地塞米松对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠髓鞘保护作用的研究

目的:分析地塞米松对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠炎症反应、髓鞘脱失及髓鞘再生的影响,探讨地塞米松治疗多发性硬化的新作用。方法:应用MOG35-55免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型。小鼠随机分为正常对照组、EAE组及地塞米松组,观察各组临床症状;采用HE染色、LFB染色、透射电镜扫描及免疫组化染色方法,检测免疫后第13、20、30 d各组小鼠脊髓组织炎症反应、髓鞘脱失及髓鞘再生情况。结果:地塞米松显著降低EAE小鼠发病率、延缓起病时间、减轻疾病严重程度。各个时间点地塞米松组脊髓组织炎性细胞浸润、髓鞘脱失及轴索变性程度较EAE组明显减轻。免疫后第20、30 d,EAE组Olig2阳性细胞数较正常对照组明显增加;免疫后各时间点,地塞米松组Olig2阳性细胞数较正常对照组均明显增加,第13、20 d较EAE组明显增加。结论:地塞米松可增加脊髓组织Olig2表达、促进髓鞘再生,这可能为地塞米松治疗EAE及多发性硬化的效应途径。     

口服烟酰胺核糖抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎的初步研究

目的：探讨口服烟酰胺核糖(nicotinamide riboside, NR)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)的治疗效果和作用机制。方法：采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55, MOG35-55)免疫C57BL/6雌性小鼠制备EAE模型,随机分为EAE组和NR组。从免疫后第3天开始,EAE组小鼠灌胃给予生理盐水,NR组小鼠灌胃给予NR,每天1次至免疫后第27天。免疫当天至免疫后第28天,观察并记录各组小鼠临床评分和体重。免疫后第28天处死小鼠,制备脾细胞悬液和脊髓组织冰冻切片。HE染色和髓鞘染色分别检测脊髓炎性细胞浸润和髓鞘脱失,Western blot和免疫荧光染色分别检测脊髓组织中ROCK-II、TLR4、p-NF-κB、iNOS表达及相应的阳性细胞数量,ELISA检测脾细胞培养液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量。结果：口服NR可推迟EAE发病时间,减轻EAE临床症状,缓解小鼠体重丢失,减少外周炎性细胞...     

银杏叶提取物对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的作用研究

目的:建立雌性Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,观察银杏叶提取物EGb761腹腔注射对EAE大鼠的可能疗效及神经保护作用和机制。方法:建立Wistar大鼠EAE模型,腹腔注射EGb761(70 mg/kg),连续7 d,于免疫后第14 d和第31 d取颈膨大,分别进行HE、LFB和改良BLS染色,观察各组大鼠炎细胞浸润、髓鞘脱失和轴突缺失情况。结果:(1)EGb761组与EAE组相比临床评分明显减低(P0.05);(2)HE染色显示:EGb761组炎症浸润与EAE组相比明显减低(P0.01);(3)LFB染色显示:EGb761脱髓鞘评分与EAE组相比明显降低(P0.05);(4)改良Bielschowsky染色显示:EGb761组高峰期轴突平均缺失面积与EAE组相比明显下降(P0.01)。结论:EGb761通过减轻炎细胞浸润、促进髓鞘再生和防止轴突缺失,从而对EAE大鼠临床症状的改善起到一定作用。     

补阳还五汤对实验性自身免疫性脑脊髓炎单核巨噬细胞的免疫调控作用

目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的有效性及对单核巨噬细胞免疫调控的作用及机制。方法:雌性C57BL/6小鼠用小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段(MOG_(35-55))免疫制作慢性EAE模型,随机分为生理盐水处理组和BYHWD组。在免疫后第3天开始分别予以生理盐水和BYHWD灌胃,500μL/d,持续观察临床症状和体质量变化。免疫后17 d各组统一处死部分动物,HE染色观察炎性细胞浸润情况,髓鞘染色观察脊髓髓鞘脱失比例,流式细胞术检测脾细胞M1型和M2型巨噬细胞表型;免疫荧光组织化学染色和Western blotting检测脊髓巨噬细胞iNOS、TNF-α、arginase及IL-10的表达。结果:BYHWD推迟EAE起病,减轻EAE症状,抑制中枢神经系统脊髓的炎性浸润和髓鞘脱失,促进脊髓及脾组织中M1型巨噬细胞转化为M2型。结论:BYHWD干预可缓解EAE行为学和病理学的改变,其作用机制可能与其诱导巨噬细胞极性转化相关。     

