袖套法制作大鼠胰腺移植模型

目的:建立一种改进的大鼠胰腺移植模型.方法:共完成80例大鼠胰腺移植,术中不阻断受体下腔静脉,用袖套法完成供体门静脉与受体左肾静脉断端的吻合,动脉用缝合法吻合.结果:受体平均手术时间50 min,静脉袖套吻合时间3 min,腹主动脉阻断时间10 min,冷缺血时间50 min.手术成功率达90%.移植术后胰腺功能恢复正常,组织病理学改变轻微.结论:袖套法制作大鼠胰腺移植模型操作简单,成功率高,结果稳定.     

大鼠胰膀胱引流式单纯胰腺移植模型的建立

目的:建立大鼠胰膀胱引流式单纯胰腺移植的动物模型。方法:22只脲链霉素诱导的糖尿病SD大鼠行单纯胰腺移植,正常22只SD大鼠为供体;血管吻合采用供胰腹腹主动脉(含脾动脉)和门静脉袢(含脾静脉)与受体腹主动脉及左肾静脉分别行端侧和端端吻合(袖套式);外分泌系统采用胰膀胱引流式。于术前2d和术后1,3,7,14,30d监测受体体重、进食量、饮水量和空腹血糖,并分析失败原因。结果:供体平均手术时间(33.7±9.5)min,受体平均手术时间(49.4±13.4)min,移植物均无热缺血时间,冷缺血时间(44.4±15.8)min。除12例于1个月内死亡或胰腺失去功能外,均成活1个月以上。术后并发症主要为尿路并发症(7例,31.8%)。成功的单纯胰腺移植后受体第1日血糖即下降后基本稳定。结论:成功的单纯胰腺移植均可有效地恢复糖尿病大鼠内分泌功能。     

新型同种异体猪全胰十二指肠移植模型的建立与评价

目的 建立一种符合生理、稳定的猪全胰十二指肠移植模型。方法 采用手术切除受体胰腺，制造Ⅰ型糖尿病模型。移植物的门静脉与受体门静脉或肠系膜前静脉吻合；移植物的腹主动脉下段与受体腹主动脉下段吻合；十二指肠与受体空肠吻合。结果 16例动物移植后效果满意，胰腺功能良好。同时，猪的免疫和胰腺解剖与人极为相似。结论 在胰腺移植的研究中，猪全胰十二指肠移植是较理想的动物模型。     

供体抗原经门静脉处理及移植物从门静脉回流对大鼠胰腺移植物功能存活的影响

以35只雄性SD大鼠为受体，制成糖尿病模型，以同龄Wistar雄性大鼠为供体，行全胰腺移植。供体抗原分别经门静脉或周围静脉处理，处理时间分别为移植前预处理或移植时处理，移植物静脉分别从门静脉或下腔静脉回流，结果表明供体抗原经门静脉预处理及移植物从门静脉回流对胰腺移植物功能存活的延长具有协同效应，移植时处理延长胰腺移植物效果不如移植前预处理，但可能具有一定的实用意义。     

小鼠异位小肠移植模型的建立

目的 探讨稳定的小鼠异位小肠移植模型制作方法,为小肠移植排斥反应的研究提供良好的实验工具.方法 选用C57BL/6小鼠作供体和BALB/c小鼠作受体进行同种异基因型异位节段性小肠移植.采用小肠供体的门静脉与受体下腔静脉端侧吻合,供体带主动脉片的肠系膜上动脉与受体腹主动脉端侧吻合,供体近端肠管结扎,远端与受体空肠端侧吻合的方式建立异位小肠移植.术后禁食3天,不禁饮,每天分两次经皮下分别给予5%葡萄糖生理盐水2 mL,术后不使用抗生素和免疫抑制剂.小鼠存活超过5 d视为手术成功.结果 共行小肠节段性移植30例,术后5 d存活率达70%(21/30).供体手术时间(41±5.5)min,热缺血时间约0.5 min,供体肠段肠系膜上动脉组织片修整时间约为3 min,供体冷保存时间为(30±7.5)min,受体手术时间(90±7.5)min,其中腹主动脉及下腔静脉阻断时间为(40±3.0)min,静脉吻合时间(10±2.0)min,动脉吻合时间(15±2.5)min,成活小鼠受体手术平均出血量约0.2 mL.手术失败的9例小鼠的死亡原因为动脉吻合口部位狭窄及吻合口处血栓形成(6例),吻合口出血导致出血性休克(2例)和术后腹腔内感染(1例).结论 良好的供体肠段的获取、高质量的血管吻合和肠道吻合及供、受体补液是提高小鼠小肠移植手术成功率的关键.     

