TRAIL基因多态性及其血清水平与急性白血病的相关性研究

目的 探讨TRAIL与急性白血病的关联性.方法 收集85例AL患者,同期选择体检者80例为对照组.采用测序法及PCR-RFLP法分析两组TRAIL基因第五外显子3'-UTR区1525G/A、1588G/A、1595C/T多态性;采用ELISA检测血清sTRAIL浓度.结果 AL组与对照组TRAIL基因1525(G/A)...     

正常大鼠角膜组织TRAIL及其受体DR4的表达及意义

目的观察大鼠角膜组织肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL)及其死亡受体4(deathreceptor4,DR4)的表达及分布情况,分析其临床意义。方法取正常大鼠角膜组织片,采用免疫组织化学方法检测TRAIL及其受体DR4在角膜组织中的表达状况。结果在正常角膜组织中TRAIL及其受体DR4均有表达,主要分布于上皮层及内皮层,基质层也有少量表达。结论正常大鼠角膜组织中有TRAIL及其受体DR4的表达。     

TRAIL受体家族基因多态性及sTRAIL水平与溃疡性结肠炎的关系

目的 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）的受体家族包括死亡受体（DR4、DR5）,诱骗受体（DcR1、DcR2）及护骨素（OPG）。研究显示TRAIL 3''非翻译区基因多态性与溃疡性结肠炎（UC）的易感性相关,由于TRAIL各受体间的平衡及相互作用是调节靶细胞对TRAIL诱导凋亡敏感度的关键因素,因此本研究将进一步探讨TRAIL受体家族基因多态性与UC的关系。方法 收集146例UC患者和247例正常对照者,采用微测序技术检测DR4（rs20575、rs13278062）、DR5（rs1047266）、DcR1（rs12549481）、DcR2（rs1133782）及OPG（rs3102735）6种单核苷酸多态性。结果 在显性模型中,与对照组相比,UC组中DR4（rs20575）的突变等位基因（G）和基因型（CG+GG）频率均增高（4.79% vs 1.62%,P=0.009;8.22% vs 3.24%,P=0.030）,而DcR2（rs1133782）的突变基因型（GA+AA）频率降低（10.27% vs 18.22%,P=0.034）。采用隐性模型分析,UC组中OPG（rs3102735）的突变等位基因（T）和基因型（TT）频率均显著高于对照组（86.99% vs 80.9%,P=0.029;76.03% vs 66.40%,P=0.044）。经非条件Logistic回归分析,与轻中度患者相比,重度UC患者中DR4（rs20575）的突变等位基因（G）和基因型（CG+GG）频率均显著增高（15.00% vs 3.17%,P=0.001;25.00% vs 5.56%,P=0.003）,而DR4（rs13278062）的突变基因型（T）和基因型（GT+TT）及OPG（rs3102735）突变等位基因（T）频率均显著降低（17.50% vs 33.73%,P=0.040;30.00% vs 59.22%,P=0.014;75.00% vs 88.89%,P=0.015）。此外,本研究还发现,UC组中sTRAIL水平显著高于对照组。结论 DR4（rs20575）、DcR2（rs1133782）及OPG（rs3102735）基因多态性与UC相关,DR4（rs20575、rs13278062）及OPG（rs3102735）基因突变可能影响UC疾病严重程度。此外,本研究还发现血浆sTRAIL水平与UC相关,提示TRAIL及其受体所构成的凋亡途径可能与UC相关。     

TRAIL及其受体DcR1和DR4在宫颈癌组织中的表达及意义

目的检测宫颈癌和正常宫颈组织中人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF related apoptosis inducing ligand, TRAIL）及其受体DcR1和DR4的表达,探讨TRAIL及其受体的表达与宫颈癌发生、发展的关系。方法免疫组织化学Envision法检测43例宫颈癌和30例正常宫颈组织中TRAIL及其受体DcR1、DR4的表达。结果TRAIL、DcR1、DR4免疫阳性产物为棕黄色,定位于胞浆或胞膜, TRAIL及DcR1在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织,DR4在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织(P＜0.05);TRAIL、DcR1、DR4在宫颈癌组织中的表达与患者的年龄、分期、淋巴结转移无关(P＞0.05)。结论TRAIL是肿瘤细胞分化差的标志之一;宫颈癌细胞由于DR4的高表达和DcR1的低表达而易被TRAIL诱导凋亡。     

