干预糖毒性对肥胖大鼠胰岛β、α细胞功能改善的作用

目的 探讨糖毒性对肥胖大鼠胰岛β、α细胞功能及分子生物学的损害作用.方法 雄性SD大鼠36只分为4组:(1)正常组:9只,普通饲料喂养.(2)高脂组:9只,高脂饲料喂养.(3)DM对照组:9只,不给予药物干预.(4)糖毒性干预组:9只,皮下注射超长效甘精胰岛素(5 U·kg-1·d-1)降低血糖,共4周.所有大鼠在实验结束时,通过免疫组化观察分析胰岛β、α细胞形态学特点,RT-PCR测定胰腺内胰岛素原mRNA表达水平,Western印迹方法检测胰腺中胰岛素蛋白质含量,胰岛素干预2周和4周后复测葡萄糖耐量试验.结果 糖毒性干预组,胰岛内β细胞比糖尿病对照组相对量增加(分别为0.38±0.08,0.11±0.05,P＜0.01),β细胞浆内胰岛素水平增加(分别为0.58±0.03,0.34±0.14,P＜0.01),胰岛素原mRNA表达增加(分别为1.52±0.14,1.26±0.14,P＜0.01);Western印迹检测胰岛素蛋白质含量明显升高;胰岛内α细胞相对量减少(分别为0.28±0.15,0.16±0.04,P＜0.01).结论 干预糖毒性4周能显著改善糖尿病大鼠胰岛β、α细胞的病理学变化,部分恢复胰岛细胞的功能.     

大鼠重症急性胰腺炎胰腺蛋白组学的初步研究

目的观察牛磺胆酸钠诱导的重症急性胰腺炎（SAP）大鼠的胰腺组织在不同时间点蛋白组学的变化。方法 36只SD大鼠分为假手术组、SAP组,分别于24 h、48 h、72 h 3个时间点处死大鼠,每时间点6只。动物经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱发SAP,对照组以生理盐水代替5%牛黄胆酸钠行假手术。通过双向电泳分离、硝酸银染色和图谱分析模型组与对照组蛋白点的差异。结果牛磺胆酸钠诱导出SAP典型组织病理学改变,伴随有胰外肺、肾、胃肠器官的损伤。通过图像分析软件分析胰腺组织蛋白组学变化：24 h时SAP组与假手术组有46个差异点,其中9个点蛋白上调,37个点下调;48 h时SAP组与假手术组有97个差异点,其中43个点蛋白上调,54个点下调;72 h时间点SAP组与假手术组有80个差异点,其中10个点蛋白上调,70个点下调。结论牛磺胆酸钠诱导的大鼠SAP模型胰腺组织在不同时间点蛋白组学的变化存在差异。     

细胞微粒蛋白组学的研究进展

细胞微粒(MPs)由多种细胞受刺激后分泌,与炎症、凝血及与心血管疾病相关。内皮微粒(EMPs)为损伤内皮细胞胞膜脱落形成,其与冠状动脉损伤、炎症息息相关,可表达胞质蛋白,且不同疾病状态下,所表达的蛋白亦不同。EMPs蛋白组学通过对EMPs所表达蛋白进行分析,筛选出与疾病相关的蛋白标志物,是临床上常用的筛选标志物的方法之一,对疾病的早期诊断有重要意义。     

基于 TMT 蛋白组学技术探讨氯化汞致小鼠肝脏损伤的机制

摘要:目的 利用蛋白组学技术筛选并鉴定氯化汞染毒后小鼠肝脏差异表达蛋白,为氯化汞的肝毒性作用机制研究提供线索。方法 45只6周龄雄性 C57BL/6小鼠随机分为5组:正常对照组,不同剂量氯化汞处理组,即低剂量组(1mg/kg)、中低剂量组(4mg/kg)、中高剂量组(8mg/kg)、高剂量组(16mg/kg)。氯化汞处理组每天灌胃给予不同剂量氯化汞,对照组给予等体积水,监测小鼠体重变化。第28天灌胃后处死小鼠,收集血清和肝脏组织,测定其血清丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST)、肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性;苏木精-伊红(hematoxylin-eosinstaining,HE)染色观察肝脏病理学变化;采用串联质谱标签(tandem masstags,TMT)定量蛋白组学技术鉴定对照组与氯化汞高剂量组肝脏的差异表达蛋白(differentiallyexpressedproteins,DEPs),并对其进行 GO 富集、KEGG通路富集分析。结果与对照组相比,中高剂量组与高剂量组小鼠体重降低(均 P<0.05)、血清 ALT 活性显著增高、肝脏 GSH-Px、CAT 水平下降。HE染色结果显示氯化汞染毒可引起多种类型的肝细胞损伤。蛋白组学结果显示,与对照组相比,氯化汞高剂量组小鼠肝脏差异表达蛋白共有195个,其中上调99个、下调96个;GO 富集分析显示氯化汞参与小鼠肝脏的糖代谢负调控、天冬氨酸家族氨基酸代谢等生物学过程;KEGG通路富集分析显示,氯化汞染毒可通过影响 CYP450介导的外源化合物代谢、类固醇激素代谢、花生四烯酸代谢、胆汁分泌等信号通路产生肝脏毒性。结论 氯化汞染毒严重影响小鼠肝脏多种蛋白的表达,导致相关代谢通路紊乱。     