左旋咪唑对急性EAE大鼠脊髓内单个核细胞上CD28和CD4表达的影响

目的：探讨左旋咪唑（Levamisole,LMS）对实验性变态反应性脑脊髓炎（experimental allergic encephalomyelitis,EAE）大鼠脊髓内单个核细胞上CD28和CD4表达的影响及其意义。方法：采用流式细胞术检测EAE大鼠脊髓单个核细胞上CD28和CD4的表达水平。结果：LMS同时给药组和预处理的EAE组大鼠脊髓内单个核细胞上CD28和CD4的表达水平,均明显高于非LMS处理的EAE模型组。结论：LMS能促进EAE大鼠脊髓内单个核细胞上CD28和CD4的表达,这可能是LMS诱发的炎性脱髓鞘白质脑病发病机制中的一个重要环节。     

IgG受体FcγRⅡB调节实验性自身免疫性脑脊髓炎致神经元损伤及Th17/Treg免疫平衡的作用研究

目的：探究IgG受体FcγRⅡB对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型小鼠神经元损伤与Th17/Treg失衡的作用。方法：C57BL/6小鼠随机分组为对照组、EAE组、FcγRⅡB组、EAE+FcγRⅡB组,每组15只,皮下注射MOG35-55肽诱导EAE模型,并给予FcγRⅡB慢病毒液处理;造模后每日称量小鼠体质量,进行神经功能评分,持续30 d;30 d后处死小鼠,HE染色观察脑组织病理形态学变化,LFB染色评估脊髓髓鞘结构变化,免疫荧光染色检测脊髓大脑皮质神经元核抗原（NeuN）和Caspase-3表达,TUNEL染色检测神经元细胞凋亡,ELISA检测血清IL-6、IL-17、IL-10及TGF-β水平,流式细胞术分析脾脏Th17、Treg细胞比例分布,Western blot测定脊髓组织维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)与Forkhead家族转录因子3(Foxp3)蛋白表达。结果：与对照组比较,EAE组小鼠体质量下降,神经功能评分升高,脑组织内炎症细胞浸润明显,脊髓中出现脱髓鞘迹象,NeuN荧光表达强度减弱而Caspase-3荧光表达强度增强,TUNEL阳性着色细胞多,细胞...     

α-硫辛酸对实验大鼠变态反应性脑脊髓炎作用

目的:研究α-硫辛酸(ALA)对实验大鼠变态反应性脑脊髓炎(EAE)的作用。方法:用豚鼠6只制备实验用免疫抗原。选择Wistar大鼠30只,随机分为5组(n=6):(1)正常对照组(NC组);(2)EAE-7 d和(3)EAE-14 d组,于皮下注射抗原匀浆观察7 d和14 d;(4)ALA-7 d和(5)ALA-14 d组,于第1次发病时给予ALA腹腔注射,连续用7 d和14 d。在研究时间点处死大鼠,HE染色观察病理学改变,免疫细胞化学染色观察白介素-17(IL-17)的表达,同时测定大鼠脑组织丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)。结果:HE染色显示,在α-硫辛酸治疗的ALA-7 d和14 d组,均能减轻脊髓组织的炎性反应和髓鞘损伤。免疫细胞化学染色表明,EAE大鼠IL-17蛋白表达明显增加(P0.05~0.01),经α-硫辛酸处理后IL-17蛋白表达降低并于14 d接近对照水平。与NC组比较,EAE组大鼠MDA含量明显升高,GSH则明显降低;经ALA处理后,MDA显著降低,而GSH则明显增加(P0.05~0.01)。相关性分析表明,IL-17表达与MDA含量呈正相关(r=0.466,P0.05),而与GSH含量则呈负相关(r=-0.478,P0.05)。结论:在EAE大鼠模型中ALA可以改善和缓解炎症反应,其保护作用可能通过调节IL-17表达实现,并表现为MDA和GSH含量的变化。     

毛蕊异黄酮通过Cyt-C/Apaf-1信号通路抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢神经细胞凋亡北大核心CSCD

