小儿急性呼吸道感染与人博卡病毒相关性的研究

目的:了解小儿急性呼吸道感染与人博卡病毒(Human Bocavirus,HBoV)的相关性。方法:对2008年1～5月在长春市儿童医院住院的1007例急性呼吸道感染患儿鼻咽深部分泌物样本用PCR扩增的方法进行HboV NS1基因检测。随机选取8例HBoV阳性产物进行测序,并将测到的序列与GenBank中的基因序列和HBoV阳性病例的临床资料进行分析。结果:1007例标本共检测出44例HBoV阳性,阳性率为4.37%,其中急性上呼吸道感染、急性支气管炎、毛细支气管炎和支气管肺炎患儿人博卡病毒阳性检出率分别为1.29%(2/155)、5.71%(2/35)、8.70%(2/23)和4.79%(38/794)。HboV急性呼吸道感染的年龄分布为1岁以下39例,占88.64%;1岁以上5例,占11.36%;男女性别比值是1.75∶1;临床表现咳嗽伴喘憋占97.56%,咳嗽伴腹泻占34.14%,入院时体温升高占54.55%,肺部听诊闻及干和/或湿性罗音者占95.12%,X线胸片片状影占87.80%,病程平均为13.79天。结论:人博卡病毒是引起小儿急性呼吸道感染的病原之一;HboV所致呼吸道感染部位多在下呼吸道;感染患儿以1岁以内婴儿为主。     

武汉市呼吸道感染儿童博卡病毒的检测及临床分析

目的 分析武汉市呼吸道感染儿童博卡病毒(HBoV)感染的临床特点,为临床治疗提供理论依据。方法 收集2014年12月1日-2015年12月1日期间在本院儿科住院的365例急性呼吸道感染患儿为研究对象,在疾病急性期用一次性吸痰管采集患儿鼻咽分泌物(NPA)标本液2 ml。先进行7种常见呼吸道病毒的筛查,然后采用PCR方法检测HBoV 基因,对阳性标本进行序列验证及分析。结果 1)对365份标本进行免疫荧光检测,结果显示呼吸道合胞病毒(RSV)的阳性检出率最高18.90%(69/365),其他依次为腺病毒(ADV)阳性15例(4.11%),副流感病毒Ⅲ(PIV-Ⅲ)阳性8例(2.20%),甲型流感病毒(IFV-A)阳性5例(1.37%),乙型流感病毒(IFV-B)阳性3例(0.82%),副流感病毒Ⅱ型(PIV-Ⅱ)阳性2例(0.55%)。2)365例标本中,32例(8.77%)出现HBoV 的PCR扩增产物,均为单一条带,大小约为354 bp,与预期的扩增片段大小相符合,显示为HBoV阳性。32例阳性标本进行测序后经Blast分析,HBoV1型28例(7.67%),HBoV2型3例(0.82%),HBoV3型1例(0.27%)。3)32例HBoV阳性患儿中,其中男19例,女13例,男女比例为1.47∶1;年龄3~13个月,平均6.87个月。结论 HBoV 感染是引起武汉市小儿呼吸道感染的重要病毒之一,主要以HBoV1型感染为主,而且多为混合感染。应加强对婴幼儿的预防保健工作,以便进行合理用药、早期治疗。     

从我国儿童呼吸道标本中首次检出人博卡病毒

目的 调查国内儿童急性呼吸道感染中是否存在人类博卡病毒（human Boeavirus）感染。方法 采用聚合酶链反应（PCR）技术对湖南地区急性呼吸道感染儿童的鼻咽抽吸物（NPA）进行包括HBoV等12种病毒基因筛查，然后将PCR扩增阳性产物构建到Ppbs-T载体进行TA克隆及步移法测序，获取全长cDNA，登录Gen Bank作对比研究。结果 从某儿童急性肺炎的呼吸道标本中，检获到HBoV基因，该患者11种常见呼吸道病毒PCR均为阴性，唯检出HBoV。患者表现咳嗽、低热、呼吸困难等临床症状，在儿科诊断为肺炎。结论 国内儿童急性呼吸道感染中，特别是在中国南方地区的急性呼吸道感染患儿中，有部分可能系HBoV感染引起，应引起临床医护人员重视。     