山莨菪碱对环孢素A所致大鼠胰腺毒性的防护作用

观察了环孢素Ａ（ＣｓＡ）的大鼠胰腺毒性及山莨菪碱的防护作用。实验分对照组、环孢素Ａ组和环孢素Ａ＋山莨菪碱组。结果：环孢素Ａ每ｄ１０ｍｇ·ｋｇ－１灌胃３周，可引起大鼠口服葡萄糖耐量和葡萄糖刺激的胰岛素分泌显著降低；同时腹部皮下注射每ｄ１０ｍｇ·ｋｇ－１山莨菪碱３周，可使环孢素Ａ所引起的大鼠口服糖耐量和服糖后胰岛素分泌显著降低。结果提示：山莨菪碱对环孢素Ａ所致大鼠胰腺毒性具有防护作用。     

不同糖浓度下心肌细胞糖代谢情况及糖毒性对心肌细胞的伤害

目的 以体外培养的H9C2心肌细胞为模型,探讨不同糖浓度下心肌细胞糖代谢情况,并揭示糖毒性对心肌细胞是否有直接伤害作用.方法 同位素示踪法检测不同葡萄糖浓度时H9C2心肌细胞3氚标记-葡萄糖(3H-G)摄取的变化,相差显微镜、Hoechst 33258染色观察H9C2细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪检测H9C2细胞凋亡率.结果 培养24 h,高糖组H9C2细胞形态学开始发生变化;与5.5 mmol/L葡萄糖组比较,25.0 mmol/L葡萄糖组H9C2细胞3H-G摄取明显降低(P<0.01).培养48 h,Hoechst 33258染色观察到H9C2细胞凋亡明显增加;与5.5 mmol/L葡萄糖组比较,25.0 mmol/L葡萄糖组H9C2细胞凋亡率明显增加(P<0.01).结论 高糖浓度下心肌细胞的糖摄取明显降低,表明心肌细胞存在胰岛素抵抗.随着高糖的作用时间延长,心肌细胞发生了凋亡.高糖对心肌细胞有直接伤害作用.     

慢性胰腺炎胰腺纤维化机制研究进展

慢性胰腺炎是一种不可逆的慢性胰腺纤维化疾病.胰腺星状细胞是纤维化的关键细胞,活化的胰腺星状细胞可分泌细胞外基质促进胰腺纤维化发生、发展.胰腺腺泡细胞坏死和巨噬细胞浸润在胰腺纤维化中发挥重要作用,腺泡细胞坏死后释放多种物质激活胰腺星状细胞可能是胰腺纤维化的启动因素,而巨噬细胞的极化及表型转换可影响胰腺组织的再生修复过程....     

蛋白质组学技术在胰腺的高糖毒性分析中的应用

慢性高血糖是糖尿病的一个主要特征,它也是发生糖尿病并发症的一个主要病因。目前普遍认为,高血糖毒性通过影响β细胞的分泌,使得2型糖尿病更加恶化。对于慢性高血糖有害影响的机制有很多不同的解释。其中一种学说认为,在高血糖状态下,几个关键蛋白的调节可能可以解释高血糖的慢性毒性作用。因此,在研究蛋白表达对于慢性高血糖毒性的影响方面,生物标本的蛋白质组学分析是一个有趣的方法。新发现的在慢性高血糖调节后表达的蛋白质,可能对更好的研究高血糖毒性条件下的机制有帮助。在这里,将对已应用于胰腺、胰岛细胞和β细胞相关研究的蛋白质组学技术作一综述。     