目的:观察毛蕊异黄酮(CA)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠中枢神经细胞凋亡的影响,并探索其可能的作用机制。方法:取45只C57BL/6小鼠,随机选取10只作为假手术组,剩余小鼠建立EAE模型,建模成功后随机分为EAE组(10只)、CA组(10只)、联合组(11只)。联合组腹腔注射CA(20 mg/kg),尾静脉注射细胞色素C(Cyt-C)激动剂抗霉素A(AA,100μg/kg);CA组腹腔注射CA(20 mg/kg),尾静脉注射等体积PBS;假手术组、EAE组腹腔注射等体积PBS,尾静脉注射等体积PBS,1次/d,持续14 d。进行神经障碍评分;检测脊髓组织三磷酸腺苷(ATP)含量;透射电镜观察线粒体超微结构;Tunel染色观察脊髓神经细胞凋亡;HE染色观察脊髓病理改变;Western blot检测脊髓组织Cyt-C、凋亡蛋白酶活化因子(Apaf-1)蛋白表达。结果:与EAE组比较,CA组小鼠神经障碍评分、脊髓神经细胞凋亡率、Cyt-C、Apaf-1蛋白表达降低,脊髓组织ATP水平升高(P<0.05);与CA组比较,联合组小鼠神经障碍评分、脊髓神经细胞凋亡率、Cyt-C、Apaf-1蛋白表达升高,脊髓组织ATP水平降低(P<0.05)。结论:CA可减少EAE小鼠中枢神经细胞凋亡,促进脊髓损伤修复,减轻线粒体损伤,可能通过抑制Cyt-C/Apaf-1信号通路发挥作用。     

中药髓复康对恒河猴脊髓半横断后凋亡相关蛋白表达的影响

目的:探讨中药髓复康(SFK)对恒河猴脊髓半横断后凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax和p53)表达的作用及其机理。方法:实验选用8岁恒河猴14只,随机分为中药治疗组6只、横段脊髓模型组6只、正常对照组2只,采用双盲法复制脊髓T12右侧半横断损伤模型。灌喂SFK溶液1月后,实验恒河猴麻醉、以损伤部位为中心切取长1cm的脊髓,采用常规SABC免疫组织化学方法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax和p53蛋白表达,并对结果进行定性、定位、图像分析和统计学处理。结果:脊髓Bax免疫组织化学阳性细胞的平均光密度(MOD)模型组略高于正常对照组,中药组明显低于模型组(P0.05)。脊髓Bcl-2免疫组织化学阳性细胞面数密度(NA),中药组明显高于模型组(P0.05)。脊髓Bcl-2免疫组织化学阳性细胞的MOD模型组略高于正常对照组,中药组略高于模型组。脊髓p53免疫组织化学阳性细胞NA,模型组明显高于正常对照组(P0.05),中药组明显低于模型组(P0.05)。脊髓p53免疫组织化学阳性细胞的MOD模型组明显高于正常对照组(P0.05),中药组明显低于模型组(P0.05)。结论:髓复康可以促进Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、p53蛋白表达和抑制神经元凋亡,对脊髓神经损伤具有保护作用。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞移植对自身免疫性脑脊髓膜炎大鼠的保护作用

目的观察输注CD4~+CD25~+调节性T细胞对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)模型大鼠后脑和脊髓组织的保护作用及相关机制。方法取SD大鼠30只,随机均分为空白对照组、模型组(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)和实验组(CD4~+CD25~+调节性T细胞输注),对EAE大鼠进行神经功能评分及体质量测量,通过病理学HE染色和免疫组化观察脑和脊髓炎症浸润,实时荧光定量PCR(qPCR)检测鼠脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23和Foxp3 m RNA水平表达。结果实验组SD大鼠神经功能评分明显改善,体质量明显增加;与模型组比较,实验组神经症状和病理改变减轻,鼠脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23 mRNA表达下降,而Foxp3 mRNA表达增加(P0.05)。结论 CD4~+CD25~+调节性T细胞通过调节免疫系统的脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23和Foxp3 mRNA水平的表达对EAE起保护作用。     