TRAIL与肿瘤关系的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）是肿瘤坏死因子超家族第三个成员,可诱导多种肿瘤细胞发生凋亡,但不会损害正常组织细胞.其特异性受体死亡受体（DR）4、DR5在多数肿瘤细胞表达,正常细胞缺失,这使得应用TRAIL进行抗肿瘤治疗成为可能.TRAIL能触发细胞凋亡通路,激活caspase家族,促进线粒体凋亡途径的启动,诱导细胞凋亡.该文就TRAIL的结构、受体及其与肿瘤的关系作一综述.     

胃腺癌组织中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-4的表达

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-4(TRAIL-R4)在诱导胃癌细胞凋亡过程中的作用.方法:应用Western blot、RT-PCR、原位杂交和免疫组织化学技术,检测31例正常胃黏膜和胃腺癌组织中TRAIL-附蛋白和mRNA的表达.结果:Western blot结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4蛋白的阳性表达率80.65%,高于其在胃腺癌组织中的阳性表达率6.45%(P＜0.05);免疫组织化学结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4蛋白均有强染色,在胃腺癌组织中染色均为阴性(P＜0.05);RT-PCR结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4 mRNA表达高于胃腺癌组织中的表达(P＜0.05);原位杂交结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4 mRNA染色均为阳性,而在胃腺癌组织中阳性表达率为3.23%(P＜0.05).结论:TRAIL-R4在胃癌组织中的表达缺失是TRAIL特异性诱导肿瘤细胞凋亡的原因之一.     

TRAIL及其受体DR4/DR5在急性肾脏移植排斥反应中作用的探讨

目的探讨新型肿瘤坏死因子超家族成员TRAIL及共受体DcR4/DcR5在急性肾脏移植排斥反应作用.方法利用流式细胞术对正常人及发生急性肾脏移杆排斥患者外周血单个细胞(PBMC)表面的TRAIL分布进行探讨;用免疫组织化学的方法对正常人肾脏和急性排斥坏死肾脏病理切片DR4和DR5进行分析.结果正常人PBMC几乎不表达TRAIL,急性肾脏热电厂斥患者PBMC高表达TRAIL,进一步证实其为IFN-γ 细胞表达;正常人肾脏表达的DR4和DR5低,但急性肾排患者高表达DR4和DR5.结论TRAIL及其受体DR4/DR5之间的作用可能参与了肾脏急性排斥反应.     

DR4?DR5基因甲基化对膀胱癌TRAIL耐受的影响研究

目的:探讨膀胱癌细胞中DR4、DR5甲基化状态以及与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)耐受间的关系.方法:采用RT-PCR技术检测膀胱癌T2A细胞、BIU87细胞表面DR4、DR5 mRNA表达,对低表达或无表达DR4、DR5膀胱癌细胞采用甲基化特异性PCR(MSP)检测DR4、DR5启动子甲基化状态.同时应用流式细胞仪检测TRAIL组以及TRAIL+5-氮杂胞苷组细胞凋亡状态.结果:RT-PCR示膀胱癌T24细胞无DR4、DR5表达,MSP法研究显示:DR4、DR5基因呈甲基化状态,对TRAIL诱导的凋亡表现为耐受状态(100 ng/ml TRAIL,凋亡率7.6%),经去甲基化试剂5-氮杂胞苷处理,T24细胞DR4、DR5表达随时间而增加,100 ng/ml TRAIL,凋亡率达29.2%;BIU-87细胞表达DR4、DR5并对TRAIL敏感(100 ng/ml TRAIL凋亡率30.4%),应用5-氮杂胞苷处理BIU87细胞,DR4、DR5表达无差异,100 ng/ml TRAIL,细胞凋亡率31.7%,MSP法检测DR4、DR5基因呈非甲基化状态.结论:膀胱癌T24细胞DR4、DR5启动子区域甲基化与TRAIL耐受有关,去甲基化可逆转上述耐受状态,可为TRAIL的下一步临床应用提供基础研究资料.     

