不同糖皮质激素治疗对肥胖哮喘小鼠全身和气道的影响

目的对比布地奈德雾化治疗和地塞米松口服治疗对肥胖哮喘小鼠的疗效和炎症改变。方法将75只C57/6J小鼠随机分为5组,正常组(A组)、哮喘组(B组)、肥胖哮喘组(C组)、布地奈德雾化治疗组(D组)、地塞米松口服治疗组(E组),建立饮食诱导的慢性肥胖哮喘模型。末次激发后24 h,取肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类,ELLISA法测定血清中IL-17浓度,肺组织病理切片观察各组小鼠炎症评分,测定气管壁总面积(WAt)、气道平滑肌面积(WAm)和管腔基底膜周长(Pbm)。结果除A组外,其余四组小鼠均出现不同程度的哮喘发作,实验结束前B组无小鼠死亡,C组有2只小鼠死亡,D组有1只小鼠死亡,而E组有5只小鼠死亡。C组BALF中白细胞总数,中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞数、血清IL-17浓度以及病理切片炎症评分、气管壁总厚度(WAt/Pbm)、气道平滑肌厚度(WAm/Pbm)明显高于A、B两组。两治疗组的BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数,以及病理切片炎症评分均较C组下降,但气管壁总厚度(WAt/Pbm)、气道平滑肌厚度(WAm/Pbm)改善不明显(P0.05)。E组血清IL-17浓度较C组下降(P0.05),但D组和C组无显著性差异(P0.05)。结论雾化布地奈德能够改善肥胖哮喘小鼠的气道炎症,但不能改善气道重建和全身炎症。地塞米松口服治疗虽有助于改善肥胖哮喘的全身炎症反应,但气道重建无益,且带来更高的病死率。     

布地奈德吸入对慢性支气管哮喘小鼠转化生长因子β1/Smad信号通路的影响

目的 观察布地奈德对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号通路的影响.方法 30只小鼠按随机数字表法分成哮喘组、布地奈德组、正常对照组,每组10只.哮喘组小鼠于第0天和第14天以卵白蛋白(OVA)致敏,第24天开始雾化吸入1%OVA激发并持续28 d,建立哮喘气道重塑模型;布地奈德组在吸入OVA前2 h雾化吸入布地奈德30 min;正常对照组以生理盐水代替OVA.于最后一次雾化结束后24 h对肺组织行苏木精-伊红染色观察病理学改变;运用医学图像分析软件测定管腔内周长(Pi)、管壁面积(WAt)、支气管平滑肌面积(WAm)、支气管平滑肌细胞核数(N),将WAt、WAm、N用Pi标准化;用免疫组织化学方法检测肺组织TGF-β1蛋白表达;用逆转录-聚合酶链反应半定量检测肺组织TGF-β1、Smad 2、Smad 3、Smad 7 mRNA表达.结果 哮喘组WAt/Pi、WAm /Pi、N /Pi与对照组比较差异有统计学意义(P值均<0.05),布地奈德组与哮喘组比较差异也具有统计学意义(P值均<0.05);哮喘组TGF-β1蛋白和TGF-β1、Smad 2、Smad 3 mRNA的表达较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05),布地奈德组TGF-β1蛋白和TGF-β1、Smad 2、Smad 3 mRNA的表达下降,与哮喘组比较差异均有统计学意义(P<0.05);布地奈德组可显著上调Smad 7 mRNA的表达,与哮喘组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 早期雾化吸入布地奈德通过抑制慢性哮喘小鼠肺组织TGF-β1、Smad 2、Smad 3的过度表达,上调Smad 7的表达,从而阻断TGF-β1/Smad信号通路,明显减轻哮喘小鼠的气道重塑.     

