miR-141-3p靶向调控前列腺癌LNCaP细胞雄激素受体的表达

目的检测LNCa P细胞内miR-141-3p对雄激素受体(AR)基因靶向调控作用,明确AR是否为miR-141-3p的靶基因。方法将miR-141-3p mimics转染LNCa P细胞后,利用反转录PCR和Western blot法分别检测LNCa P细胞中AR的mRNA和蛋白表达。采用PCR方法扩增得到含有miR-141-3p结合位点的AR mRNA 3'非翻译区(3'UTR)片段,并插入到pmiR-report载体萤光素酶基因的3'下游区,并将所构建载体命名为pmiR-AR-3'UTR;萤光素酶报告基因检测试剂盒检测miR-141-3p对pmiR-AR-3'UTR靶向抑制效果。结果转染miR-141-3p mimics可降低LNCa P细胞内源AR的mRNA和蛋白水平;萤光素酶活性检测结果显示:与对照组相比,miR-141-3p可明显抑制pmiR-AR-3'UTR萤光素酶活性。结论 AR是miR-141-3p的靶基因。     

miR-141-3p对卵巢癌的作用及其机制

目的:探究miR-141-3p在卵巢癌中的作用及其相关的分子机制.方法:实时荧光定量PCR检测30例卵巢囊肿和30例卵巢癌组织中miR-141-3p和表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平.将SKOV3细胞分为NC组(无转染的SKOV3细胞),miR-141-3p组(SKOV3细胞转染miR-141-3p),LV-EG...     

微小RNA-141-3p在脑出血患者血清中的表达及其作用机制

目的 分析微小RNA-141-3p(miR-141-3p)在脑出血(ICH)患者中的表达水平,并探讨miR-141-3p对大鼠脑出血损伤的作用及其机制.方法 以40例脑出血患者和40例体检健康对照者为研究对象,采用Real-time PCR方法检测血清中miR-141-3p的含量.采用生物信息学预测miR-141-3p...     

miR-299-5p在前列腺癌中的表达及对细胞生物行为学的影响

目的:探讨微小RNA-299-5p(miR-299-5p)在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞生物学行为的影响.方法:收集2016年8月至2018年10月期间本院手术后存档的前列腺癌组织及对应癌旁组织标本各42例,qRT-PCR法检测miR-299-5p表达水平.体外培养人前列腺癌PC-3细胞,通过Lipofect...     

miR-144-3p对前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭的影响及可能机制

目的 探讨miR-144-3p对前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭的影响及可能机制.方法 利用脂质体介导的方法进行转染,将前列腺癌PC3细胞分为空白组(未进行转染)、miR-144-3p阴性对照组(转染无义序列)和miR-144-3p模拟物组(转染miR-144-3p模拟物),采用实时定量PCR验证转染效率,Western ...     

miR-141-3p、PD-L1及巨噬细胞在子宫内膜异位症中的表达及相关性研究

目的 探讨miR-141-3p、PD-L1及M1、M2型巨噬细胞在子宫内膜异位症 （Endometriosis,EMs） 中的表达及其临床意义。方法 选取2021年10月-2022年7月,因EMs在石河子大学第一附属医院妇科行腹腔镜手术或开腹手术的患者30 例为EMs组,同期选取非EMs患者因子宫肌瘤行诊断性刮宫或子宫全切术的子宫内膜组织30例为对照组,术后病理证实均为增生期子宫内膜。通过qRT-PCR检测子宫内膜组织中miR-141-3p以及PD-L1的表达;通过免疫组化检测子宫内膜组织中 M1型巨噬细胞表面标志物CD86,M2型巨噬细胞表面标志物CD206的表达,并应用Image J软件对免疫组化结果进行平均光密度 （Average Optical Density,AOD） 的检测。通过 Person 或 Spearman 相关检验分析 miR-141-3p、PD-L1、CD86 及 CD206 之间相关性。结果 （1） miR-141-3p 在 EMs 组在位内膜、异位内膜中的表达低于对照组子宫内膜 （P=0.000 5; P＜0.000 1）,且在异位内膜中表达最低。（2）PD-L1在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达高于对照组子宫内膜（P=0.013 7; P=0.000 3）,且在异位内膜中表达最高。（3）在EMs异位内膜中miR-141-3p与PD-L1的表达呈负相关（r =-0.648 9,P=0.000 1）。 （4） CD86在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达低于对照组子宫内膜 （P=0.047 2;P=0.001 0）。（5） CD206在EMs组在位内膜、异位内膜中的表达高于对照组子宫内膜 （P=0.043 4;P＜0.000 1）,且在异位内膜中表达最高。（6） PD-L1与M1型巨噬细胞标志物 CD86 在 EMs 异位内膜中的表达呈负相关 （r =-0.440 8,P=0.014 8）。（7） PD-L1 与 M2 型巨噬细胞标志物 CD206在EMs异位内膜中的表达呈正相关 （r =0.598 1,P=0.000 5）。结论 EMs患者中miR-141-3p表达降低,PD-L1表达升高,巨噬细胞从M1型向M2型极化,且随病情进展而改变。     