杭州地区急性呼吸道感染患儿人博卡病毒的检测及分析

目的了解杭州地区人博卡病毒(HBoV)的流行情况和基因变异情况。方法对杭州地区160例儿童急性呼吸道感染患者咽拭子样本进行HBoV检测,并对阳性样本进行常见呼吸道病毒的检测,最终选取HBoV单一阳性的HZ1株和HZ2株进行VP1基因扩增,将获得的序列上传Genbank并与其他国家和地区的8株HBoV的VP1基因进行序列比对和分析。结果杭州地区HBoV的检出率为6.9%(11/160),与其他常见呼吸道病毒的合并感染率达到45.5%(5/11),HZ1株和HZ2株与其他国家和地区的8株HBoV的VP1基因相似性达到99%以上。结论研究证明杭州地区急性呼吸道感染患儿中存在HBoV的感染,与其他呼吸道病毒有较高的合并感染,从分离到的HZ1株和HZ2株来看,杭州地区流行的是ST2基因型,其外壳蛋白VP1基因变异很小。     

天津地区儿童人博卡病毒感染及基因型分析

目的 了解天津地区急性下呼吸道感染儿童中人博卡病毒(HBoV)的感染情况及病毒基因特性.方法 采集2008年9月- 2009年5月急性下呼吸道感染住院儿童的鼻咽吸取物标本202份,进行PCR扩增来检测HBoVNP-1基因,对VP1及VP2基因进行扩增及序列测定,与GenBank中登录的序列进行比较,分析序列特征并绘制种系发生树,同时采用多重PCR方法检测其他12种呼吸道病毒及WU多瘤病毒.结果 202份标本中,6.9％( 14/202)为HBoV阳性,所有阳性患儿的年龄均≤6岁,6月～12月龄患儿感染率最高,为14.3％ (6/42);所有感染者均为肺炎和喘息性支气管炎患儿,各月份均有检出;HBoV与其他病毒的混合感染率为85.7％ (12/14),其中58.3％ (7/12)为3种以上呼吸道病毒混合感染;VP1/VP2基因种系发生树分析表明13株HBoV均属于Ib簇,同源性分析表明,天津地区HBoV VP1基因与从GenBank下载的Ⅰ型序列比较,核酸及氨基酸的同源性分别为99.0％～ 99.8％及99.0％ ～99.9％.结论 天津地区存在HBoV流行,感染者多为＜6岁儿童,HBoV与其他呼吸道病毒混合感染常见,HBoV病毒均属于Ib簇.     

下呼吸道感染住院患儿人博卡病毒感染的临床特征

目的 研究＜1岁急性下呼吸道感染患儿人博卡病毒(HBoV)感染的临床特征.方法 采用实时荧光定量PCR法对2009年11月-2010年12月453例因急性下呼吸道感染的＜1岁患儿鼻咽部抽吸物进行博卡病毒检测,阳性病例采用实时荧光定量PCR对其DNA载量进行测定,并结合其临床特征进行综合分析.结果 HBoV阳性检出35例,总阳性检测率为7.73％,平均年龄10.5月龄,季节性及性别差异无统计学意义;HBoV感染重症感染患儿(4.2×108拷贝/ml)与普通感染患儿(1.7×108拷贝/ml) HBoV的病毒载量差异无统计学意义;HBoV协同感染(6.5×106拷贝/ml)与独立感染(1.3×106拷贝/ml)患儿病毒载量差异也无统计学意义.结论 博卡病毒是＜1岁患儿下呼吸道感染的重要病原体,常年均可见HBoV检出病例,其病毒载量与临床表现严重程度无明显相关性,博卡病毒不是＜1岁患儿急性下呼吸道感染的惟一因素.     