TRAIL受体DR5、DcR1在宫颈癌组织中的表达

目的 检测TRAIL受体DR5、DcR1在宫颈癌中的表达及意义,探讨其在诱导肿瘤细胞凋亡中的作用. 方法 采用免疫组化ElivisionTM plus法检测DR5、DcR1在正常宫颈组织、官颈上皮内瘤样病变(CIN)和官颈癌组织中的表达情况,并分析其与临床病理的关系. 结果 DR5在正常宫颈组织中阳性表达率为10.00％,显著低于CIN组(80.00％)和宫颈癌组(92.86％),差异具有统计学意义(P＜0.01);DcR1在正常宫颈组织、CIN组织和宫颈癌组织中阳性表达率分别为90.00％、90.00％和97.62％,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).DR5、DcR1的阳性表达率与官颈癌的临床分期、病理分型以及淋巴结转移无明显相关性. 结论 DR5和DcR1在宫颈癌中均为高表达,可能成为新的治疗靶点.     

抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6)对Jurkat细胞作用研究

目的:观察抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单克隆抗体—mDRA-6对Jurkat细胞的凋亡作用。方法:制备抗人DR5单抗-mDRA-6;检测Jurkat细胞表面DR5表达率;荧光显微镜下观察mDRA-6作用下Jurkat细胞形态变化;MTT法计算mDRA-6对Jurkat细胞存活的影响;FITC-AnnexinⅤ及PI双染流式细胞仪检测mDRA-6对Jurkat细胞凋亡率影响;琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6对Jurkat细胞DNA片段化的作用。结果:Jurkat细胞表面DR5表达率为94.8%;mDRA-6使Jurkat细胞染色质边集、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成;MTT法显示mDRA-6具有明显的Jurkat细胞杀伤作用,1.563 mg/L的mDRA-6可使Jurkat细胞死亡60.50%;AnnexinⅤ及PI双染显示0.3mg/L的mDRA-6作用10 h,Jurkat细胞凋亡率达43.22%;10 mg/L mDRA-6作用HL-60细胞3h,DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显的“梯形”条带。结论:抗DR5单抗-mDRA-6能够诱导Jurkat细胞凋亡。     

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4启动子区-1722基因多态性与溃疡性结肠炎的相关性研究

目的:探讨CTLA4基因启动子区-1722 T/C(rs733618)多态性与中国湖北汉族人群溃疡性结肠炎(UC)的相关性。方法:采用PCR-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP),对471例中国汉族人群(UC:143例,对照者:328例)进行CTLA4基因-1722位点多态性检测。结果:UC患者CTLA4基因-1722位点C等位基因和T/C+C/C基因型频率与正常对照组相比,差异无统计学意义(34.6%比35.2%,P=0.860,OR=1.027,95%CI=0.767-1.374;60.8%比53.4%,P=0.133,OR=0.736,95%CI=0.494-1.098);-1722T/C基因多态性与UC临床表型无显著相关性。结论:CTLA4基因启动子区-1722T/C基因多态性与中国汉族UC无显著相关性。     

系统性红斑狼疮与CTLA-4基因多态性的相关性研究

目的:研究细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)基因启动子区-1772(T/C)位点和外显子1中的+49(A/G)位点基因多态性与中国汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法:应用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)方法,对76例SLE患者和100例中国汉族正常对照者进行CTLA-4基因-1772(T/C)位点和+49(A/G)位点多态性检测。结果:与正常对照组比较,SLE患者CTLA-4基因-1772位点TT和CC基因型频率均明显升高(32.9%比14%,χ2=8.938,P=0.003;11.8%比2%,χ2=7.139,P=0.008),TC基因型频率明显降低(55.3%比84%,χ2=17.533,P=0.000);+49位点各基因型频率、等位基因频率和携带者频率总体分布均无显著性差异(P>0.05)。结论:CTLA-4基因+49位点多态性与中国汉族SLE无明显相关性,而-1772位点多态性与中国汉族SLE明显相关,CTLA-4基因可能是SLE的易感基因。     