轴索损伤在大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎不同时期的动态变化及意义

目的: 研究不同发病时期实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠轴索损伤的动态变化及意义。方法: 对不同发病时期EAE大鼠进行HE染色判断炎症损害,以免疫组化方法标记β-淀粉样前体蛋白(β-APP)和磷酸化tau蛋白,了解轴索急性损伤及反复发病后的神经变性情况。结果: 急性组大鼠脊髓组织内可见大量炎症细胞弥散分布,在炎症细胞区内有大量β-APP阳性表达,神经纤维变性标志物tau蛋白只有少量沉积;瘫痪组大鼠血管周围有淋巴细胞浸润,呈袖套样分布,β-APP在无炎症的区域也有部分表达,并有tau蛋白大量沉积,提示反复发病的瘫痪大鼠存在持续的轴索损伤,并发生明显的轴索变性。急性组、瘫痪组轴索中β-APP和tau蛋白阳性数均多于正常组,差异显著,急性组和瘫痪组比较,轴索中β-APP和tau蛋白阳性表达数亦有显著差异。结论: (1)发病早期轴索损伤与炎症破坏有关,并呈可逆性。(2)神经变性主要存在于EAE的慢性病程中。(3)在EAE发病过程中轴索损伤呈动态变化,疾病后期轴索发生神经变性并导致神经功能不可逆损伤,在EAE研究中有重要意义。     

Evaluation of locomotor function and microscopic structure of the spinal cord in a mouse model of experimental autoimmune encephalomyelitis following treatment with syngeneic mesenchymal stem cells

Out of the minor myelin proteins, most significant one is myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG). Mesenchymal stem cells (MSCs) have proven immunoregulatory capacity. The objective of this study was to investigate the effects of syngeneic MSCs on mouse model of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) through observation of locomotion by footprint analysis, histological analysis of spinal cord and estimation IL-17. C57BL/6 mice (10 weeks, n = 16) were immunized with 300 µg of MOG_35-55 and 200 µL of complete Freund’s adjuvant (CFA) to produce EAE model. Sham-treated control (n = 8) were injected with CFA. Half of immunized mice were given 100 µL of PBS (n = 8) and next half (n = 8) received 1 × 10⁵ MSCs on day 11 through the tail veins. Clinical scoring showed development of EAE (loss of tonicity of tail and weakness of hind limb) on day 10. Following MSC treatment, clinical scores and hindlimb stride length showed significant improvement on day 15 onwards, compared to day 10 (P < 0.05). Under LFB staining, while PBS-treated group of EAE mice showed pale and degenerated axons in anterolateral white column of lumbar spinal cord, MSC-treated group showed numerous normal-looking axons. H&E staining showed normal axons in anterolateral white column and reduction of macrophages in MSC-treated EAE mice group. A lower level of IL-17 was observed in MSC treated EAE mice, compared to PBS-treated EAE mice. Our results suggest that Intravenous MSC has the potential to improve the locomotion and regeneration of axons in spinal cord in MOG-induced EAE model.     

Hydroxyzine inhibits experimental allergic encephalomyelitis (EAE) and associated brain mast cell activation

Experimental allergic encephalomyelitis (EAE) has been used as an animal model for the human demyelinating disease multiple sclerosis (MS). In acute MS or EAE, early disruption in the integrity of the blood-brain-barrier (BBB) precedes brain infiltration by inflammatory cells or any clinical evidence of disease. BBB permeability could be affected by vasoactive mediators and cytokines released from perivascular brain mast cells. We investigated the number and degree of activation of brain mast cells in EAE and the effect of the heterocyclic histamine-1 receptor antagonist hydroxyzine, a piperazine compound known to also block mast cells. Acute EAE was induced in Lewis rats by immunization with whole guinea pig spinal cord homogenate and complete Freund's adjuvant (CFA). A second group of animals were treated orally with hydroxyzine for one day before immunization and then continuously for 14 days. Control rats were treated with CFA or hydroxyzine alone. The clinical progression of EAE was assessed on days 10, 12 and 14 after immunization. The number of metachromatic mast cells and the degree of degranulation was assessed in the thalamus with light microscopy. At day 14, there was a three-fold increase in the number of brain mast cells with EAE, as compared to controls. These cells were positive for the immunoglobulin E binding protein (FcepsilonRI), while those from control rats were not. Over 40% of all thalamic mast cells studied in EAE showed partial staining or extruded secretory granule indicative of secretion. Hydroxyzine treatment inhibited (p<0.05) the progression and severity of EAE by 50% and the extent of mast cell degranulation by 70% (p<0.05). These findings indicate that brain mast cells are associated with EAE development and that inhibition of their activation correlates positively with the clinical outcome.     