广州地区儿童呼吸道感染人博卡病毒的分子流行病学研究

人博卡病毒(HBoV)属细小病毒,为瑞典学者Allander 等[1]2005年从小儿下呼吸道感染样本中分离到的一种新呼吸道病原.目前世界各地均有HBoV研究相关报告[2],说明该病毒是世界范围内存在的人类致病原.为了解广州地区HBoV的分子流行病学特点和临床特征,对638例患儿临床标本进行检测.结果报告如下.     

2016年武汉地区住院儿童人博卡病毒感染的临床特征及流行病学

目的了解武汉地区住院儿童呼吸道人博卡病毒（HBoV）感染情况、临床特征及流行病学特点。方法收集2016年1—12月该院儿科因急性呼吸道感染的住院患儿968例,采用无菌负压吸引法采集新鲜标本检查痰HBoV、RSV、ADV、INF A/B和PIV I/II/III,分析HBoV感染病例的流行情况及临床特征。结果968例患儿中,HBoV阳性75例,检出率7.75%。男女患儿检出率分别为5.68%、2.07%,不同性别HBoV检出率比较,差异无统计学意义（χ2=2.083,P=0.140）;53例（70.67%）HBoV阳性患儿年龄＜1岁,63例（84.00%）HBoV阳性患儿年龄＜3岁,各年龄组检出率比较,差异有统计学意义（χ2=4.60,P=0.043）。春、夏、秋、冬HBoV检出率分别为9.78%、5.29%、2.86%、5.20%;除9、10月份外,HBoV在其余月份均有检出,3月份检出率最高（为33.33%）。17例单纯HBoV感染,58例混合感染,HBoV临床诊断以支气管肺炎为主（26例,占34.67%）。HBoV病例主要临床特征为发热（81.33%）、咳嗽和喘息（各占77.33％）。结论HBoV是武汉地区住院儿童呼吸道感染的重要病原体之一,全年均可发生HBoV感染,流行高峰在春季和夏季,无性别差异。住院儿童感染HBoV临床诊断以支气管肺炎最常见,主要表现为发热、咳嗽、喘息。     

荧光定量PCR方法快速检测人博卡病毒的研究

目的建立特异、快速、灵敏的、用于人博卡病毒核酸检测的荧光定量PCR方法。方法对博卡病毒的ns1基因应用Clustal W软件进行序列同源性比对,在保守区设计特异性引物和TaqMan探针,并对荧光PCR反应条件进行优化,验证方法的特异性,并将该方法与国际上通用的针对人博卡病毒ns1基因和np基因的普通PCR方法进行灵敏度比对;同时将该方法应用于疑似患者临床标本检测。结果该方法针对ns1基因进行扩增,对人博卡病毒核酸检测有高度特异性,与副流感1、2、3型,甲型、乙型流感病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒,冠状病毒229E、OC43,偏肺病毒以及鼻病毒等均无交叉反应。检测的灵敏度均比国际上通用的扩增ns1基因及np基因的PCR方法高10倍。用该方法从144份急性上呼吸道感染患者咽拭标本中检出了2份博卡病毒阳性,从病毒核酸提取至检测完成仅需3 h左右;用普通PCR仅能检出1份阳性标本,且耗时需5 h左右。结论该研究建立的TaqMan荧光定量PCR是一种快速检测人博卡病毒特异、敏感的方法,适用于临床早期诊断。     

成都地区2009-2013年儿童人博卡病毒感染分析

目的 了解四川成都地区急性呼吸道感染住院患儿人博卡病毒(HBoV)的感染情况,分析其流行特征。方法 采集2009年10月-2013年10月年成都市某妇女儿童医院因呼吸道感染而住院的患儿鼻咽抽提物,提取核酸,用巢式PCR方法检测人博卡病毒;同时对流感病毒等其他7种呼吸道病毒进行检测,了解混合感染情况;用统计学软件对检测结果及病例信息进行分析。结果 在1842份标本中,HBoV检出率为6.84%(126/1842),与其他呼吸道病毒混合感染率为58.73%(74/126);患儿以下呼吸道感染为主,1~2岁检出率最高,为7.83%(108/1379);HBoV感染未见明显的季节性分布特点。结论 HBoV为成都地区儿童发热呼吸道症候群的主要病原之一,>2岁儿童检出率最高,且与其他病毒有较高的混合感染率。     

