN血浆蛋白标志物提供依据。     

尿液microRNA-196a与肾脏疾病患者远期预后的关系

目的:探讨尿液microRNA-196a(miR-196a)能否作为预测局灶节段性肾小球硬化(FSGS)远期预后的生物标志物。方法:收集FSGS患者和正常对照的尿液和血浆标本,分析尿液和血浆miR-196a水平与FSGS活动性的关系。入选231例经肾活检确诊的FSGS,qRT-PCR方法检测尿液miR-196a水平,评估尿液miR-196a对FSGS预后的预测价值。结果:尿液miR-196a水平在活动性FSGS患者组显著高于肾脏疾病完全缓解组和正常对照组(P0.001),血浆miR-196a水平在三组之间无明显差异,表明尿液miR-196a是一种主要来源于肾脏的生物标志物。231例随访患者中,43例进展为终末期肾病(ESRD)。发生ESRD的患者尿液miR-196a水平显著高于未发生ESRD的患者(P=0.025)。尿液miR-196a水平与蛋白尿和估算的肾小球滤过率(e GFR)相关,与肾间质纤维化评分存在相关性。随着尿液miR-196a水平增加,患者发生ESRD的风险增加。校正年龄、性别、蛋白尿、e GFR后尿液miR-196a升高仍是患者进展至ESRD的独立危险因素。结论:尿液miR-196a是FSGS患者发生ESRD的独立危险因素,可能成为预测FSGS远期预后的新型生物标志物。     

尿液蛋白质组学与糖尿病肾病

蛋白质组学是系统研究细胞或组织全套蛋白质生物学信息的科学,其中尿液蛋白质组学以其独特的优点广泛应用于基础和临床研究领域.糖尿病肾病是糖尿病最常见且危害巨大的并发症之一,许多学者运用尿液蛋白质组学分析方法对糖尿病肾病进行研究,发现了一些与糖尿病肾病相关的生物学标志及可能的发生机制,展示了尿液蛋白质组学技术在糖尿病肾病早期诊断、动态监测病情及发现新的治疗靶点方面的前景.     

以血栓性微血管病为特征的系统性红斑狼疮肾损害——附20例临床病理及预后分析

目的:分析以血栓性微血管病(TMA)为特征的系统性红斑狼疮(SLE)肾损害(SLE-肾脏TMA)患者的临床、病理特征及预后。方法:从2005年1月至2016年12月2 332例SLE首次肾活检标本中筛选出符合SLE-肾脏TMA病例,即有肾小球TMA和/或间质血管TMA,无内皮下或上皮侧免疫复合物(IC)沉积的患者。回顾性分析这些患者的临床病理特征及预后。结果:20例患者病理符合SLE-肾脏TMA,临床均有急性肾损伤及血液系统受累,其中11例(55%)需肾脏替代治疗(RRT),12例(60%)有肾病综合征,13例(65.0%)存在TMA三联征。17例(85.0%)患者肾小球TMA伴血管TMA,8例(40%)肾组织无IC沉积,12例(60%)仅系膜区少量IC沉积。尿蛋白定量与足突融合范围正相关。20例均接受强化免疫抑制治疗,11例治疗初需RRT患者均摆脱透析,15例(75%)获完全缓解,4例(20%)获部分缓解。中位随访58.0(36.0,92.3)月, 5例肾病复发,无一例进展至终末期肾病或死亡。结论:以TMA为特征的肾损伤在SLE肾活检病例中并不少见,临床表现特殊且肾损伤重,应作为SLE肾损伤的一种独特类型。这类患者肾功能损伤重,但经强化免疫抑制治疗预后良好。     