miR-485-5p 在前列腺癌组织中表达的临床意义及对前列腺癌细胞生物学行为的影响

目的:探究miR-485-5p在前列腺癌(PC)组织中表达的临床意义及对PC细胞生物学行为的影响。方法:实时定量PCR(RT-PCR)检测45例PC组织、癌旁组织及3种PC细胞系(LNCaP、22RV1、PC-3)中miR-485-5p相对表达量,分析PC组织miR-485-5p表达量与各病理参数间的关系。将PC细胞分为miR-485-5p mimic组(miR组)和阴性对照组(NC组),分别转染miR-485-5p mimic及对照质粒,采用MTT法检测两组细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡、划痕实验及Transwell实验分别检测细胞迁移及侵袭。结果:PC组织中miR-485-5p相对表达量明显低于癌旁组织(P0.05),3种细胞系中LNCaP细胞miR-485-5p表达量最低。PC组织中miR-485-5p表达与淋巴结转移、临床病理分级及TNM分期相关(P0.05)。转染后,miR组miR-485-5p表达量明显高于NC组(P0.05)。随着孵育时间延长,miR组细胞抑制率及凋亡率均明显升高,且高于NC组(P0.05);miR组细胞划痕愈合率及侵袭细胞数均低于NC组(P0.05)。结论:miR-485-5p在PC组织及细胞中低表达,且与病理参数相关,通过上调其表达水平可明显抑制PC细胞增殖、迁移及侵袭并诱导凋亡。     

miR-126-3p在甲状腺癌中的表达及其功能研究

目的:探讨微小分子核糖核酸(miR)-126-3p在甲状腺癌中的表达,探讨其生物学功能。方法:RT-PCR检测35例甲状腺癌、癌旁组织以及三种甲状腺癌细胞系(TPC-1、FTC-133、8505C)中miR-126-3p表达量;将甲状腺癌细胞分为类似物组(mimic)和对照组(NC),分别转染miR-126-3p mimic及阴性对照质粒。两组细胞增殖、凋亡分别采用Brdu-ELISA法和流式细胞术检测,Transwell小室法检测两组细胞迁移和侵袭。结果:35例癌组织中miR-126-3p相对表达量显著低于癌旁组织(0.384±0.028 vs 0.981±0.039,t=10.291,P0.05);在三种甲状腺癌细胞中,TPC-1细胞中miR-126-3p相对表达量最低;与NC组比较,mimic组甲状腺癌细胞TPC-1增殖受到显著的抑制,第3天两组间开始表现出统计学差异(P0.05);与NC组比较,mimic组甲状腺癌细胞TPC-1凋亡显著增加[(15.32±3.20)%vs(8.12±1.17)%,t=4.623,P0.05],迁移受到抑制(26.68±4.48 vs 82.21±3.65,t=17.789,P0.05),侵袭受到抑制(12.28±1.03 vs 34.43±2.10,t=8.103,P0.05)。结论:甲状腺癌组织中miR-126-3p表达降低,上调miR-126-3p表达可以显著抑制甲状腺癌细胞增殖、促进凋亡、抑制迁移和侵袭,miR-126-3p可能作为一种抑癌基因在甲状腺癌中发挥重要的生物学功能。     