神经干细胞联合胶原蛋白支架移植脊髓损伤大鼠脑细胞的凋亡

背景：目前的研究表明,从胚胎大鼠大脑皮质分离的神经干细胞在胶原蛋白凝胶中可增殖并分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。 目的：观察神经干细胞联合胶原蛋白支架移植对脊髓损伤后鼠大脑神经细胞凋亡的影响。 方法：取45只SD大鼠制作脊髓半切损伤模型,随机分为3组,造模1周后,细胞移植组大鼠运动皮质后部在脊髓损伤部位注入同种异体神经干细胞悬液,联合组在脊髓损伤部位注入同种异体神经干细胞结合胶原蛋白悬液,模型组不植入任何物质。 结果与结论：移植后1-8周,3组大鼠肢体运动功能均有不同程度恢复,且联合组移植后8周BBB运动评分明显高于其他两组(P < 0.05)。移植后1周苏木精-伊红染色显示3组均可见少量凋亡细胞及Bcl-2抗凋亡蛋白阳性细胞,大量Bax阳性细胞;随时间的推移,3组Bax凋亡蛋白阳性细胞、Bcl-2抗凋亡蛋白阳性细胞逐渐减少,并且移植后8周联合组、细胞移植组Bax阳性细胞明显低于模型组(P < 0.05),Bcl-2抗凋亡蛋白阳性细胞高于模型组(P < 0.05),此时3组均无凋亡细胞。表明神经干细胞联合胶原蛋白支架移植可抑制脊髓损伤后鼠大脑神经细胞的凋亡,促进脊髓神经功能的恢复。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

芹菜素对人肺癌A549细胞凋亡及相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响

目的研究芹菜素对人肺癌 A549细胞增殖抑制和凋亡诱导作用与 Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法10~80μmol/L 不同浓度芹菜素作用 A549细胞,采用 MTT 法检测芹菜素对 A549细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258细胞核染色法观察芹菜素诱导细胞凋亡形态学的变化;流式细胞仪 AnnexinV- FITC/PI 双染色法检测细胞凋亡率;Western blot 法检测凋亡相关蛋白 Bax 和 Bcl-2表达的变化。结果 MTT 法显示,芹菜素对 A549细胞有显著的增殖抑制作用（P <0.01）,且具浓度和时间依赖性;荧光显微镜下观察到芹菜素处理组细胞出现典型的凋亡形态学改变：细胞核固缩、染色质凝集和核碎片化等;流式细胞仪分析结果显示,芹菜素呈浓度依赖性诱导 A549细胞凋亡;Western blot结果显示,促凋亡蛋白 Bax 随着芹菜素浓度升高表达增加,抗凋亡蛋白 Bcl-2随着芹菜素浓度升高表达减少。结论芹菜素具有抑制人肺癌 A549细胞增殖,诱导其凋亡的作用,其机制可能与上调 Bax 蛋白表达和下调 Bcl-2蛋白表达有关。     

大黄活性成分对实验性自身免疫性脑脊髓炎相关基因蛋白表达以及炎性因子的影响

目的:探究大黄酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型中炎症因子以及Foxp3 转录因子(Foxp3) 表达量的影响。方法:通过髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35鄄55(MOG35鄄55 )抗原乳剂免疫C57BL/6 小鼠制备EAE 模型,实验小鼠随 机分为对照组、模型组、给药组1、给药组2、给药组3;免疫当天腹腔注射大黄酸5、10、20 mg/ kg,对照组和模型组给予等量的 生理盐水,连续给药30 d;观察小鼠的发病率、死亡率,并进行临床评分。分别在免疫后第14、20、30 天取各组小鼠脑和脊髓组 织,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素2(IL鄄2)的水平,蛋白质印迹法(Western blot)测定Foxp3 蛋白的含量。结果:给 予EAE 模型小鼠不同剂量的大黄酸给药组较模型组发病率显著降低(P<0.05);模型组小鼠在第20 天、第30 天脑和脊髓组 织中分泌的IL鄄2 较对照组显著增加(P<0.05),脑组织中Foxp3 表达量显著降低(P<0.05);给予不同剂量的大黄酸给药组较 模型组可显著降低EAE 小鼠脑、脊髓组织中的IL鄄2 水平(P<0.05),上调Foxp3 表达量(P<0.05),其中5 mg/ kg 剂量的作用效 果相对显著(P<0.05)。结论:小剂量大黄酸可能通过抑制IL-2 水平和促进Foxp3 表达量,调控炎症反应和免疫功能,从而在 EAE 中发挥治疗作用。     