幼年哮喘大鼠气道重塑各阶段支气管组织感觉神经肽受体表达变化

目的探讨感觉神经肽受体(NK-1R)在幼年哮喘大鼠气道重塑发生、发展中的意义。方法幼年SD大鼠64只,随机分为哮喘组及对照组各32只。哮喘组大鼠采用卵蛋白(OVA)激发法制作哮喘模型,对照组以等剂量生理盐水处理。将各组32只均分为4个亚组,分别于处理2、4、6、8周后采集标本。采用HE染色进行肺组织病理学观察,图像分析系统测定支气管基底膜周径(Pbm)、总管壁面积(WAt)及平滑肌面积(WAm),并用Pbm将测量值标化;样本碱水解法测定肺组织羟脯氨酸水平;免疫组化法、Western blot法检测支气管组织中的NK-1R,Realtime PCR检测NK-1R mRNA。结果 HE染色光镜下观察,哮喘组各亚组支气管病理变化明显,以哮喘8周组最为明显。哮喘组各亚组Wam/Pbm、肺组织羟脯氨酸水平均高于对照组,哮喘4、6、8周组Wat/Pbm高于对照组(P均<0.05),且Wat/Pbm、Wam/Pbm、羟脯氨酸水平哮喘8周组>哮喘6周组>哮喘4周组>哮喘2周组(P均<0.05)。哮喘组各亚组大鼠支气管中NK-1R mRNA及其蛋白表达均高于对照组,且哮喘8周组>哮喘6周组>哮喘4周组>哮喘2周组(P均<0.05)。结论哮喘大鼠气道重塑各所段支气管组织中NK-1R mRNA及其蛋白表达增高。NK-1R可能与哮喘气道重塑的发生、发展有关。     

布地奈德吸入对慢性支气管哮喘小鼠转化生长因子β1/Smad信号通路的影响

目的 观察布地奈德对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠转化生长因子β1(transforminggrowth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号通路的影响.方法 30只小鼠按随机数字表法分成哮喘组、布地奈德组、正常对照组,每组10只.哮喘组小鼠于第0天和第14天以卵白蛋白(OVA)致敏,第24天开始雾化吸人1%OVA激发并持续28 d,建立哮喘气道重塑模型;布地奈德组在吸入OVA前2 h雾化吸入布地奈德30 min;正常对照组以生理盐水代替OVA.于最后一次雾化结束后24 h对肺组织行苏木精一伊红染色观察病理学改变;运用医学图像分析软件测定管腔内周长(Pi)、管壁面积(WAt)、支气管平滑肌面积(WAm)、支气管平滑肌细胞核数(N).将WAt、WArn、N用Pi标准化;用免疫组织化学方法检测肺组织TGF-β1蛋白表达;用逆转录-聚合酶链反应半定量检测肺组织TGF-β1、Smad 2、Smad 3、Smad 7 mRNA表达.结果 哮喘组WAt/Pi、WAm/Pi、N/Pi与对照组比较差异有统计学意义(P值均<0.05).布地奈德组与哮喘组比较差异也具有统计学意义(P值均<0.05);哮喘组TGF-β1蛋白和TGF-β1、Smad 2、Smad 3 mRNA的表达较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05),布地奈德组TGF-β1蛋白和TGF-β1、Smad 2、Smad 3 mRNA的表达下降.与哮喘组比较差异均有统计学意义(P<0.05);布地奈德组可显著上调Smad 7 mRNA的表达.与哮喘组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 早期雾化吸入布地奈德通过抑制慢性哮喘小鼠肺组织TGF-β1、Smad 2、Smad 3的过度表达.上调Smad 7的表达,从而阻断TGF-β1/Smad信号通路,明显减轻哮喘小鼠的气道重塑.     

β2-肾上腺素受体表达水平与支气管哮喘气道重塑的关系

目的通过观察β2-肾上腺素受体(β2-adenergic receptor,β2-AR)在支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠气道壁组织表达水平的变化,探讨β2-AR表达水平与气道重塑的关系及观察应用β2-受体激动剂对小鼠气道重塑的影响。方法 30只雌性BALB/c小鼠分为3组,每组10只,分别为对照组(DZ)、哮喘模型组(MX)和特布他林组(TB)。采用0.2%卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)溶液腹腔注射致敏及2.5%OVA溶液雾化吸入激发的方法制作小鼠哮喘气道重塑模型,同时给予β2-受体激动剂(特布他林)干预,最后一次激发24h内处死小鼠,取其肺组织,对肺组织切片进行HE染色,以医学图像分析软件测量支气管基底膜周径(Pbm)、总气道壁面积(Wat)和平滑肌面积(Wam),同时采用免疫组织化学法,应用上述图像分析软件检测气道壁组织β2-AR的积分光密度值(IOD)。结果①各组小鼠总气道壁面积/支气管基底膜周径(Wat/Pbm):MX组(25.37±4.25)与DZ组(12.89±1.71)、TB组(15.98±2.58)相比较,气道壁显著增厚(P<0.01),TB组与DZ组相比较,气道壁厚度无明显差别(P>0.05);各组小鼠平滑肌面积/支气管基底膜周径(Wam/Pbm):MX组(7.58±2.16)与DZ组(2.55±0.72)、TB组(3.54±1.63)相比,气道平滑肌增厚(P<0.05),TB组与DZ组相比气道平滑肌厚度无明显差别(P>0.05)。②各组小鼠气道壁β2-AR表达的IOD值:与DZ组(24.90±2.42)相比较,MX组(19.88±1.94)小鼠气道壁组织β2-AR的表达水平显著降低(P<0.01),同时TB组(22.10±1.08)小鼠气道壁组织β2-AR的表达水平也显著低于对照组小鼠(P<0.01)。结论①应用β2-受体激动剂可通过抑制气道平滑肌增殖,减轻小鼠哮喘气道壁增厚,干预气道重塑;②哮喘发生气道重塑时,小鼠气道壁组织β2-AR表达明显下调,同时应用-受体激动剂(特布他林)可下调小鼠气道壁组织-AR的表达。     