苏州地区儿童呼吸道偏肺病毒感染的流行特征

人偏肺病毒(hMPV)是从呼吸道感染的儿童中新发现的一种病毒,本研究探讨苏州地区hMPV感染的流行特征. 1对象与方法:选取苏州大学附属儿童医院呼吸科2005年11月至2006年10月间1932例急性呼吸道感染患儿,男1196例(61.9%)、女736例(38.1%).＜6月龄590例、6月龄～1岁399例、1～3岁527例、3～5岁213例、＞5岁203例.     

2014-2015年武汉地区4 232例儿童呼吸道人类博卡病毒感染流行病学特征

目的 分析武汉地区4 232例急性呼吸道感染(ARTI)的儿童人类博卡病毒(HBoV)感染的临床及流行病学特征。 方法 收集2014年1月1日-2015年12月31日期间4 232例7岁以下儿童经确诊为ARTI的鼻咽抽吸物(NPA),利用RT-PCR法对HBoV进行筛查,同时对流感病毒A型(Inf-A)、流感病毒B型(Inf-B)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)及副流感病毒Ⅰ型(PIV-Ⅰ)、副流感病毒Ⅱ型(PIV-Ⅱ)、副流感病毒Ⅲ型(PIV-Ⅲ)7种呼吸道病毒进行检测以了解其混合感染情况,并结合病例临床资料对其流行病学特征进行分析。 结果 4 232例NPA标本中,HBoV检出率为1.23%(52/4 232)。1～<3岁儿童HBoV阳性检出率最高,为2.81%(24/854)。HBoV在春夏秋冬各季节的检出率分别为3.05%、0.60%、0.52%、0.24%, 差异均有统计学意义(χ²=36.784,P=0.002),其中以春季检出率最高。HBoV与其他病毒混合感染率为69.23%(36/52)。以支气管肺炎患儿HBoV阳性检出率(51.92%)最高。 结论 2014-2015年HBoV为武汉地区儿童发热呼吸道症候群的主要病原之一,1～<3岁儿童检出率最高,与其他病毒有较高的混合感染率,且春季流行。     

急性呼吸道感染患儿中不同基因型人鼻病毒感染研究

目的 了解急性呼吸道感染住院患儿中不同基因型人鼻病毒(Human Rhinovirus,HRV)流行情况,并进行遗传变异分析。 方法 采集2010年1月至2014年2月年成都某妇女儿童医院因急性呼吸道感染住院患儿的鼻咽抽提物1 780份,采用巢式PCR方法,先用HRV-5′NCR引物筛检标本,了解该病毒总检出率,阳性标本再用HRV-VP4/VP2引物进行分型检测,利用MEGA6.06软件分析其变异情况。 结果 在1 780份鼻咽抽吸物标本中,HRV阳性为365例(20.5%,365/1 780),其中244份VP4/VP2基因阳性,经序列分析发现132例为A型、30例为B型、82例为C型;不同基因型的检出率在月份和年龄上有一定波动,其中A型和C型呈交互流行特点;经同源性分析发现不同基因型内和型间的核苷酸同源性差异较大。 结论 HRV是成都地区急性呼吸道感染较为常见的病原之一,以HRV-A型和C型流行为主,各个基因型间具有较高的变异性。     