补阳还五汤对EAE 小鼠免疫调节的作用

目的:探讨补阳还五汤对实验性自身免疫性脑脊髓炎的抗炎治疗效果和免疫调节机制。方法:雌性C57BL/6小鼠采用MOG35-55 多肽诱导建立EAE 模型后,随机分为生理盐水组、补阳还五汤组,每组13 只。造模的第3 天给药,生理盐水组给予生理盐水25 ml/ kg 灌胃,补阳还五汤组给予补阳还五汤生药量50 g/ kg 灌胃,共治疗25 d。每天记录临床症状评分和体重变化。HE 染色检测脊髓组织炎细胞浸润,髓鞘染色观察髓鞘脱失情况,免疫荧光技术检测脾脏ROCK 表达。流式细胞术检测脾脏CD4+ T 细胞亚群变化。Western blot 法检测脊髓TLR4、Myd88、NF-B、COX-2、ROCK 和脑ROCK 的表达。结果:与生理盐水组比较,补阳还五汤治疗后明显降低EAE 小鼠神经功能评分(P<0.001),抑制中枢神经系统炎细胞浸润(P<0.05),减轻髓鞘脱失(P<0.05),增加CD25+(P<0.05)、IL-10+(P<0.05)、TGF-β+(P<0.01)、IFN-β+(P<0.05)CD4+ T 细胞的比例;抑制外周和中枢ROCK域的表达(P<0.05);减少脊髓TLR4、Myd88、NF-B、COX-2 的表达(P<0.05)。结论:补阳还五汤可以通过抑制ROCK / TLR4/ NF鄄资B 炎性通路和调节外周T 细胞亚群比例发挥其抗炎和免疫调节作用。     

脊髓损伤早期凋亡调控蛋白的表达与电生理变化的关系

目的： 通过观察大鼠急性脊髓损伤后早期细胞凋亡调控基因Bcl-2和Bax的表达与电生理皮层体感诱发电位（CSEP）和运动诱发电位（MEP）的变化,探讨细胞凋亡调控基因的表达与脊髓的电生理变化关系。方法： 56只Wistar 大鼠随机分成7组,6组制成急性脊髓损伤模型,另一组作为对照组,分别于伤后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h描记CSEP和MEP,随后采集脊髓标本,分别进行HE染色和免疫组化检测细胞凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果： CSEP和MEP的峰峰值在伤后立即下降或消失,6 h有所上升,12 h又下降,24 h较12 h略上升,48 h上升较明显,72 h继续上升,但较正常峰峰值略低。峰峰值呈下降-升高-再下降-再升高的双谷态势,潜伏期相对应不同程度延长。Bcl-2和Bax都在术后6 h可见阳性表达,Bcl-2表达在24 h达到高峰, Bax的表达在12 h达到高峰。结论：CSEP和MEP的变化与脊髓损伤程度密切相关,可以作为判断脊髓损伤后运动功能及预后的电生理指标。     

Influences of HIF-lα on Bax/Bcl-2 and VEGF expressions in rats with spinal cord injury

Hypoxia-inducible factor 1-alpha (HIF-1α) is a subunit of HIF-l and thought to be able to protect hypoxic cells from apoptosis or necrosis under ischemic and anoxic conditions. This study aimed to investigated whether recombinant adenovirus vector over-expressing HIF-lα could affect apoptosis-related proteins (Bcl-2 and Bax) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in a rat spinal cord injury (SCI) model. A total of 60 male SD rats were divided into 4 groups: Sham, Control, Ad-Blank and Ad-HIF-1α groups. 1, 3, 7, 14, 28 days after surgery, the behavioral recovery was evaluated with BBB scales. Then, rats were sacrificed and the spinal cord was collected for detection of Bcl-2, Bax and VEGF expressions by immunohistochemistry. Results showed the Bcl-2, Bax, VEGF and HIF-lα expressions increased in animals with SCI, but the increase in Bcl-2, VEGF and HIF-lα expressions were higher in Ad-HIF-1α group when compared with other groups, but Bax expression decreased significantly. In addition, administration of Ad-HIF-1α significantly reduced apoptotic cells and promoted the recovery of neurological function. In conclusion, administration of Ad-HIF-1α after SCI could ameliorate neuronal apoptosis and promote angiogenesis in rats. Our study provides a basis for further exploration of the relationship between HIF1α and SCI.