蓝玉簪颗粒抑制慢性支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌及Bcl-2表达

目的 观察蓝玉簪颗粒对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道上皮杯状细胞化生及黏液高分泌的抑制作用并探讨其机制.方法 32只BABL/C小鼠随机分成正常对照组(A组)、慢性哮喘模型组(B组)、蓝玉簪颗粒组(C组,0.33 g生药/kg体质量)和地塞米松干预组(D组,2.0 mg/kg体质量),每组8只.卵白蛋白腹腔注射致敏并长期雾化吸入制备小鼠慢性哮喘模型.阿尔辛蓝-过碘酸-希夫(AB-PAS)染色观察气道上皮杯状细胞增生、黏液分泌情况,免疫组织化学半定量法测定气道壁Bcl-2含量.计算机图象分析软件测定气道壁Bcl-2、AB-PAS染色阳性面积和气道上皮层面积(Aep)与气道基底膜周径(Pbm)比值(如Aep/Pbm,Bcl-2/Pbm)等.结果 B组小鼠气道上皮层增生,气道黏液分泌显著增加,气道壁Bcl-2表达增强;B组AB-PAS/Pbm,Bcl-2/Pbm等值较C组均显著增高(P＜0.01);B组和C组Aep/Pbm值比较差异有统计学意义(P＜0.01),C组与D组比较差异无统计学意义(P＞0.05);AB-PAS/Pbm与Bcl-2/Pbm呈显著正相关(r=0.671,P＜0.01),Aep/Pbm与Bcl-2表达也呈显著正相关(r=0.784,P＜0.001).结论 蓝玉簪颗粒可以抑制慢性哮喘小鼠气道上皮杯状细胞增殖和黏液高分泌,其部分机制可能通过抑制Bcl-2的表达实现.     

一氧化氮对哮喘大鼠基质金属蛋白酶的表达调控

目的　观察一氧化氮 (NO)对哮喘大鼠基质金属蛋白酶 (MMP)及金属蛋白酶组织抑制物表达的影响 ,探讨其在哮喘气道结构重建中的作用。方法　 30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组和左旋精氨酸组 (L Arg组 ) ,每组 1 0只。肺组织作病理切片并HE染色 ,通过病理图像分析系统测定支气管基底膜周径 (Pbm)、总管壁面积 (WAt)、内壁面积 (WAi) ,平滑肌面积 (WAm)等形态学参数。用NO与一氧化氮合酶 (NOS)试剂盒测定肺组织中亚硝酸盐 /硝酸盐 (NO- 2 /NO- 3)水平与NOS活性。半定量逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)分析肺组织中MMP 2与TIMP 1mRNA的表达。结果(1 )WAt/Pbm、WAi/Pbm及WAm/Pbm哮喘组 [分别为 (2 5 3± 2 1 ) μm2 / μm、(2 0 4± 2 3) μm2 / μm、(4 2±2 0 ) μm2 / μm]和L Arg组 [分别为 (35 1± 2 6) μm2 / μm、(2 5 3± 2 0 ) μm2 / μm、(8 7± 1 5) μm2 / μm]与对照组 [分别为 (2 0 8± 1 3) μm2 / μm、(1 5 3± 2 1 ) μm2 / μm、(3 1± 1 1 ) μm2 / μm]比较 ,差异有显著性(P <0 0 1 ) ;L Arg组与哮喘组比较差异亦有显著性 (P <0 0 5)。 (2 )肺组织中NO- 2 /NO- 3水平哮喘组[(7 2± 2 1 )nmol/mg]和L Arg组 [(1 1 8± 1 7)nmol/mg]与对照组 [(3 1± 1 2 )n     