miR-330-3p调控ALAS2在红细胞分化中的作用

目的 探讨miR-330-3p在红细胞分化中的作用和机制.方法 胚胎干细胞诱导分化为红系细胞,分别测定0d、7 d、14d、21dmiR-330-3p和ALAS2表达水平.比较红系细胞(K562细胞)和非红系细胞(HELA细胞)miR-330-3p和ALAS2表达差异.K562分转染miR-330-3p抑制物组、miR...     

miR-625-3p在结肠癌组织和细胞中的表达

目的:探讨微小RNA(mi R)-625-3p在结肠癌组织和细胞中的表达,了解其作用机制。方法:利用q RT-PCR分析结肠癌细胞株、癌组织和癌旁组织中mi R-625-3p的表达水平,探讨mi R-625-3p表达水平与结肠癌临床病理参数之间的关系;利用碘化丙啶染色和流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化;Western blot法检测mi R-625-3p对结肠癌细胞株凋亡相关蛋白的影响,初步了解其发挥影响的可能机制。结果:结肠癌组织mi R-625-3p的表达量比癌旁组织高(P0.05),mi R-625-3p的表达量与结肠癌浸润深度、TNM分期及有无远处转移关系密切(P0.05)。mi R-625-3p在结肠癌SW620细胞中的表达水平高于在SW480细胞中的表达。抑制mi R-625-3p的表达能显著抑制结肠癌细胞的周期(P0.05)和促进凋亡;转染mi R-625-3p后,Bcl-2的表达量增加(P0.05),Bax表达量没有显著变化。结论:mi R-625-3p能促进结肠癌细胞增殖,抑制结肠癌细胞凋亡,可能是结肠癌新的抗癌靶点。     

miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用

背景：目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展,Ⅰ型胶原与增生性瘢痕成纤维细胞密切相关,猜测miR-2116-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系。目的：探讨miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法：收集新疆医科大学第一附属医院6例患者的增生性瘢痕组织与6例患者重睑术后正常皮肤组织,采用qRT-PCR法检测miR-2116-3p与Ⅰ型胶原的表达。取增生性瘢痕组织,原代培养第3-6代成纤维细胞,分为阴性对照组、miR-2116-3p模拟物组和miR-2116-3p抑制物组,分别转染对应的序列,用CCK-8法与EdU试剂盒检测细胞增殖活力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法与Western blot法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达,双荧光素酶实验验证其靶向结合。结果与结论：(1)增生性瘢痕组织中miR-2116-3p的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P <0.01),Ⅰ型胶原的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P <0.01);(2)转染后24,48,72 h,与阴性对照组比较,miR-21...     

妊娠糖尿病患者血清miR-330-3p、lncRNA SNHG17表达水平及临床意义

目的 探究妊娠糖尿病（GDM）患者血清miR-330-3p、长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因17(SNHG17)表达水平及对不良妊娠结局的预测价值。方法 招募2021年1月至2022年2月西北妇女儿童医院产科产检及分娩的160例GDM孕妇（GDM组）和160例糖耐量试验正常的健康孕妇（对照组）为研究对象。荧光定量PCR反应检测血清miR-330-3p、lncRNA SNHG17表达水平;Pearson法分析lncRNA SNHG17与miR-330-3p及二者与空腹血糖（FBG）等生化指标的相关性;多因素Logistic回归分析GDM孕妇妊娠结局的影响因素;受试者操作特征（ROC）曲线分析lncRNASNHG17、miR-330-3p对GDM孕妇不良妊娠结局的预测价值。结果 与对照组相比,GDM孕妇血清糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹血糖（FBG）、OGTT后2 h血糖、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、miR-330-3p水平较高（P<0.05）,HOMA-β、lncRNA SNHG17较低（P<0.05）。GDM孕妇血清miR...     