组织蛋白质组学在动脉粥样硬化疾病中的研究进展

动脉粥样硬化是一种高致残率和致死率的疾病之一。其分子机制的初步探明已经为疾病的预防、诊断和康复检测提供一些重要的信息,但更深层次的机制未明。该研究概述了近年来蛋白质组学技术的发展,动物模型中动脉粥样硬化组织蛋白质组学以及人类的动脉粥样硬化组织蛋白质组学的研究进展,并就动脉粥样硬化组织蛋白组学存在的问题以及发展方向作了探讨。     

类风湿关节炎蛋白质组学的研究进展

类风湿关节炎是一种常见的系统性自身免疫疾病。近年来,应用新的基因组学技术来研究类风湿关节炎(RA)的病理机制以及有效的针对性治疗方法已使得人们对RA生物学有了较多的了解。蛋白质组学是RA生物学的重要内容。本文综述了RA用蛋白质组学寻找新的特异性靶蛋白:钙结合蛋白S100A9/A8、血清淀粉样蛋白?半乳凝素、泛素-蛋白酶体途径的最新研究进展,并简要介绍了RA特异性靶蛋白的表达水平。     

原发性胰腺癌与胰腺转移癌的研究进展

原发性胰腺癌临床症状出现较晚,诊断与治疗难度极大,早期发现并进行规范化综合治疗是改善预后的关键因素。少见病理类型的胰腺癌发病率呈逐年上升趋势,胰腺腺鳞癌和胰腺鳞癌两种亚型尤为明显,且较胰腺腺癌恶性程度高、预后差,其诊疗特殊性已引起关注。胰腺转移癌与原发性胰腺癌鉴别困难,极易造成误诊。原发肿瘤的生物学特性及综合治疗的效果是导致患者生存时间及生存质量差异的原因。     

比较蛋白质组学研究进展

蛋白质组学作为后基因时代研究的一个重要内容,已广泛深入到生命科学和医药学的各个领域,尤其是比较蛋白质组学在疾病研究、治疗和制药中得到了更为广泛的应用。本文简要介绍了比较蛋白质组学的基本概念、研究技术和相关的研究现状。     

胰腺癌相关肿瘤标志物研究进展

目前一些常用胰腺癌肿瘤标志物如CAl9-9、CA5O、CA242等指标,对于诊断肿瘤发生、监测预后及复发起到了重要作用,但这些指标的特异性及敏感性尚不能满足临床的需要,因此需要寻找新的诊断及联合诊断的指标来进一步提高胰腺癌早期诊断率.     

肝细胞肝癌相关蛋白质组学研究进展

探讨和揭示肝细胞肝癌发生发展和转移复发的相关因素及分子机制,寻找早期诊断肝癌、预测转移的生物标记和干预治疗的药物靶点,已成为当今肝细胞肝癌研究的热点。随着后基因组时代的来临,作为功能基因的直接体现者及生物体生命功能执行者的蛋白质为多基因、多蛋白的肝细胞肝癌的研究创造了新的契机。     

血栓性疾病蛋白质组学的研究进展

血栓性疾病是目前人类死亡的最主要原因之一,由于其发病机制尚未明确,以致病死率居高不下。蛋白质组学技术可以高通量地对比健康、疾病及给药后蛋白质表达谱的变化,有效地进行疾病标志物及药物靶点的筛选和鉴定。随着蛋白质组学研究方法的建立和发展,蛋白质组学技术在动脉血栓、静脉血栓疾病的诊断、治疗等方面发挥越来越重要的作用。该文就血栓性疾病蛋白质组学技术的研究进展予以综述。     

蛋白质组学在帕金森病研究中的应用研究进展

帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是与年龄相关的神经系统慢性退行性疾病,主要病理特征为黑质多巴胺能神经元持续变性,其病因和发病机理尚不清楚。蛋白质组学是从整体水平研究蛋白质在不同疾病状态或外界因素作用下的差异表达情况,已成为探索疾病发病机制、疾病诊断和药物治疗最有效的方法,并为PD发病机制的研究、发现PD的诊断标记物和寻找药物治疗新靶点及研制可靠药物提供有力的依据。本文就蛋白质组学在PD研究中对PD细胞和动物模型、发病机制和PD的诊断以及药物治疗研究中的应用进展做一综述。     

肾小球疾病的尿蛋白质组学诊断

肾小球疾病是目前我国最常见的肾脏疾病。尿液蛋白质种类和数量的变化携带着肾小球疾病发生和发展的各种重要信息,尿蛋白质组学的研究为肾小球疾病的早期诊断、评估预后及监测治疗反应提供了一种无创性的手段。本文着重介绍尿蛋白质组学在肾小球疾病中的最新研究进展,并简要概括尿蛋白质组学研究相关技术及其局限性。