蛋白质组学技术在慢性阻塞性肺疾病研究中的应用

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是全球范围常见疾病,其发病机制相当复杂,主要涉及氧化/抗氧化失衡、蛋白酶/抗蛋白酶失衡、炎症机制和细胞凋亡4个大的方面,而氧化/抗氧化失衡是COPD发生的关键机制,到目前为止COPD的发病机制仍然没有完全阐明.而蛋白质组学从整体的角度研究蛋白质,能精确地反映细胞、组织或器官中蛋白质动态变化,探寻疾病相关的标志物,为阐明发病机制提供新的线索.近年来,研究人员利用蛋白质组学技术从COPD患者支气管肺泡灌洗液、血清和血浆中寻找差异表达的蛋白质和疾病相关的标记分子.因此蛋白质组学这一新兴学科的产生,将为COPD的发病机制及治疗带来新的希望.本文就蛋白质组学在COPD研究中的应用作一简要综述.     

综合基因表达谱分析与人类肝胰岛素抵抗相关蛋白分子表达研究

目的分析糖尿病患者与正常人肝组织之间的差异表达基因(DEGs),筛选出肝组织中与可能产生胰岛素抵抗相关作用的蛋白分子。方法从GEO数据库下载基因芯片数据集GSE23343(包括10例2型糖尿病和7例正常人肝组织的基因表达值),通过DEGs表达谱分析和功能通路富集分析,构建DEGs对应的蛋白质-蛋白质相互作用网络。结果分析得到928个显著上调的DEGs(P0.01),发现DEGs主要富集在细胞和代谢生物过程中,KEGG通路富集显示DEGs主要集中于信号转导和肿瘤相关通路。经蛋白质相互作用网络构建,筛选出5个关键蛋白分子MDM2、PCNA、CAV1、PIK3R1、NR3C1。结论系统地筛选出人类肝组织中可能与胰岛素抵抗形成相关的蛋白分子,为进一步实验研究肝胰岛素抵抗产生机制和新的降血糖药物作用靶点提供基础。     

端粒缺陷相关蛋白在IgA肾病中的表达研究

目的 观察IgA肾病患者血液、尿液中4种端粒缺陷相关蛋白CRAMP、stathmin、EF-1α和chitinase表达变化,评估其对IgA肾病肾损伤程度的预测价值。方法 以浙江省人民医院肾内科收治的177例IgA肾病患者为研究对象,同时选取83名健康对照者作为对照,其中IgA肾病患者根据肾穿刺活检病理分期分为IgANⅠ~Ⅱ组和IgAN Ⅲ~Ⅴ组。收集纳入者血浆及尿液标本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)及Chitinase分析试剂盒检测CRAMP,EF-1α和stathmin浓度及chitinase酶活性。结果 (1)IgAN组血浆中CRAMP浓度及chitinase酶活性较对照组增高,且IgAN Ⅲ~Ⅴ组升高更为明显。联合CRAMP及chitinase对于区分IgA肾病和健康对照具有较高的灵敏度(88.2%)及特异度(92.5%)。(2)IgAN组尿液中CRAMP浓度及chitinase酶活性较对照组增高,IgAN Ⅲ+组chitinase酶活性升高更为明显。联合CRAMP及chitinase对于区分IgA肾病和健康对照具有较高的灵敏度(74.3%)及特异度(84.2%)。结论 端粒缺陷相关蛋白CRAMP及chitinase在IgA肾病表达增加,且二者对IgA肾病肾损伤程度具有较高的预测价值。     

老年糖尿病肾病患者血浆差异蛋白的表达

目的探讨老年糖尿病肾病(DN)与健康人群血浆差异蛋白的表达。方法选取老年DN患者10例(试验组),同期查体健康人群10例(对照组),采用荧光差异双向凝胶电泳(2D-DIGE)检测老年DN患者及健康志愿者血浆蛋白质组的表达情况,以差异表达1.5倍为截断值挑选蛋白质斑点并行质谱分析。结果应用老年DN患者及健康志愿者血浆成功构建差异表达双向凝胶电泳图谱,并分析筛选出33个差异表达斑点,通过质谱分析数据库比对鉴定出6种差异表达蛋白。结论 2D-DIGE技术可有效筛选老年DN相关特异蛋白,为进一步筛选DN血清标志物提供依据。