血管内皮生长因子在支气管哮喘小鼠气道中表达变化及其对气道重构的影响

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）在支气管哮喘（哮喘）小鼠气道中表达变化及其对气道重构的影响。方法将40只雌性BALB/c小鼠随机分为4组（每组10只）：生理盐水对照组（A组）;哮喘组（B组）;VEGF受体抑制剂干预组（C组）;地塞米松干预组（D组）。用鸡卵白蛋白致敏和雾化激发建立慢性哮喘小鼠模型。收集小鼠的支气管肺泡灌洗液（BALF）,行白细胞和嗜酸粒细胞（EOS）计数;ELISA法检测BALF和血清中VEGF的水平;用SABC免疫组化法检测VEGF在肺组织的表达水平并行抗Ⅷ因子免疫组化染色在显微镜下计数气管黏膜固有层、黏膜下层血管密度;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测VEGF mRNA的表达变化;采用医学图像分析软件测定支气管管壁厚度（WAt/Pbm）及肺组织切片中的血管数。结果B组BALF中白细胞总数、EOS百分比、VEGF浓度及血清中VEGF浓度明显高于A组,差异有统计学意义（P〈0.01）;C、D两组与B组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）,C组与D组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。抗Ⅷ因子免疫组化染色及图像分析结果显示：B组气管血管密度、WAt/Pbm及肺组织切片中的血管数明显高于A组（P〈0.01）,C、D两组与B组比较均显著减少（P〈0.01）,C组与D组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。免疫组化及RT-PCR检测结果显示：B组小鼠肺组织中的VEGF表达较A组显著增加（P〈0.01）,C、D两组小鼠肺组织中VEGF的表达与B组比较均显著减少（P〈0.01）,C组与D组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论VEGF在小鼠哮喘模型气道及肺组织内过度表达,参与了哮喘的发病和气道重构的过程,VEGF受体抑制剂可以降低哮喘模型的气道炎症,减轻气道重构的程度。     

蓝玉簪颗粒抑制慢性支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌及Bcl-2表达

目的观察蓝玉簪颗粒对慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道上皮杯状细胞化生及黏液高分泌的抑制作用并探讨其机制。方法32只BABL／C小鼠随机分成正常对照组（A组）、慢性哮喘模型组（B组）、蓝玉簪颗粒组（C组,0．33g生药／kg体质量）和地塞米松干预组（D组,2．0mg／kg体质量）,每组8只。卵白蛋白腹腔注射致敏并长期雾化吸入制备小鼠慢性哮喘模型。阿尔辛蓝-过碘酸-希夫（AB-PAS）染色观察气道上皮杯状细胞增生、黏液分泌情况,免疫组织化学半定量法测定气道壁Bcl-2含量。计算机图象分析软件测定气道壁Bcl-2、AB-PAS染色阳性面积和气道上皮层面积（Aep）与气道基底膜周径（Pbm）比值（如Aep／Pbm,Bcl-2／Pbm）等。结果B组小鼠气道上皮层增生,气道黏液分泌显著增加,气道壁Bcl-2表达增强;B组A昏PAS／Phm,Bcl-2／Pbm等值较C组均显著增高（P〈0．01）;B组和C组Aep／Pbm值比较差异有统计学意义（P〈0．01）,C组与D组比较差异无统计学意义;AB-PAS／Pbm与Bcl-2／Pbm呈显著正相关（r=0．671,P〈0．01）,Aep／Pbm与Bcb2表达也呈显著正相关（r=0．784,P〈0．001）。结论蓝玉簪颗粒可以抑制慢性哮喘小鼠气道上皮杯状细胞增殖和黏液高分泌,其部分机制可能通过抑制Bcl-2的表达实现。     