不阻断腹主动脉及下腔静脉的大鼠胰腺移植

实验以３０只大鼠为受体进行胰腺移植的两种手术方式对比研究，第１组阻断受体腹主动脉、下腔静脉后分别与供胰腹主动脉、门静脉吻合；第２组不阻断腹主动脉、下腔静脉，而是将供腹腔动脉、门静脉分别与体左肾动、静脉吻合。结果发现，不阻断受体腹主动脉、下腔静脉的术式并发症少，提高了移植的成功率。     

胰腺移植近况

胰腺移植已达到用胰尾自体移植模型作研究。胰腺内分泌功能已证明与热缺血损伤的耐受力有关。用双动脉吻合的胰尾自体移植,能达到100％的即时成功,移植的胰腺保持满意的糖耐量和胰岛素分泌。已证明、葡萄糖内环境稳定没有重要改变是因胰腺的胰岛素分泌液从门静脉转移到体静脉。     

门静脉回流、胰液肠内引流术式猪全胰十二指肠移植模型的建立

目的建立稳定的、符合生理的门静脉回流、空肠内引流术式猪全胰十二指肠移植模型。方法40头四川本地杂种猪分为供、受体两组(n=20)。采用UW液低温灌注的方法，整块切取供体全胰十二指肠，保留腹主动脉Carrel片和门静脉。UW液保存、修整后的胰腺十二指肠移植物用髂血管延长的动脉与供体腹主动脉段端-侧吻合；门静脉与供体肠系膜上静脉端-侧吻合；十二指肠与供体空肠侧-侧吻合。结果共完成猪全胰十二指肠移植手术20例。胰腺移植术后1例因麻醉过深，呼吸抑制而术后未能复苏；1例移植胰腺血栓形成、血管栓塞；另1例死于肠瘘导致的腹腔感染。17例术后第2天检测外周血血糖正常。结论猪全胰十二指肠移植门静脉回流、空肠内引流术式大动物模型稳定、可靠。     

猪同种异体胰十二指肠移植门静脉回流肠内引流模型治疗Ⅰ型糖尿病的实验研究

目的建立稳定、可靠、符合解剖生理的猪胰十二指肠移植模型。方法选四川当地杂种长白猪46头（体重25-32kg），分为供受体两组（n=20），进行同种异体胰十二指肠移植手术。供体全身肝素化，用UW液从腹主动脉灌注、门静脉流出，压力80-100cmH2O。切取供体的胰十二指肠，修剪供体、供体髂总动脉及髂内、外动脉分别与移植胰腺的腹腔动脉和肠系膜上动脉“Y”型吻合。切除受体胰腺建立Ⅰ型糖尿病模型。供体的门静脉与受体的肠系膜上静脉或门静脉端-侧4吻合；呈“Y”形的髂总动脉与受体腹主动脉端-吻合；供体的十二肠与受体的空肠侧-侧吻合。颈外静脉切开置管，术后输液。观察术后手术合并症，术中，术后1～7d检测血糖、胰岛素、胰高血糖素水平，移植物存活，急性排斥反应。结果进行猪同种异体胰十二指肠移植23例，手术中因麻醉意外死亡1例，手术成功率为95．6％。发生手术合并症2例，其中静脉血栓形成1例，发生率为4．6％。十二指肠空肠吻合口漏1例，发生率4．6％。在切除胰腺30min可见血糖升高，手术后第2天开始恢复正常水平。胰岛素和胰高血糖素在切除胰腺30min内开始下降，术后第2天开始恢复正常水平。术后第1天开始出现排斥反应，且逐渐加重，第7天达到高峰，但是未出现血糖、胰岛素、胰高血糖素水平变化和排斥反应的临床症状。结论门静脉回流＋肠内引流手术保持内分泌稳定，符合解剖生理，有临床应用的可行性。猪的门静脉回流＋肠内引流手术模型的成功建立为临床开展胰腺移植门、肠引流手术奠定基础。     

