乳腺癌转移抑制基因BRMS1真核表达载体的构建及鉴定

目的构建乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)真核表达载体pcDNA3.1/myc-BRMS1,为研究抑制恶性肿瘤转移的机制奠定基础。方法设计含有HindⅢ和XhoⅠ酶切位点的一对引物,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人乳腺癌细胞株MCF-7中扩增到BRMS1的cDNA基因片断,经回收、纯化、酶切后,连接到质粒pcDNA3.1/myc-His( )A上,鉴定正确后并转染人胚肾细胞HEK-293进行Western blot验证其是否表达。结果琼脂糖凝胶电泳及基因测序证实重组的pcDNA3.1/myc-BRMS1cDNA的碱基组成与GenBank中的人BRMS1cDNA的基因片断组成相同。结论成功构建了乳腺癌转移抑制基因BRMS1真核表达载体并测序鉴定。     

稳定表达PTEN抑癌基因的炎性乳腺癌细胞系MDA-MB-468的建立和鉴定

目的建立稳定表达外源性PTEN(phosphataseandtensinhomologdeletedfromchromosometen)基因的人炎性乳腺癌MDA MB 468细胞系。方法用脂质体lipofectamine2000转染法,将野生型PTEN基因导入高转移性炎性乳腺癌细胞系MDA MB 468,经G418筛选抗性克隆,扩大培养后,应用RT PCR、免疫组化方法及Westernblot分析目的基因及其蛋白表达。结果野生型PTEN基因成功地导入炎性乳腺癌细胞系MDA MB 468,转染细胞稳定表达PTEN蛋白,PTEN蛋白分布于细胞质。结论MDA MB 468炎性乳腺癌细胞株能稳定表达外源性PTEN基因。     

联合检测多基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨ER,PR,p53(突变型,下同),HER2,MDR1基因在乳腺癌组织中表达,及其与临床病理因素的相关性和预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测上述基因在215例乳腺癌中的表达情况,分析其与临床病理因素的相关性;随访全组病例的无病生存率和总生存率,进行生存分析。结果ER,PR,p53,HER2,MDR1在全组病例中表达的阳性率分别为40.9%,27.0%,40.5%,37.2%,37.7%;PR和p53表达增高者多伴有腋淋巴结转移(P=0.001,0.037);HER2表达增高者TNM分期相对较晚(多为III期)、腋淋巴结转移程度相对较重(常在5个以上)(P=0.012,0.037);上述基因表达与其他临床病理因素间无明显关系(P>0.05)。MDR1与p53,HER2间具有显著的正相关关系(P=0.020,rs=0.159;P=0.014,rs=0.168);而ER,PR与HER2间无明显相关性(P>0.05)。单因素生存分析发现TNM分期、腋淋巴结有无转移及程度、p53和HER2表达与乳腺癌患者的无病和总生存率相关;而MDR1表达亦与总生存率相关。多因素生存分析发现腋淋巴结转移情况、MDR1和HER2表达是影响预后的独立危险因素。结论p53,HER2,MDR1对预后的影响可能是通过诱导乳腺癌细胞耐药及对内分泌治疗反应下降所致。联合检测上述基因在乳腺癌中的表达,有助于判断乳腺癌的恶性程度、转移表型和预后;p53,HER2,MDR1过表达的乳腺癌(以HE     

抑癌基因PTEN在肾癌组织中的表达及意义

我们用免疫组化方法在蛋白质水平检测抑癌基因ＰＴＥＮ (ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅａｎｄｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｄｅｌｅｔｅｄｆｒｏｍｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ 10 )在肾癌中的表达 ,探讨其与肾癌病理类型、淋巴结转移的关系。报告如下。材料与方法　肾癌标本 4 0例 ,其中透明     