高表达白细胞介素-17的激素抵抗型哮喘模型建立

目的建立一种对糖皮质激素治疗不敏感的小鼠哮喘模型。方法雌性Balb/c小鼠分为对照组、卵清蛋白(OVA)组和弗氏完全佐剂(CFA)组,分别经腹腔或者皮下注射氢氧化铝、OVA/氢氧化铝和OVA/CFA。实验第21、22和23天每天雾化吸入1次,对照组小鼠吸入物为PBS,OVA组和CFA组吸入OVA。OVA组和CFA组各6只小鼠在雾化吸入前3 h腹腔注射地塞米松,余6只注射PBS。所有小鼠在实验24 d时处死,留取肺泡灌洗液(BALF)和外周血血清,BALF行Giemsa染色和细胞分类计数,ELISA检测血清中Ig E以及BALF中Ig E、白细胞介素(IL)-17、γ干扰素(IFN-γ)、IL-6和IL-13的含量。结果 OVA组小鼠血清和BALF中IL-17表达与对照组小鼠无明显差别,而CFA组小鼠BALF中IL-17水平明显高于OVA组和对照组小鼠(P0.01)。OVA组小鼠BALF中以嗜酸性粒细胞为主,而CFA组小鼠BALF中以中性粒细胞为主。给予地塞米松治疗后,OVA组小鼠BALF中细胞总数、各类型细胞数目和各细胞因子均少于未治疗小鼠(P0.05),而地塞米松治疗并不能降低CFA组小鼠BALF中细胞数量和细胞因子水平(P0.05)。结论 OVA结合CFA可诱导出高表达IL-17、对糖皮质激素治疗不敏感的小鼠哮喘模型。     

内源性硫化氢和胱硫醚-β-合成酶mRNA在支气管哮喘大鼠中的表达及意义

目的 观察支气管哮喘(简称哮喘)大鼠胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)mRNA及硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的表达变化,探讨CBS与H2S的相关性.方法 采用哮喘大鼠模型,将30只SD大鼠随机分成哮喘组、对照组、地塞米松组,分光光度法测定血浆H2S含量,RT-PCR法检测肺组织CBS mRNA的表达水平.结果 血浆中H2S含量哮喘组显著低干对照组,地寒米松组与哮喘组、对照组相比差异无统计学意义.肺组织CBS mRNA的表达水平哮喘组、地塞米松组显著低于对照组,地塞米松组显著高于哮喘组.肺组织CBS mRNA和血浆中H2S的表达水平呈显著正相关.结论 哮喘大鼠血浆中H2S的含量和肺组织CBS mRNA的表达下降,两者呈正相关,提示可能参与了哮喘的炎症过程.地塞米松改善哮喘炎症可能部分通过H2S/CBS体系而起作用.     

内源性硫化氢和胱硫醚-β-合成酶mRNA在支气管哮喘大鼠中的表达及意义

目的观察支气管哮喘（简称哮喘）大鼠胱硫醚-β-合成酶（eystathionine-β-synthase,CBS）tuRNA及硫化氢（hydrogensulfide,HzS）的表达变化,探讨CBS与HzS的相关性。方法采用哮喘大鼠模型,将30只SD大鼠随机分成哮喘组、对照组、地塞米松组,分光光度法测定血浆H2S含量,RT—PCR法检测肺组织CBSmRNA的表达水平。结果血浆中H2S含量哮喘组显著低于对照组,地塞米松组与哮喘组、对照组相比差异无统计学意义。肺组织CBSmRNA的表达水平哮喘组、地塞米松组显著低于对照组,地塞米松组显著高于哮喘组。肺组织CBSmRNA和血浆中Hzs的表达水平呈显著正相关。结论哮喘大鼠血浆中H2S的含量和肺组织CBSmRNA的表达下降,两者呈正相关,提示可能参与了哮喘的炎症过程。地塞米松改善哮喘炎症可能部分通过H2S／CBS体系而起作用。     

表皮生长因子受体对支气管哮喘小鼠气道黏液分泌的影响及机制

目的 探讨支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道黏液分泌与表皮生长因子受体(EGFR)、转化生长因子α(TGF-α)的关系以及表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(AG1478)的干预作用.方法 32只小鼠随机分为4组:正常对照组、哮喘模型组、AG1478组和地塞米松干预组.建立哮喘小鼠模型,对肺组织切片行过碘酸雪夫染色显示气道黏膜杯状细胞的增生情况.应用免疫组织化学方法检测TGF-α的蛋白及RT-PCR方法检测EGFR mRNA表达的变化.结果 哮喘组出现气道壁增厚、杯状细胞增多、黏液分泌增加,EGFR、TGF-α水平增高.地塞米松组和AG1478组较哮喘组均有所改善,EGFR、TGF-α表达降低(P<0.05).结论 EGFR、TGF-α参与哮喘小鼠气道黏液分泌过程,AG1478可抑制气道黏液分泌.AG1478可能通过下调EGFR、TGF-α的表达以及抑制依赖于EGFR下游的细胞信号转导级联反应来发挥其效应.     