多囊卵巢综合征患者血清miR-143-5p及miR-34a-5p表达水平及其临床意义

目的 探讨血清中miR-143-5p和miR-34a-5p在多囊卵巢综合征患者中的表达水平及与PCOS患者临床病理特征的关系,评估miR-143-5p和miR-34a-5p作为诊断PCOS的生物标志物潜能。方法 选取2019年1月至2021年6月在南京市第一医院收治确诊为PCOS的患者40例（PCOS组）和同期50例体检正常的非PCOS女性（对照组）,分析两组研究对象的生殖激素及胰岛素相关指标,采用qRT-PCR检测miR-143-5p及miR-34a-5p表达水平,ROC曲线分析miR-143-5p及miR-34a-5p对PCOS的诊断价值。结果 血清中基础LH值PCOS组为（7.88±1.21）mIU/mL,对照组为（5.46±1.21）mIU/mL,两组相比差异具有统计学意义（P<0.001）;空腹胰岛素PCOS组为（9.37±2.88）mIU/L,对照组为（8.04±1.98）mIU/L,组间相比差异具有统计学意义（P=0.036）;PCOS组胰岛素抵抗指数和睾酮显著高于对照组,两组间均有统计学差异（P<0.05）。PCOS组血清中miR-143-5p及miR-34...     

前列腺癌患者血清和组织中miR-421的表达及临床意义

目的检测miR-421在前列腺癌(prostate cancer,PCa)患者血清和组织中的表达,并探讨其与临床病理特征的关系及意义。方法收集2015年12月~2016年12月初次在安徽医科大学第一附属医院泌尿外科住院的PCa患者血清62例及前列腺增生(prostatic hyperplasia,BPH)患者血清46例,并调取同时期病理科存档的PCa蜡块42例,BPH蜡块37例。采用qRTPCR检测血清中miR-421的表达,采用原位分子杂交法检测病理组织中miR-421的表达。结果 miR-421在PCa和BPH患者血清中的表达分别为2.52±1.70、0.82±0.65,与BPH组相比,miR-421在PCa血清中的表达升高(P0.05),PCa患者血清和组织中miR-421的表达与Gleason评分、TNM临床分期、骨转移等有关(P0.05),与患者年龄、术前PSA水平等均无关(P0.05)。结论 miR-421在PCa患者血清或组织中的表达水平高于BPH患者,有望成为PCa的诊断标志物。     

LINC00491靶向调控miR-532-3p对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的：探讨LINC00491对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能的作用机制。方法：qRT-PCR检测LINC00491、miR-532-3p的表达量;Pearson法分析前列腺癌组织中LINC00491与miR-532-3p表达量的相关性;体外培养人前列腺癌细胞22RV1,采用脂质体转染法将si-NC、si-LINC00491、miR-NC、miR-532-3p mimics、si-LINC00491与anti-miR-NC（共转染）、si-LINC00491与anti-miR-532-3p（共转染）分别转染至22RV1细胞;CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Transwell检测细胞的迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验与qRT-PCR验证LINC00491与miR-532-3p的靶向调控作用;Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果：前列腺癌组织中LINC00491的表达量高于癌旁组织（P<0.05）,而miR-532-3p的表达量低于癌旁组织（P<0.05）;LINC00491与miR-532-3p呈负相关（r=-0.85...     