hASIP基因在乳腺癌中的表达及其意义

目的:检测hASIP基因在人乳腺癌中的表达并分析其与临床病理指标的相关性,进一步探讨hASIP与乳腺癌的关系。方法:以RT-PCR法检测人乳腺癌及癌旁组织中hASIP的表达情况,并与临床及病理常用指标作对照分析。结果:hASIP-a在癌组织中的表达率为92.5%(49/53),在癌旁组织中的表达率为75.5%(40/53),两者之间有统计学差异(P<0.05)。hASIP-b在癌组织中的表达率为54.7%(29/53),在癌旁组织中的表达率为43.4%(23/53),两者之间无统计学差异(P>0.05)。以癌旁组织为参照,hASIP-a在癌组织中表达上调的占64.2%(34/53);hASIP-b在癌组织中表达上调的占32.1%(17/53)。两者之间有显著统计学差异(P<0.01)。hASIP-a高表达与乳腺癌病人年龄>50岁、肿瘤分期早、ER阳性、病理为除浸润性导管癌外的其它浸润性癌相关(P<0.05)。结论:hASIP-a在人乳腺癌中存在高表达。乳腺癌病人年龄>50岁、肿瘤分期早、ER阳性、病理为除浸润性导管癌外的其它浸润性癌,可能是hASIP-a高表达的相关因素。     

抑癌基因PTEN与人大肠癌转移的相关性研究

目的　探讨抑癌基因PTEN的表达在大肠癌转移侵袭过程中的作用。方法　 (1)应用Nothernblot和免疫组织化学的方法检测 47例大肠癌组织中PTENmRNA和蛋白的表达 ,分析其与大肠癌转移的关系。 (2 )利用Westernblot法检测不同转移潜能的大肠癌细胞系内PTEN蛋白的表达水平 ,说明PTEN蛋白的表达对大肠癌细胞转移潜能的影响。 (3 )用阳离子脂质体作载体 ,将PTEN基因转染大肠癌细胞株LOVO后 ,采用计数细胞悬液加到粘附底物后 2 0和 12 0min的细胞贴壁数用以测定细胞粘附能力 ,采用Costar的浸润小室检测PTEN基因转染前后细胞的浸润能力。结果　 (1)在有淋巴结及远处转移的大肠癌组织中 ,PTENmRNA和蛋白的表达显著低于无转移者 ;(2 )转移潜能高的LOVO细胞PTEN的表达量通过显著低于转移潜能较低的HT 2 9、LS 174T ;(3 )LOVO、转染 pcDNA3 .0 PTEN的细胞 (LOVO/pcDNA3 .0 PTEN )在特异性粘附底物(Laminin)上 2 0min时贴壁率分别为 (18.6± 1.4) %和 (13 .9± 0 .5 ) % (P <0 .0 5 ) ,12 0min时贴壁率分别为 (71.2± 2 .5 ) %和 (5 6.0± 1.6) % (P <0 .0 5 ) ;(4 )采用Costar的浸润小室对LOVO、LOVO/pcDNA3 .0 PTEN细胞的浸润能力分析结果显示 :细胞悬液静置培养 6h后 ,对照细胞LOVO浸润穿透多聚碳膜的细胞数为 (1     

PTEN基因在甲状腺癌组织中的表达及其意义

摘要：为探讨PTEN基因在甲状腺癌中的表达及其与甲状腺癌生物学行为的关系，笔者采用免疫组化方法检测PTEN基因在不同甲状腺组织中的表达。结果示，甲状腺癌组织PTEN基因的阳性表达率明显低于甲状腺正常组织和甲状腺腺瘤组织；PTEN基因表达与甲状腺癌的TNM分期、淋巴结转移呈负相关。提示PTEN基因表达的降低在甲状腺癌的发生和转移过程中起重要作用。     

抑癌基因PTEN在乳腺癌激素耐受细胞中的表达

目的 讨抑癌基因PTEN对乳腺癌Tamoxifen耐受细胞系LCC2细胞增殖和P13K／AKT信号通路的作用。方法 乳腺癌Tamoxifen耐受细胞系LCC2中。建立PTEN蜕皮激素稳定诱导表达系统，5μol／L松甾酮A诱导PTEN表达后。检测PTEN的表达对LCC2细胞周期和细胞凋亡的影响以及对磷酸化AKT蛋白水平的作用。结果 TEN不能诱导细胞发生凋亡。但可以使细胞停滞于G1期。对照组中G1期的细胞百分比为58．74％，S期为22．58％；诱导表达24h后G1期的细胞百分比为67．98％，S期为15．36％（P〈0．05）；诱导表达48h后Gl期的细胞百分比为69．47％，S期为12．70％（P〈0．05）。松甾酮A诱导PTEN表达24h和48h后，与对照组相比PTEN表达后活化的AKT表达减少，但是24h和48h间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 TEN可能通过P13K／AKT信号转寻途径诱导细胞生长的抑制，使细胞停滞于G1期，但不能诱导细胞凋亡。     