表皮生长因子受体对支气管哮喘小鼠气道黏液分泌的影响及机制

目的探讨支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道黏液分泌与表皮生长因子受体（EGFR）、转化生长因子α（TGFα）的关系以及表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（AG1478）的干预作用。方法32只小鼠随机分为4组：正常对照组、哮喘模型组、AG1478组和地塞米松干预组。建立哮喘小鼠模型,对肺组织切片行过碘酸雪夫染色显示气道黏膜杯状细胞的增生情况。应用免疫组织化学方法检测TGF—α的蛋白及RTPCR方法检测EGFR mRNA表达的变化。结果哮喘组出现气道壁增厚、杯状细胞增多、黏液分泌增加,EGFR、TGF—α水平增高。地塞米松组和AG1478组较哮喘组均有所改善,EGFR、TGF—α表达降低（P〈0．05）。结论EGFR、TGF—α参与哮喘小鼠气道黏液分泌过程,AG1478可抑制气道黏液分泌。AG1478可能通过下调EGFR、TGF-α的表达以及抑制依赖于EGFR下游的细胞信号转导级联反应来发挥其效应。     

异丁斯特对支气管哮喘豚鼠Th2型细胞因子白介素4、白介素1 3及嗜酸粒细胞趋化因子的影响

目的 探讨异丁斯特对支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠Th2型细胞因子白介素4(interleukin-4,IL-4)、IL-13及嗜酸粒细胞趋化凶子(eotaxin)的影响.方法 Hartley豚鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、异丁斯特10、20、30 mg/kg组及地塞米松(DXM)给药组.用卵白蛋白致敏制备豚鼠哮喘模型,给药后观察各组肺组织的病理变化;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),并对其中的嗜酸粒细胞(eosinophil,EOS)进行计数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定BALF中IL4、IL-13的含量;双抗体夹心ABC_ELISA法检测eotaxin水平.结果 HE染色显示,模型组豚鼠支气管壁及管腔内、血管周围可见大量炎症细胞浸润,平滑肌肥厚,黏膜、肺组织充血水肿,异丁斯特各剂量组及DXM给药组较模型组炎症表现明显减轻;与模型组比较,异丁斯特各剂量组及DXM给药组均能显著降低哮喘豚鼠BALF中EOS的数量;与模型组比较,异丁斯特各剂量组及DXM给药组均能显著降低哮喘豚鼠BALF中IL-4、IL-13含量及eotaxin水平.结论 异丁斯特对哮喘豚鼠有治疗作用,其机制可能与降低IL-4、II-13含量及eotaxin水平,减少气道EOS浸润,从而减轻哮喘气道炎症有关.     

雷公藤甲素对哮喘小鼠信号转导和转录激活因子6及eotaxin表达的影响

目的研究雷公藤甲素对哮喘小鼠信号转导和转录激活因子6(STAT6)、嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)表达的影响,探讨其治疗哮喘的机制。方法建立小鼠卵蛋白哮喘模型,随机分为7组,分别为对照组、地塞米松治疗组及不同剂量雷公藤甲素治疗组,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(Eos)计数;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学法分别检测肺组织中STAT6、eotaxin mRNA及气道上皮STAT6、eotaxin蛋白表达水平。结果哮喘组STAT6、eotaxin mRNA及蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.01),雷公藤甲素治疗组及地塞米松组明显低于哮喘组(P<0.01)。气道上皮STAT6的蛋白表达与BALF中白细胞数、Eos计数及气道上皮eotaxin蛋白表达呈正相关(r分别为0.528,0.612,0.682,P<0.01)。气道上皮eotaxin蛋白表达与白细胞总数、Eos计数呈正相关(r分别为0.79,0.88,P<0.01)。结论雷公藤甲素抑制哮喘气道炎症的机制可能与其抑制STAT6及eotaxin的表达活性有关。     