miR-155-5p在宫颈癌血清中的表达及其对宫颈癌细胞的影响

 目的：检测miR-155-5p在不同宫颈疾病患者血清中的表达差异,并分析其对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,探讨miR-155-5p在宫颈癌发生、发展中的可能作用机制。方法：采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法,检测并分析比较miR-155-5p在不同宫颈疾病患者血清中的表达差异。利用miR-155-5p mimic或inhibitor提高或降低宫颈癌细胞中miR-155-5p的表达。CCK-8法和流式细胞术检测宫颈癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。结果：宫颈癌组血清中miR-155-5p的表达高于宫颈炎组和健康对照组（P<0.05）,宫颈上皮内瘤样病变组和宫颈癌组血清中miR-155-5p的表达差异无统计学意义（P>0.05）。与空白组、脂质体组和阴性对照组相比,转染100 nmol/L和200 nmol/L miR-155-5p mimic的SiHa细胞中,S期细胞比例升高,凋亡细胞比例降低（P<005）。转染100 nmol/L和200 nmol/L miR-155-5p inhibitor的SiHa细胞中,G2/M期细胞比例明显增多（P<005）。结论：(1)宫颈癌患者血清中miR-155-5p表达较健康对照人群上调,可能作为宫颈癌早期诊断的肿瘤分子标志物。(2)miR-155-5p对宫颈癌HeLa细胞增殖、细胞周期和凋亡无明显影响。(3)miR-155-5p可促进宫颈癌SiHa细胞进入S期,并抑制SiHa细胞凋亡,提示miR-155-5p可能在宫颈鳞癌发生、发展中起作用。     

习惯性流产患者治疗后妊娠血清miR-141-3p、ZEB1水平对妊娠结局的预测价值

目的 分析习惯性流产患者治疗后妊娠血清微小RNA-141-3p(miR-141-3p)和E盒结合锌指蛋白1(ZEB1的表达水平,并探讨二者对不良妊娠结局的预测价值。方法 在武汉科技大学附属汉阳医院妇产科就诊的习惯性流产治疗后再次妊娠的早孕期患者136例及同期正常单胎妊娠的早孕期人群75例为研究对象,136例患者根据妊娠结局不同,分为不良妊娠结局组（58例）和妊娠结局良好组（78例）,75例正常单胎妊娠最终纳入72例作为对照组。检测三组患者血清miR-141-3p、ZEB1的表达水平;分析血清miR-141-3p与ZEB1表达水平的相关性及对不良妊娠结局的预测价值。结果 不良妊娠结局组血清miR-141-3p表达水平显著高于妊娠结局良好组及对照组,ZEB1表达水平显著低于妊娠结局良好组及对照组（P均<0.05）。不良妊娠结局组血清miR-141-3p与ZEB1表达水平呈显著负相关（r=-0.518,P<0.05）。miR-141-3p高表达、ZEB1低表达是影响不良妊娠结局发生的危险因素（P<0.05）。miR-141-3p、ZEB1两者联合预测的ROC曲线下面积（AU...     

栀子多糖调控miR-141-3p对LPS诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的影响北大核心CSCD

目的:探讨栀子多糖对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞炎症反应、凋亡的影响及分子机制。方法:100 ng/ml LPS处理H9C2细胞作为LPS组,正常培养的细胞作为对照组,采用终浓度为2.5、5、10μmol/L的栀子多糖和100 ng/ml LPS共同培养的细胞作为栀子多糖低、中、高浓度组。将H9C2细胞分为LPS+Experiment-H+anti-miR-NC组、LPS+Experiment-H+anti-miR-141-3p组、LPS+Experiment-H+pcDNA3.1组、LPS+Experiment-H+pcDNA3.1-KLF6组。ELISA检测IL-1β、TNF-α水平;Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Krupple样转录因子6(KLF6)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测miR-141-3p表达;荧光素酶报告实验检测miR-141-3p和KLF6的靶向关系。结果:LPS诱导的心肌细胞中IL-1β、TNF-α水平、Bax表达、细胞凋亡率显著升高,miR-141-3p表达显著降低,KLF6表达显著升高(P<0.05)。栀子多糖处理后LPS诱导的心肌细胞中IL-1β、TNF-α水平、Bax表达、细胞凋亡率显著降低,miR-141-3p表达显著升高,KLF6表达显著降低(P<0.05)。抑制miR-141-3p表达和过表达KLF6逆转了栀子多糖对LPS作用的H9C2细胞凋亡和炎症因子的抑制作用。miR-141-3p可靶向调控KLF6表达。结论:栀子多糖可抑制LPS诱导的心肌细胞凋亡和炎症因子释放,对LPS诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,其机制可能与miR-141-3p和KLF6有关。