抑癌基因WTX在结肠癌中的表达及其意义

目的:探讨抑癌基因WTX在结肠癌组织中的表达水平及其意义.方法:收集经病理学证实的50例结肠癌患者的癌组织及其癌旁组织与远癌组织标本,应用荧光定量PCR( qPCR)及Western blot法检测各组织WTX基因及蛋白的表达水平.结果:相对于远癌组织(1.00±0.00),癌组织与癌旁组织WTX基因表达量分别为0.36±0.17和0.91±0.34,各组织间差异均有统计学意义(均P＜0.05).WTX蛋白的相对表达量在癌组织,癌旁组织,远癌组织分别为0.27±0.11,0.64±0.23,0.72±0.19,各组织间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:抑癌基因WTX的表达降低可能在结肠癌的发生发展进程中起重要作用.     

抑癌基因PTEN在结肠直肠癌中表达的研究

目的：探讨PTEN蛋白在结肠直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学技术检测1998年1月至1999年8月间于我院收治的122例结肠直肠癌组织标本中frrEN蛋白的表达。结果：在122例结肠直肠癌组织标本中有39例为阴性表达，正常结肠直肠黏膜组织、腺瘤组织均为阳性表达（P〈0．01）。无论阳性面积抑或强阳性面积，PTEN蛋白表达与结肠直肠癌病人的性别、年龄无显著相关性（P〉0．05）；而与结肠直肠癌周径、淋巴结转移、远处转移、肿瘤分化程度和Dukes分期存在显著相关（P〈0．01）。肿瘤分化各组两两比较显示，在阳性面积中除高分化与中分化腺癌、在强阳性面积中除低分化与未分化腺癌（P〉0．05）外，其余各组间统计学检验均存在显著性差异（P〈0．01）。Dukes分期各期两两比较，无论是阳性面积还是强阳性面积，除B期与C期（P〉0．05）外，其余各组间统计学检验均存在显著性差异（P〈0．01）。结论：PTEN抑癌基因的蛋白表达低下或丢失与结肠直肠的癌变有关，可能是结肠直肠的癌变过程中一种较晚发生的事件，是进展期结肠直肠癌的一种信号。     

乳腺癌前哨淋巴结活检技术

目的 探讨不同方法检测乳腺癌前哨淋巴结（sentinel lymph node,SLN)的可行性及其临床意义。方法 71例经细针穿刺或术中冰冻切片诊断为乳腺癌而临床无腋窝淋巴结肿大的女性患者,随机分为4组,其中亚甲蓝淋巴示踪24例,活性染料异硫蓝示踪29例,核素^99m锝－硫胶体示踪8例,染料与核素联合示踪10例,确认并切除前哨淋巴结,将其单独送病理,随后行乳腺癌手术,包括传统的腋窝淋巴结清扫术。结果 71例患者中有60例成功确定前哨淋巴结,检出率84．5％,其中亚甲蓝组75．0％（18／24）,异硫蓝组86．2％（25／29）,核素组检出7例,联合组全部检出;该技术总的敏感性83．3％,4组分别为70．0％、90．0％、100％、100％;假阴性率各组分别为30．0％、10．0％、0、0;总的准确率93．3％,各组分别为83％、96．0％、100％、100％。各组寻找前哨淋巴结平均花费时间分别为29、22、7、6min。结论 前哨淋巴结活检技术在临床是可行的。绝大多数前哨淋巴结可以比较准确地反映其余腋窝淋巴结的组织学特点。活性染料与核素联合示踪既直观又准确,是最佳的选择方法。     