可溶性IL-13受体α2对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 通过观察可溶性IL-13受体α2(sIL-13Rα2)对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道炎症的影响,了解sIL-13Rα2对哮喘潜在的治疗价值.方法 24只BALB/c小鼠随机分成正常对照组、哮喘组及sIL-13Rα2治疗组,哮喘组和sIL-13Rα2治疗组以鸡卵白蛋白(OVA)致敏和激发,建立哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA.sIL-13Rα2治疗组每次激发前30 min腹腔注射sIL-13Rα2 100μg,正常对照组及哮喘组则用生理盐水替代.比较各组支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、肺组织学检查.结果 与正常对照组相比,哮喘组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比显著增加(P值均＜0.001),血清及BALF中IL-13明显增多(P值均＜0.001),病理示肺组织损害明显.与哮喘组相比,sIL-13Rα2治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比显著降低(P值均＜0.001),血清及BALF中IL-13明显减少(P值均＜0.001),病理示肺组织损害明显减轻.结论 sIL-13Rα2可明显减轻哮喘小鼠气道炎症.     

外源性间充质干细胞减轻支气管哮喘小鼠气道炎症的研究

目的 观察鸡卵清蛋白诱导小鼠支气管哮喘(简称哮喘)模型中外源性间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)在哮喘小鼠肺组织气道炎症中的作用.方法 45只雌性SPF级C57BL/6小鼠,体质量18～22 g.随机分为对照组(P:P:P)、哮喘组(O:P:O)和MSC治疗组(O:M:O).哮喘组与MSC治疗组第1天和第8天致敏,第15天、第16天和第17天使用OVA气道内滴入激发哮喘.MSC治疗组于哮喘造模第14天移植外源性MSC.对照组小鼠予PBS处理.三组小鼠于末次激发结束后24 h(第18天)处死,取支气管肺泡灌洗液上清,ELISA检测IL-5、IL-9及β-氨基己糖苷酶;支气管肺泡灌洗液细胞计数总细胞数、嗜酸粒细胞数;取肺组织行病理切片苏木精-伊红染色观察肺部气道炎症情况.结果 ①MSC下调了哮喘小鼠气道局部炎症;②MSC减轻了哮喘小鼠肺组织中的炎细胞浸润;③MSC减轻了哮喘小鼠气道中的肥大细胞脱颗粒现象;④MSC抑制了哮喘小鼠过度的Th2变态反应.结论 外源性MSC通过抑制Th2变态反应,减轻哮喘肺组织的气道炎症.     

嗜酸细胞凋亡在激素抵抗型哮喘中的意义

目的 观察激素抵抗型（ＳＲ）哮喘是否存在嗜酸细胞（ＥＯＳ）凋亡功能的异常及促炎症细胞因子白细胞介素５（ＩＬ－５）和粒－巨细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的调节作用。方法 分离ＳＲ（１５例）、激素敏感型（ＳＳ,３０例）两组哮喘患外周血单个核细胞（ＰＢＭＣＳ）及ＥＯＳ,体外培养后测定：（Ｆ１）ＰＢＭＣＳ在糖皮质激素处理前、后和细胞因子的能力;（２）自发的或糖皮质激素诱导的或用ＰＢＭＣＳ培养上液处理后     

可溶性IL-13受体α2对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响

目的通过观察可溶性IL-13受体α2（sIL-13Rα2）对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道炎症的影响,了解sIL-13Rα2对哮喘潜在的治疗价值。方法 24只BALB/c小鼠随机分成正常对照组、哮喘组及sIL-13Rα2治疗组,哮喘组和sIL-13Rα2治疗组以鸡卵白蛋白（OVA）致敏和激发,建立哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA。sIL-13Rα2治疗组每次激发前30min腹腔注射sIL-13Rα2100μg,正常对照组及哮喘组则用生理盐水替代。比较各组支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数、肺组织学检查。结果与正常对照组相比,哮喘组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比显著增加（P值均〈0.001）,血清及BALF中IL-13明显增多（P值均〈0.001）,病理示肺组织损害明显。与哮喘组相比,sIL-13Rα2治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比显著降低（P值均〈0.001）,血清及BALF中IL-13明显减少（P值均〈0.001）,病理示肺组织损害明显减轻。结论 sIL-13Rα2可明显减轻哮喘小鼠气道炎症。