瘦素受体基因Gln223Arg多态性与中国北方汉族人2型糖尿病的关联研究

目的探讨瘦素受体(Lepr)基因第6外显子Gln223Arg多态性与中国北方人2型糖尿病(T2DM)的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法鉴定了相互间无亲缘关系且具有完整临床资料的728例中国北方汉族人的Lepr基因Gln223Arg多态性的基因型(其中包括有糖尿病家族史的T2DM患者333例,非糖尿病健康对照395例)。结果 Lepr基因Gln223Arg多态性的基因型频率和等位基因频率在T2DM组和正常对照组中的分布存在显著性差异(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,进行年龄、性别、BMI和腰围等因素调整后,GG基因型的携带仍然能够增加T2DM的患病风险。结论 Lepr基因第6外显子Gln223Arg多态性与中国北方人T2DM的易感性相关联。     

动脉粥样硬化性脑梗死患者载脂蛋白E基因多态性研究

目的 :探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系。方法 :以聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP)技术结合银染色方法检测了 40例动脉粥样硬化性脑梗死 (ACI)患者和 90例无血缘关系的健康汉族人群载脂蛋白E基因型。结果 :ACI组ε4 等位基因频率明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,ε3等位基因频率明显低于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :ε4 等位基因是动脉粥样硬化性脑梗死的遗传易患因子之一 ,ε3等位基因是动脉粥样硬化性脑梗死的保护因子。     

基质金属蛋白酶家族基因启动子多态性及其与疾病关系的研究进展

近年来,随着分子生物学的进展,人们对MMP的结构、功能及其在病理生理过程中的作用进行了深入的研究。MMP基因存在许多多态性位点,特别是MMP基因启动子多态性对于调节MMP基因表达水平发挥重要作用,与许多疾病易感性相关。现就近年来MMP家族基因启动子基因多态性及其与疾病关系的研究进展予以综述。     

Apo(a)PNR基因多态性和青光眼发病的相关性分析

目的:研究载脂蛋白(a)[Apo(a)]五核苷酸重复序列(PNR)基因(TTTTA)n多态性在中国大陆地区一原发性开角型青光眼(POAG)家系中的分布情况,探讨其与青光眼发病的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析家系中37个成员和180个健康体检者的Apo(a)PNR基因型。同时测定家系和正常对照组中各成员的Lp(a)、TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoAI、ApoB的水平进行分析。对家系中PAGE显示的不同基因型进行DNA测序分析。结果:POAG家系成员Lp(a)、TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoAI、ApoB水平和正常对照组无显著差异(P>0.05),Apo(a)PNR基因型在家系中出现5/8型5例,8/8型30例,8/9型2例;180例正常对照中发现5/9型1例、5/8型3例、8/8型112例、8/9型48例、8/10型4例、9/9型9例、9/10型2例、8/11型1例,家系组5/8型和8/8型显著高于对照组,8/9型显著低于对照组(P<0.05)。结论:Apo(a)PNR基因多态性可能和POAG发病相关。     

IFN-α对肿瘤细胞上TRAIL受体DR4和DR5表达的调节及意义

目的　研究IFN- α对肿瘤细胞Colo205TRAIL功能受体DR4和DR5表达的调节作用,以及IFN -α刺激与肿瘤细胞对rTRAIL诱导凋亡敏感性的影响。方法　Colo205细胞以IFN- α刺激 0、24、48和 72h;采用RT PCR方法检测DR4和DR5基因表达;用间接免疫荧光染色结合流式细胞技术检测细胞表面DR4和DR5分子表达;采用annexinV和碘化丙锭双染色试剂盒检测细胞凋亡。结果　IFN -α刺激后,DR4和DR5的mR NA在细胞表面的表达均有增加,刺激 48h,膜型DR4和DR5表达达到高峰值 (16. 7%和 29. 8% );rTRAIL凋亡诱导效应在IFN- α刺激 48h的Colo205细胞中最高。结论　IFN -α上调死亡受体DR4、DR5的表达可能是其促进rTRAIL诱导肿瘤凋亡的重要机制。     