供体抗原经门静脉处理及移植物从门静脉回流对大鼠胰腺移植…

以３５只雄性ＳＤ大鼠为受体，制成糖尿病模型，以同龄Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠为供体，行全县腺移植。供体抗原分别经门静灌周围静脉处理，处理时间分别为移植前预处理或移植时处理，移植物静脉分别从门静脉或下腔静脉回流，结果表明供体抗原经门静脉预处理及移植物从门静脉加流对胰腺移植物功能存活的延长具有协同效应，移植时处理延长胰腺移植物效果不如移植前预处理，但可能具有一定的实用意义。     

P选择素、细胞间黏附分子-1在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用

目的观察P选择素（Ps）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用及Ps单克隆抗体的治疗作用。方法75只SD大鼠随机分为假手术组、移植组和治疗组。移植组和治疗组均进行全胰十二指肠移植术，但治疗组于再灌注前5rain静脉注射Ps单克隆抗体。3组分别于腹主动脉开放后1（n=5）、3（n=5）、6（n=5）h取血测定血清淀粉酶水平，并切取胰腺标本进行组织病理学观察及Ps、ICAM．1免疫组织化学染色。结果移植组胰腺组织损伤随再灌注时间的延长而加重，血淀粉酶升高，与中性粒细胞浸润直接相关；而治疗组胰腺组织损伤不明显，血淀粉酶减低。移植组各时段Ps、ICAM-1均有阳性表达，且Ps再灌注1h为表达高峰，ICAM．1随再灌注时间延长表达逐渐增加，假手术组、治疗组Ps、ICAM-1不表达。结论Ps及ICAM-1按一定时间顺序参与胰腺移植缺血再灌注损伤的病理过程；Ps可能是胰腺移植缺血再灌注损伤的起始因素；抗Ps单克隆抗体对移植胰腺缺血再灌注损伤有保护作用。     

区域性缺血对裸小鼠胰腺移植癌及癌周胰腺组织的影响

目的 为缺血疗法在胰腺癌的临床应用提供基础研究资料。方法 在建立人胰腺癌细胞株裸小鼠胰腺原位称植瘤模型的基础上,结扎荷瘤裸鼠胃十二指肠动脉,胰十二指肠下动脉及背胰动脉,诱导胰腺右叶区域性缺血,观察缺血对裸小鼠胰腺移植癌生长,移植癌及癌周胰腺组织病理形态学的影响。结果 缺血组移植癌生长缓慢,倍增时间延长,移植癌体积,癌细胞增殖指数及蛋白质含量在术后3,7,细胞浸润;癌周胰腺组织腺泡萎缩破坏,可见广泛纤维化及淋巴细胞浸润,结论 区域性缺血对裸小鼠胰腺移植癌有确切的杀伤和抑制效应,癌周胰腺组织的缺血性改变可能不利于移植癌的生长。     

猪胰肾联合移植模型的建立

目的 建立一种猪胰肾联合移植模型。方法 血管吻合采用供体门静脉远端与左肾静脉端端吻合，近端再与受体下腔静脉端侧吻合；带腹腔动脉、肠系膜上动脉和左肾动脉的腹主动脉段与受体腹主动脉端侧吻合。胰腺外分泌自膀胱引流，供肾输尿管置管引外流。结果 １１例动物移植成功，早期移植功能恢复良好。结论 这种建立猪胰肾联合移植的方法是可行的。     