2005-2011年苏州地区急性呼吸道感染住院儿童病原学研究

目的了 解2005-2011年苏州地区急性呼吸道感染(ARI)住院患儿的病原检出情况.方法 选取苏州地区2005年9月至2011年10月因ARI在苏州大学附属儿童医院住院治疗的患儿作为研究对象,共10 243例.收集患儿临床资料,同时采集鼻咽部分泌物及血清标本进行多病原检测.应用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒A(IV-A)和流感病毒B(IV-B)、副流感病毒1～3型(PIV-1 ～3)、腺病毒(ADV)；荧光定量PCR检测鼻咽分泌物中人类博卡病毒(HBoV)、肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)；RT-PCR检测人类偏肺病毒(hMPV)；痰培养检测细菌；定量ELISA检测MP和CP的特异性抗体；分析病原检出情况、不同年龄患儿各病原检出率、各病原季节分布及其致病情况.结果 10 243例患儿中有5871例至少有1种病原检测结果为阳性,总检出率为57.32％ (5871/10 243),其中,病毒检出率为32.47％ (3326/10 243),细菌检出率为28.02％(2870/10 243),不典型病原体检出率为26.94％ (2759/10 243).MP是最常见的病原,检出率为25.74％(2637/10 243).病毒病原中RSV、PIV-3阳性患儿年龄中位数(分别为6、8月龄)小于患儿总体年龄中位数(12月龄)(x2值分别为380.992、34.826,P值均＜0.05),而ADV、HBoV、IV-A阳性患儿年龄中位数(分别为42、14、24月龄)高于总体年龄中位数(x2值分别为83.583、13.169、18.012,P值均＜0.05)；不典型病原MP患儿年龄中位数(30月龄)大于总体年龄中位数(x2=728.299,P＜0.05).细菌病原中肺炎链球菌和副流感嗜血杆菌阳性患儿年龄中位数(分别为17、21月龄)大于总体年龄中位数(x2值分别为60.463、8.803,P值均＜0.05).0～6月龄、7月龄～1岁、2～3岁、4～5岁、≥6岁组患儿RSV检出率分别为25.59％(840/3283)、17.05％(333/1953)、11.85％(310/2615)、6.68％(90/1347)、2.87％(30/1045),检出率随年龄的增长而下降(x2=178.46,P＜0.01)；各年龄组患儿MP检出率分别为8.25％(271/3283)、19.46％(380/1953)、33.00％(863/2615)、41.43％ (558/1347)、54.07％(565/1045),检出率随年龄增加而增加(x2=379.21,P＜0.01).RSV、IV-A好发于冬季,检出率分别为35.73％ (941/2634)和4.44％ (117/2634)；hMPV好发于冬春季节,春季为10.94％ (277/2533),冬季为10.55％ (278/2634)；HBoV好发于夏秋季节,夏季为9.99％(149/1491),秋季为9.71％(98/1009).MP、CP夏季检出率最高,分别达31.27％(819/2619)和10.07％ (43/427).毛细支气管炎以RSV最多见[33.27％(866/2603)]；支气管肺炎和大叶性肺炎均以MP检出最多,检出率分别为26.05％(1152/4422)和52.25％(267/511).结论 MP、RSV是住院儿童呼吸道感染常见病原.新型病毒hMPV和HBoV在儿童呼吸道感染中也起着重要的作用.不同的病原,年龄分布不同,具有各自的季节性及疾病分布特点.     

乌鲁木齐地区儿童人偏肺病毒感染状况 初步研究

目的 了解人偏肺病毒(hMPV)在乌鲁木齐地区儿童呼吸道感染患者中的致病情况.方法 选取2006年11月至2007年4月因呼吸道感染于新疆维吾尔自治区人民医院儿科住院患儿和部分门诊患儿的呼吸道分泌物及咽拭子标本共209份.通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测hMPV的M基因片段.并对阳性标本进行测序,用BLAST及DNAStar软件进行分析.结果 共检出2例阳性标本,占总例数1.0%.将2份阳性标本扩增的hMPV M基因片段进行对比,同源性为83.8%.进一步选取GenBank中与本次扩增目的基因相同的hMPV M基因片段做基因进化树分析,结果提示2例标本可能属于不同的2种基因型.结论 hMPV是乌鲁木齐地区儿童呼吸道感染病原之一,在一个流行季节当地可同时有2种不同基因型的hMPV流行.