新疆维吾尔族乳腺癌中细胞色素P45019基因rs10046位点基因多态性与病理免疫组化指标表达状态的研究

目的 探讨应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测 112 例维吾尔族女性乳腺癌患者和 139 例维吾尔族正常女性细胞色素 P450（CYP）19 基因 rs10046 位点多态性,回顾性分析该位点多态性和乳腺癌免疫组化的关系。结果：细胞色素 P450 19 基因 rs10046 位点三种基因分型符合Hardy-Weinberg 平衡;细胞色素 P450 19 基因 rs10046 位点存在 C-T 的替换,等位基因 C、T 在病例组所占的比例分别为 48.2%、51.8%,对照组为 47.5%、52.5%,等位基因分布无统计学差异（P〉0.05）;CC、TC、TT 基因型在乳腺癌组分布频率分别为 26.8%、42.9%、30.4%,在对照组中分布频率分别为 18.0%、,57.6%、24.5%,两组间分布差异有统计学差异（P〈0.05）。细胞色素 P450 19 基因型与乳腺癌组织中的 ER、PR、Her-2、Ki-67 的表达差异及相关性均无统计学意义（P〉0.05）。结论新疆维吾尔族乳腺癌的CYP19基因rs10046位点多态性与对照组的分布差异有统计学意义,基因rs10046位点多态性与免疫组织化学指标表达的状态差异无统计学意义。     

冠心病患者胰岛素受体底物-1基因多态性的研究

目的　探讨胰岛素受体底物 - 1基因多态性是否与冠心病有关联。方法　应用多聚酶链反应 ( PCR)对成都地区汉族 113例冠心病患者及 194例正常对照者胰岛素受体底物 - 1基因酶切位点的限制性片段长度多态性( RFL P)进行研究。血脂用酶法测定。结果　冠心病组和正常对照组胰岛素受体底物 - 1基因均以 GG基因型为主 ,其频率分别为 0 .960和 0 .985。正常对照组和冠心病组胰岛素受体底物 - 1基因 R等位基因频率分别为 0 .0 15和0 .0 40 ,具有统计学意义 ( P=0 .0 5 )。冠心病组中具有 G/R基因型者血清 TC水平较具有 G/G基因型者显著升高( P<0 .0 5 ) ,具有 G/G基因型者血糖水平较具有 G/R基因型者显著升高 ( P<0 .0 5 )。结论　胰岛素受体底物 - 1基因多态性与中国人冠心病有一定关联。冠心病患者胰岛素受体底物 - 1基因 G/R基因型对血清胆固醇的升高有一定影响 ,而 G/G基因型对血糖的升高有一定影响     

5-氮杂胞苷对胃癌裸鼠移植瘤死亡受体DR4和DR5表达的影响

[目的]研究5-氮杂胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌裸鼠移植瘤中死亡受体4(DR4)和死亡受体5(DR5)表达的影响.[方法]利用RT-PCR方法检测5-Aza-CdR处理后的胃癌裸鼠移植瘤内DR4和DR5的RNA表达水平、用MS-PCR检测5-Aza-CdR处理后的胃癌裸鼠抑制瘤内DR4和DR5启动子区甲基化水平.[结果]5-Aza-CdR能够抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长.5-Aza-CdR能够逆转胃癌裸鼠移植瘤中DR4和DR5的启动子甲基化水平,并上调DR4和DR5的表达水平.[结论]去甲基化药物5-Aza-CdR能够抑制裸鼠胃癌移植瘤生长,提示该药物有治疗作用且能够诱导DR4和DR5的启动子区去甲基化从而使DR4和DR5的表达水平升高.