大鼠小肠移植模型的改进

目的　通过改进技术 ,建立一种简便稳定存活率高的大鼠异位节段小肠移植模型。方法　“无损伤”游离 ,原位冷灌注 ,切取带有腹主动脉和肠系膜上静脉并门静脉的节段小肠 ,4℃乳酸林格氏液保存 1h。游离受体左肾静脉 ,切除左肾。采用显微外科技术行供体腹主动脉对受体腹主动脉的端侧吻合 ,门静脉与受体左肾静脉行袖式吻合。移植肠近端关闭 ,远端外置。结果　共进行 87次移植实验 ,其中 2 6次为正式实验。动脉、静脉吻合时间分别为 2 5～ 30min和 5min。 2 6只受体鼠中2 1只存活超过 3d ,平均存活 (8.93± 2 .5 9)d ,最长存活时间为 14d。结论　良好的血管吻合和充分补充液体是手术成功、移植肠具有良好活力的关键因素     

区域性缺血对裸小鼠胰腺移植癌及癌周胰腺组织的影响

目的　为缺血疗法在胰腺癌的临床应用提供基础研究资料。方法　在建立人胰腺癌细胞株裸小鼠胰腺原位移植瘤模型的基础上 ,结扎荷瘤裸鼠胃十二指肠动脉、胰十二指肠下动脉及背胰动脉 ,诱导胰腺右叶区域性缺血 ,观察缺血对裸小鼠胰腺移植癌生长、移植癌及癌周胰腺组织病理形态学的影响。结果　缺血组移植癌生长缓慢 ,倍增时间延长 ,移植癌体积、癌细胞增殖指数及蛋白含量在术后第 3、7、14天均显著低于对照组 (P <0 .0 1)。光镜下缺血组移植癌呈大片凝固坏死 ,周围有渐进性坏死细胞及炎症细胞浸润 ;癌周胰腺组织腺泡萎缩破坏 ,可见广泛纤维化及淋巴细胞浸润。结论　区域性缺血对裸小鼠胰腺移植癌有确切的杀伤和抑制效应 ,癌周胰腺组织的缺血性改变可能不利于移植癌的生长。     

小鼠肝动脉重建对长时间冷保存移植肝存活率的影响

目的研究小鼠肝动脉重建(hepatic arterial reconstruction,HAR)对长时间冷保存移植肝存活率的影响。方法同系雄性C57BL/6小鼠68只,分为冷保存时间(cold preservation time,CPT)1 h组、CPT4 h组、CPT8 h组、CPT16 h组、CPT16 h+HAR组(供、受体小鼠各一半)。小鼠供肝经门静脉灌注4℃UW液后保存。肝脏移植采用缝合法(肝上下腔静脉)和袖套法(门静脉、肝下下腔静脉)吻合,胆管采用内支架管重建法。小鼠HAR采用含供体肝动脉的腹主动脉与受体腹主动脉端侧吻合的方法。观察术后5组受体小鼠移植肝的存活时间,用组织学检查肝细胞损伤情况,用免疫组织化学法观察肝细胞再生功能。结果 CPT1 h、4 h、8 h组受体术后12 d移植物的存活率分别为7/7、10/10、9/9。CPT16 h组除1例小鼠存活外,其余均在移植术后36 h内死亡,存活率为10%(1/10),CPT16 h+HAR组受体90%(9/10)存活,两组存活率相比,差异有统计学意义(P0.01)。CPT1 h、4 h组的移植物组织损伤程度轻,CPT8 h组的移植物组织损伤程度较前两组严重,但肝细胞再生活跃。CRT16 h组的移植肝组织表现为广泛肝细胞空泡变性、坏死,肝细胞再生不明显。CPT16 h+HAR组仅有轻度的肝窦淤血,肝细胞空泡变性、坏死改变,肝细胞再生活跃。结论 HAR可提高长时间冷保存移植肝的存活率。     