The value of sentinel lymph node biopsy in elderly breast cancer patients

BACKGROUND: Although sentinel lymph node biopsy has been accepted as a useful procedure for certain breast cancer patients, the value of this procedure in the elderly remains unknown. We undertook this study to evaluate changes in adjuvant treatment attributable to sentinel lymph node biopsy. METHODS: A total of 104 patients > or =65 years underwent sentinel lymph node biopsy plus lumpectomy or mastectomy for the treatment of clinically node-negative invasive breast cancer. Demographic, pathologic, and treatment data were evaluated using an SAS software package (SAS, Cary, North Carolina). RESULTS: Twenty-nine of 104 patients (28%) had metastatic disease in > or =1 sentinel lymph node. Nonsurgical treatment was modified in 38% of patients because of sentinel lymph node biopsy results. Changes included adjuvant chemotherapy and/or hormonal therapy, adjuvant axillary radiotherapy, and decisions against adjuvant therapy. CONCLUSIONS: These data suggest that sentinel lymph node biopsy in elderly breast cancer patients is beneficial.     

Prediction of non-sentinel lymph node involvement in breast cancer patients with a positive sentinel lymph node

Completion axillary lymph node dissection (cALND) is the golden standard if breast cancer involves the sentinel lymph node (SLN). However, most non-sentinel lymph nodes (NSLN) are not involved, cALND has a considerable complication rate and does not improve outcome. We here present and validate our predictive model for positive NSLNs in the cALND if the SLN is positive.Consecutive early breast cancer patients from one center undergoing cALND for a positive SLN were included. We assessed demographic and clinicopathological variables for NSLN involvement. Uni- and multivariate analysis was performed. A predictive model was built and validated in two external centers.21.9% of 470 patients had at least one involved NSLN. In univariate analysis, seven variables were significantly correlated with NSLN involvement: tumor size, grade, lymphovascular invasion (LVI), number of positive and negative SLNs, size of SLN metastasis and intraoperative positive SLN. In multivariate analysis, LVI, number of negative SLNs, size of SLN metastasis and intraoperative positive pathological evaluation were independent predictors for NSLN involvement. The calculated risk resulted in an AUC of 0.76. Applied to the external data, the model was accurate and discriminating for one (AUC = 0.75) and less for the other center (AUC = 0.58).A discriminative predictive model was constructed to calculate the risk of NSLN involvement in case of a positive SLN. External validation of our model reveals differences in performance when applied to data from other institutions concluding that such a predictive model requires validation prior to use.     

Success in sentinel lymph node procedures in obese patients with breast cancer

Background

Sentinel lymph node (SLN) biopsy for axillary staging in breast cancer is technically more demanding but of added benefit in obese patients. This retrospective review compares variables and outcomes of SLN staging in obese and nonobese women.

Methods

From 235 total SLN cases, demographics and clinical and procedural variables were collected and compared in obese (body mass index [BMI] of ≥35, n = 28) and nonobese (BMI ≤25 [n = 84]) patients.

Results

Overall, the intraoperative false-negative rate was 13.6% and failure to identify SLN occurred in 2 cases (.85%). Although no differences in patient or tumor characteristics were found, obese patients had significantly lower external hotspot counts, first sentinel node counts, and fewer sentinel nodes recovered when compared with the nonobese.

Conclusions

SLN procedures are successful and accurate for axillary staging in obese women and avoid the added morbidity of axillary lymph node dissection in this higher risk population.     

乳腺癌前哨淋巴结活检的实践与体会

目的评价乳腺癌前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy,SLNB)的可行性,并分析影响该技术成功率的相关因素。方法术前于肿瘤周围皮内分别注射放射性胶体和蓝色染料两种前哨淋巴结示踪剂,术前先行淋巴闪烁扫描,术中应用γ计数探测仪检测,并结合淋巴结蓝染情况定位SLN,切除SLN后再行腋窝淋巴结清扫(axillary lymph node dissection,ALND),两标本均行组织学检查。结果全组116例乳腺癌SLNB的检出率98.3%,该技术的灵敏度93.6%,准确性97.4%,假阴性6.4%。结论乳腺癌SLNB是一种简便、安全的检测技术,可用于了解腋窝淋巴结的状况,有望在早期乳腺癌中取代常规的ALND。     

乳腺癌前哨淋巴结活检临床意义研究

目的 评价前哨淋巴结活检术（SLNB）预测腋窝淋巴结（ALN）转移状况的准确性及临床意义。方法 2002年6月至2005年6月对120例女性乳腺癌病人联合使用关蓝溶液及^99mTc-右旋糖酐（DX）示踪，γ记数探测仪定位，行SLNB。结果 前哨淋巴结（SLN）检出率为98．3％，准确率为97．5％，假阴性率为6．5％，冰冻切片和连续石蜡切片加免疫组化检查的符合率为92．4％。结论 SLNB可以准确预测ALN转移状况；联合法并术中使用γ记数探测仪是SLN定位的首选方法；多枚ALN转移可能使假阴性率升高。     

乳腺癌前哨淋巴结活检对腋窝淋巴结转移的预警价值研究

目的探讨乳腺癌前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)预警腋窝淋巴结转移的价值. 方法对56例乳腺癌行亚甲蓝前哨淋巴结定位、活检和腋窝淋巴结清扫术,标本常规行HE染色、免疫组化病理检查. 结果 SLN成功检出52例(52/56,92.8%),常规病理检查证实SLN转移22例;SLN无转移,但非SLN发现转移者1例,假阴性率为4.3%(1/23).常规病理检查无转移的29例患者,免疫组化检测发现1例CK-19( )、EMA( ),另1例CK-19( ),CEA( ),而所属非前哨淋巴结无肿瘤转移. 结论乳腺癌亚甲蓝前哨淋巴结定位、活检可以预示腋窝淋巴结转移.     

Intramammary sentinel lymph node in patients with breast cancer: Report of four cases

To analyze breast cancer patients with intramammary sentinel lymph node, we reviewed T1-T2N0 breast cancer patients who underwent sentinel lymph node mapping using radioisotope methods. Intramammary sentinel lymph (ISN) nodes were detected in 4 of 166 patients. Three of four ISNs were present in completely different quadrants of the breast from those of primary lesions. Although two patients had no involved nodes, including ISNs, the remaining two with T2 tumor had metastasis of ISNs alone with resulting upstaging. We should keep in mind the presence of intramammary SN in regions apart from the primary tumor, particularly when performing breast conservative surgery.     

乳腺癌前哨淋巴结检测的临床研究

目的通过前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)活检,了解前哨淋巴结是否能反映乳腺癌腋窝淋巴结转移情况,从而决定是否行腋窝淋巴结清扫(axillary lymph node dissection,ALND). 方法 47例T1、T2、T3临床检查腋窝淋巴结无肿大的乳腺癌患者,术前30 min于乳腺肿块周围腺体注射蓝色染料,术中取蓝染的SLN病理检查,术后将病理检查结果与腋窝淋巴结转移情况进行比较分析. 结果 47例中5例未见淋巴结及淋巴管蓝染,其余42例找到腋窝淋巴结608个,阳性18例168个,阴性24例440个;SLN共78个,阳性16例29个,阴性26例49个.SLN的检出率89.4%,准确性95.2% ,特异性100%,敏感性88.9%,假阴性率11.1%,假阳性率0. 结论 SLN活检反应腋窝淋巴结的肿瘤转移状况,可以用于术中确定是否行ALND.     

乳腺癌内乳区前哨淋巴结活检术研究进展

内乳区淋巴结的转移状况是乳腺癌的独立预后指标,也：是乳腺癌淋巴分期的重要依据之一。内乳区淋巴结转移的患者预后较差。随着前哨淋巴结活检技术的不断发展和新型注射技术的出现,内乳区前哨淋巴结活检的显像率显著提高,经肋间行内乳区前哨淋巴结活检术可以最小的风险评估内乳区淋巴结状况,并进一步完善乳腺癌的淋巴结分期．有助于为患者制定更为准确的个体化治疗方案。