大鼠原位小肠移植模型的建立与改进

目的探讨建立一种简便稳定存活率高的大鼠原位小肠移植模型。方法整块切取带有腹主动脉和肠系膜上静脉并门静脉的节段小肠,术中原位冷灌注,4℃乳酸林格液保存。动脉吻合采用显微外科技术行供体腹主动脉对受体腹主动脉的端侧吻合,利用Cuff套管技术将供体的门静脉与受体的左肾静脉端端吻合。移植肠远、近端分别与受体肠行端端吻合。结果建立小肠移植模型1 6次,动脉、静脉吻合时间分别为(2 5±5)m in和(4±1)m in。1 6只受体鼠中1 3只存活超过5 d,平均存活(1 0.3 5±2.8 4)d,最长存活时间为2 1 d。结论移植肠的获取、血管吻合技术、肠吻合技术和维持良好的血容量是手术成功的关键。该模型的成功建立,为小肠移植的基础研究提供了良好的动物模型。     

家兔活体部分胰腺移植模型的建立

目的：建立一种家兔活体部分胰腺移植的模型。方法：供体手术：将带脾的胰体尾部游离下来，经原位灌注后取下胰体尾部并安置脾动静脉袖套。受体手术：将供胰动、静脉分别与受体颈总动脉、颈外静脉行端端吻合。结果：12只供体家兔术后1周均成活，空腹血糖处于正常范围。糖尿病受体家兔术后空腹血糖恢复正常大于3d9只。移植胰存活时间平均为11.4d。结论：建立了简单、稳定的家兔活体部分胰腺移植模型。     

大鼠单纯胰腺移植手术技术

目的　探讨大鼠单纯胰腺移植(PTA)的手术技巧。方法　88 只 SD大鼠分为供、受体。根据胰外分泌系统的不同处理分为胰肠重建式(E D组,n=22)和胰膀胱重建式(B D组,n=22)行 PTA,血管吻合采用供胰腺腹主动脉袢(含脾动脉)和门静脉袢(含脾静脉)与受体腹主动脉及左肾静脉分别行端侧和端端吻合(袖套式)。于术前和术后1 d、3 d、7 d、14 d和30 d监测受体尿量、进食量、饮水量和空腹血糖。结果　平均手术时间: 供体为(33.1±11.1) min,受体为(51.7±14.7) min; 移植物均无热缺血时间,平均冷缺血时间为(46.5±17.1) min; 成功的PTA后受体术后第1天血糖即下降,第3天基本达到正常水平; 饮水量、进食量及尿量均减少,14 d后基本稳定。结论　成功的PTA可有效地恢复糖尿病大鼠内分泌功能,掌握熟练的手术技巧非常重要。     

缺血预处理对大鼠胰腺移植的保护作用

目的　探讨缺血预处理对大鼠胰腺移植的远期保护作用。方法　糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组(I/R组, n= 3 0 )和缺血预处理组(IPC组, n= 3 0 ),两组移植前2d,再灌注后3d和7d随机各杀死6只大鼠,取血查血糖及淀粉酶,同时取胰腺组织行HE染色; 6只大鼠用于观测各种代谢指标。其余6只大鼠用来观察大鼠存活率。结果　IPC组1个月存活率高于I/R组( 5 /6∶3 /6, P< 0. 0 1 );再灌注后IPC组各时间点血糖(P< 0. 0 1 )、血淀粉酶(P< 0. 0 1 )、进食量(P< 0. 0 5 )、排尿量(P< 0. 0 1 )和饮水量(P< 0. 0 5 )均低于I/R组;I/R组移植胰的损伤程度大于IPC组。结论　缺血预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率,降低血淀粉酶活性,减轻胰腺的再灌注损伤程度,对大鼠胰腺移植具有保护作用。